湖南安化山楂几种化学成分的研究①
作者：冯映冰 王 娟
单位：冯映冰 王 娟(湖南中医学院药学分院 长沙 410004)
关键词：安化山楂；总黄酮 总有机酸；熊果酸；含量测定
湖南中医学院学报/990109 提要 测定了湖南安化山楂中具有明显药理作用的总黄酮、总有机酸、熊果酸的含量，并与辽宁、山东等地所产山楂进行比较。结果表明，湖南安化山楂品质优良，具有开发利用价值。
中国图书分类号 R284.1
山楂在我国广为分布，北方产山楂称北山楂，为蔷薇科山楂属植物山里红(Crataegus pinnatifide Bge Var majao N.E.Br)及大果山楂(C.pinatifide Bge)的果实；南方产山楂称南山楂，为同属植物野山楂(C.Cuneata sied et zuce)的果实。此外，湖南安化县文溪等山区所产山楂，其果大、气香、味酸甜，经鉴定为湖北山楂Crataegus napenensis Sarg。为了开发利用山区资源，笔者以具有强心降脂作用的黄酮类、熊果酸和具有健胃消食功能的总有机酸为指标，将湖南安化与其他5个地区所产山楂进行了含量测定的比较，结果如下。
, 百拇医药
1 实验材料
CS-930双波长薄层色谱扫描仪(日本岛津)；UV-265FW紫外分光光度计(日本岛津)；定量毛细管(U.S.A Dummond)；硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂)。试剂均为分析纯。
熊果酸对照品(中国药品生物制品检定所)；以无水乙醇配制成0.82mg/ml的对照品液；槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所)：以50%乙醇配制成0.20mg/ml的对照品液。
山楂分别购自产地，经鉴定确认。去核干燥粉碎，过40目筛，置干燥器备用。
2 方法与结果
2.1 薄层扫描法测定熊果酸的含量
2.1.1 实验条件 薄层板：硅胶G板20cm×10cm，厚0.2mm。展开剂：环已烷-氯仿-乙酸乙酯(20∶5∶8)。显色：喷以醋酐-浓硫酸(9∶1)，100℃烘10min。
, 百拇医药
扫描参数：λS=535nm，λR=680nm，反射法锯齿扫描，狭缝1.2mm×1.2mm，SX=3，灵敏度：中。
2.1.2 样品中熊果酸定性鉴别 取样品供试液，熊果酸对照品液点于同一块薄层板，展开，显色，与对照品相应的位置上，样品显相同的樱红色斑点(图1)；在370～700nm范围内，进行光谱扫描，所得结果表明样品与对照品吸收图谱一致(图2)。
图1 熊果酸薄层色谱图
图2 熊果酸吸收光谱图
“—”对照品 “……”样品
2.1.3 标准曲线的绘制 在同一块薄层板上分别点对照品液1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0μl，展开、显色、扫描，得峰面积积分值A。以A为纵座标，熊果酸点样量C为横座标绘制标准曲线，并计算回归方程为Y=92+1.5524×103x，r=0.9988，线性范围0.82～4.10μg。
, 百拇医药
2.1.4 稳定性考察 对展开、显色后的熊果酸对照品斑点每隔30min扫描1次，结果说明斑点显色后2.5h内稳定。
2.1.5 精密度测定 于同一薄层板上点6个熊果酸对照品斑点，点样量2μl，将其展开，显色，扫描，6个斑点平均峰面积积分值为47910，SD=894，RSD=1.87%。
2.1.6 样品测定 分别精密称取不同产地山楂粉末约1.0g，置索氏提取器，加100ml乙醚，于40℃水浴提取4.5h，提取液回收至干，残渣加少量乙醇-乙醚(2∶3)溶解，转至5ml容量瓶，以乙醇-乙醚(2∶3)定容，摇匀供试。
分别取对照品液2μl、4μl，样品液2μl点于同一薄层板，展开、显色、扫描，按外标两点法计算，得样品中熊果酸含量，结果见附表。
2.1.7 回收率测定 精密称取已知熊果酸含量的安化山楂粉末5份(每份约1.10g)，每份精密加入熊果酸对照品0.004g，按样品测定方法测定并计算回收率，回收率平均值为101.55%，RSD=
, 百拇医药
1.51%。
2.2 比色法测定总黄酮含量
2.2.1 实验条件 按文献[1]方法，以NaNo2-AL(NO3)3作为显色剂，于510nm处测定吸收度，按标准曲线法计算含量。
2.2.2 标准曲线绘制 精密量取槲皮素对照品液0.0、 1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0ml，置10ml容量瓶中，按文献[1]方法操作，测得吸收度A。以A为纵座标，C为横座标，绘制标准曲线，并经计算得回归方程Y=0.563x+0.015，r=0.9983，线性范围0.020～0.10mg/ml。
2.2.3 样品测定 精密称取山楂粉末约2.5g，置索氏提取器，加95%乙醇150ml，回流1.5小时，将提取液转入250ml容量瓶，以蒸馏水定容至刻度，摇匀供试。精密量取样品供试液1ml，按“2.2.2”项下方法操作，并根据标准曲线计算出样品中总黄酮含量，结果见附表。
, 百拇医药
2.2.4 回收率测定 精密称取约2.0g已知含量的山东泰安山楂粉末，精密加入槲皮素对照品0.10g，按样品测定方法测定，计算回收率，结果回收率3次平均值为95.69%，RSD=3.43%。
2.3 中和法测定总有机酸含量[2]
精密称取山楂粉末1g，加水至100ml，置具塞三角瓶中室温浸泡8h，过滤、弃去初滤液、取续滤液25ml，加活性炭0.1g脱色，过滤，以50ml水冲洗残渣，合并滤液与洗液，加酚酞指示剂两滴，用标准NaOH液(0.1mol/L)滴定即得。每毫升标准NaOH液(0.1mol/L)相当于6.404mg枸橼酸(C6H8O7)。按枸橼酸计算，样品中总有机酸含量见附表。
附表 不同产地山楂样品测定结果 (%) 产地
, 百拇医药 熊果酸
总黄酮
总有机酸
含 量
RSD
含 量
RSD
含 量
RSD
湖南
安化
0.67
1.48
, 百拇医药 9.27
0.71
5.59
1.01
辽宁
阜新
0.62
2.62
4.02
1.04
7.20
0.92
山东
, 百拇医药
泰安
0.57
2.08
7.65
0.72
6.02
1.26
河北
承德
0.53
1.97
6.88
1.67
, 百拇医药
4.38
1.15
湖北
随县
0.59
1.02
1.90
1.12
1.08
0.86
注：以上结果均为3次实验平均值
3 讨论
山楂具有强心、降压、健胃消食等功效，不但是常用中药，而且以山楂为原料的保健食品、饮料也日益受到人们的关注。传统上北山楂应用广泛，其他山楂较少利用。山楂果实含有黄酮、有机酸、糖类、维生素C等化学成份。其中黄酮类、熊果酸具有强心、降脂、改善微循环等作用，有机酸具有明显健胃消食功能。故本文测定了湖南安化等5个地区所产山楂果实中总黄酮、总有机酸、熊果酸的含量。结果表明，湖南安化山楂以上几种化学成分含量均高于或相当于山东、河北、辽宁等北山楂，以此为指标，可认为湖南安化山楂品质优良，具有极大的开发利用价值。
①课题来源 湖南省科委资助课题
参考文献
[1] 郭允珍.大山楂丸中主要有效成分的含量测定.中成药研究，1984，(10)：27
[2] 何心亮，刘元红.小儿消食片质量标准的研究.中成药，1992，14(5)：11～13
(收稿日期 1998-06-09)
, http://www.100md.com
单位：冯映冰 王 娟(湖南中医学院药学分院 长沙 410004)
关键词：安化山楂；总黄酮 总有机酸；熊果酸；含量测定
湖南中医学院学报/990109 提要 测定了湖南安化山楂中具有明显药理作用的总黄酮、总有机酸、熊果酸的含量，并与辽宁、山东等地所产山楂进行比较。结果表明，湖南安化山楂品质优良，具有开发利用价值。
中国图书分类号 R284.1
山楂在我国广为分布，北方产山楂称北山楂，为蔷薇科山楂属植物山里红(Crataegus pinnatifide Bge Var majao N.E.Br)及大果山楂(C.pinatifide Bge)的果实；南方产山楂称南山楂，为同属植物野山楂(C.Cuneata sied et zuce)的果实。此外，湖南安化县文溪等山区所产山楂，其果大、气香、味酸甜，经鉴定为湖北山楂Crataegus napenensis Sarg。为了开发利用山区资源，笔者以具有强心降脂作用的黄酮类、熊果酸和具有健胃消食功能的总有机酸为指标，将湖南安化与其他5个地区所产山楂进行了含量测定的比较，结果如下。
, 百拇医药
1 实验材料
CS-930双波长薄层色谱扫描仪(日本岛津)；UV-265FW紫外分光光度计(日本岛津)；定量毛细管(U.S.A Dummond)；硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂)。试剂均为分析纯。
熊果酸对照品(中国药品生物制品检定所)；以无水乙醇配制成0.82mg/ml的对照品液；槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所)：以50%乙醇配制成0.20mg/ml的对照品液。
山楂分别购自产地，经鉴定确认。去核干燥粉碎，过40目筛，置干燥器备用。
2 方法与结果
2.1 薄层扫描法测定熊果酸的含量
2.1.1 实验条件 薄层板：硅胶G板20cm×10cm，厚0.2mm。展开剂：环已烷-氯仿-乙酸乙酯(20∶5∶8)。显色：喷以醋酐-浓硫酸(9∶1)，100℃烘10min。
, 百拇医药
扫描参数：λS=535nm，λR=680nm，反射法锯齿扫描，狭缝1.2mm×1.2mm，SX=3，灵敏度：中。
2.1.2 样品中熊果酸定性鉴别 取样品供试液，熊果酸对照品液点于同一块薄层板，展开，显色，与对照品相应的位置上，样品显相同的樱红色斑点(图1)；在370～700nm范围内，进行光谱扫描，所得结果表明样品与对照品吸收图谱一致(图2)。
图1 熊果酸薄层色谱图
图2 熊果酸吸收光谱图
“—”对照品 “……”样品
2.1.3 标准曲线的绘制 在同一块薄层板上分别点对照品液1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0μl，展开、显色、扫描，得峰面积积分值A。以A为纵座标，熊果酸点样量C为横座标绘制标准曲线，并计算回归方程为Y=92+1.5524×103x，r=0.9988，线性范围0.82～4.10μg。
, 百拇医药
2.1.4 稳定性考察 对展开、显色后的熊果酸对照品斑点每隔30min扫描1次，结果说明斑点显色后2.5h内稳定。
2.1.5 精密度测定 于同一薄层板上点6个熊果酸对照品斑点，点样量2μl，将其展开，显色，扫描，6个斑点平均峰面积积分值为47910，SD=894，RSD=1.87%。
2.1.6 样品测定 分别精密称取不同产地山楂粉末约1.0g，置索氏提取器，加100ml乙醚，于40℃水浴提取4.5h，提取液回收至干，残渣加少量乙醇-乙醚(2∶3)溶解，转至5ml容量瓶，以乙醇-乙醚(2∶3)定容，摇匀供试。
分别取对照品液2μl、4μl，样品液2μl点于同一薄层板，展开、显色、扫描，按外标两点法计算，得样品中熊果酸含量，结果见附表。
2.1.7 回收率测定 精密称取已知熊果酸含量的安化山楂粉末5份(每份约1.10g)，每份精密加入熊果酸对照品0.004g，按样品测定方法测定并计算回收率，回收率平均值为101.55%，RSD=
, 百拇医药
1.51%。
2.2 比色法测定总黄酮含量
2.2.1 实验条件 按文献[1]方法，以NaNo2-AL(NO3)3作为显色剂，于510nm处测定吸收度，按标准曲线法计算含量。
2.2.2 标准曲线绘制 精密量取槲皮素对照品液0.0、 1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0ml，置10ml容量瓶中，按文献[1]方法操作，测得吸收度A。以A为纵座标，C为横座标，绘制标准曲线，并经计算得回归方程Y=0.563x+0.015，r=0.9983，线性范围0.020～0.10mg/ml。
2.2.3 样品测定 精密称取山楂粉末约2.5g，置索氏提取器，加95%乙醇150ml，回流1.5小时，将提取液转入250ml容量瓶，以蒸馏水定容至刻度，摇匀供试。精密量取样品供试液1ml，按“2.2.2”项下方法操作，并根据标准曲线计算出样品中总黄酮含量，结果见附表。
, 百拇医药
2.2.4 回收率测定 精密称取约2.0g已知含量的山东泰安山楂粉末，精密加入槲皮素对照品0.10g，按样品测定方法测定，计算回收率，结果回收率3次平均值为95.69%，RSD=3.43%。
2.3 中和法测定总有机酸含量[2]
精密称取山楂粉末1g，加水至100ml，置具塞三角瓶中室温浸泡8h，过滤、弃去初滤液、取续滤液25ml，加活性炭0.1g脱色，过滤，以50ml水冲洗残渣，合并滤液与洗液，加酚酞指示剂两滴，用标准NaOH液(0.1mol/L)滴定即得。每毫升标准NaOH液(0.1mol/L)相当于6.404mg枸橼酸(C6H8O7)。按枸橼酸计算，样品中总有机酸含量见附表。
附表 不同产地山楂样品测定结果 (%) 产地
, 百拇医药 熊果酸
总黄酮
总有机酸
含 量
RSD
含 量
RSD
含 量
RSD
湖南
安化
0.67
1.48
, 百拇医药 9.27
0.71
5.59
1.01
辽宁
阜新
0.62
2.62
4.02
1.04
7.20
0.92
山东
, 百拇医药
泰安
0.57
2.08
7.65
0.72
6.02
1.26
河北
承德
0.53
1.97
6.88
1.67
, 百拇医药
4.38
1.15
湖北
随县
0.59
1.02
1.90
1.12
1.08
0.86
注：以上结果均为3次实验平均值
3 讨论
山楂具有强心、降压、健胃消食等功效，不但是常用中药，而且以山楂为原料的保健食品、饮料也日益受到人们的关注。传统上北山楂应用广泛，其他山楂较少利用。山楂果实含有黄酮、有机酸、糖类、维生素C等化学成份。其中黄酮类、熊果酸具有强心、降脂、改善微循环等作用，有机酸具有明显健胃消食功能。故本文测定了湖南安化等5个地区所产山楂果实中总黄酮、总有机酸、熊果酸的含量。结果表明，湖南安化山楂以上几种化学成分含量均高于或相当于山东、河北、辽宁等北山楂，以此为指标，可认为湖南安化山楂品质优良，具有极大的开发利用价值。
①课题来源 湖南省科委资助课题
参考文献
[1] 郭允珍.大山楂丸中主要有效成分的含量测定.中成药研究，1984，(10)：27
[2] 何心亮，刘元红.小儿消食片质量标准的研究.中成药，1992，14(5)：11～13
(收稿日期 1998-06-09)
, http://www.100md.com