替硝唑漱口水稳定性研究
作者：潘细贵 王军 罗毅 罗顺德
单位：湖北医科大学第一附属医院 武汉430060
关键词：替硝唑；漱口水；稳定性；高效液相色谱法
中国医院药学杂志990317 摘要 目的:研究替硝唑漱口水的稳定性。方法:用HPLC测定替硝唑的含量，恒温加速试验预测替硝唑漱口水的有效期。结果:替硝唑分解属一级动力学过程，t25 ℃0.9为6.1年。结论:确定替硝唑漱口水的有效期定为2年以上。
Study on stability of tinidazole collutoria
Pan Xigui,Wang Jun,Luo yi,et al (Deparment of Pharmacy,The First Affitiated Hospital of Hubei Medical University 430060)
, 百拇医药
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the stability of tinidazole collutoria.METHODS:Tinidazole was determined in tinidazole collutoria by high performance liquid chromotography.The stability was studied by accelereted test process.RESULTS:The mechanism was fit to first-order reaction and the shelf life was 6.1 years.CONCLUSION:The efficient period was over 2 years.
KEY WORDS tinidazole，collutoria，stability，HPLC
替硝唑(Tinidazole)是抗滴虫和厌氧菌感染的有效药物，具有比甲硝唑疗效高，疗程短的特点[1]。替硝唑漱口水应用于治疗口腔厌氧菌感染，临床疗效显著。本文用HPLC测定替硝唑漱口水中替硝唑含量，并对其稳定性进行初步探讨，结果如下。
, 百拇医药
1 药品及试剂
替硝唑对照品及原料(湖北省医药工业研究所提供)；替硝唑漱口水(浓度0.05%，本院制剂室生产)；甲硝唑对照品(武汉制药厂提供)；甲醇(优级纯，北京化工厂)。
2 方法及结果
2.1 标准溶液的配制 精密称取干燥至恒重的替硝唑对照品0.100 0 g置100 ml棕色量瓶中，用甲醇溶解，并加至刻度，即得1001 μg.ml-1替硝唑标准液。精密称取甲硝唑0.100 1 g置100 ml棕色量瓶中，同法配成1 001 μg.ml-1的甲硝唑标准液(内标)。
2.2 色谱条件[2] 色谱柱Ultrasphere ODS 4.6×250 mm不锈钢柱，流动相：甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶0.1)，流速：1 ml.min-1，检测波长310 nm，灵敏度0.1 AUFS，室温操作。
, 百拇医药
取替硝唑漱口水，分别于不加热和90 ℃加热40 h后，在上述条件下，稀释成50 μg.ml-1后进样20 μl，可见分解产物不干扰替硝唑的测定(如图1)。
图 1 替硝唑漱口水加热前(A)及加热后(B)色谱图
1.分解产物 2.甲硝唑 3.替硝唑
2.3 标准曲线的制备 精密吸取替硝唑标准液1，2，5，8，10 ml于100 ml量瓶中，加入内标液5 ml，用甲醇稀释至刻度，即得10，20，50，80，100 μg.ml-1的替硝唑系列溶液。取20 μl进样，以替硝唑峰面积和甲硝唑峰面积比值对替硝唑浓度进行线性回归，回归方程为A替/A甲=0.013 2+0.086 4 C(r=0.999 9)，线性关系良好。
, 百拇医药
2.4 回收率试验 按替硝唑漱口水处方精密称取替硝唑及其它辅料，混合均匀后，精密吸取10 ml于100 ml量瓶中，余按2.3项下测定，代入回归方程计算，平均回收率99.0%±1.2%，RSD为1.3%(n=6)。
2.5 恒温加速试验 取替硝唑漱口水分成5组，分别置于70，80，85，90，95 ℃恒温水浴锅中加热，按规定时间取样。取出后立即冰浴冷却终止反应，放置室温后精密吸取10 ml于100 ml量瓶中，加5.0 ml内标液，用甲醇稀至刻度。取20 μl进样，计算含量，以0时浓度为100%，不同时间样品的含量如表1。将各温度下数据以lg C对t进行回归，计算反应速度常数K(h-1)如表2。
表 1 不同温度恒温加速试验样品含量 70 ℃
80 ℃
85 ℃
, 百拇医药
90 ℃
95 ℃
T/h
C/%
T/h
C/%
T/h
C/%
T/h
C/%
T/h
C/%
0
, http://www.100md.com
100
0
100
0
100
0
100
0
100
24
99.52
24
98.36
, 百拇医药 24
97.61
12
99.75
12
98.40
48
98.77
48
97.73
48
96.59
24
, 百拇医药
97.42
24
94.49
72
98.45
60
95.39
60
94.14
48
93.15
36
91.82
, http://www.100md.com
96
97.32
72
94.61
72
92.84
60
90.78
48
89.24
120
96.86
84
, 百拇医药
93.64
84
91.65
72
89.71
60
86.68
表 2 反应速度常数K 温度/K
回归方程
|r|
K/×10-4h-1
343.2
, http://www.100md.com
lgC=2.000 5-1.188×10-4t
0.990
2.736
353.2
lgC=2.000 9-2.945×10-4t
0.980
6.782
358.2
lgC=2.001 0-4.502×10-4t
0.985
10.37
, 百拇医药
363.2
lgC=2.003 9-7.253×10-4t
0.990
16.70
368.2
lgC=2.002 0-1.073×10-3t
0.997
24.71
以lgK对绝对温度的倒数进行回归，得回归方程lgK=10.601 3-4 862.8/T(r=0.991 9)，由此推算K25 ℃=1.968×10-6(h-1)t25 ℃0.9=6.1年。
, http://www.100md.com
2.6 留样观察 对批号950423，950424，950425的三批样品在室温遮光条件下从配制之日起进行留样观察，放置时间2.5年，外观均为淡黄，含量结果如表3。
表 3 样品留样观察含量结果 批号
0个月
含量/%
6个月
含量/%
12个月
含量/%
24个月
含量/%
30个月
, 百拇医药
含量/%
950423
99.2
99.1
98.3
97.8
97.0
950424
101.5
101.0
100.2
99.6
98.3
, http://www.100md.com
950425
99.6
99.0
98.2
98.0
96.7
3 讨论
3.1 替硝唑为硝基咪唑类衍生物，在水溶液中可缓慢水解为2-甲基-5-硝基咪唑，在本实验条件下替硝唑、降解产物、甲硝唑均能完全分离，回收率高，变异性小。本方法的建立可用于替硝唑的含量测定及稳定性研究。
3.2 恒温加速试验结果表明，本品的降解属一级动力学过程，推算t25 ℃0.9为6.1年。留样观察2.5年的结果表明，外观、含量均符合规定，初步确定替硝唑漱口水的有效期在2年以上。
参考文献
1 张先洲，蔡鸿生，彭 艳等.替硝唑在唾液中药代动力学.中国新药杂志，1996，5(3)：216
2 许明旺，余文光.替硝唑片的HPLC和UV测定.中国医药工业杂志，1996，27(4)：169
(1998年2月9日收稿), 百拇医药
单位：湖北医科大学第一附属医院 武汉430060
关键词：替硝唑；漱口水；稳定性；高效液相色谱法
中国医院药学杂志990317 摘要 目的:研究替硝唑漱口水的稳定性。方法:用HPLC测定替硝唑的含量，恒温加速试验预测替硝唑漱口水的有效期。结果:替硝唑分解属一级动力学过程，t25 ℃0.9为6.1年。结论:确定替硝唑漱口水的有效期定为2年以上。
Study on stability of tinidazole collutoria
Pan Xigui,Wang Jun,Luo yi,et al (Deparment of Pharmacy,The First Affitiated Hospital of Hubei Medical University 430060)
, 百拇医药
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the stability of tinidazole collutoria.METHODS:Tinidazole was determined in tinidazole collutoria by high performance liquid chromotography.The stability was studied by accelereted test process.RESULTS:The mechanism was fit to first-order reaction and the shelf life was 6.1 years.CONCLUSION:The efficient period was over 2 years.
KEY WORDS tinidazole，collutoria，stability，HPLC
替硝唑(Tinidazole)是抗滴虫和厌氧菌感染的有效药物，具有比甲硝唑疗效高，疗程短的特点[1]。替硝唑漱口水应用于治疗口腔厌氧菌感染，临床疗效显著。本文用HPLC测定替硝唑漱口水中替硝唑含量，并对其稳定性进行初步探讨，结果如下。
, 百拇医药
1 药品及试剂
替硝唑对照品及原料(湖北省医药工业研究所提供)；替硝唑漱口水(浓度0.05%，本院制剂室生产)；甲硝唑对照品(武汉制药厂提供)；甲醇(优级纯，北京化工厂)。
2 方法及结果
2.1 标准溶液的配制 精密称取干燥至恒重的替硝唑对照品0.100 0 g置100 ml棕色量瓶中，用甲醇溶解，并加至刻度，即得1001 μg.ml-1替硝唑标准液。精密称取甲硝唑0.100 1 g置100 ml棕色量瓶中，同法配成1 001 μg.ml-1的甲硝唑标准液(内标)。
2.2 色谱条件[2] 色谱柱Ultrasphere ODS 4.6×250 mm不锈钢柱，流动相：甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶0.1)，流速：1 ml.min-1，检测波长310 nm，灵敏度0.1 AUFS，室温操作。
, 百拇医药
取替硝唑漱口水，分别于不加热和90 ℃加热40 h后，在上述条件下，稀释成50 μg.ml-1后进样20 μl，可见分解产物不干扰替硝唑的测定(如图1)。
图 1 替硝唑漱口水加热前(A)及加热后(B)色谱图
1.分解产物 2.甲硝唑 3.替硝唑
2.3 标准曲线的制备 精密吸取替硝唑标准液1，2，5，8，10 ml于100 ml量瓶中，加入内标液5 ml，用甲醇稀释至刻度，即得10，20，50，80，100 μg.ml-1的替硝唑系列溶液。取20 μl进样，以替硝唑峰面积和甲硝唑峰面积比值对替硝唑浓度进行线性回归，回归方程为A替/A甲=0.013 2+0.086 4 C(r=0.999 9)，线性关系良好。
, 百拇医药
2.4 回收率试验 按替硝唑漱口水处方精密称取替硝唑及其它辅料，混合均匀后，精密吸取10 ml于100 ml量瓶中，余按2.3项下测定，代入回归方程计算，平均回收率99.0%±1.2%，RSD为1.3%(n=6)。
2.5 恒温加速试验 取替硝唑漱口水分成5组，分别置于70，80，85，90，95 ℃恒温水浴锅中加热，按规定时间取样。取出后立即冰浴冷却终止反应，放置室温后精密吸取10 ml于100 ml量瓶中，加5.0 ml内标液，用甲醇稀至刻度。取20 μl进样，计算含量，以0时浓度为100%，不同时间样品的含量如表1。将各温度下数据以lg C对t进行回归，计算反应速度常数K(h-1)如表2。
表 1 不同温度恒温加速试验样品含量 70 ℃
80 ℃
85 ℃
, 百拇医药
90 ℃
95 ℃
T/h
C/%
T/h
C/%
T/h
C/%
T/h
C/%
T/h
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0
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100
0
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24
99.52
24
98.36
, 百拇医药 24
97.61
12
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12
98.40
48
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48
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96.59
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, 百拇医药
97.42
24
94.49
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60
95.39
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48
93.15
36
91.82
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97.32
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94.61
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89.24
120
96.86
84
, 百拇医药
93.64
84
91.65
72
89.71
60
86.68
表 2 反应速度常数K 温度/K
回归方程
|r|
K/×10-4h-1
343.2
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lgC=2.000 5-1.188×10-4t
0.990
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lgC=2.000 9-2.945×10-4t
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358.2
lgC=2.001 0-4.502×10-4t
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10.37
, 百拇医药
363.2
lgC=2.003 9-7.253×10-4t
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lgC=2.002 0-1.073×10-3t
0.997
24.71
以lgK对绝对温度的倒数进行回归，得回归方程lgK=10.601 3-4 862.8/T(r=0.991 9)，由此推算K25 ℃=1.968×10-6(h-1)t25 ℃0.9=6.1年。
, http://www.100md.com
2.6 留样观察 对批号950423，950424，950425的三批样品在室温遮光条件下从配制之日起进行留样观察，放置时间2.5年，外观均为淡黄，含量结果如表3。
表 3 样品留样观察含量结果 批号
0个月
含量/%
6个月
含量/%
12个月
含量/%
24个月
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, 百拇医药
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950423
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, http://www.100md.com
950425
99.6
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98.2
98.0
96.7
3 讨论
3.1 替硝唑为硝基咪唑类衍生物，在水溶液中可缓慢水解为2-甲基-5-硝基咪唑，在本实验条件下替硝唑、降解产物、甲硝唑均能完全分离，回收率高，变异性小。本方法的建立可用于替硝唑的含量测定及稳定性研究。
3.2 恒温加速试验结果表明，本品的降解属一级动力学过程，推算t25 ℃0.9为6.1年。留样观察2.5年的结果表明，外观、含量均符合规定，初步确定替硝唑漱口水的有效期在2年以上。
参考文献
1 张先洲，蔡鸿生，彭 艳等.替硝唑在唾液中药代动力学.中国新药杂志，1996，5(3)：216
2 许明旺，余文光.替硝唑片的HPLC和UV测定.中国医药工业杂志，1996，27(4)：169
(1998年2月9日收稿), 百拇医药