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编号:10496978
高效液相色谱法测定软膏中曲安萘德和水杨酸含量
http://www.100md.com 《中国医院药学杂志》 1999年第3期
     作者:揭新明 王宗锐

    单位:广东医学院 湛江524023

    关键词:高效液相色谱法;曲安萘德;水杨酸

    中国医院药学杂志990303

    摘要 目的:建立一种快速的用高效液相色谱法测定曲安萘德(TA)和水杨酸(SA)的含量。方法:使用C18色谱柱,流动相为甲醇∶水(60∶40 V/V),检测波长为240 nm及290 nm。结果:方法在7 min内完成测定,其中水杨酸在8~24 μg.ml-1浓度范围内,r=0.999 5,RSD=0.49%,回收率为99.7%~100.3%;曲安萘德在6.25~50 μg.ml-1浓度范围内,r=0.999 8,RSD=0.47%,回收率为99.4%~99.8%。结论:方法可行快速准确地检测软膏中的曲安萘德和水杨酸含量。
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    Determination of triamcinolonide acetonide

    and salicylic acid in ointment by HPLC

    Jie Xinmin,Wang Zongrui

    (Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023)

    ABSTRACT OBJECTIVE:To establish a rapid method to determine triamcinolone acetonide(TA) and salicylic acid(SA) in ointment by high-performance liquid chromatography.METHODS:TA and SA were eluted with CH3OH∶H2O(60∶40,V/V,1 ml.min-1) at C18 column and were determined at 240 nm and 290 nm.RESULTS:TA and SA were eluted in 7 min,in the concentration of SA 8~24 μg.ml-1,r=0.999 5,RSD=0.49%,the recovery was 99.7%~100.3%; and in the concentration of TA 6.25~50 μg.ml-1,r=0.999 8,RSD=0.47%,the recovery was 99.4%~99.8%.CONCLUSIONS:The method can be used to determine the concentrations of TA and SA in ointment rapidly and accurately.
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    KEY WORDS triamcinolonide acetonide,salicylic acid,HPLC

    曲安萘德(Triamcinolonide Acetonide,TA)是一种肾上腺皮质激素类药。水杨酸(Salicylic Acid,SA)具有抑制细菌生长及止痒等作用。本文建立了一种用HPLC同时测量TA和SA的方法,并应用在药用软膏(内含TA 0.025%,SA 2%的凡士林软膏)的监测中。该法快速准确,线性、回收率及再现性均较好。

    1 仪器与试剂

    1.1试剂与药品 甲醇(黄岩化工实验厂,色谱纯)。曲安萘德、水杨酸、炔诺酮(Norethisterone,NOR)、卡马西平(Carbamazepine,CAR)对照品(湛江市药品检验所提供)。

    1.2 SA对照品溶液 精密称取SA对照品适量,加甲醇溶解并定量稀释制成1.00 mg.ml-1的溶液。
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    1.3 CAR内标溶液 精密称取CAR适量,加甲醇制成0.5 mg.ml-1的溶液。

    1.4 TA对照品溶液 精密称取TA对照品适量,加甲醇制成0.25 mg.ml-1的溶液。

    1.5 NOR内标溶液 精密称取NOR适量,加甲醇制成0.15 mg.ml-1的溶液。

    1.6 软膏样品预处理 取软膏样品适量(约相当于曲安萘德1.25 mg),精密称量,加甲醇约30 ml,置80 ℃水浴加热2 min,搅拌。冷却至室温,加CAR及NOR内标液各5 ml,用甲醇稀释至50 ml,摇匀。置冰浴中冷却2 h以上,取出迅速滤过。取滤液作供试液。
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    1.7 仪器 高效液相色谱仪(HP1100,美国HP公司),配自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器;扫描分光光度计(UV-3010PC,日本Shimadzu公司)。

    1.8 色谱条件 ODS Hypersil色谱柱(6 mm×150 mm,5 μm),操作温度35 ℃。流动相为甲醇∶水(60∶40 V/V),流速1 ml.min-1。进样量:1 μl。检测波长对TA用240 nm,对SA用290 nm。测定TA时用NOR作内标,测定SA时用CAR作内标,按内标法以峰面积定量。

    2 结果

    2.1对照品溶液中TA、SA及内标NOR、CAR的色谱图见图1。

    图 1 药物对照品色谱图
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    2.2 标准曲线建立

    2.2.1 水杨酸线性关系试验 分别取SA对照品溶液适量,加5 ml CAR内标溶液,配制成含SA 8,12,16,20,24 μg.ml-1的甲醇溶液。将此系列溶液按选定的色谱条件进行测试,以SA浓度C(μg.ml-1)作自变量,Y(SA峰面积/CAR峰面积)作因变量,以Y对C回归分析,其回归方程为(n=12):

    A SA B CAR C NOR D TA

    Y=-0.001 34+0.028 23 C,r=0.999 5,可见SA在8~24 μg.ml-1范围内线性关系良好。
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    2.2.2 曲安萘德线性关系试验 分别取TA对照品溶液适量,加5 ml NOR内标溶液,配制成含TA 6.25,12.5,25,37.5,50 μg.ml-1的甲醇溶液。将此溶液作色谱分析,以TA浓度C(μg.ml-1)作自变量,Y(TA峰面积/NOR峰面积)作因变量,以Y对C回归分析,其回归方程为(n=12):Y=0.018 24+0.023 47 C,r=0.9998,可见在6.25~50 μg.ml-1范围内线性关系良好。

    2.3 精密度试验 将软膏样品供试液进行5次平行测试,结果见表1、表2。

    表 1 保留时间重现性试验结果(min) 项目(FA)

, 百拇医药     SA

    CAR

    NOR

    TA

    1

    0.662

    2.168

    3.856

    5.464

    2

    0.661

    2.170

    3.854
, 百拇医药
    5.462

    3

    0.661

    2.167

    3.857

    5.466

    4

    0.662

    2.168

    3.858

    5.468

    5

    0.664
, 百拇医药
    2.169

    3.855

    5.462

    0.662

    2.168

    3.856

    5.464

    RSD/%

    0.18

    0.05

    0.04

    0.05

    2.4 回收率试验 分别在软膏样品供试液中加入SA及TA对照品各0.25,0.5,1mg,作回收率试验,结果见表3。表 2 测量重现性试验(μg.ml-1) 项目(FA)
, 百拇医药
    SA

    TA

    1

    15.2

    42.5

    2

    15.3

    42.8

    3

    15.1

    42.4

    4

    15.2

, http://www.100md.com     42.6

    5

    15.1

    42.2

    15.2

    42.5

    RSD

    0.5%

    0.5%

    表 3 回收率试验(%) 项目(FA)

    SA

    TA

    0.25 mg
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    100.3

    99.8

    0.5 mg

    99.8

    99.6

    1 mg

    99.7

    99.4

    3 讨论

    3.1色谱分离条件的探讨 SA及TA均可溶于甲醇,报道采用磷酸缓冲液-甲醇或醋酸缓冲液-乙腈作流动相[1~3]。本法使用水-甲醇(40∶60 V/V)作流动相,对四种物质的分离度及稳定性均较好。
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    3.2 色谱检测条件的探讨 从四种物质的紫外吸收图谱可见,TA和NOR在波长240 nm处有紫外吸收,SA和CAR的特异吸收峰在290 nm。使用二极管检测器时,可以240 nm及290 nm同时记录色谱图,得到较好的灵敏度和特异性。若使用单波长检测器时,可选用240 nm作检测波长。

    参考文献

    1 李俊松,万伟中,张淑芳.反相高效液相色谱法同时测定水杨酸原料中水杨酸和微量杂质苯酚含量.中国医院药学杂志,1995,15(11):504

    2 唐跃年,张菀陵.HPLC测定阿司匹林和水杨酸血药浓度.药物分析杂志,1991,11(6):363

    3 吴 越,吴葆杰,郑嘉烈等.高效液相色谱法测定血浆中阿司匹林和水杨酸.中国医药工业杂志,1990,21(8):360

    (1998年3月28日收稿), http://www.100md.com