鼻咽癌高发家族染色体畸变及脆性部位分析
作者：雷迅 杨新明 蒋新伟
单位：雷迅 广西桂林医学院附属医院耳鼻咽喉科 桂林 541001；杨新明 蒋新伟 湖南医科大学第二附属医院
关键词：鼻咽癌；染色体畸变；脆性部位
广西医科大学学报990328
摘要 目的：探讨染色体畸变和脆性部位表达在鼻咽癌家族发病中的意义。方法：采用低叶酸培养条件和G显带方法检测一个鼻咽癌家族成员和对照者外周血淋巴细胞染色体畸变和脆性部位。结果：家族组染色体畸变率和脆性部位检出数高于对照组(P<0.001)，未发现非随机表达位点。两组染色体畸变数和脆性部位检出数均呈线性关系。结论：该家族部分成员染色体不稳定性增加，对鼻咽癌的易感性有其内在的遗传背景。某些常见型脆性部位的检出可能不代表家族成员患鼻咽癌风险升高。
中国图书资料分类法分类号 R739.63
, 百拇医药
AN ANALYSIS OF A NASOPHARYNGEAL CANCER FAMILY FOR THE CHROMOSOME ABERRATIONS AND FRAGILE SITES
Lei Xun,Yang Xinming*,Jiang Xinwei*
Department of Otolaryngology,the Affiliated Hospital of Guilin Medical College,Guilin 541001
Abstract Objective:To investigate the roles of the chromosome aberrations and fragile sites in the nasopharyngeal cancer (NPC) family.Methods:A NPC family and control subjects were studied for the chromosome aberrations and fragile sites by peripheral lymphocyte culture with TC 199 medium of low folic acid and G-banding technique.Results:The chromosome aberration rate and the number of fragile sites observed in the family group were higher than those in the control one (P<0.001),and the expressed loci were almost random.There was a significant association between the chromosome aberrations and fragile sites in two groups.Conclusion:Some members in the family have an increasing chromosome instability,possibly predisposing to NPC.The family members with certain common fragile sites probably do not indicate an elevating risk for NPC.
, 百拇医药
Key words nasopharyngeal carcinoma;chromosome aberration;fragile site
染色体的不稳定与肿瘤发生的关系及染色体脆性部位(Fragile sites,FS)同癌基因、癌断裂点的相互关系已成为医学遗传学研究的重要课题之一。有推测染色体上的某些脆性部位可能增加个体对肿瘤的易感性。癌家族与某些染色体脆性部位密切相关[1]。鼻咽癌的发生与遗传因素有关，患者外周血淋巴细胞染色体畸变和脆性部位表达频率增高[2]，但迄今有关鼻咽癌家族脆性部位研究的报道不多。本文对一个鼻咽癌高发家族成员染色体畸变和脆性部位进行分析研究，以期探讨在其发病中的作用。
1 材料与方法
1.1 实验对象：慈利县郊的朱氏家族，共29人，Ⅱ12为先证者(见图1)。本实验分为两组，家族非癌成员组(简称家族组)，均系血缘亲属，21人(男16人，女5人)，平均年龄26.5岁(9～62岁)；对照组21人，在性别、年龄、生活工作环境等方面与家族组配对，且无肿瘤及遗传病家族史。
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1.2 实验方法：取经肝素处理的外周静脉血，按0.3 ml/瓶接种于含ψ=5%小牛血清、pH为7.6的TC199培养基(叶酸含量0.01 mg/L)中，37℃培养96 h，终止培养前3 h加浓度为10 mg/L秋水仙素0.2 ml。常规收获细胞制片，胰酶法进行G显带[2]，每例随机分析100个染色体长度适宜、分散良好的中期分裂相，根据带型将断裂、裂隙定位并检出脆性部位[3]。
图1 朱氏鼻咽癌高发家族系谱
2 结果
2.1 染色体畸变和脆性部位比较及染色体畸变率分布见，表1、2。
表1 两组染色体畸变和脆性部位比较 组 别
, 百拇医药
n
细胞数
染色体畸变
脆性部位
次数
%
次数
%
家族组
21
2098
231
11.01
, 百拇医药 146
6.95
对照组
21
2093
106
5.06△
63
3.01*
△χ2=46.68,P<0.001;*χ2=28.31,P<0.001表2 两组染色体畸变率分布 染色体畸变率(%)
家族组(人数)
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对照组(人数)
0～5
7
14
6～10
3
5
11～15
6
2
16以上
5
2.2 染色体脆性部位分析：两组脆性部位的检出情况见表1。家族组、对照组的检出率分别为90.5%(19/21)，76.2%(16/21)(P>0.1)。共检出不同常见型FS37个，家族组31个，对照组25个，表达的位点分布离散，各位点逐个统计处理，仅3P14位点有显著性差异(P<0.001)，检出数分别为78次和34次。家族组17人、对照组15人检出3P14。家族成员中2人检出罕见型FS8q22次、12q13次，另2人检出11q13各1次，对照组无这类FS表达。
, 百拇医药
2.3 染色体畸变与脆性部位关系：家族组、对照组染色体畸变位点与FS一致率分别为63.2%、64.1%，畸变数与FS检出数均呈线性关系，r分别为0.9577，0.9718(P<0.001)。染色体脆性部位及畸变位点见图2。
图2 染色体脆性部位及畸变位点
3 讨论
鼻咽癌患者外周血淋巴细胞染色体畸变及FS检出数明显高于正常人，并发现染色体结构重排[2]。癌高发家族及易感人群分析研究认为细胞遗传物质不稳定性与个体易感性增加相关[4]。本研究显示家族组染色体畸变率在11%以上的有11人，16%以上5人；家族组染色体畸变率和脆性部位检出数明显高于正常对照组(P<0.001)，两组FS检出数均随畸变数高而相应增高，两者明显相关；畸变位点与FS一致率基本相同。这说明：①染色体FS与畸变位点之间有着较为密切的关系，断裂点与FS的一致可能不是机遇造成，而是在染色体FS上更易发生裂隙、断裂的反应；②家族部分成员具有染色体不稳定性特征，这种不稳定性与DNA修复酶系统的缺陷及脆性部位存在有关[5]，与常见型FS表达增高有关。结果提示该家族部分成员对鼻咽癌易感性可能有其内在遗传背景，即这些染色体不稳定性个体有更易受多种致癌物攻击的脆弱性。
, 百拇医药
本实验家族组、对照组检出的几乎均为常见型FS，分布离散，未发现非随机表达倾向，两组各21人分别有19人，16个检出FS，对照组超过半数携带2种以上常见型FS。除3P14位点外，两组各位点检出数无显著差异。故笔者认为，就携带而言，某些常见型FS的检出可能不代表该家族成员鼻咽癌风险升高。而3P14位点表达增高，国内有报道[6]22例正常人检出3P14位点36次，国外的研究显示正常人90%携带3P14[7]，认为3P14是最常见的FS[7，8]。尽管有鼻咽癌和其他肿瘤患者FS3P14检出数较高的报道，但作为一个在正常人中有较高表达的位点，结合本研究结果，认为3P14的携带在朱氏家族鼻咽癌的发生中不具有特殊意义，而反映了染色体不稳定的遗传基础，其与染色体畸变具有相同的意义。
实验中在家族4个成员发现罕见型FS8q22、11q13、12q13共计4次，对照组未检出这类FS。文献记载FS8q22、11q13、12q13等与某些癌染色体断裂点一致，且8q22与癌基因C-MOS处于同一带内，这些位点的表达与癌家族的发病是否有内在联系或反映家族个体对肿瘤的易感性有待进一步研究及随访。
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参考文献
1 周宏远，梁谋，李世绩，等.4个食管癌高发家族的染色体脆性部位研究.中华医学遗传学杂志，1995，12(2)：113
2 杨新明，游孟高，李舜农，等.染色体畸变-脆性部位与鼻咽癌遗传易感性.遗传与疾病，1987，4(4)：220
3 Sutherland GR,Ledbetter DH.Report of the committee on cytogenet markers.Cytogenet Cell Genet,1989,51:452
4 曹新，李丽燕，谢菁，等.食管癌患者及其一级亲属染色体脆性部位研究.癌症，1996，15(5)：349
5 周宏远，曾设民，李世绩，等.鼻咽癌患者染色体畸变的非随机研究.中华医学遗传杂志，1995，12(3)：174
, 百拇医药
6 方女燕，区宝祥，陈巧伦，等.鼻咽癌患者和EB病毒IgA/VCA抗体阳性者染色体脆性部位的研究.癌症，1991，10(5)：382
7 Smeets DF,Scheres JM,Hustinx TW.The most common fragile site in man is 3P14.Hum Genet,1986,72:215
8 Le-Beau MM,Drabkin H,Glover TW,et al.An FHIT tumor suppressor gene Genes Chronosome Cancer,1998,21(4):281
收稿日期：1999-01-27, http://www.100md.com
单位：雷迅 广西桂林医学院附属医院耳鼻咽喉科 桂林 541001；杨新明 蒋新伟 湖南医科大学第二附属医院
关键词：鼻咽癌；染色体畸变；脆性部位
广西医科大学学报990328
摘要 目的：探讨染色体畸变和脆性部位表达在鼻咽癌家族发病中的意义。方法：采用低叶酸培养条件和G显带方法检测一个鼻咽癌家族成员和对照者外周血淋巴细胞染色体畸变和脆性部位。结果：家族组染色体畸变率和脆性部位检出数高于对照组(P<0.001)，未发现非随机表达位点。两组染色体畸变数和脆性部位检出数均呈线性关系。结论：该家族部分成员染色体不稳定性增加，对鼻咽癌的易感性有其内在的遗传背景。某些常见型脆性部位的检出可能不代表家族成员患鼻咽癌风险升高。
中国图书资料分类法分类号 R739.63
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AN ANALYSIS OF A NASOPHARYNGEAL CANCER FAMILY FOR THE CHROMOSOME ABERRATIONS AND FRAGILE SITES
Lei Xun,Yang Xinming*,Jiang Xinwei*
Department of Otolaryngology,the Affiliated Hospital of Guilin Medical College,Guilin 541001
Abstract Objective:To investigate the roles of the chromosome aberrations and fragile sites in the nasopharyngeal cancer (NPC) family.Methods:A NPC family and control subjects were studied for the chromosome aberrations and fragile sites by peripheral lymphocyte culture with TC 199 medium of low folic acid and G-banding technique.Results:The chromosome aberration rate and the number of fragile sites observed in the family group were higher than those in the control one (P<0.001),and the expressed loci were almost random.There was a significant association between the chromosome aberrations and fragile sites in two groups.Conclusion:Some members in the family have an increasing chromosome instability,possibly predisposing to NPC.The family members with certain common fragile sites probably do not indicate an elevating risk for NPC.
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Key words nasopharyngeal carcinoma;chromosome aberration;fragile site
染色体的不稳定与肿瘤发生的关系及染色体脆性部位(Fragile sites,FS)同癌基因、癌断裂点的相互关系已成为医学遗传学研究的重要课题之一。有推测染色体上的某些脆性部位可能增加个体对肿瘤的易感性。癌家族与某些染色体脆性部位密切相关[1]。鼻咽癌的发生与遗传因素有关，患者外周血淋巴细胞染色体畸变和脆性部位表达频率增高[2]，但迄今有关鼻咽癌家族脆性部位研究的报道不多。本文对一个鼻咽癌高发家族成员染色体畸变和脆性部位进行分析研究，以期探讨在其发病中的作用。
1 材料与方法
1.1 实验对象：慈利县郊的朱氏家族，共29人，Ⅱ12为先证者(见图1)。本实验分为两组，家族非癌成员组(简称家族组)，均系血缘亲属，21人(男16人，女5人)，平均年龄26.5岁(9～62岁)；对照组21人，在性别、年龄、生活工作环境等方面与家族组配对，且无肿瘤及遗传病家族史。
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1.2 实验方法：取经肝素处理的外周静脉血，按0.3 ml/瓶接种于含ψ=5%小牛血清、pH为7.6的TC199培养基(叶酸含量0.01 mg/L)中，37℃培养96 h，终止培养前3 h加浓度为10 mg/L秋水仙素0.2 ml。常规收获细胞制片，胰酶法进行G显带[2]，每例随机分析100个染色体长度适宜、分散良好的中期分裂相，根据带型将断裂、裂隙定位并检出脆性部位[3]。
图1 朱氏鼻咽癌高发家族系谱
2 结果
2.1 染色体畸变和脆性部位比较及染色体畸变率分布见，表1、2。
表1 两组染色体畸变和脆性部位比较 组 别
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n
细胞数
染色体畸变
脆性部位
次数
%
次数
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家族组
21
2098
231
11.01
, 百拇医药 146
6.95
对照组
21
2093
106
5.06△
63
3.01*
△χ2=46.68,P<0.001;*χ2=28.31,P<0.001表2 两组染色体畸变率分布 染色体畸变率(%)
家族组(人数)
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对照组(人数)
0～5
7
14
6～10
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5
11～15
6
2
16以上
5
2.2 染色体脆性部位分析：两组脆性部位的检出情况见表1。家族组、对照组的检出率分别为90.5%(19/21)，76.2%(16/21)(P>0.1)。共检出不同常见型FS37个，家族组31个，对照组25个，表达的位点分布离散，各位点逐个统计处理，仅3P14位点有显著性差异(P<0.001)，检出数分别为78次和34次。家族组17人、对照组15人检出3P14。家族成员中2人检出罕见型FS8q22次、12q13次，另2人检出11q13各1次，对照组无这类FS表达。
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2.3 染色体畸变与脆性部位关系：家族组、对照组染色体畸变位点与FS一致率分别为63.2%、64.1%，畸变数与FS检出数均呈线性关系，r分别为0.9577，0.9718(P<0.001)。染色体脆性部位及畸变位点见图2。
图2 染色体脆性部位及畸变位点
3 讨论
鼻咽癌患者外周血淋巴细胞染色体畸变及FS检出数明显高于正常人，并发现染色体结构重排[2]。癌高发家族及易感人群分析研究认为细胞遗传物质不稳定性与个体易感性增加相关[4]。本研究显示家族组染色体畸变率在11%以上的有11人，16%以上5人；家族组染色体畸变率和脆性部位检出数明显高于正常对照组(P<0.001)，两组FS检出数均随畸变数高而相应增高，两者明显相关；畸变位点与FS一致率基本相同。这说明：①染色体FS与畸变位点之间有着较为密切的关系，断裂点与FS的一致可能不是机遇造成，而是在染色体FS上更易发生裂隙、断裂的反应；②家族部分成员具有染色体不稳定性特征，这种不稳定性与DNA修复酶系统的缺陷及脆性部位存在有关[5]，与常见型FS表达增高有关。结果提示该家族部分成员对鼻咽癌易感性可能有其内在遗传背景，即这些染色体不稳定性个体有更易受多种致癌物攻击的脆弱性。
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本实验家族组、对照组检出的几乎均为常见型FS，分布离散，未发现非随机表达倾向，两组各21人分别有19人，16个检出FS，对照组超过半数携带2种以上常见型FS。除3P14位点外，两组各位点检出数无显著差异。故笔者认为，就携带而言，某些常见型FS的检出可能不代表该家族成员鼻咽癌风险升高。而3P14位点表达增高，国内有报道[6]22例正常人检出3P14位点36次，国外的研究显示正常人90%携带3P14[7]，认为3P14是最常见的FS[7，8]。尽管有鼻咽癌和其他肿瘤患者FS3P14检出数较高的报道，但作为一个在正常人中有较高表达的位点，结合本研究结果，认为3P14的携带在朱氏家族鼻咽癌的发生中不具有特殊意义，而反映了染色体不稳定的遗传基础，其与染色体畸变具有相同的意义。
实验中在家族4个成员发现罕见型FS8q22、11q13、12q13共计4次，对照组未检出这类FS。文献记载FS8q22、11q13、12q13等与某些癌染色体断裂点一致，且8q22与癌基因C-MOS处于同一带内，这些位点的表达与癌家族的发病是否有内在联系或反映家族个体对肿瘤的易感性有待进一步研究及随访。
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参考文献
1 周宏远，梁谋，李世绩，等.4个食管癌高发家族的染色体脆性部位研究.中华医学遗传学杂志，1995，12(2)：113
2 杨新明，游孟高，李舜农，等.染色体畸变-脆性部位与鼻咽癌遗传易感性.遗传与疾病，1987，4(4)：220
3 Sutherland GR,Ledbetter DH.Report of the committee on cytogenet markers.Cytogenet Cell Genet,1989,51:452
4 曹新，李丽燕，谢菁，等.食管癌患者及其一级亲属染色体脆性部位研究.癌症，1996，15(5)：349
5 周宏远，曾设民，李世绩，等.鼻咽癌患者染色体畸变的非随机研究.中华医学遗传杂志，1995，12(3)：174
, 百拇医药
6 方女燕，区宝祥，陈巧伦，等.鼻咽癌患者和EB病毒IgA/VCA抗体阳性者染色体脆性部位的研究.癌症，1991，10(5)：382
7 Smeets DF,Scheres JM,Hustinx TW.The most common fragile site in man is 3P14.Hum Genet,1986,72:215
8 Le-Beau MM,Drabkin H,Glover TW,et al.An FHIT tumor suppressor gene Genes Chronosome Cancer,1998,21(4):281
收稿日期：1999-01-27, http://www.100md.com