变异型CD44在胃腺癌中的表达及其临床意义
作者：金卫中 赵景轩 杨东慧 张永红
单位：金卫中 赵景轩 杨东慧 中国人民解放军第401医院病理科(青岛 266071)；张永红 青岛医学院附属医院神经病学研究室
关键词：胃肿瘤；腺癌；CD44；预后
青岛医学院学报990110 【摘要】 ①目的 探讨胃腺癌组织中变异型CD44(CD44v)的表达及其与淋巴结转移和预后的关系。②方法应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(S-P)免疫组织化学技术，对105例胃腺癌CD44v6的表达进行了检测。③结果CD44v6蛋白的阳性表达率为48.6%，CD44v6在胃腺癌的表达与肿瘤分化、浸润深度、临床分期和预后均有关系(χ2=4.41～8.97，P均<0.05)，与淋巴结转移关系密切(χ2=9.23，P<0.01)。④结论 CD44v6 表达是判断胃腺癌淋巴结转移及病人预后有价值的指标之一。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R735.2
EXPRESSION OF CD44v IN GASTRIC ADENOCARCINOMA AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE
Jin Weizhong, Zhao Jingxuan, Yang Donghui, et al
Department of Pathology, No. 401 Hospital of PLA, Qingdao 266071
【ABSTRACT】 Objective To study the expression of CD44v in gastric adenocarcinoma and its relationship with lymph node metastasis and prognosis of patients. Methods Expressions of CD44v6 in 105 cases of gastric adenocarcinoma were observed by S-P immunohistochemistry. Results The incidence of CD44v6 protein positivity in gastric adenocarcinomas was 48.6%. The expression of CD44v6 protein was related with the differentiation, depth of invasion, TNM stage and prognosis of gastric adenocarcinoma(χ2=4.41-8.97, P<0.05), and was significantly correlated with metastasis to lymph nodes (χ2=9.23, P<0.01). Conclusion Expression of CD44v6 might be a useful indicator of gastric adenocarcinoma metastasis to lymph node and the prognosis of patients.
, 百拇医药
【KEY WORDS】 stomach neoplasms; adenocarcinoma; CD44; prognosis
肿瘤细胞表面黏附分子功能及表达的变化在近年来日渐受到重视，细胞黏附分子CD44基因在肿瘤的发生、发展中起着重要作用，其中CD44v(CD44变异型)与肿瘤转移可能密切相关〔1,2〕。本文应用免疫组织化学方法检测CD44v在胃腺癌组织中的表达，并探讨其临床意义。
1 材料与方法
1.1 材料
选择我院1988～1993年间经病理确诊的原发性胃腺癌105例， 全部材料取自胃癌根治标本，均未经放疗、化疗。标本经100g/L福尔马林固定，石蜡包埋，制成4μm厚切片。行Lauren组织学分型，以胃腺癌TNM分期法标准行临床分期。手术后5年以上有随访资料者共62例。另选择非瘤胃黏膜33例作对照。
, 百拇医药
1.2 方法
采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(S-P)免疫组化染色方法。CD44v6单克隆抗体及S-P免疫组化试剂、DAB显示剂均购自福州迈新生物技术公司。经微波抗原修复，Ⅰ抗4℃孵育过夜，生物素标记的Ⅱ抗室温孵育30min， 链菌素亲生物蛋白-过氧化物酶室温孵育30min，各步骤间均经PBS液洗涤3次，每次5min，DAB显色3～5min，苏木素衬染。同时以省略Ⅰ抗为阴性对照。阳性结果判断标准:细胞膜呈棕色为阳性表达，不着色为阴性。统计学处理采用χ2检验。
2 结 果
2.1 CD44v6在非瘤胃黏膜的表达特征
CD44v6在33例非瘤胃黏膜中有26例呈弱阳性表达， 其表达仅限于紧靠黏膜肌的腺体，有的向上延伸，但不超过腺体底部上1/3处， 虽然这些区域呈弱阳性表达，但近胃小凹的腺体上部不表达。同样，胃的被覆上皮亦呈阴性。
, 百拇医药
2.2 CD44v6表达与胃腺癌分型、分期及预后关系
CD44v6阳性物质主要定位于癌细胞膜上，呈镶边状。在肠型胃癌中CD44v6阳性细胞呈簇状分布于癌巢内或癌周，在弥漫型胃癌阳性细胞呈点散状分布，而在癌细胞巢周边部及脉管内转移性癌栓中CD44v6表达较强。CD44v6阳性表达率为48.6%(51/105)，不同Lauren分型CD44v6阳性表达率比较，细胞分化好(肠型胃癌)与分化差(弥漫型胃癌)间差异有显著性(χ2=4.41,P<0.05)。淋巴结转移组CD44v6阳性率为58.1%(43/74)，明显高于淋巴结未转移组之25.8%(8/31)，差异有极显著意义(χ2=9.23,P<0.01)。CD44v6阳性表达与癌浸润程度、临床分期差异均有显著性(χ2=8.97,6.37,P均<0.05)。<5年生存率组与≥5年生存率组比较，差异有显著性(χ2=4.99,P<0.05)。见表1.
, 百拇医药
表1 105例胃腺癌CD44v6表达与临床病理关系 临床病理特征
n
CD44v6表达阳性例数(%)
Lauren分型
肠型
72
40(55.6)
弥漫型
33
11(33.3)
淋巴结转移
阳性组
, 百拇医药
74
43(58.1)
阴性组
31
8(25.8)
临床分期
Ⅰ，Ⅱ
33
10(30.3)
Ⅲ，Ⅳ
72
41(56.9)
浸润深度
, 百拇医药
黏膜及黏膜下
9
2(22.2)
肌层
24
7(29.2)
浆膜层
72
42(58.3)
术后生存情况
<5年
35
19(54.3)
, 百拇医药
≥5年
27
7(25.9)
3 讨 论 CD44是一种细胞表面的跨膜性糖蛋白黏附分子，其结构形式和功能较复杂，可分为标准型(CD44s)和变异型(CD44v)。Macky等〔3〕和Fox等〔4〕用单克隆抗体研究了CD44在人体组织和一些肿瘤中的表达，发现CD44s和CD44v分布较为广泛，主要以上皮细胞为主，而上皮细胞以生发细胞为著，如皮肤及食管鳞状上皮的基底细胞以及乳腺的肌上皮细胞。本文结果亦显示,CD44v 阳性表达主要位于胃腺生发部，即胃腺颈部和小凹底部。表明CD44与细胞移动、生长及抑制细胞凋亡有关〔5〕，且在萎缩性胃炎的肠化腺体有较高的表达率〔6〕，这些变化与癌的关系尚有待研究。
已有研究表明， CD44v 异常表达在恶性肿瘤中是一种普遍现象， 其在原发性胃腺癌的进行性发展中起重要作用。 本文检测结果表明，CD44v6的表达与胃癌的侵犯性、转移能力及预后等临床生物学行为相关。在淋巴结转移组，胃腺癌CD44v6阳性表达率为58.1%，明显高于淋巴结未转移组(25.8%)，提示CD44v阳性表达与胃腺癌演进、侵犯能力、 转移能力的增强有关，表达CD44v6的肿瘤细胞可能获得有利于癌细胞浸润和转移的新的生物学行为〔7〕。CD44是细胞表面黏附分子，参与癌细胞与基质的黏附作用，也能与细胞内骨架蛋白结合，参与细胞移动，这种黏附与结合能力的增强有利于癌细胞的扩散与转移。变异型CD44的表达与肿瘤细胞分化有关，其阳性表达率在肠型胃癌比弥漫型胃癌更常见，这一结果与文献报道相符〔8,9〕。本文结果显示，CD44v6阳性表达的胃癌病人5 年存活率较阴性表达者大为降低，提示有转移活性的CD44v病人预后不良。我们认为，CD44v表达的异常有可能成为肿瘤转移或复发早期监测的生物学标志，对病人的预后估计亦具有临床价值。
, http://www.100md.com
参考文献
1 Stamenkovic I, Aruffo A,Amiot M,et al.The hematopoietic and epithelial forms of CD44 are distinct polypeptides with different adhesion potentials hyaluronate-bearing cells.EMRO J,1991,10:343
2 Gunthert U, Hofmann M, Rudy W, et al. A new variant of glycoprotein CD44 confers metastatic potential to rat carcinoma cells.Cell,1991,65:13
3 Mackay CR,Terpe HT,Stauder R,et al.Expression and modulation of CD44 variant isoforms in humans. J Cell Biol,1994,124:71
, http://www.100md.com
4 Fox SB,Fawcett J,Jackson DJ,et al.Normal human tissues, in addition to some tumors, express multiple different CD44 isoforms.Cancer Res,1994,54:4539
5 Ayroldi E,Cannarile L,Migliorati G,et al.CD44(Pgp-1)inhibits CD3 and dexamethasone induced apoptosis.Blood,1995,86:2672
6 Mayer B,Jauch KW,Gunthert U,et al.De-novo expression of CD44 and survival in gastric cancer.Lancet,1993,342:1019
7 Tahara E,Semba S,Tahara H. Molecular biological observations in gastric cancer.Semin Oncol,1996,23(3):307
, 百拇医药
8 Hong RL,Lee WJ,Shun CT,et al. Expression of CD44 and its clinical implication in diffuse-type and intestinal-type gastric adenocarcinomas. Oncology,1995,52(4):334
9 Streit M,Schmidt R,Hilgenfeld RU,et al.Adhesion receptors in malignant transformation and dissemination of gastrointestinal tumors.Recent Results Cancer Res,1996,142:19
(1998-07-27收稿 1998-12-28修回), 百拇医药
单位：金卫中 赵景轩 杨东慧 中国人民解放军第401医院病理科(青岛 266071)；张永红 青岛医学院附属医院神经病学研究室
关键词：胃肿瘤；腺癌；CD44；预后
青岛医学院学报990110 【摘要】 ①目的 探讨胃腺癌组织中变异型CD44(CD44v)的表达及其与淋巴结转移和预后的关系。②方法应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(S-P)免疫组织化学技术，对105例胃腺癌CD44v6的表达进行了检测。③结果CD44v6蛋白的阳性表达率为48.6%，CD44v6在胃腺癌的表达与肿瘤分化、浸润深度、临床分期和预后均有关系(χ2=4.41～8.97，P均<0.05)，与淋巴结转移关系密切(χ2=9.23，P<0.01)。④结论 CD44v6 表达是判断胃腺癌淋巴结转移及病人预后有价值的指标之一。
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中国图书资料分类法分类号 R735.2
EXPRESSION OF CD44v IN GASTRIC ADENOCARCINOMA AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE
Jin Weizhong, Zhao Jingxuan, Yang Donghui, et al
Department of Pathology, No. 401 Hospital of PLA, Qingdao 266071
【ABSTRACT】 Objective To study the expression of CD44v in gastric adenocarcinoma and its relationship with lymph node metastasis and prognosis of patients. Methods Expressions of CD44v6 in 105 cases of gastric adenocarcinoma were observed by S-P immunohistochemistry. Results The incidence of CD44v6 protein positivity in gastric adenocarcinomas was 48.6%. The expression of CD44v6 protein was related with the differentiation, depth of invasion, TNM stage and prognosis of gastric adenocarcinoma(χ2=4.41-8.97, P<0.05), and was significantly correlated with metastasis to lymph nodes (χ2=9.23, P<0.01). Conclusion Expression of CD44v6 might be a useful indicator of gastric adenocarcinoma metastasis to lymph node and the prognosis of patients.
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【KEY WORDS】 stomach neoplasms; adenocarcinoma; CD44; prognosis
肿瘤细胞表面黏附分子功能及表达的变化在近年来日渐受到重视，细胞黏附分子CD44基因在肿瘤的发生、发展中起着重要作用，其中CD44v(CD44变异型)与肿瘤转移可能密切相关〔1,2〕。本文应用免疫组织化学方法检测CD44v在胃腺癌组织中的表达，并探讨其临床意义。
1 材料与方法
1.1 材料
选择我院1988～1993年间经病理确诊的原发性胃腺癌105例， 全部材料取自胃癌根治标本，均未经放疗、化疗。标本经100g/L福尔马林固定，石蜡包埋，制成4μm厚切片。行Lauren组织学分型，以胃腺癌TNM分期法标准行临床分期。手术后5年以上有随访资料者共62例。另选择非瘤胃黏膜33例作对照。
, 百拇医药
1.2 方法
采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(S-P)免疫组化染色方法。CD44v6单克隆抗体及S-P免疫组化试剂、DAB显示剂均购自福州迈新生物技术公司。经微波抗原修复，Ⅰ抗4℃孵育过夜，生物素标记的Ⅱ抗室温孵育30min， 链菌素亲生物蛋白-过氧化物酶室温孵育30min，各步骤间均经PBS液洗涤3次，每次5min，DAB显色3～5min，苏木素衬染。同时以省略Ⅰ抗为阴性对照。阳性结果判断标准:细胞膜呈棕色为阳性表达，不着色为阴性。统计学处理采用χ2检验。
2 结 果
2.1 CD44v6在非瘤胃黏膜的表达特征
CD44v6在33例非瘤胃黏膜中有26例呈弱阳性表达， 其表达仅限于紧靠黏膜肌的腺体，有的向上延伸，但不超过腺体底部上1/3处， 虽然这些区域呈弱阳性表达，但近胃小凹的腺体上部不表达。同样，胃的被覆上皮亦呈阴性。
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2.2 CD44v6表达与胃腺癌分型、分期及预后关系
CD44v6阳性物质主要定位于癌细胞膜上，呈镶边状。在肠型胃癌中CD44v6阳性细胞呈簇状分布于癌巢内或癌周，在弥漫型胃癌阳性细胞呈点散状分布，而在癌细胞巢周边部及脉管内转移性癌栓中CD44v6表达较强。CD44v6阳性表达率为48.6%(51/105)，不同Lauren分型CD44v6阳性表达率比较，细胞分化好(肠型胃癌)与分化差(弥漫型胃癌)间差异有显著性(χ2=4.41,P<0.05)。淋巴结转移组CD44v6阳性率为58.1%(43/74)，明显高于淋巴结未转移组之25.8%(8/31)，差异有极显著意义(χ2=9.23,P<0.01)。CD44v6阳性表达与癌浸润程度、临床分期差异均有显著性(χ2=8.97,6.37,P均<0.05)。<5年生存率组与≥5年生存率组比较，差异有显著性(χ2=4.99,P<0.05)。见表1.
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表1 105例胃腺癌CD44v6表达与临床病理关系 临床病理特征
n
CD44v6表达阳性例数(%)
Lauren分型
肠型
72
40(55.6)
弥漫型
33
11(33.3)
淋巴结转移
阳性组
, 百拇医药
74
43(58.1)
阴性组
31
8(25.8)
临床分期
Ⅰ，Ⅱ
33
10(30.3)
Ⅲ，Ⅳ
72
41(56.9)
浸润深度
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黏膜及黏膜下
9
2(22.2)
肌层
24
7(29.2)
浆膜层
72
42(58.3)
术后生存情况
<5年
35
19(54.3)
, 百拇医药
≥5年
27
7(25.9)
3 讨 论 CD44是一种细胞表面的跨膜性糖蛋白黏附分子，其结构形式和功能较复杂，可分为标准型(CD44s)和变异型(CD44v)。Macky等〔3〕和Fox等〔4〕用单克隆抗体研究了CD44在人体组织和一些肿瘤中的表达，发现CD44s和CD44v分布较为广泛，主要以上皮细胞为主，而上皮细胞以生发细胞为著，如皮肤及食管鳞状上皮的基底细胞以及乳腺的肌上皮细胞。本文结果亦显示,CD44v 阳性表达主要位于胃腺生发部，即胃腺颈部和小凹底部。表明CD44与细胞移动、生长及抑制细胞凋亡有关〔5〕，且在萎缩性胃炎的肠化腺体有较高的表达率〔6〕，这些变化与癌的关系尚有待研究。
已有研究表明， CD44v 异常表达在恶性肿瘤中是一种普遍现象， 其在原发性胃腺癌的进行性发展中起重要作用。 本文检测结果表明，CD44v6的表达与胃癌的侵犯性、转移能力及预后等临床生物学行为相关。在淋巴结转移组，胃腺癌CD44v6阳性表达率为58.1%，明显高于淋巴结未转移组(25.8%)，提示CD44v阳性表达与胃腺癌演进、侵犯能力、 转移能力的增强有关，表达CD44v6的肿瘤细胞可能获得有利于癌细胞浸润和转移的新的生物学行为〔7〕。CD44是细胞表面黏附分子，参与癌细胞与基质的黏附作用，也能与细胞内骨架蛋白结合，参与细胞移动，这种黏附与结合能力的增强有利于癌细胞的扩散与转移。变异型CD44的表达与肿瘤细胞分化有关，其阳性表达率在肠型胃癌比弥漫型胃癌更常见，这一结果与文献报道相符〔8,9〕。本文结果显示，CD44v6阳性表达的胃癌病人5 年存活率较阴性表达者大为降低，提示有转移活性的CD44v病人预后不良。我们认为，CD44v表达的异常有可能成为肿瘤转移或复发早期监测的生物学标志，对病人的预后估计亦具有临床价值。
, http://www.100md.com
参考文献
1 Stamenkovic I, Aruffo A,Amiot M,et al.The hematopoietic and epithelial forms of CD44 are distinct polypeptides with different adhesion potentials hyaluronate-bearing cells.EMRO J,1991,10:343
2 Gunthert U, Hofmann M, Rudy W, et al. A new variant of glycoprotein CD44 confers metastatic potential to rat carcinoma cells.Cell,1991,65:13
3 Mackay CR,Terpe HT,Stauder R,et al.Expression and modulation of CD44 variant isoforms in humans. J Cell Biol,1994,124:71
, http://www.100md.com
4 Fox SB,Fawcett J,Jackson DJ,et al.Normal human tissues, in addition to some tumors, express multiple different CD44 isoforms.Cancer Res,1994,54:4539
5 Ayroldi E,Cannarile L,Migliorati G,et al.CD44(Pgp-1)inhibits CD3 and dexamethasone induced apoptosis.Blood,1995,86:2672
6 Mayer B,Jauch KW,Gunthert U,et al.De-novo expression of CD44 and survival in gastric cancer.Lancet,1993,342:1019
7 Tahara E,Semba S,Tahara H. Molecular biological observations in gastric cancer.Semin Oncol,1996,23(3):307
, 百拇医药
8 Hong RL,Lee WJ,Shun CT,et al. Expression of CD44 and its clinical implication in diffuse-type and intestinal-type gastric adenocarcinomas. Oncology,1995,52(4):334
9 Streit M,Schmidt R,Hilgenfeld RU,et al.Adhesion receptors in malignant transformation and dissemination of gastrointestinal tumors.Recent Results Cancer Res,1996,142:19
(1998-07-27收稿 1998-12-28修回), 百拇医药