鼻咽癌患者血清谷胱甘肽S-转移酶-π的表达及意义
作者：高春生 夏福臻
单位：(高春生)广东深圳市南山人民医院耳鼻咽喉科；(夏福臻)广东深圳市南山妇幼保健院实验室，深圳 518052
关键词：鼻咽癌；谷胱甘肽S-转移酶-π；血清
广东医学院学报JOURNAL OF GUANGDONG MEDICAL COLLEGE1999年 第17卷 第1期 Vol 摘要 目的：研究谷胱甘肽S-转移酶-π在鼻咽癌患者血清中的表达及意义.方法：用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定了31例(实验组)鼻咽癌患者放疗前后，25例(对照组)正常人血清谷胱甘肽S-转移酶-π的表达.结果：实验组放疗前、放疗后、放疗后1个月、放疗后3个月的血清GST-π的水平分别为1.08±0.61，0.53±0.34，0.38±0.27和0.33±0.15，对照组为0.31±0.10，实验组放疗前与对照组比较差异有显著性(P<0.01).结论：提示血清GST-π可作为鼻咽癌患者的标志酶.
, http://www.100md.com
Expression and significance of serum glutathione S -transferase -π in patients with nasopharyngeal carcinoma
Gao Chunsheng，Xia Fuzhen
Department of Otorhinolaryngology，Nanshan People’s Hospital，Nanshan Hospital for Women and Children，Shenzhen 518052)
Abstract Objective：To investigate the levels of serum glutathione S-transferase(GST-π)in nasopharyngeal carcinoma and its significans.Methods：The levels of serum glutathione S-transferase(GST-π)in 31 patients with nasopharyngeal carcinoma and 25 controls were measured by enzymelinked immunosorbent assay(ELISA).Results：The results were as follows：the levels of GST-in patients with NPC before and after radiation，one month and three months are 1.08±0.61，0.53±0.34，0.38±0.27，and 0.33+0.15 respectively.The level of GST-π in controls is 0.31±0.10. The level of GST-π in experimental group is significantly different compared with that in controls.Conclusion：The results indicate that serum GST-π is a useful tumor marker in NPC.
, http://www.100md.com
Key words：nasopharyngeal carcinoma；GST-π；serum
谷胱甘肽S转移酶是一组具有多种生理功能的二聚体蛋白质，其活性测定作为肝功能指标用于临床多年，它有三种同功酶α、μ和π.近年来研究发现GST-π在恶性肿瘤和发生，发展和转归中有重要意义，是一种新的肿瘤标志物.关于GST-π在鼻咽癌患者血清中的表达研究尚未见报道.为了探讨其临床意义，本文用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了31例鼻咽癌患者放疗前后血清GST-π水平.
1 材料与方法
1.1 临床资料 实验组经病理诊断确诊的鼻咽癌患者31例，其中，男19例，女12例，年龄23～68岁平均49岁.对照组正常人25例，男16例，女9例，年龄25～65岁，平均47岁.
1.2 血清样品 对实验组鼻咽癌患者放疗前、放疗后、放疗1个月后及放疗3个月后各抽取静脉血3mL，分离血清无溶血.对照组正常人抽取静脉血3mL，分离血清后，保存于-20°C冰箱备用.
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1.3 方法 血清GST-π测定用酶联免疫吸附法.采用双抗体夹心定量ELISA检测法，人胎盘GST-π抗原，鼠抗人GST-π单克隆抗体试剂由河南医科大学二附院耳鼻咽喉科实验室提供.血清用0.01mol PBST稀释，每孔加样100μl，37°C孵育60min，洗板6次.各孔加入抗GST-HRP酶结合物100μl，37°C孵育60min，洗板6次.各孔加入TMB底物液100μl，37°C孵化育15min.2 molH2SO4经上反应，30min内以微孔板读数器在波长450nm测定OD值.
1.4 统计学处理 数据经t检验处理.
2 结果
2.1 血清GST-π活性测定 结果见表1.
表1 实验组与对照组GST-π活性ng/ml (
±s) 组别
, 百拇医药
例数
GST-π
P值
实验组
31
1.08±0.61
<0.01
对照组
25
0.31±0.10
实验组鼻咽癌患者GST-π水平与正常对照相比有差异具非常显著性(P<0.01)
从表2可以看出，鼻咽癌患者放疗后血清GST-π活性明显下降，放疗前、后相比有显著差(P<0.01).放疗后随着时间延迟而渐下降，但与对照组比放疗后各个时间的测定差异无显著性(P>0.05). 表2 实验组鼻咽癌患者放疗前后GST-π活性 (±s) 时间
, 百拇医药
例数
cGST-π/(ng*mL-1)
P
放疗前
31
1.08±0.61
<0.01
放疗后
28
0.53±0.34
一个月
26
, 百拇医药 0.38±0.27
>0.05
三个月
24
0.33±0.15
3 讨论
谷胱甘肽S转移酶作为一种新的肿瘤标志物正引起人们的关注.其中π类GSTS与肿瘤关系较为密切，包括(GST-π)和大鼠胎盘型GSTs[1].在GST-π作为人体肿瘤的标志物方面的研究，通过放免测定胃癌、食道癌、结肠癌等患者血清GST-π，结果显示其含量均高于正常人及良性疾病患者，提示GST-π是消化道肿瘤的标志物[2，3].其他研究也显示，尿道、膀胱、乳腺癌、胶质细胞瘤等肿瘤中GST-π表达均比对照组明显增高.分子生物学技术研究证实，在多数肿瘤中，GST-πmRNA水平与GST-π免疫组化表达一致，肿瘤组织较正常组织增加，最明显的是胃癌、结肠癌.在GST-π与肿瘤的多药耐药性方面的研究结果显示，病人治疗前血清水平可作为预测联合化疗效果的参考指标[3～6].国外有人报道GST-π胎儿时期水平较高，出生1a后保持较低水平[1，5].GST-π在肿瘤组织及血清中含量增高，这有助于肿瘤的早期诊断和疗效观察.
, 百拇医药
国内外文献尚未见GST-π在鼻咽癌中的应用研究.本实验结果显示，鼻咽癌患者血清水平明显高于正常对照组，有统计学差异(P<0.01)，而放疗后血清GST-π水平则渐下降，与正常人相比无统计学差异(P>0.05).结果表明，GST-π血清水平可作为鼻咽癌发生发展的标志酶，通过对GST-π血清水平的监测，估计其放疗效果，了解其预后.但GST-π在鼻咽癌组织、癌旁组织中的表达是否增高，有待于进一步研究.
4 参考文献
1 Li Yuhua.The significance of glutathione S-transferase(GST)isoenzymes for research on carcinogenesis and diagnosis of lung cancer.In：The 10th Asia Pacific Cancer Conference.International Academic Publishers，Beijing，1991，105
, 百拇医药
2 李楠.血浆谷胱甘肽S转移酶P与消化道肿瘤的关系.新消化病杂志，1996，4(2)：78
3 Yoshiro N，Yasuo T，Tadanori S，et al.Serum glutathione Stransferase- as a tumor marker for gastrointestinal malignancies.Cancer，1989，63：317
4 刘小平.食管癌患者放疗前后血中Pi类谷胱甘肽S-转移酶水平的测定.中国肿瘤临床，1995，22(10)：706
5 Colovai A，Stocica A，Cinca SA，et al.Glutathione Stransferase activity in human tumor.Neoplasma，1992，39(4)：249
6 姚登高.细胞凋亡与谷胱甘肽 S-转移酶、谷胱甘肽S-转移酶-π关系的研究.解剖学报，1996，27(1)：32收稿日期：1998-11-26, 百拇医药
单位：(高春生)广东深圳市南山人民医院耳鼻咽喉科；(夏福臻)广东深圳市南山妇幼保健院实验室，深圳 518052
关键词：鼻咽癌；谷胱甘肽S-转移酶-π；血清
广东医学院学报JOURNAL OF GUANGDONG MEDICAL COLLEGE1999年 第17卷 第1期 Vol 摘要 目的：研究谷胱甘肽S-转移酶-π在鼻咽癌患者血清中的表达及意义.方法：用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定了31例(实验组)鼻咽癌患者放疗前后，25例(对照组)正常人血清谷胱甘肽S-转移酶-π的表达.结果：实验组放疗前、放疗后、放疗后1个月、放疗后3个月的血清GST-π的水平分别为1.08±0.61，0.53±0.34，0.38±0.27和0.33±0.15，对照组为0.31±0.10，实验组放疗前与对照组比较差异有显著性(P<0.01).结论：提示血清GST-π可作为鼻咽癌患者的标志酶.
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Expression and significance of serum glutathione S -transferase -π in patients with nasopharyngeal carcinoma
Gao Chunsheng，Xia Fuzhen
Department of Otorhinolaryngology，Nanshan People’s Hospital，Nanshan Hospital for Women and Children，Shenzhen 518052)
Abstract Objective：To investigate the levels of serum glutathione S-transferase(GST-π)in nasopharyngeal carcinoma and its significans.Methods：The levels of serum glutathione S-transferase(GST-π)in 31 patients with nasopharyngeal carcinoma and 25 controls were measured by enzymelinked immunosorbent assay(ELISA).Results：The results were as follows：the levels of GST-in patients with NPC before and after radiation，one month and three months are 1.08±0.61，0.53±0.34，0.38±0.27，and 0.33+0.15 respectively.The level of GST-π in controls is 0.31±0.10. The level of GST-π in experimental group is significantly different compared with that in controls.Conclusion：The results indicate that serum GST-π is a useful tumor marker in NPC.
, http://www.100md.com
Key words：nasopharyngeal carcinoma；GST-π；serum
谷胱甘肽S转移酶是一组具有多种生理功能的二聚体蛋白质，其活性测定作为肝功能指标用于临床多年，它有三种同功酶α、μ和π.近年来研究发现GST-π在恶性肿瘤和发生，发展和转归中有重要意义，是一种新的肿瘤标志物.关于GST-π在鼻咽癌患者血清中的表达研究尚未见报道.为了探讨其临床意义，本文用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了31例鼻咽癌患者放疗前后血清GST-π水平.
1 材料与方法
1.1 临床资料 实验组经病理诊断确诊的鼻咽癌患者31例，其中，男19例，女12例，年龄23～68岁平均49岁.对照组正常人25例，男16例，女9例，年龄25～65岁，平均47岁.
1.2 血清样品 对实验组鼻咽癌患者放疗前、放疗后、放疗1个月后及放疗3个月后各抽取静脉血3mL，分离血清无溶血.对照组正常人抽取静脉血3mL，分离血清后，保存于-20°C冰箱备用.
, http://www.100md.com
1.3 方法 血清GST-π测定用酶联免疫吸附法.采用双抗体夹心定量ELISA检测法，人胎盘GST-π抗原，鼠抗人GST-π单克隆抗体试剂由河南医科大学二附院耳鼻咽喉科实验室提供.血清用0.01mol PBST稀释，每孔加样100μl，37°C孵育60min，洗板6次.各孔加入抗GST-HRP酶结合物100μl，37°C孵育60min，洗板6次.各孔加入TMB底物液100μl，37°C孵化育15min.2 molH2SO4经上反应，30min内以微孔板读数器在波长450nm测定OD值.
1.4 统计学处理 数据经t检验处理.
2 结果
2.1 血清GST-π活性测定 结果见表1.
表1 实验组与对照组GST-π活性ng/ml (
±s) 组别, 百拇医药
例数
GST-π
P值
实验组
31
1.08±0.61
<0.01
对照组
25
0.31±0.10
实验组鼻咽癌患者GST-π水平与正常对照相比有差异具非常显著性(P<0.01)
从表2可以看出，鼻咽癌患者放疗后血清GST-π活性明显下降，放疗前、后相比有显著差(P<0.01).放疗后随着时间延迟而渐下降，但与对照组比放疗后各个时间的测定差异无显著性(P>0.05). 表2 实验组鼻咽癌患者放疗前后GST-π活性 (
±s) 时间, 百拇医药
例数
cGST-π/(ng*mL-1)
P
放疗前
31
1.08±0.61
<0.01
放疗后
28
0.53±0.34
一个月
26
, 百拇医药 0.38±0.27
>0.05
三个月
24
0.33±0.15
3 讨论
谷胱甘肽S转移酶作为一种新的肿瘤标志物正引起人们的关注.其中π类GSTS与肿瘤关系较为密切，包括(GST-π)和大鼠胎盘型GSTs[1].在GST-π作为人体肿瘤的标志物方面的研究，通过放免测定胃癌、食道癌、结肠癌等患者血清GST-π，结果显示其含量均高于正常人及良性疾病患者，提示GST-π是消化道肿瘤的标志物[2，3].其他研究也显示，尿道、膀胱、乳腺癌、胶质细胞瘤等肿瘤中GST-π表达均比对照组明显增高.分子生物学技术研究证实，在多数肿瘤中，GST-πmRNA水平与GST-π免疫组化表达一致，肿瘤组织较正常组织增加，最明显的是胃癌、结肠癌.在GST-π与肿瘤的多药耐药性方面的研究结果显示，病人治疗前血清水平可作为预测联合化疗效果的参考指标[3～6].国外有人报道GST-π胎儿时期水平较高，出生1a后保持较低水平[1，5].GST-π在肿瘤组织及血清中含量增高，这有助于肿瘤的早期诊断和疗效观察.
, 百拇医药
国内外文献尚未见GST-π在鼻咽癌中的应用研究.本实验结果显示，鼻咽癌患者血清水平明显高于正常对照组，有统计学差异(P<0.01)，而放疗后血清GST-π水平则渐下降，与正常人相比无统计学差异(P>0.05).结果表明，GST-π血清水平可作为鼻咽癌发生发展的标志酶，通过对GST-π血清水平的监测，估计其放疗效果，了解其预后.但GST-π在鼻咽癌组织、癌旁组织中的表达是否增高，有待于进一步研究.
4 参考文献
1 Li Yuhua.The significance of glutathione S-transferase(GST)isoenzymes for research on carcinogenesis and diagnosis of lung cancer.In：The 10th Asia Pacific Cancer Conference.International Academic Publishers，Beijing，1991，105
, 百拇医药
2 李楠.血浆谷胱甘肽S转移酶P与消化道肿瘤的关系.新消化病杂志，1996，4(2)：78
3 Yoshiro N，Yasuo T，Tadanori S，et al.Serum glutathione Stransferase- as a tumor marker for gastrointestinal malignancies.Cancer，1989，63：317
4 刘小平.食管癌患者放疗前后血中Pi类谷胱甘肽S-转移酶水平的测定.中国肿瘤临床，1995，22(10)：706
5 Colovai A，Stocica A，Cinca SA，et al.Glutathione Stransferase activity in human tumor.Neoplasma，1992，39(4)：249
6 姚登高.细胞凋亡与谷胱甘肽 S-转移酶、谷胱甘肽S-转移酶-π关系的研究.解剖学报，1996，27(1)：32收稿日期：1998-11-26, 百拇医药