络合萃取-分光光度法测定复方解热凝胶中马来酸氯苯那敏含量
作者：张雪萍
单位：张雪萍(温州市医药科学研究所，温州 325003)
关键词：凝胶；马来酸氯苯那敏；锌试剂；分光光度法
沈阳药科大学学报000117 摘 要：创立了测定复方解热凝胶中马来酸氯苯那敏含量的络合萃取-分光光度法.实验表明，马来酸氯苯那敏在8～18 μg/mL范围内呈现良好的线性关系.A=0.043 8 C-0.016 6，r=0.999 7
(n=5)，RSD为0.74%，回收率99.9%.
分类号：R914
Determination of Chlorpheniramine Maleate in Glue by Spectrophotometry
, http://www.100md.com
Zhang Xueping
(Wenzhou Institute of Medical and Pharmaceutical Sciences,Wenzhou 325003)
Abstract：Chlorpheniramine maleate in glue was determined by zincon complexemetric extraction-spectrophotometry.The result showed a good linear relationship in the concentration range of 8～18 μg/mL.A=0.043 8 C-0.011 6.r=0.999 7(n=5),RSD 0.74%. The average recovery was about 99.9%.
Key words：glue；chlorpheniramine maleate;zincon;spectrophotometry▲
, 百拇医药
复方解热凝胶是我所新研制的儿童药用剂型，但由于马来酸氯苯那敏含量低，又与其他成分及赋形剂相互干扰，难以采用药典法〔1〕进行含量测定.作者参阅文献〔2～4〕，经过预处理，成功地排除干扰，建立了测定凝胶中马来酸氯苯那敏的络合萃取-分光光度法，获得满意结果.
1 仪器与试药
UV-760紫外可见分光光度计，上海第三分析仪器厂；岛津-265紫外分光光度计；日本分光UV-550紫外-可见分光光度计；马来酸氯苯那敏对照品，中国药品生物制品检定所提供，0047-9603；锌试剂，上海试剂三厂，960522(A.R)；氯仿，上海试剂总厂，971108(A.R)；样品，本所制备.
2 方法与结果
2.1 试液及样品配制
, 百拇医药 盐酸溶液(0.026 mol/L) 量取稀盐酸1mL，加水至100mL，摇匀.
锌试剂溶液 精密称取锌试剂34.0mg，置50 mL容量瓶中，加0.1mol/L NaOH液10mL溶解，加水稀释至刻度，摇匀.
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5) 按《中华人民共和国药典》1995年版二部附录XVD项下制备.
马来酸氯苯那敏对照液 精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品约0.05g，置三角烧瓶中，用适量盐酸溶液溶解，水浴上加热30min，放冷至室温，转移至100mL容量瓶中用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为储备液.吸取5.0mL用盐酸溶液稀释至50.0mL摇匀，作为对照液，浓度为1.289mmol/L.
空白样品液 取空白凝胶2块(含有除马来酸氯苯那敏外的其他主药及辅料)，加盐酸溶液适量置三角烧瓶中，水浴加热30 min，放冷至室温后，转移至50mL容量瓶中，用盐酸溶液分次洗涤烧瓶，合并洗液.然后用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，过滤.
, 百拇医药
样品液制备 取复方解热凝胶1块，加盐酸溶液适量置三角烧瓶中，水浴上加热30min，放至室温，转移至25mL容量瓶中，用盐酸溶液洗涤烧瓶，合并洗液.然后用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，过滤.
2.2 含量测定方法研究
马来酸氯苯那敏-锌试剂络合物吸收曲线制备 精密吸取马来酸氯苯那敏对照液2.0mL，加入10 mL缓冲液，精密加入锌试剂溶液2.0mL，氯仿10.0mL，振摇萃取5min，放置5min，分离氯仿层，以氯仿为空白，于400～700nm绘制吸收曲线(图1)，最大吸收波长为(533±1)nm，取空白样品液同上处理后分离氯仿层作空白，最大吸收波长无变化.
Fig.1 The chlorpheniramine maleate-zincon complexemetric spectrum
, http://www.100md.com
空白液的选择 为考察氯仿经萃取后可能对吸收度产生的影响，作者作了如下比较，以空气为空白，在533 nm波长处分别测定氯仿及氯仿提取液的吸收度(n=3)，经t检验，P>0.05，无显著性差异.作者选用提取后的氯仿作为空白液.
其他成分及辅料干扰性实验 精密量取空白样品液2.0mL，加入缓冲液10mL，锌试剂溶液2.0mL，氯仿10.0mL，振摇萃取5min，放置5min，分离氯仿层.同时制备空白液，以空气为空白，于533nm波长处分别测定吸收度，结果如表1(n=3).
Tab.1 The disturbed test Blank sample A1
Produced blank A2
Disturbed result A1-A2
, http://www.100md.com
0.036 5
0.036 5
0.000 0
0.036 3
0.036 4
-0.000 1
0.036 4
0.036 4
0.000 0
结果表明其它成分及辅料不干扰马来酸氯苯那敏的含量测定.
提取效能考察 精密吸取样品液2.0mL，加缓冲液10mL，锌试剂溶液2.0mL，用氯仿萃取3次(每次10.0mL)，振摇萃取5min，放置5min，分别分离氯仿层，同时取盐酸溶液2.0mL，按上法自“加缓冲液”起，依法操作作为空白.于533nm波长处测定吸收度，结果表明用10mL氯仿进行一次提取后，余液中已无马来酸氯苯那敏络合物存在，吸收度0.000(n=3).
, 百拇医药
萃取系统pH值变化考察 文献〔3〕表明马来酸氯苯那敏与锌试剂络合物在水相pH值4.4～4.6时对应的吸收度值最大，稳定性最好，作者选用pH4.5为本系统的条件并考察了萃取前后水相pH的变化，结果表明该系统条件稳定，pH值无改变(n=3).
显色时间及待测溶液稳定性考察 锌试剂加入量是保证样品络合反应进行完全的主要因素之一.锌试剂的磺酸根与马来酸氯苯那敏是以1∶1等摩尔比进行络合的，本方法设计的摩尔比为14.3∶1(取样品2.0mL时).作者将显色时间在3及5min之间进行考察，结果显示无显著性差异，作者选择显色时间为5min.将待测溶液在室温下放置，每隔30min测试吸收度，3h内无明显变化RSD=1.50%(n=3)，溶液稳定.30min与180min 2组测试结果经t检验P>0.05，无显著性差异.Tab.2 The sample solution stability test t/min
A
, http://www.100md.com
RSD/%
30
0.341 7
60
0.338 3
90
0.336 5
120
0.332 5
0.334 65
1.50
150
0.330 0
, http://www.100md.com
180
0.328 9
马来酸氯苯那敏标准曲线制备 精密量取马来酸氯苯那敏对照液1.50，2.00，2.50，3.00，3.50mL，加入10mL缓冲液、锌试剂溶液2.0mL、氯仿10.0mL，振摇萃取5min，放置5 min，分离氯仿层.同时取盐酸溶液2.0 mL同法操作，分离氯仿层作为空白.于533nm波长处测定吸收度.以浓度为横座标，吸收度为纵座标，得回归方程A=0.043 8 C-0.011 6，r=0.999 7，在8～18 μg/mL范围内线性关系良好(n=5).
回收率实验 精密量取马来酸氯苯那敏对照品储备液5.0 mL置50 mL容量瓶中，用空白样品液稀释至刻度，摇匀.按表1制备溶液，按标准曲线制备项下方法操作，于533 nm波长测定吸收度.结果显示，平均回收率99.9%，RSD 0.74%，n=5.结果如表3.Tab.3 The recovery test(n=5) Added/μg.
, 百拇医药
mL-1
Found/μg.
mL-1
Absorb
/A
Recovery
/%
Mean/%
RSD/%
7.56
7.59
0.321
, 百拇医药
100.4
10.08
10.10
0.431
100.2
12.60
12.46
0.534
98.9
99.9
0.74
15.12
15.01
, 百拇医药
0.646
99.3
17.64
17.75
0.766
100.6
样品测定 精密量取样品液2.0 mL按标准曲线制备项下方法操作，分取氯仿层.同时以2.0 mL盐酸溶液同法操作，所得氯仿液为空白液，于533 nm波长处测定吸收度，按回归方程计算.
C=A+0.011 6/0.043 8.
本文对同一样品测试5次，=0.448，RSD 0.74%，重现性良好，结果如表4.Tab.4 The repeat test No
, http://www.100md.com
A
RSD/%
1
0.445
2
0.445
3
0.452
0.448
0.74
4
0.451
, 百拇医药
5
0.449
3 讨论
a.本方法的理论依据是锌试剂的磺酸根在pH 4.5条件下与马来酸氯苯那敏形成1∶1等摩尔比络合物.实验证明该络合物稳定，萃取完全，平均回收率99.9%；RSD 0.74%，具有可靠的精密度.
b.实验结果表明，经水解处理后的凝胶中其他成分与锌试剂不产生络合，对马来酸氯苯那敏含量测定无干扰，测定结果可靠.
c.实验结果还表明，马来酸氯苯那敏浓度在8～18 μg/mL范围内线性关系良好，浓度与吸收度之间符合朗伯.比尔定律，可进行含量测定.
d.本方法将加样、萃取、显色同时完成，比文献〔3〕方法更简便，减少操作误差，更加准确.
, 百拇医药
e.影响本方法测定结果准确性和稳定性的因素主要有水相pH值，锌试剂的用量及有机相中的水分等.为防止有机相中微量水分的影响，除实验用具应干燥外，分离氯仿层时应控制在8 mL左右.加入脱水剂虽可增加溶液的稳定性，但对样品有吸附，不便采用.锌试剂应新鲜配制.■
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典：二部.北京：化学工业出版社，广东科技出版社，1995.44～46
[2]辛勋，吴清平.锌试剂络合-分光光度法测定速效伤风胶囊中扑尔敏的含量.药物分析杂志，1990，10(4)：245～246
[3]黄明秀.络合萃取分光光度法测定鼻宝片中马来酸氯苯那敏的含量.中国现代应用药学，1998，15(2)：57～58
[4]覃洁萍，黄可丰.络合萃取-分光光度法测定咳特灵胶囊中扑尔敏的含量.药物分析杂志，1995，15(3)：36～37
收稿日期：1999-05-10, 百拇医药
单位：张雪萍(温州市医药科学研究所，温州 325003)
关键词：凝胶；马来酸氯苯那敏；锌试剂；分光光度法
沈阳药科大学学报000117 摘 要：创立了测定复方解热凝胶中马来酸氯苯那敏含量的络合萃取-分光光度法.实验表明，马来酸氯苯那敏在8～18 μg/mL范围内呈现良好的线性关系.A=0.043 8 C-0.016 6，r=0.999 7
(n=5)，RSD为0.74%，回收率99.9%.
分类号：R914
Determination of Chlorpheniramine Maleate in Glue by Spectrophotometry
, http://www.100md.com
Zhang Xueping
(Wenzhou Institute of Medical and Pharmaceutical Sciences,Wenzhou 325003)
Abstract：Chlorpheniramine maleate in glue was determined by zincon complexemetric extraction-spectrophotometry.The result showed a good linear relationship in the concentration range of 8～18 μg/mL.A=0.043 8 C-0.011 6.r=0.999 7(n=5),RSD 0.74%. The average recovery was about 99.9%.
Key words：glue；chlorpheniramine maleate;zincon;spectrophotometry▲
, 百拇医药
复方解热凝胶是我所新研制的儿童药用剂型，但由于马来酸氯苯那敏含量低，又与其他成分及赋形剂相互干扰，难以采用药典法〔1〕进行含量测定.作者参阅文献〔2～4〕，经过预处理，成功地排除干扰，建立了测定凝胶中马来酸氯苯那敏的络合萃取-分光光度法，获得满意结果.
1 仪器与试药
UV-760紫外可见分光光度计，上海第三分析仪器厂；岛津-265紫外分光光度计；日本分光UV-550紫外-可见分光光度计；马来酸氯苯那敏对照品，中国药品生物制品检定所提供，0047-9603；锌试剂，上海试剂三厂，960522(A.R)；氯仿，上海试剂总厂，971108(A.R)；样品，本所制备.
2 方法与结果
2.1 试液及样品配制
, 百拇医药 盐酸溶液(0.026 mol/L) 量取稀盐酸1mL，加水至100mL，摇匀.
锌试剂溶液 精密称取锌试剂34.0mg，置50 mL容量瓶中，加0.1mol/L NaOH液10mL溶解，加水稀释至刻度，摇匀.
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5) 按《中华人民共和国药典》1995年版二部附录XVD项下制备.
马来酸氯苯那敏对照液 精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品约0.05g，置三角烧瓶中，用适量盐酸溶液溶解，水浴上加热30min，放冷至室温，转移至100mL容量瓶中用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为储备液.吸取5.0mL用盐酸溶液稀释至50.0mL摇匀，作为对照液，浓度为1.289mmol/L.
空白样品液 取空白凝胶2块(含有除马来酸氯苯那敏外的其他主药及辅料)，加盐酸溶液适量置三角烧瓶中，水浴加热30 min，放冷至室温后，转移至50mL容量瓶中，用盐酸溶液分次洗涤烧瓶，合并洗液.然后用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，过滤.
, 百拇医药
样品液制备 取复方解热凝胶1块，加盐酸溶液适量置三角烧瓶中，水浴上加热30min，放至室温，转移至25mL容量瓶中，用盐酸溶液洗涤烧瓶，合并洗液.然后用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，过滤.
2.2 含量测定方法研究
马来酸氯苯那敏-锌试剂络合物吸收曲线制备 精密吸取马来酸氯苯那敏对照液2.0mL，加入10 mL缓冲液，精密加入锌试剂溶液2.0mL，氯仿10.0mL，振摇萃取5min，放置5min，分离氯仿层，以氯仿为空白，于400～700nm绘制吸收曲线(图1)，最大吸收波长为(533±1)nm，取空白样品液同上处理后分离氯仿层作空白，最大吸收波长无变化.
Fig.1 The chlorpheniramine maleate-zincon complexemetric spectrum
, http://www.100md.com
空白液的选择 为考察氯仿经萃取后可能对吸收度产生的影响，作者作了如下比较，以空气为空白，在533 nm波长处分别测定氯仿及氯仿提取液的吸收度(n=3)，经t检验，P>0.05，无显著性差异.作者选用提取后的氯仿作为空白液.
其他成分及辅料干扰性实验 精密量取空白样品液2.0mL，加入缓冲液10mL，锌试剂溶液2.0mL，氯仿10.0mL，振摇萃取5min，放置5min，分离氯仿层.同时制备空白液，以空气为空白，于533nm波长处分别测定吸收度，结果如表1(n=3).
Tab.1 The disturbed test Blank sample A1
Produced blank A2
Disturbed result A1-A2
, http://www.100md.com
0.036 5
0.036 5
0.000 0
0.036 3
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-0.000 1
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0.036 4
0.000 0
结果表明其它成分及辅料不干扰马来酸氯苯那敏的含量测定.
提取效能考察 精密吸取样品液2.0mL，加缓冲液10mL，锌试剂溶液2.0mL，用氯仿萃取3次(每次10.0mL)，振摇萃取5min，放置5min，分别分离氯仿层，同时取盐酸溶液2.0mL，按上法自“加缓冲液”起，依法操作作为空白.于533nm波长处测定吸收度，结果表明用10mL氯仿进行一次提取后，余液中已无马来酸氯苯那敏络合物存在，吸收度0.000(n=3).
, 百拇医药
萃取系统pH值变化考察 文献〔3〕表明马来酸氯苯那敏与锌试剂络合物在水相pH值4.4～4.6时对应的吸收度值最大，稳定性最好，作者选用pH4.5为本系统的条件并考察了萃取前后水相pH的变化，结果表明该系统条件稳定，pH值无改变(n=3).
显色时间及待测溶液稳定性考察 锌试剂加入量是保证样品络合反应进行完全的主要因素之一.锌试剂的磺酸根与马来酸氯苯那敏是以1∶1等摩尔比进行络合的，本方法设计的摩尔比为14.3∶1(取样品2.0mL时).作者将显色时间在3及5min之间进行考察，结果显示无显著性差异，作者选择显色时间为5min.将待测溶液在室温下放置，每隔30min测试吸收度，3h内无明显变化RSD=1.50%(n=3)，溶液稳定.30min与180min 2组测试结果经t检验P>0.05，无显著性差异.Tab.2 The sample solution stability test t/min
A
, http://www.100md.com
RSD/%
30
0.341 7
60
0.338 3
90
0.336 5
120
0.332 5
0.334 65
1.50
150
0.330 0
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180
0.328 9
马来酸氯苯那敏标准曲线制备 精密量取马来酸氯苯那敏对照液1.50，2.00，2.50，3.00，3.50mL，加入10mL缓冲液、锌试剂溶液2.0mL、氯仿10.0mL，振摇萃取5min，放置5 min，分离氯仿层.同时取盐酸溶液2.0 mL同法操作，分离氯仿层作为空白.于533nm波长处测定吸收度.以浓度为横座标，吸收度为纵座标，得回归方程A=0.043 8 C-0.011 6，r=0.999 7，在8～18 μg/mL范围内线性关系良好(n=5).
回收率实验 精密量取马来酸氯苯那敏对照品储备液5.0 mL置50 mL容量瓶中，用空白样品液稀释至刻度，摇匀.按表1制备溶液，按标准曲线制备项下方法操作，于533 nm波长测定吸收度.结果显示，平均回收率99.9%，RSD 0.74%，n=5.结果如表3.Tab.3 The recovery test(n=5) Added/μg.
, 百拇医药
mL-1
Found/μg.
mL-1
Absorb
/A
Recovery
/%
Mean/%
RSD/%
7.56
7.59
0.321
, 百拇医药
100.4
10.08
10.10
0.431
100.2
12.60
12.46
0.534
98.9
99.9
0.74
15.12
15.01
, 百拇医药
0.646
99.3
17.64
17.75
0.766
100.6
样品测定 精密量取样品液2.0 mL按标准曲线制备项下方法操作，分取氯仿层.同时以2.0 mL盐酸溶液同法操作，所得氯仿液为空白液，于533 nm波长处测定吸收度，按回归方程计算.
C=A+0.011 6/0.043 8.
本文对同一样品测试5次，
=0.448，RSD 0.74%，重现性良好，结果如表4.Tab.4 The repeat test No, http://www.100md.com
A
RSD/%
1
0.445
2
0.445
3
0.452
0.448
0.74
4
0.451
, 百拇医药
5
0.449
3 讨论
a.本方法的理论依据是锌试剂的磺酸根在pH 4.5条件下与马来酸氯苯那敏形成1∶1等摩尔比络合物.实验证明该络合物稳定，萃取完全，平均回收率99.9%；RSD 0.74%，具有可靠的精密度.
b.实验结果表明，经水解处理后的凝胶中其他成分与锌试剂不产生络合，对马来酸氯苯那敏含量测定无干扰，测定结果可靠.
c.实验结果还表明，马来酸氯苯那敏浓度在8～18 μg/mL范围内线性关系良好，浓度与吸收度之间符合朗伯.比尔定律，可进行含量测定.
d.本方法将加样、萃取、显色同时完成，比文献〔3〕方法更简便，减少操作误差，更加准确.
, 百拇医药
e.影响本方法测定结果准确性和稳定性的因素主要有水相pH值，锌试剂的用量及有机相中的水分等.为防止有机相中微量水分的影响，除实验用具应干燥外，分离氯仿层时应控制在8 mL左右.加入脱水剂虽可增加溶液的稳定性，但对样品有吸附，不便采用.锌试剂应新鲜配制.■
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典：二部.北京：化学工业出版社，广东科技出版社，1995.44～46
[2]辛勋，吴清平.锌试剂络合-分光光度法测定速效伤风胶囊中扑尔敏的含量.药物分析杂志，1990，10(4)：245～246
[3]黄明秀.络合萃取分光光度法测定鼻宝片中马来酸氯苯那敏的含量.中国现代应用药学，1998，15(2)：57～58
[4]覃洁萍，黄可丰.络合萃取-分光光度法测定咳特灵胶囊中扑尔敏的含量.药物分析杂志，1995，15(3)：36～37
收稿日期：1999-05-10, 百拇医药