酸性染料两相滴定法测定浙贝母总生物碱的含量
作者：王安行 胡梅素
单位：王安行 (杭州 310006 浙江省医药科技公司)；胡梅素(杭州 310004 浙江省药品检验所)
关键词：
980326 浙贝母的主要成分是生物碱，有关总生物碱的含量测定有较多报道，经比较，认为两相滴定法的优点是方法简便，无须特殊仪器设备，分析快速，耗样及试剂较少，便于基层检验药品质量。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
微量滴定管(分度值为0.02ml)。
1.2 试剂
盐酸阿托品对照品、浙贝母次碱对照品(中国药品生物制品检定所)，溴麝香草酚蓝为分析纯。
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1.3 样品
主要来自宁波鄞县樟村镇产地，少数由各医药公司抽取。
2 试验方法
2.1试验方法
取浙贝母粗粉2g，精密称定，加氨水1ml混匀，精密加入乙醚-氯仿-乙醇(25∶8∶2.5)混合溶液25ml，称定重量，超声30min，再称定重量，以上述混合溶液补足损失部分。精密吸取上清液5ml，水浴蒸干，加乙醇1ml溶解残留物，蒸干，残渣加氯仿15ml分次溶解并转移入具塞试管中，再加入苯二甲酸氢钾缓冲溶液(pH5.0)2ml，用溴麝香草酚蓝溶液(0.001mol/L)滴定至水层为黄色，即得。每1ml的溴麝香草酚蓝溶液(0.001mol/L)相当于0.4296mg的浙贝母次碱(C27H43O3N)。
, 百拇医药
2.2 试液的配置
2.2.1 pH缓冲溶液的配置：取邻苯二甲酸氢钾溶液(0.2mol/L)250ml，加氢氧化钠溶液(0.2mol/L)118.3ml混匀，得pH为5.0的缓冲溶液。
2.2.2 溴麝香草酚蓝滴定溶液的配制：精密称取溴麝香草酚蓝0.6244g，加氢氧化钠(1mol/L)溶液10ml，加新沸后的冷水使成1000ml。精密量取阿托品氯仿溶液(取105℃干燥至恒重的硫酸阿托品0.0025g，精密称定，加氯仿制成50ml的溶液)，加pH为5.0的缓冲溶液2ml，氯仿5ml，用上述溴麝香草酚蓝滴定至水层黄色，计算即得溴麝香草酚蓝的浓度及其校正因子。
2.3 重复性试验
对来自鄞县传统炮制方法的浙贝母测定其总生物碱含量，共取样8份，测定结果RSD为1.62%。
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2.4 回收率试验
取浙贝母次碱对照品,加氯仿制成每1ml含0.05mg的溶液。取已测知含量的浙贝母线粗粉约2.0g精密称定,加氨水1ml,再精密加入对照品溶液5ml(相当于浙贝母次碱0.25mg)，再加入乙醚混合溶液20ml，照2.1项下自“称定重量，超声处理30min操作起”，结果平均回收率为97.9%±1.39%(n=8)。
表1 浙贝母次碱的回收率试验结果 次数
浙贝母粉
(g)
相当总碱含
量(g)
加入对照品
量(g)
, 百拇医药
测得总碱量
(g)
回收率
(%)
1
2.0135
0.416
0.1047
0.518
97.4
2
2.0102
0.416
, 百拇医药
0.1047
0.518
97.4
3
2.0805
0.431
0.0969
0.527
99.1
4
2.0413
0.422
0.0969
, 百拇医药
0.518
99.1
5
2.0350
0.421
0.0969
0.514
96.0
6
2.0357
0.421
0.0969
0.518
, 百拇医药
100.1
7
2.0494
0.424
0.0969
0.518
97.0
8
2.0308
0.420
0.0969
0.514
97.0
, 百拇医药
平均回收率为97.9%，SD为1.39%，RSD为1.42%。
2.5 样品测定结果：23种不同加工方法(传统加工，灰贝；硫磺熏蒸法，生砌片法)测得浙贝母总碱的结果见表2。
3 讨论
3.1 本方法的原理为在适当的pH值中H+结合的生物碱为阳离子(即成为盐)，此时的酸性染料则成阴离子存在，此阴阳离子能结合成有色化合物，它能定量地被有机溶剂提取，因此水相没有颜色，在达到终点后，染料留在水相，使之显出颜色。所以控制适当的pH值是关键。
表2 不同加工方法测定浙贝母总碱的含量 样品
号
总生物碱含量
, 百拇医药
(%)
样品
号
总生物碱含量
(%)
样品
号
总生物碱含量
(%)
1
0.103
9
0.172
, 百拇医药
17
0.169
2
0.124
10
0.172
18
0.152
3
0.120
11
0.192
19
, 百拇医药
0.363
4
0.148
12
0.167
20
0.274
5
0.100
13
0.138
21
0.209
, 百拇医药
6
0.106
14
0.130
22
0.218
7
0.095
15
0.146
23
0.210
8
, 百拇医药
0.194
16
0.144
注：本表中1～7号为传统方法炮制的贝母样品；8～18号为硫磺熏蒸法炮制的贝母样品；19～23号为生切片贝母样品
3.2 本方法经空白试验结果证明，空白试验无干扰。方便简捷，分析快速，无需特殊仪器设备，更适合我国基层单位掌握以控制浙贝母的质量。
3.3 浙贝母次碱因中国药品生物制品检定所提供只作鉴别用的，故而采用上述同方法进行含量测定，结果含量为96.1%。
收稿日期：1997-12-03, http://www.100md.com
单位：王安行 (杭州 310006 浙江省医药科技公司)；胡梅素(杭州 310004 浙江省药品检验所)
关键词：
980326 浙贝母的主要成分是生物碱，有关总生物碱的含量测定有较多报道，经比较，认为两相滴定法的优点是方法简便，无须特殊仪器设备，分析快速，耗样及试剂较少，便于基层检验药品质量。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
微量滴定管(分度值为0.02ml)。
1.2 试剂
盐酸阿托品对照品、浙贝母次碱对照品(中国药品生物制品检定所)，溴麝香草酚蓝为分析纯。
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1.3 样品
主要来自宁波鄞县樟村镇产地，少数由各医药公司抽取。
2 试验方法
2.1试验方法
取浙贝母粗粉2g，精密称定，加氨水1ml混匀，精密加入乙醚-氯仿-乙醇(25∶8∶2.5)混合溶液25ml，称定重量，超声30min，再称定重量，以上述混合溶液补足损失部分。精密吸取上清液5ml，水浴蒸干，加乙醇1ml溶解残留物，蒸干，残渣加氯仿15ml分次溶解并转移入具塞试管中，再加入苯二甲酸氢钾缓冲溶液(pH5.0)2ml，用溴麝香草酚蓝溶液(0.001mol/L)滴定至水层为黄色，即得。每1ml的溴麝香草酚蓝溶液(0.001mol/L)相当于0.4296mg的浙贝母次碱(C27H43O3N)。
, 百拇医药
2.2 试液的配置
2.2.1 pH缓冲溶液的配置：取邻苯二甲酸氢钾溶液(0.2mol/L)250ml，加氢氧化钠溶液(0.2mol/L)118.3ml混匀，得pH为5.0的缓冲溶液。
2.2.2 溴麝香草酚蓝滴定溶液的配制：精密称取溴麝香草酚蓝0.6244g，加氢氧化钠(1mol/L)溶液10ml，加新沸后的冷水使成1000ml。精密量取阿托品氯仿溶液(取105℃干燥至恒重的硫酸阿托品0.0025g，精密称定，加氯仿制成50ml的溶液)，加pH为5.0的缓冲溶液2ml，氯仿5ml，用上述溴麝香草酚蓝滴定至水层黄色，计算即得溴麝香草酚蓝的浓度及其校正因子。
2.3 重复性试验
对来自鄞县传统炮制方法的浙贝母测定其总生物碱含量，共取样8份，测定结果RSD为1.62%。
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2.4 回收率试验
取浙贝母次碱对照品,加氯仿制成每1ml含0.05mg的溶液。取已测知含量的浙贝母线粗粉约2.0g精密称定,加氨水1ml,再精密加入对照品溶液5ml(相当于浙贝母次碱0.25mg)，再加入乙醚混合溶液20ml，照2.1项下自“称定重量，超声处理30min操作起”，结果平均回收率为97.9%±1.39%(n=8)。
表1 浙贝母次碱的回收率试验结果 次数
浙贝母粉
(g)
相当总碱含
量(g)
加入对照品
量(g)
, 百拇医药
测得总碱量
(g)
回收率
(%)
1
2.0135
0.416
0.1047
0.518
97.4
2
2.0102
0.416
, 百拇医药
0.1047
0.518
97.4
3
2.0805
0.431
0.0969
0.527
99.1
4
2.0413
0.422
0.0969
, 百拇医药
0.518
99.1
5
2.0350
0.421
0.0969
0.514
96.0
6
2.0357
0.421
0.0969
0.518
, 百拇医药
100.1
7
2.0494
0.424
0.0969
0.518
97.0
8
2.0308
0.420
0.0969
0.514
97.0
, 百拇医药
平均回收率为97.9%，SD为1.39%，RSD为1.42%。
2.5 样品测定结果：23种不同加工方法(传统加工，灰贝；硫磺熏蒸法，生砌片法)测得浙贝母总碱的结果见表2。
3 讨论
3.1 本方法的原理为在适当的pH值中H+结合的生物碱为阳离子(即成为盐)，此时的酸性染料则成阴离子存在，此阴阳离子能结合成有色化合物，它能定量地被有机溶剂提取，因此水相没有颜色，在达到终点后，染料留在水相，使之显出颜色。所以控制适当的pH值是关键。
表2 不同加工方法测定浙贝母总碱的含量 样品
号
总生物碱含量
, 百拇医药
(%)
样品
号
总生物碱含量
(%)
样品
号
总生物碱含量
(%)
1
0.103
9
0.172
, 百拇医药
17
0.169
2
0.124
10
0.172
18
0.152
3
0.120
11
0.192
19
, 百拇医药
0.363
4
0.148
12
0.167
20
0.274
5
0.100
13
0.138
21
0.209
, 百拇医药
6
0.106
14
0.130
22
0.218
7
0.095
15
0.146
23
0.210
8
, 百拇医药
0.194
16
0.144
注：本表中1～7号为传统方法炮制的贝母样品；8～18号为硫磺熏蒸法炮制的贝母样品；19～23号为生切片贝母样品
3.2 本方法经空白试验结果证明，空白试验无干扰。方便简捷，分析快速，无需特殊仪器设备，更适合我国基层单位掌握以控制浙贝母的质量。
3.3 浙贝母次碱因中国药品生物制品检定所提供只作鉴别用的，故而采用上述同方法进行含量测定，结果含量为96.1%。
收稿日期：1997-12-03, http://www.100md.com
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