不同消毒剂对HBsAg灭活作用的实验研究
作者：胡继发 聂绍发 朱桂宝
单位：胡继发(同济医科大学科研处， 湖北 武汉 430030)；聂绍发 朱桂宝(同济医科大学流行病学教研室， 湖北 武汉 430030)
关键词：G-L消毒剂；戊二醛；新洁尔灭；HBsAg；消毒
疾病控制杂志990307
【摘要】 目的 寻找一种高效、无毒、无刺激、广谱、价廉的乙肝病毒消毒剂。方法 按卫生部消毒技术规范进行。结果 戊二醛对HBsAg有一定的破坏作用，而新洁尔灭作用很差，但由戊二醛和新洁尔灭组成的复方G-L消毒剂(A)10 min可灭活HBsAg。结论 G-L消毒剂对HBsAg有明显的杀灭作用。
【中图分类号】 R187.2； R373.2 【文献标识码】 A
, http://www.100md.com
【文章编号】 1008-6013(1999)03-0170-02
Experimental study of effect of different disinfectants inactivating HBsAg
HU Ji-fa, NIE Shao-fa, ZHU Gui-bao.
Tongji Medical University, Wuhan 430030, China
【Abstract】 Objecitve To find out a effective, inirritative, eurytopicite and cheap disinfectant of inactivating hepatitis B virus. Methods The experimental study is following Standardization Technique of Disinfection issued by Ministry of Health. Results Gluaradehyde has a little effect in inactivating hepatitis B virus. Liquor bauzolkoni bromidi has little effect. But G-L disinfectant(A), which is complex of gluaradehyde and liquor bauzolkoni bromidi, can inactivate HBsAg in 10 minutes. Conclusion G-L disinfectant has a significant effect on inactivating HBsAg.
, 百拇医药
【Key words】 G-L disinfectant; gluaradehyde; liquor bauzolkoni bromidi; HBsAg; disinfection
目前对乙肝病毒灭活的化学消毒剂种类繁多，但无一种符合理想要求。近十几年对复方化学消毒剂及协同作用的研究较多并有很大进展。Whiteley在1990年报告了一种表面活性剂结合的戊二醛复方消毒剂，对乙肝病毒有很好灭活作用[1]。Letertre报道季铵盐和醛类配伍可减少醛的气味和腐蚀性，而消毒效果优于单方[2]。我们对戊二醛、新洁尔灭及其复方消毒剂与其它几种消毒剂对HBsAg灭活情况进行了实验研究，以寻找理想消毒剂。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 消毒剂 戊二醛，新洁尔灭，G-L消毒剂，2%戊二醛(美国生产)，1%强化戊二醛(武汉)。
, 百拇医药
1.1.2 中和剂 戊二醛-1%甘氨酸，新洁尔灭-1%吐温+1%磷脂，复方消毒剂-1%甘氨酸+1%磷脂，pH=7.2～7.4。
1.1.3 阳性血清 HBsAg阳性血清应用pH为7.2的PBS稀释到1∶64、1∶128。
1.1.4 消毒试验载体 为20孔反应板。
1.2 试验方法
1.2.1 血清滴度的确定 用RPHA法。
1.2.2 HBsAg灭活试验 用新配制的消毒剂0.2 ml，加待检血清0.2 ml，混匀，置20℃，作用10～30 min，取0.1 ml加中和剂，中止反应10～20 min，取0.1 ml混合液用ELISA法检测，同时设立对照。
1.2.3 对照的设立 (1)中和剂对照；(2)消毒剂与中和剂反应对照；(3)阴性对照；(4)阳性对照；(5)空白对照。
, 百拇医药
1.2.4 HBsAg灭活效果的检测 用ELISA法检测HBsAg的破坏情况，判断标准：药盒P/N值>5判为药盒合格，被检样品S/N值<2.1判为阴性，即消毒剂对HBsAg灭活有效。
2 结果
2.1 对照组结果 药盒P/N值>5，说明药盒合格。中和剂符合要求。
2.2 消毒剂对HBsAg灭活效果 为了便于比较分析，我们以滴度为分界点分别判断消毒剂对不同滴度HBsAg灭活作用。
不同消毒剂对效价为1∶128的血清中的HBsAg的灭活情况见表1。
表1 不同消毒剂对1∶128待检血清中HBsAg的灭活情况 种类
浓度
, 百拇医药
(%)
不同作用时间(min)对HBsAg灭活
10
15
30
戊二醛
2
0.66(2.4)
0.62(2.2)
0.57(2.0)
1
0.89(3.2)
, 百拇医药 0.82(2.8)
0.72(2.6)
新洁尔灭
0.5
0.90(3.3)
0.73(2.3)
0.60(2.1)
G-L消毒剂 A
-
0.49(1.5)
0.28(0.6)
0.24(0.5)
, 百拇医药
B
-
0.59(2.1)
0.45(1.1)
0.45(1.1)
戊二醛(强生)
2
0.93(3.9)
—
—
强化戊二醛
1
0.97(4.4)
, http://www.100md.com
—
—
注：表中数值为OD值，括号内数值为S/N值，S/N值<2.1为阴性。
从表1可见除G-L消毒剂外其它几种消毒剂对HBsAg作用10 min均无效。
不同消毒剂对滴度为1∶64待检血清中的HBsAg灭活情况见表2。
表2 不同消毒剂对1∶64待检血清HBsAg的灭活情况 种类
浓度
(%)
不同作用时间(min)对HBsAg灭活
10
, 百拇医药
15
30
戊二醛
2
0.59(2.1)
0.51(1.8)
0.44(1.6)
G-L消毒剂 A
-
0.42(1.1)
0.32(0.8)
0.26(0.7)
, http://www.100md.com B
-
0.50(1.8)
0.53(2.0)
0.46(1.7)
戊二醛(强生)
2
0.58(2.1)
0.49(1.9)
0.44(1.6)
强化戊二醛
1
0.73(3.5)
, 百拇医药
0.65(3.2)
0.55(2.7)
注：表中数值为OD值，括号内数值为S/N值，S/N值<2.1为灭活有效。
从表2可见2%戊二醛、2%戊二醛(强生)杀灭HBsAg需15 min，1%强化戊二醛无效，而G-L消毒剂只需10 min。
3 讨论
近年来仍以HBsAg作为评价消毒剂灭活HBV效果的指标[3]，我们实验结果与文献[4，5]一致。戊二醛是一种高效、广谱消毒剂，WHO推荐用于HBV污染的物品[6]。但是目前由戊二醛组成的复方较多，有的效果并不明显(表1、2)。其市售2%戊二醛杀灭HBsAg需15 min，1%戊二醛不能杀灭HBsAg。我们研制的G-L消毒剂A可在10 min杀灭HBsAg，其主要成份为戊二醛和新洁尔灭，试验中单方效果并不明显，而组成复方后消毒效果明显加强。可能有化学协同杀菌作用，亦有报导戊二醛加表面活性剂对芽胞及HBsAg有很强的杀灭效果。G-L消毒剂减轻了醛的气味、刺激性及腐蚀性[2]，并可减轻其毒性，又可降低成本，同时能达到良好的消毒效果。
, 百拇医药
【基金项目】 湖北省卫生厅资助课题(W97425)
【作者简介】 胡继发(1967-)，男，主管技师，学士
聂绍发(1954-)，男，副教授，硕士生导师
【参考文献】
[1] 陈宁庆. 艾滋病的消毒[J]. 中国消毒学杂志，1991，8(1)：19.
[2] Letertre. Bactericides containing ammonium compounds[J]. CA, 1977,86:154267.
[3] 邰昌松，张朝武. 乙型肝炎病毒检测研究的进展[J]. 中国消毒学杂志，1995，12(3)：163～167.
, 百拇医药
[4] 徐云庆，何尚浦，施侣元. 消毒剂对乙型肝炎病毒灭活效果的研究[J]. 消毒与灭菌，1988，5(4)：190.
[5] 杨仲国，沈培谊. PCR技术在乙型肝炎病毒灭活试验中的应用[J]. 中国消毒学杂志，1995，12(1)：52～54.
[6] Scientific group of viral hepatitis. WHO Tech Rep Ser[R]. Geneva： WHO， 1973.512.
[7] 聂绍发，朱桂宝，张惠娟，等. G-L消毒剂消毒效果的实验研究[J]. 中华流行病学杂志，1997，18(特1)：689～690.
(收稿日期 1998-12-30), 百拇医药
单位：胡继发(同济医科大学科研处， 湖北 武汉 430030)；聂绍发 朱桂宝(同济医科大学流行病学教研室， 湖北 武汉 430030)
关键词：G-L消毒剂；戊二醛；新洁尔灭；HBsAg；消毒
疾病控制杂志990307
【摘要】 目的 寻找一种高效、无毒、无刺激、广谱、价廉的乙肝病毒消毒剂。方法 按卫生部消毒技术规范进行。结果 戊二醛对HBsAg有一定的破坏作用，而新洁尔灭作用很差，但由戊二醛和新洁尔灭组成的复方G-L消毒剂(A)10 min可灭活HBsAg。结论 G-L消毒剂对HBsAg有明显的杀灭作用。
【中图分类号】 R187.2； R373.2 【文献标识码】 A
, http://www.100md.com
【文章编号】 1008-6013(1999)03-0170-02
Experimental study of effect of different disinfectants inactivating HBsAg
HU Ji-fa, NIE Shao-fa, ZHU Gui-bao.
Tongji Medical University, Wuhan 430030, China
【Abstract】 Objecitve To find out a effective, inirritative, eurytopicite and cheap disinfectant of inactivating hepatitis B virus. Methods The experimental study is following Standardization Technique of Disinfection issued by Ministry of Health. Results Gluaradehyde has a little effect in inactivating hepatitis B virus. Liquor bauzolkoni bromidi has little effect. But G-L disinfectant(A), which is complex of gluaradehyde and liquor bauzolkoni bromidi, can inactivate HBsAg in 10 minutes. Conclusion G-L disinfectant has a significant effect on inactivating HBsAg.
, 百拇医药
【Key words】 G-L disinfectant; gluaradehyde; liquor bauzolkoni bromidi; HBsAg; disinfection
目前对乙肝病毒灭活的化学消毒剂种类繁多，但无一种符合理想要求。近十几年对复方化学消毒剂及协同作用的研究较多并有很大进展。Whiteley在1990年报告了一种表面活性剂结合的戊二醛复方消毒剂，对乙肝病毒有很好灭活作用[1]。Letertre报道季铵盐和醛类配伍可减少醛的气味和腐蚀性，而消毒效果优于单方[2]。我们对戊二醛、新洁尔灭及其复方消毒剂与其它几种消毒剂对HBsAg灭活情况进行了实验研究，以寻找理想消毒剂。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 消毒剂 戊二醛，新洁尔灭，G-L消毒剂，2%戊二醛(美国生产)，1%强化戊二醛(武汉)。
, 百拇医药
1.1.2 中和剂 戊二醛-1%甘氨酸，新洁尔灭-1%吐温+1%磷脂，复方消毒剂-1%甘氨酸+1%磷脂，pH=7.2～7.4。
1.1.3 阳性血清 HBsAg阳性血清应用pH为7.2的PBS稀释到1∶64、1∶128。
1.1.4 消毒试验载体 为20孔反应板。
1.2 试验方法
1.2.1 血清滴度的确定 用RPHA法。
1.2.2 HBsAg灭活试验 用新配制的消毒剂0.2 ml，加待检血清0.2 ml，混匀，置20℃，作用10～30 min，取0.1 ml加中和剂，中止反应10～20 min，取0.1 ml混合液用ELISA法检测，同时设立对照。
1.2.3 对照的设立 (1)中和剂对照；(2)消毒剂与中和剂反应对照；(3)阴性对照；(4)阳性对照；(5)空白对照。
, 百拇医药
1.2.4 HBsAg灭活效果的检测 用ELISA法检测HBsAg的破坏情况，判断标准：药盒P/N值>5判为药盒合格，被检样品S/N值<2.1判为阴性，即消毒剂对HBsAg灭活有效。
2 结果
2.1 对照组结果 药盒P/N值>5，说明药盒合格。中和剂符合要求。
2.2 消毒剂对HBsAg灭活效果 为了便于比较分析，我们以滴度为分界点分别判断消毒剂对不同滴度HBsAg灭活作用。
不同消毒剂对效价为1∶128的血清中的HBsAg的灭活情况见表1。
表1 不同消毒剂对1∶128待检血清中HBsAg的灭活情况 种类
浓度
, 百拇医药
(%)
不同作用时间(min)对HBsAg灭活
10
15
30
戊二醛
2
0.66(2.4)
0.62(2.2)
0.57(2.0)
1
0.89(3.2)
, 百拇医药 0.82(2.8)
0.72(2.6)
新洁尔灭
0.5
0.90(3.3)
0.73(2.3)
0.60(2.1)
G-L消毒剂 A
-
0.49(1.5)
0.28(0.6)
0.24(0.5)
, 百拇医药
B
-
0.59(2.1)
0.45(1.1)
0.45(1.1)
戊二醛(强生)
2
0.93(3.9)
—
—
强化戊二醛
1
0.97(4.4)
, http://www.100md.com
—
—
注：表中数值为OD值，括号内数值为S/N值，S/N值<2.1为阴性。
从表1可见除G-L消毒剂外其它几种消毒剂对HBsAg作用10 min均无效。
不同消毒剂对滴度为1∶64待检血清中的HBsAg灭活情况见表2。
表2 不同消毒剂对1∶64待检血清HBsAg的灭活情况 种类
浓度
(%)
不同作用时间(min)对HBsAg灭活
10
, 百拇医药
15
30
戊二醛
2
0.59(2.1)
0.51(1.8)
0.44(1.6)
G-L消毒剂 A
-
0.42(1.1)
0.32(0.8)
0.26(0.7)
, http://www.100md.com B
-
0.50(1.8)
0.53(2.0)
0.46(1.7)
戊二醛(强生)
2
0.58(2.1)
0.49(1.9)
0.44(1.6)
强化戊二醛
1
0.73(3.5)
, 百拇医药
0.65(3.2)
0.55(2.7)
注：表中数值为OD值，括号内数值为S/N值，S/N值<2.1为灭活有效。
从表2可见2%戊二醛、2%戊二醛(强生)杀灭HBsAg需15 min，1%强化戊二醛无效，而G-L消毒剂只需10 min。
3 讨论
近年来仍以HBsAg作为评价消毒剂灭活HBV效果的指标[3]，我们实验结果与文献[4，5]一致。戊二醛是一种高效、广谱消毒剂，WHO推荐用于HBV污染的物品[6]。但是目前由戊二醛组成的复方较多，有的效果并不明显(表1、2)。其市售2%戊二醛杀灭HBsAg需15 min，1%戊二醛不能杀灭HBsAg。我们研制的G-L消毒剂A可在10 min杀灭HBsAg，其主要成份为戊二醛和新洁尔灭，试验中单方效果并不明显，而组成复方后消毒效果明显加强。可能有化学协同杀菌作用，亦有报导戊二醛加表面活性剂对芽胞及HBsAg有很强的杀灭效果。G-L消毒剂减轻了醛的气味、刺激性及腐蚀性[2]，并可减轻其毒性，又可降低成本，同时能达到良好的消毒效果。
, 百拇医药
【基金项目】 湖北省卫生厅资助课题(W97425)
【作者简介】 胡继发(1967-)，男，主管技师，学士
聂绍发(1954-)，男，副教授，硕士生导师
【参考文献】
[1] 陈宁庆. 艾滋病的消毒[J]. 中国消毒学杂志，1991，8(1)：19.
[2] Letertre. Bactericides containing ammonium compounds[J]. CA, 1977,86:154267.
[3] 邰昌松，张朝武. 乙型肝炎病毒检测研究的进展[J]. 中国消毒学杂志，1995，12(3)：163～167.
, 百拇医药
[4] 徐云庆，何尚浦，施侣元. 消毒剂对乙型肝炎病毒灭活效果的研究[J]. 消毒与灭菌，1988，5(4)：190.
[5] 杨仲国，沈培谊. PCR技术在乙型肝炎病毒灭活试验中的应用[J]. 中国消毒学杂志，1995，12(1)：52～54.
[6] Scientific group of viral hepatitis. WHO Tech Rep Ser[R]. Geneva： WHO， 1973.512.
[7] 聂绍发，朱桂宝，张惠娟，等. G-L消毒剂消毒效果的实验研究[J]. 中华流行病学杂志，1997，18(特1)：689～690.
(收稿日期 1998-12-30), 百拇医药