硫酸沙丁胺醇控释小丸胶囊的人体相对生物利用度研究*
作者：陈 孝 伍杰雄 张霖泽 赵香兰
单位：陈 孝 伍杰雄 广州 510080 中山医科大学附属第一医院药学部；张霖泽 广州 510240 广州市医药工业研究所；赵香兰 广州 510089 中山医科大学临床药理研究所
关键词：沙丁胺醇；控释胶囊；药代动力学；人体生物利用度
中国现代应用药学990309摘要 目的：研究硫酸沙丁胺醇控释小丸胶囊和进口控释片及普通片在健康志愿者体内单剂量和多剂量给药后的药代动力学和生物利用度。方法：8名健康男性志愿者自身随机交叉先后po 8mg受试硫酸沙丁胺醇控释小丸胶囊、沙丁胺醇控释片(Volmax)或沙丁胺醇普通片(Ventolin)，观察其药代动力学和相对生物利用度。另20名受试者自身随机交叉po受试胶囊(8mg,bid)和Volmax(8mg,bid)，连服5d，观察峰谷波动率。用高效液相色谱法测定血药浓度。结果：单剂量给药后Tmax分别为(4.5±0.8)、(5.0±1.5)、(1.8±0.7)h；Cmax分别为(14.6±5.5)、(15.0±3.8)、(31.0±7.5)ng/ml；AUC0～∞分别为(137.4±31.8)、(139.3±31.4)、(189.2±31.3)ng/ml*h；MRT分别为(10.5±0.8)、(10.8±1.0)、(7.4±0.8)h。多剂量给药后第5天的Tmax分别为(5.5±0.8)、(5.8±1.3)h；Cmax分别为(14.2±2.17)、(15.2±2.81)ng/ml；Cmin分别为(7.7±0.9)、(7.8±1.1)ng/ml；AUC0～Tn分别为(126.5±19.9)、(132.3±22.1)ng/ml.h；峰谷波动率分别为(0.61±0.2)、(0.66±0.2)。结论：受试胶囊相对于Ventolin和Volmax的生物利用度分别为72.4%±10.4%和99.8%±18.5%；受试胶囊和Volmax一样具有明显的缓释特征。
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Studies on the relative bioavailability of a novel controlled-release salbutamol capsule in healthy volunteers
Chen Xiao(Chen X),Wu Jiexiong(Wu JX),Zhang Linze(Zhang LZ),et al(Department of Pharmacology,The First Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou 510080)
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the pharmacokinetics and relative bioavailability of a novel controlled-release salbutamol capsule.METHOD:The tested controlled-release salbutamol capsule was compared to the inport salbutamol controlled-release formulation-Volmax and the immediate-release formulation of salbutamol-Ventolin to 8 male healthy subjects in a single dose in a randomized three-way crossover design.Another 20 male healthy subjects were enrolled in the multiple oral doses study.Each subject received one 8 mg tested novel controlled-release salbutamol capsule or Volmax every 12 h for 5 consecutive days with 7 days separating each phase.Serum concentrations of salbutamol were determined by HPLC.RESULTS:The pharmacokinetic parameters of the single dose test were listed as follows:Tmax (4.5±0.8)、(5.0±1.5)、(1.8±0.7)h,Cmax(14.6±5.5)、(15±3.8)、(31.0±7.5)ng/ml, AUC0～∞(137.4±31.8)、(139.3±31.4)、(189.2±31.3)ng/ml.h,MRT(10.5±0.8)、(10.8±1.0)、(7.4±0.8)h,respectively.In the multiple oral doses study,Tmax was (5.5±0.8)、(5.8±1.3)h respectively,Cmax was (14.2±2.17)、(15.2±2.81)ng/ml respectively,Cmin was (7.7±0.9)、(7.8±1.1)ng/ml respectively,AUC0～Tn was (126.5±19.9)、(132.3±22.1)ng/ml.h respectively,and peak-trough fluctuation(PTF) was (0.61±0.2)、(0.66±0.2) respectively.CONCLUSION:The relative bioavailability of the novel controlled-release salbutamol capsule was founded to be 72.4%±10.4% and 99.8%±18.5% compared with Ventolin and Volmax respectively,and it has the distinct characteristics of an effective controlled-release formulation that will offer clinical advantages of better compliance and tolerability over long term usage.
, 百拇医药
KEY WORDS salbutamol,controlled-release salbutamol capsule,pharmacokinetics,huamn relative bioavailability
沙丁胺醇(Salbutamol)为选择性β2-受体激动剂,有较强的支气管扩张作用，在临床被广泛用于治疗支气管哮喘症。由于其常释片消除半率期较短，临床每天需用药3～4次，对长期用药病人甚为不便；以及较高的峰浓度可能导致的副作用，故国外开发其控释制剂(Volmax,英国葛兰素)，并已上市。现广州市医药工业研究所研制了硫酸沙丁胺醇控释小丸胶囊，本文主要研究该制剂的人体相对生物利用度和多剂量给药后的峰谷波动率。
1 实验材料
1.1 仪器
Waters 510泵，Waters 474型扫描荧光检测器，岛津CR-3A数据处理器，超纯水系统(Milli-Qplus)。
, 百拇医药
1.2 药品与试剂
1.2.1 药品：①沙丁胺醇标准品(99.6%，广州市医药工业研究所);②丁酚胺(Bamethane,Sigma公司,Lot:65F0535);③磷酸二(2-乙基已基)酯[Di-(2-ethylhexyl) phosphate,DEHP,Sigma公司,Lot:64H0289];④沙丁胺醇控释小丸胶囊(8mg/胶囊，广州市医药工业研究所，批号：960125)；⑤沙丁胺醇普通片(Ventolin)(2mg/片，葛兰素公司生产，批号：W2484MB)；⑥沙丁胺醇控释片(Volmax)(8mg/片，葛兰素公司生产，批号：W1164NA)。
1.2.2 试剂：甲醇、乙腈均为色谱纯(浙江黄岩化学实验厂)，水为超纯水，(NH4)H2PO4为分析纯。
1.3 受试对象
, 百拇医药
单剂量组8名健康男性志愿者,年龄21～24岁,体重58～69kg。多剂量组20名健康男性志愿者,年龄20～23岁,体重54～67kg。均无心血管、呼吸及消化系统病史,无药物过敏史,体检正常,肝、肾功能检查正常。受试前两周内未服用其它任何药物。受试前自愿签署知情同意书。
2 实验方法
2.1 标准曲线制作及样本处理
采用本作者所建立的实验方法[1]。
2.2 实验设计与血样采集
2.2.1 单剂量给药组：8名健康受试者服药前禁食12h，服药后4h进食统一食谱的标准餐。按拉丁方设计,自身对照随机交叉po广州医药工业研究所提供的沙丁胺醇控释胶囊或Volmax或Ventolin各8mg，给药间隔为1周。服药后按下列时间点从上肢静脉取血。控释制剂采血时间点为：0(给药前)，1，2，3，4，5，6，7，8，10，12，15，24和36h；普通片采血时间点为：0(给药前)，0.5，1，1.5，2，2.5，3，4，5，6，7，8，10，12，24和36h。血样本在3000r/min离心10min，分离出血浆，置-20℃冰箱中冷冻保存至测定时间。
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2.2.2 多剂量给药组：另20名健康受试者自身对照随机交叉po受试沙丁胺醇控释胶囊8mg，或Volmax 8mg，每12h 1次，连续6d，两药的给药间隔为1周。受试者早7:30进食统一早餐,餐后即服药,晚7:30再服药。其余时间按平常习惯进餐,但勿吃油腻食物。服药后按下列时间点从上肢静脉取血：每天早上给药前；第6天0(给药前)，1，2，3，4，5，6，7，8，10，12，15，24和36h。血样本在3000r/min 离心10min，分离出血浆，置-20℃冰箱中冷冻保存至测定时间。
2.3 数据处理
2.3.1 单剂量给药组：用剩余法计算Ventolin的Ke；Cmax,Tmax为实测值，AUC及MRT采用统计矩方法计算。体内吸收百分数按Wagner-Nelson方程计算。
2.3.2 多剂量给药组：将20名受试者第6天给药后各时间点的血药浓度数据用统计矩方法计算AUC0～∞；Cmax为第6天峰浓度实测值；Cmin为5d谷浓度值的平均。峰谷波动率采用如下式公式计算：PTF=(Cmax-Cmin)/(AUC/τ)。
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2.3.3 统计分析：各剂量组的参数采用方差分析检验不同的制剂的参数差异是否有显著性。
3 结 果
3.1 单剂量组药代动力学研究结果：8名健康受试者单剂po 8mg受试控释胶囊或Volmax或Ventolin后，平均血药浓度-时间曲线见图1，主要药动学参数见表1。
图1 3种沙丁胺醇制剂单剂量给药后的平均药-时曲线 从图1和表1可知，受试控释制剂与参比控释制剂Volmax比较，吸收和消除参数Tmax、Cmax 、MRT、AUC0～∞均无显著差异(均P>0.05)。受试控释胶囊与普通片表1 8名志愿者单次服用受试胶囊、Volmax和Ventolin各8mg后的药动学参数 志愿者
Tmax(h)
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Cmax(ng/ml)
AUC0～∞(mg/ml.h)
F(%)
MRT(h)
A
B
C
A
B
C
A
B
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C
A
B
C
A
B
C
1
5.0
6.0
1.0
10.7
10.9
43.3
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122.6
147.8
170.9
71.7
86.5
100.0
10.4
11.6
6.4
2
5.0
3.0
2.5
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8.6
12.2
30.2
83.7
87.1
172.5
48.5
50.5
100.0
10.7
12.0
8.6
3
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5.0
5.0
2.0
11.5
16.1
22.2
106.8
135.9
139.2
76.7
97.6
100.0
9.5
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8.8
7.2
4
3.0
5.0
1.0
26.6
23.3
32.6
179.0
193.8
243.6
73.5
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79.6
100.0
9.4
10.9
7.3
5
5.0
4.0
2.0
14.3
15.5
22.8
144.3
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137.8
185.5
77.8
74.3
100.0
11.6
10.4
8.4
6
4.0
8.0
1.5
12.8
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12.8
38.3
142.4
150.3
202.2
70.4
74.3
100.0
10.2
11.3
6.8
7
4.0
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5.0
3.0
15.9
15.3
33.2
169.6
151.7
213.4
79.5
71.1
100.0
11.2
11.0
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7.4
8
5.0
4.0
1.5
16.4
13.5
25.2
151.1
110.1
186.2
81.1
59.1
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100.0
10.8
10.5
6.9
MEAN
4.5
5.0
1.8
14.6
15.0
31.0
137.4
139.3
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189.2
72.4
74.1
10.5
10.8
7.4
SD
0.8
1.5
0.7
5.5
3.8
7.5
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31.8
31.4
31.3
10.4
14.8
0.8
1.0
0.8
A-B的P值
0.487
0.733
0.826
0.726
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0.394
A-C的P值
<0.001
0.002
0.010
<0.001
<0.001
B-C的P值
0.002
0.002
0.003
0.002
<0.001
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注：1.“A”为受试胶囊，“B”为葛兰素控释片Volmax，“C”代表葛兰素普通片Ventolin；2.生物利用度F是以常释片为100%，受试胶囊和Volmax与之相比而得出；3.Tmax、Cmax为实测值，AUC0～∞、MRT用统计距方法计算剂比较，Tmax较大；Cmax较低；MRT亦较长，以上参数差异均非常显著(P<0.01)。受试控释胶囊的AUC0～∞(137.4±31.8ng/ml.h)较Ventolin(189.2±31.3ng/ml*h)小(P<0.01)，相对于Ventolin的生物利用度为72.4%±10.4%，但相对于Volmax的生物利用度为99.8%±18.5%。
3.2 稳态下两种控释制剂的药代动力学结果比较
稳态的平均血药浓度-时间曲线见图2和图3，峰谷浓度及波动系数见表2。
, 百拇医药
图2 多剂量给药前5d的谷浓度
图3 多剂量给药第5天的药-时曲线
结果显示，20名志愿者用药后第3、4、5天的血药浓度较一致(图2)，表明已达稳态。稳态时受试控释胶囊与参比控释制剂Volmax的主要药动学参数表明，两制剂Tmax、Cmax、Cmin、PTF之间均无显著性差异(P>0.01)。受试控释胶囊对Volmax的相对生物利用度为96.6%±13.9%。受试控释胶囊的主要稳态药动学参数Cmax、Cmin、AUC0～12和PTF值与Volmax的相应数值之比分别为95.2%±15.2%、101.3%±14.8%、96.6%±13.9%和96.6%±28%。
表2 20名志愿者连续服用受试胶囊和Volmax(各8mg,bid,×6d)后药动学参数 志愿者
, 百拇医药
Tmax(h)
Cmax(ng/ml)
Cmin(ng/ml)
PTF
AUC0～∞(mg/ml.h)
F(%)
MRT(h)
A
B
A
B
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A
B
A
B
A
B
A
B
A
B
9
5.0
5.0
12.1
, 百拇医药
11.0
6.2
6.9
0.73
0.46
96.8
107.9
89.7
100.0
10.6
12.2
10
5.0
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5.0
10.6
13.6
7.5
8.7
0.42
0.48
88.5
122.3
72.4
100.0
10.8
10.7
, 百拇医药
11
5.0
6.0
17.4
19.8
7.4
6.7
0.85
0.96
141.1
164.0
86.0
100.0
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11.7
10.1
12
5.0
5.0
14.4
15.7
7.6
7.9
0.62
0.75
132.1
124.7
, 百拇医药
105.9
100.0
11.7
11.8
13
6.0
8.0
9.7
10.9
7.3
5.9
0.33
0.66
, 百拇医药
88.0
90.7
97.0
100.0
11.7
11.0
14
6.0
3.0
17.0
17.1
8.7
9.0
, 百拇医药
0.62
0.59
160.8
164.6
97.7
100.0
11.1
12.2
15
5.0
6.0
14.0
13.7
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6.1
7.1
0.85
0.66
111.4
119.2
93.5
100.0
10.1
11.4
16
5.0
7.0
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13.6
17.4
7.9
7.6
0.53
0.82
128.6
143.7
89.5
100.0
10.6
12.2
17
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7.0
6.0
11.3
14.7
6.9
6.4
0.48
0.86
110.7
115.6
95.8
100.0
11.6
, 百拇医药
12.2
18
5.0
7.0
13.2
10.6
7.5
6.4
0.59
0.50
116.8
100.1
116.7
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100.0
10.3
10.3
19
4.0
4.0
15.5
17.0
6.8
7.7
0.81
0.72
128.4
, http://www.100md.com
155.8
82.4
100.0
12.1
12.7
20
4.0
5.0
16.2
17.9
7.7
8.8
0.77
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0.79
132.1
137.8
95.9
100.0
8.8
11.1
21
6.0
7.0
13.0
13.5
7.0
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9.2
0.60
0.40
120.3
127.8
94.1
100.0
10.2
11.2
22
6.0
4.0
13.9
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15.7
7.2
7.1
0.63
0.76
128.0
135.1
94.7
100.0
10.7
9.9
23
6.0
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7.0
14.8
18.6
8.2
9.1
0.60
0.75
132.7
152.5
87.0
100.0
12.1
12.0
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24
5.0
5.0
15.4
12.1
10.4
8.6
0.40
0.33
148.5
126.8
117.1
100.0
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11.2
11.7
25
6.0
6.0
17.5
15.0
8.8
7.4
0.68
0.74
154.5
124.0
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124.6
100.0
12.3
11.8
26
7.0
6.0
14.2
13.4
8.7
7.4
0.49
0.64
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135.4
112.1
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100.0
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11.1
27
6.0
8.0
16.0
17.3
7.9
8.0
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0.71
0.70
136.5
160.2
85.2
100.0
11.5
10.6
28
5.0
5.0
15.0
19.1
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8.5
9.7
0.57
0.70
138.0
161.2
85.6
100.0
9.2
10.0
mean
5.5
5.8
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14.2
15.2
7.7
7.8
0.61
0.66
126.5
132.3
96.6
100.0
10.9
11.3
SD
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0.83
1.33
2.17
2.81
0.99
1.08
0.15
0.16
19.87
22.11
13.85
0.00
0.94
, 百拇医药
0.84
P值
0.330
0.066
0.795
0.216
0.189
0.260
0.075
注：1.“A”为受试胶囊，“B”为葛兰素控释片Volmax；2.生物利用度F是以常释片为100%，受试胶囊和Volmax与之相比而得出；3.Tmax、Cmax为实测值，Cmin为5d谷浓度的平均值，AUC0～12、MRT用统计距方法计算3.3 体内吸收百分率
, 百拇医药
受试控释胶囊和Volmax的体内吸收百分率见表3。在1，4，8和12h的吸收百分数分别为7.1%，75.4%，85.9%和86.6%，与Volmax在同样时间点的吸收百分数6.4%，77.2%，85.2%及85.5%非常接近；在24h吸收均可达100%(见表3)。
表3 沙丁胺醇受试胶囊和Volmax的体内吸收百分数(%) 时间(h)
受试胶囊
Volmax
0
0.0±0.0
0.0±0.0
1
7.1±4.5
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6.4±4.8
2
23.6±14.1
19.1±8.4
3
52.3±31.9
52.5±32.8
4
75.4±18.5
77.2±31.6
6
87.7±7.2
, 百拇医药 82.3±21.7
8
85.9±7.2
85.2±5.2
10
87.4±5.7
86.4±8.0
12
86.6±3.3
85.5±4.7
24
101.8±1.6
, 百拇医药 101.0±1.7
4 讨 论
4.1 本试验选用两种权威的沙丁胺醇普通片Ventolin和控释片Volmax作参比。在po单剂量8mg后，受试控释胶囊的吸收较普通片慢，Cmax也较低，但与Volmax接近，体内吸收百分率与Volmax极为相似，故该受试控释胶囊具有明显的缓释特征。受试控释胶囊和Volmax对普通片的相对生物利用度只有73%左右，这与沙丁胺醇具有较强的首过效应有关[2]。
4.2 多剂量给药时，在较大的志愿者样本量(20人)下观察，受试控释胶囊的Tmax、Cmax、Cmin、AUC0～12值及峰谷波动率与Volmax之间无显著性差异，各参数值与国外文献报道亦基本相同[2]，受试控释胶囊对Volmax的相对生物利用度为96.4%±14.1%，说明受试控释胶囊和进口的控释制剂有相同的质量。
, 百拇医药
*本试验属九五国家重点科技项目(攻关)计划“缓(控)释小丸工业化生产试验研究”专题项目,专题合同编号96-902-02-11
参考文献
[1] 陈孝，赵香兰.一种简易的检测人血浆中沙丁胺醇浓度的HPLC法.药物分析杂志，1998，28(3)∶91.
[2] Sykes RS，Reese ME,Meyer MC,et al.Relative bioavailability of a controlled-release albuterol formulation for twice-daily use.Biopharmasceutics and Drug Disposition,1988,9∶551.
收稿日期：1998-04-16, http://www.100md.com
单位：陈 孝 伍杰雄 广州 510080 中山医科大学附属第一医院药学部；张霖泽 广州 510240 广州市医药工业研究所；赵香兰 广州 510089 中山医科大学临床药理研究所
关键词：沙丁胺醇；控释胶囊；药代动力学；人体生物利用度
中国现代应用药学990309摘要 目的：研究硫酸沙丁胺醇控释小丸胶囊和进口控释片及普通片在健康志愿者体内单剂量和多剂量给药后的药代动力学和生物利用度。方法：8名健康男性志愿者自身随机交叉先后po 8mg受试硫酸沙丁胺醇控释小丸胶囊、沙丁胺醇控释片(Volmax)或沙丁胺醇普通片(Ventolin)，观察其药代动力学和相对生物利用度。另20名受试者自身随机交叉po受试胶囊(8mg,bid)和Volmax(8mg,bid)，连服5d，观察峰谷波动率。用高效液相色谱法测定血药浓度。结果：单剂量给药后Tmax分别为(4.5±0.8)、(5.0±1.5)、(1.8±0.7)h；Cmax分别为(14.6±5.5)、(15.0±3.8)、(31.0±7.5)ng/ml；AUC0～∞分别为(137.4±31.8)、(139.3±31.4)、(189.2±31.3)ng/ml*h；MRT分别为(10.5±0.8)、(10.8±1.0)、(7.4±0.8)h。多剂量给药后第5天的Tmax分别为(5.5±0.8)、(5.8±1.3)h；Cmax分别为(14.2±2.17)、(15.2±2.81)ng/ml；Cmin分别为(7.7±0.9)、(7.8±1.1)ng/ml；AUC0～Tn分别为(126.5±19.9)、(132.3±22.1)ng/ml.h；峰谷波动率分别为(0.61±0.2)、(0.66±0.2)。结论：受试胶囊相对于Ventolin和Volmax的生物利用度分别为72.4%±10.4%和99.8%±18.5%；受试胶囊和Volmax一样具有明显的缓释特征。
, http://www.100md.com
Studies on the relative bioavailability of a novel controlled-release salbutamol capsule in healthy volunteers
Chen Xiao(Chen X),Wu Jiexiong(Wu JX),Zhang Linze(Zhang LZ),et al(Department of Pharmacology,The First Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou 510080)
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the pharmacokinetics and relative bioavailability of a novel controlled-release salbutamol capsule.METHOD:The tested controlled-release salbutamol capsule was compared to the inport salbutamol controlled-release formulation-Volmax and the immediate-release formulation of salbutamol-Ventolin to 8 male healthy subjects in a single dose in a randomized three-way crossover design.Another 20 male healthy subjects were enrolled in the multiple oral doses study.Each subject received one 8 mg tested novel controlled-release salbutamol capsule or Volmax every 12 h for 5 consecutive days with 7 days separating each phase.Serum concentrations of salbutamol were determined by HPLC.RESULTS:The pharmacokinetic parameters of the single dose test were listed as follows:Tmax (4.5±0.8)、(5.0±1.5)、(1.8±0.7)h,Cmax(14.6±5.5)、(15±3.8)、(31.0±7.5)ng/ml, AUC0～∞(137.4±31.8)、(139.3±31.4)、(189.2±31.3)ng/ml.h,MRT(10.5±0.8)、(10.8±1.0)、(7.4±0.8)h,respectively.In the multiple oral doses study,Tmax was (5.5±0.8)、(5.8±1.3)h respectively,Cmax was (14.2±2.17)、(15.2±2.81)ng/ml respectively,Cmin was (7.7±0.9)、(7.8±1.1)ng/ml respectively,AUC0～Tn was (126.5±19.9)、(132.3±22.1)ng/ml.h respectively,and peak-trough fluctuation(PTF) was (0.61±0.2)、(0.66±0.2) respectively.CONCLUSION:The relative bioavailability of the novel controlled-release salbutamol capsule was founded to be 72.4%±10.4% and 99.8%±18.5% compared with Ventolin and Volmax respectively,and it has the distinct characteristics of an effective controlled-release formulation that will offer clinical advantages of better compliance and tolerability over long term usage.
, 百拇医药
KEY WORDS salbutamol,controlled-release salbutamol capsule,pharmacokinetics,huamn relative bioavailability
沙丁胺醇(Salbutamol)为选择性β2-受体激动剂,有较强的支气管扩张作用，在临床被广泛用于治疗支气管哮喘症。由于其常释片消除半率期较短，临床每天需用药3～4次，对长期用药病人甚为不便；以及较高的峰浓度可能导致的副作用，故国外开发其控释制剂(Volmax,英国葛兰素)，并已上市。现广州市医药工业研究所研制了硫酸沙丁胺醇控释小丸胶囊，本文主要研究该制剂的人体相对生物利用度和多剂量给药后的峰谷波动率。
1 实验材料
1.1 仪器
Waters 510泵，Waters 474型扫描荧光检测器，岛津CR-3A数据处理器，超纯水系统(Milli-Qplus)。
, 百拇医药
1.2 药品与试剂
1.2.1 药品：①沙丁胺醇标准品(99.6%，广州市医药工业研究所);②丁酚胺(Bamethane,Sigma公司,Lot:65F0535);③磷酸二(2-乙基已基)酯[Di-(2-ethylhexyl) phosphate,DEHP,Sigma公司,Lot:64H0289];④沙丁胺醇控释小丸胶囊(8mg/胶囊，广州市医药工业研究所，批号：960125)；⑤沙丁胺醇普通片(Ventolin)(2mg/片，葛兰素公司生产，批号：W2484MB)；⑥沙丁胺醇控释片(Volmax)(8mg/片，葛兰素公司生产，批号：W1164NA)。
1.2.2 试剂：甲醇、乙腈均为色谱纯(浙江黄岩化学实验厂)，水为超纯水，(NH4)H2PO4为分析纯。
1.3 受试对象
, 百拇医药
单剂量组8名健康男性志愿者,年龄21～24岁,体重58～69kg。多剂量组20名健康男性志愿者,年龄20～23岁,体重54～67kg。均无心血管、呼吸及消化系统病史,无药物过敏史,体检正常,肝、肾功能检查正常。受试前两周内未服用其它任何药物。受试前自愿签署知情同意书。
2 实验方法
2.1 标准曲线制作及样本处理
采用本作者所建立的实验方法[1]。
2.2 实验设计与血样采集
2.2.1 单剂量给药组：8名健康受试者服药前禁食12h，服药后4h进食统一食谱的标准餐。按拉丁方设计,自身对照随机交叉po广州医药工业研究所提供的沙丁胺醇控释胶囊或Volmax或Ventolin各8mg，给药间隔为1周。服药后按下列时间点从上肢静脉取血。控释制剂采血时间点为：0(给药前)，1，2，3，4，5，6，7，8，10，12，15，24和36h；普通片采血时间点为：0(给药前)，0.5，1，1.5，2，2.5，3，4，5，6，7，8，10，12，24和36h。血样本在3000r/min离心10min，分离出血浆，置-20℃冰箱中冷冻保存至测定时间。
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2.2.2 多剂量给药组：另20名健康受试者自身对照随机交叉po受试沙丁胺醇控释胶囊8mg，或Volmax 8mg，每12h 1次，连续6d，两药的给药间隔为1周。受试者早7:30进食统一早餐,餐后即服药,晚7:30再服药。其余时间按平常习惯进餐,但勿吃油腻食物。服药后按下列时间点从上肢静脉取血：每天早上给药前；第6天0(给药前)，1，2，3，4，5，6，7，8，10，12，15，24和36h。血样本在3000r/min 离心10min，分离出血浆，置-20℃冰箱中冷冻保存至测定时间。
2.3 数据处理
2.3.1 单剂量给药组：用剩余法计算Ventolin的Ke；Cmax,Tmax为实测值，AUC及MRT采用统计矩方法计算。体内吸收百分数按Wagner-Nelson方程计算。
2.3.2 多剂量给药组：将20名受试者第6天给药后各时间点的血药浓度数据用统计矩方法计算AUC0～∞；Cmax为第6天峰浓度实测值；Cmin为5d谷浓度值的平均。峰谷波动率采用如下式公式计算：PTF=(Cmax-Cmin)/(AUC/τ)。
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2.3.3 统计分析：各剂量组的参数采用方差分析检验不同的制剂的参数差异是否有显著性。
3 结 果
3.1 单剂量组药代动力学研究结果：8名健康受试者单剂po 8mg受试控释胶囊或Volmax或Ventolin后，平均血药浓度-时间曲线见图1，主要药动学参数见表1。
图1 3种沙丁胺醇制剂单剂量给药后的平均药-时曲线 从图1和表1可知，受试控释制剂与参比控释制剂Volmax比较，吸收和消除参数Tmax、Cmax 、MRT、AUC0～∞均无显著差异(均P>0.05)。受试控释胶囊与普通片表1 8名志愿者单次服用受试胶囊、Volmax和Ventolin各8mg后的药动学参数 志愿者
Tmax(h)
, 百拇医药
Cmax(ng/ml)
AUC0～∞(mg/ml.h)
F(%)
MRT(h)
A
B
C
A
B
C
A
B
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C
A
B
C
A
B
C
1
5.0
6.0
1.0
10.7
10.9
43.3
, 百拇医药
122.6
147.8
170.9
71.7
86.5
100.0
10.4
11.6
6.4
2
5.0
3.0
2.5
, http://www.100md.com
8.6
12.2
30.2
83.7
87.1
172.5
48.5
50.5
100.0
10.7
12.0
8.6
3
, 百拇医药
5.0
5.0
2.0
11.5
16.1
22.2
106.8
135.9
139.2
76.7
97.6
100.0
9.5
, 百拇医药
8.8
7.2
4
3.0
5.0
1.0
26.6
23.3
32.6
179.0
193.8
243.6
73.5
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79.6
100.0
9.4
10.9
7.3
5
5.0
4.0
2.0
14.3
15.5
22.8
144.3
, 百拇医药
137.8
185.5
77.8
74.3
100.0
11.6
10.4
8.4
6
4.0
8.0
1.5
12.8
, 百拇医药
12.8
38.3
142.4
150.3
202.2
70.4
74.3
100.0
10.2
11.3
6.8
7
4.0
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5.0
3.0
15.9
15.3
33.2
169.6
151.7
213.4
79.5
71.1
100.0
11.2
11.0
, 百拇医药
7.4
8
5.0
4.0
1.5
16.4
13.5
25.2
151.1
110.1
186.2
81.1
59.1
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100.0
10.8
10.5
6.9
MEAN
4.5
5.0
1.8
14.6
15.0
31.0
137.4
139.3
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189.2
72.4
74.1
10.5
10.8
7.4
SD
0.8
1.5
0.7
5.5
3.8
7.5
, http://www.100md.com
31.8
31.4
31.3
10.4
14.8
0.8
1.0
0.8
A-B的P值
0.487
0.733
0.826
0.726
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0.394
A-C的P值
<0.001
0.002
0.010
<0.001
<0.001
B-C的P值
0.002
0.002
0.003
0.002
<0.001
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注：1.“A”为受试胶囊，“B”为葛兰素控释片Volmax，“C”代表葛兰素普通片Ventolin；2.生物利用度F是以常释片为100%，受试胶囊和Volmax与之相比而得出；3.Tmax、Cmax为实测值，AUC0～∞、MRT用统计距方法计算剂比较，Tmax较大；Cmax较低；MRT亦较长，以上参数差异均非常显著(P<0.01)。受试控释胶囊的AUC0～∞(137.4±31.8ng/ml.h)较Ventolin(189.2±31.3ng/ml*h)小(P<0.01)，相对于Ventolin的生物利用度为72.4%±10.4%，但相对于Volmax的生物利用度为99.8%±18.5%。
3.2 稳态下两种控释制剂的药代动力学结果比较
稳态的平均血药浓度-时间曲线见图2和图3，峰谷浓度及波动系数见表2。
, 百拇医药
图2 多剂量给药前5d的谷浓度
图3 多剂量给药第5天的药-时曲线
结果显示，20名志愿者用药后第3、4、5天的血药浓度较一致(图2)，表明已达稳态。稳态时受试控释胶囊与参比控释制剂Volmax的主要药动学参数表明，两制剂Tmax、Cmax、Cmin、PTF之间均无显著性差异(P>0.01)。受试控释胶囊对Volmax的相对生物利用度为96.6%±13.9%。受试控释胶囊的主要稳态药动学参数Cmax、Cmin、AUC0～12和PTF值与Volmax的相应数值之比分别为95.2%±15.2%、101.3%±14.8%、96.6%±13.9%和96.6%±28%。
表2 20名志愿者连续服用受试胶囊和Volmax(各8mg,bid,×6d)后药动学参数 志愿者
, 百拇医药
Tmax(h)
Cmax(ng/ml)
Cmin(ng/ml)
PTF
AUC0～∞(mg/ml.h)
F(%)
MRT(h)
A
B
A
B
, 百拇医药
A
B
A
B
A
B
A
B
A
B
9
5.0
5.0
12.1
, 百拇医药
11.0
6.2
6.9
0.73
0.46
96.8
107.9
89.7
100.0
10.6
12.2
10
5.0
, 百拇医药
5.0
10.6
13.6
7.5
8.7
0.42
0.48
88.5
122.3
72.4
100.0
10.8
10.7
, 百拇医药
11
5.0
6.0
17.4
19.8
7.4
6.7
0.85
0.96
141.1
164.0
86.0
100.0
, http://www.100md.com
11.7
10.1
12
5.0
5.0
14.4
15.7
7.6
7.9
0.62
0.75
132.1
124.7
, 百拇医药
105.9
100.0
11.7
11.8
13
6.0
8.0
9.7
10.9
7.3
5.9
0.33
0.66
, 百拇医药
88.0
90.7
97.0
100.0
11.7
11.0
14
6.0
3.0
17.0
17.1
8.7
9.0
, 百拇医药
0.62
0.59
160.8
164.6
97.7
100.0
11.1
12.2
15
5.0
6.0
14.0
13.7
, http://www.100md.com
6.1
7.1
0.85
0.66
111.4
119.2
93.5
100.0
10.1
11.4
16
5.0
7.0
, 百拇医药
13.6
17.4
7.9
7.6
0.53
0.82
128.6
143.7
89.5
100.0
10.6
12.2
17
, 百拇医药
7.0
6.0
11.3
14.7
6.9
6.4
0.48
0.86
110.7
115.6
95.8
100.0
11.6
, 百拇医药
12.2
18
5.0
7.0
13.2
10.6
7.5
6.4
0.59
0.50
116.8
100.1
116.7
, http://www.100md.com
100.0
10.3
10.3
19
4.0
4.0
15.5
17.0
6.8
7.7
0.81
0.72
128.4
, http://www.100md.com
155.8
82.4
100.0
12.1
12.7
20
4.0
5.0
16.2
17.9
7.7
8.8
0.77
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0.79
132.1
137.8
95.9
100.0
8.8
11.1
21
6.0
7.0
13.0
13.5
7.0
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9.2
0.60
0.40
120.3
127.8
94.1
100.0
10.2
11.2
22
6.0
4.0
13.9
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15.7
7.2
7.1
0.63
0.76
128.0
135.1
94.7
100.0
10.7
9.9
23
6.0
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7.0
14.8
18.6
8.2
9.1
0.60
0.75
132.7
152.5
87.0
100.0
12.1
12.0
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24
5.0
5.0
15.4
12.1
10.4
8.6
0.40
0.33
148.5
126.8
117.1
100.0
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11.2
11.7
25
6.0
6.0
17.5
15.0
8.8
7.4
0.68
0.74
154.5
124.0
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124.6
100.0
12.3
11.8
26
7.0
6.0
14.2
13.4
8.7
7.4
0.49
0.64
, 百拇医药
135.4
112.1
120.8
100.0
10.6
11.1
27
6.0
8.0
16.0
17.3
7.9
8.0
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0.71
0.70
136.5
160.2
85.2
100.0
11.5
10.6
28
5.0
5.0
15.0
19.1
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8.5
9.7
0.57
0.70
138.0
161.2
85.6
100.0
9.2
10.0
mean
5.5
5.8
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14.2
15.2
7.7
7.8
0.61
0.66
126.5
132.3
96.6
100.0
10.9
11.3
SD
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0.83
1.33
2.17
2.81
0.99
1.08
0.15
0.16
19.87
22.11
13.85
0.00
0.94
, 百拇医药
0.84
P值
0.330
0.066
0.795
0.216
0.189
0.260
0.075
注：1.“A”为受试胶囊，“B”为葛兰素控释片Volmax；2.生物利用度F是以常释片为100%，受试胶囊和Volmax与之相比而得出；3.Tmax、Cmax为实测值，Cmin为5d谷浓度的平均值，AUC0～12、MRT用统计距方法计算3.3 体内吸收百分率
, 百拇医药
受试控释胶囊和Volmax的体内吸收百分率见表3。在1，4，8和12h的吸收百分数分别为7.1%，75.4%，85.9%和86.6%，与Volmax在同样时间点的吸收百分数6.4%，77.2%，85.2%及85.5%非常接近；在24h吸收均可达100%(见表3)。
表3 沙丁胺醇受试胶囊和Volmax的体内吸收百分数(%) 时间(h)
受试胶囊
Volmax
0
0.0±0.0
0.0±0.0
1
7.1±4.5
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6.4±4.8
2
23.6±14.1
19.1±8.4
3
52.3±31.9
52.5±32.8
4
75.4±18.5
77.2±31.6
6
87.7±7.2
, 百拇医药 82.3±21.7
8
85.9±7.2
85.2±5.2
10
87.4±5.7
86.4±8.0
12
86.6±3.3
85.5±4.7
24
101.8±1.6
, 百拇医药 101.0±1.7
4 讨 论
4.1 本试验选用两种权威的沙丁胺醇普通片Ventolin和控释片Volmax作参比。在po单剂量8mg后，受试控释胶囊的吸收较普通片慢，Cmax也较低，但与Volmax接近，体内吸收百分率与Volmax极为相似，故该受试控释胶囊具有明显的缓释特征。受试控释胶囊和Volmax对普通片的相对生物利用度只有73%左右，这与沙丁胺醇具有较强的首过效应有关[2]。
4.2 多剂量给药时，在较大的志愿者样本量(20人)下观察，受试控释胶囊的Tmax、Cmax、Cmin、AUC0～12值及峰谷波动率与Volmax之间无显著性差异，各参数值与国外文献报道亦基本相同[2]，受试控释胶囊对Volmax的相对生物利用度为96.4%±14.1%，说明受试控释胶囊和进口的控释制剂有相同的质量。
, 百拇医药
*本试验属九五国家重点科技项目(攻关)计划“缓(控)释小丸工业化生产试验研究”专题项目,专题合同编号96-902-02-11
参考文献
[1] 陈孝，赵香兰.一种简易的检测人血浆中沙丁胺醇浓度的HPLC法.药物分析杂志，1998，28(3)∶91.
[2] Sykes RS，Reese ME,Meyer MC,et al.Relative bioavailability of a controlled-release albuterol formulation for twice-daily use.Biopharmasceutics and Drug Disposition,1988,9∶551.
收稿日期：1998-04-16, http://www.100md.com