ABO血型鉴定.ppt
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参见附件(300kb)。
ABO血型鉴定 不规则抗体筛选
* 玻片法(正定型)
* 试管法(正定型,反定型)
* 盐水法
* 聚凝胺法
* 抗人球法
ABO血型鉴定实验原理
* 抗原抗体反应--在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原→判断血型
* 抗体在相邻的红细胞表面抗原决定簇之间搭桥形成肉眼可见的颗粒状凝集团块.见图
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgGM在盐水介质中产生凝集
试剂
* 抗A、抗B试剂血清
* 5%的A型、B型及O型试剂红细胞悬液
* 受检者血清
* 5%的受检者红细胞悬液 (从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5%红细胞悬液。采血时应注意先用75%酒精消毒指尖或耳垂。)(取少量受检者红细胞(约0.2~0.5 ml)用生理盐水洗涤3次，然后加入适量生理盐水调配成5%浓度。)
四 实验步骤.swf
* 1. 玻片法
* (1) 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。
* (2) 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。
* (3) 竹签两头分别混合，搅匀。用两根 分别用来混合A型和B型标准
血清和红细胞悬液
* (4)观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。
* (5) 判断血型 根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。
2.试管法(正定型)
* A B
* A标准血清 2滴
* B标准血清 2滴
* 受试者的红细胞悬液 1滴 1滴
* 混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。 。
* 取出观察结果。完全凝集的管底部有红细胞的凝块，管底细胞边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；完全不凝的试管，血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐，用手轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升，随即成为均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载玻片上镜检后判定凝集程度。
试管法(反定型)
* Ac Bc Oc
* 受检者血清 2滴 2滴 2滴
* 5%的A型红细胞悬液 1滴
* 5%的B型红细胞悬液 1滴
* 5%的O型红细胞悬液 1滴
* 立即以1000rpm离心1分钟或3000rpm离心15秒 ......
ABO血型鉴定 不规则抗体筛选
* 玻片法(正定型)
* 试管法(正定型,反定型)
* 盐水法
* 聚凝胺法
* 抗人球法
ABO血型鉴定实验原理
* 抗原抗体反应--在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原→判断血型
* 抗体在相邻的红细胞表面抗原决定簇之间搭桥形成肉眼可见的颗粒状凝集团块.见图
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgGM在盐水介质中产生凝集
试剂
* 抗A、抗B试剂血清
* 5%的A型、B型及O型试剂红细胞悬液
* 受检者血清
* 5%的受检者红细胞悬液 (从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5%红细胞悬液。采血时应注意先用75%酒精消毒指尖或耳垂。)(取少量受检者红细胞(约0.2~0.5 ml)用生理盐水洗涤3次，然后加入适量生理盐水调配成5%浓度。)
四 实验步骤.swf
* 1. 玻片法
* (1) 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。
* (2) 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。
* (3) 竹签两头分别混合，搅匀。用两根 分别用来混合A型和B型标准
血清和红细胞悬液
* (4)观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。
* (5) 判断血型 根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。
2.试管法(正定型)
* A B
* A标准血清 2滴
* B标准血清 2滴
* 受试者的红细胞悬液 1滴 1滴
* 混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。 。
* 取出观察结果。完全凝集的管底部有红细胞的凝块，管底细胞边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；完全不凝的试管，血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐，用手轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升，随即成为均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载玻片上镜检后判定凝集程度。
试管法(反定型)
* Ac Bc Oc
* 受检者血清 2滴 2滴 2滴
* 5%的A型红细胞悬液 1滴
* 5%的B型红细胞悬液 1滴
* 5%的O型红细胞悬液 1滴
* 立即以1000rpm离心1分钟或3000rpm离心15秒 ......
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