缬沙坦对自发性高血压大鼠组织内肾素—血管紧张素的影响
作者：杨尚印 胡作英 曹蘅 杨霆 俞国华
单位：杨尚印(241001 安徽省芜湖市，皖南医学院弋矶山医院 心内科)；曹蘅(241001 安徽省芜湖市，皖南医学院弋矶山医院 心内科)；杨霆(241001 安徽省芜湖市，皖南医学院弋矶山医院 心内科)；俞国华(241001 安徽省芜湖市，皖南医学院弋矶山医院 心内科)；胡作英(南京市第一人民医院 心内科)
关键词：自发性高血压大鼠 肾素—血管紧张素系统 血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体拮抗剂
中国循环杂志000131 摘 要：目的：用缬沙坦(valsartan)和苯那普利(benazepril)干预自发性高血压大鼠(SHR)，观察大鼠主要组织内肾素—血管紧张素活性变化。
方法：将SHR随机分成4组(生理盐水组、苯那普利组、小剂量缬沙坦组、大剂量缬沙坦组，各组n=6)，并设Wistar Kyoto(WKY)大鼠为血压正常对照组(WKY大鼠对照组，n=6)，用放射免疫测定法观察各组血浆和主要器官组织内肾素—血管紧张素活性和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平。
, 百拇医药
结果：①SHR的4组心、脑、肾、肝中肾素活性较WKY大鼠对照组均明显增高(P<0.05)，组织中AngⅡ水平亦较WKY大鼠对照组增高。②用苯那普利组干预4周后的SHR，血浆和肾组织中肾素活性较生理盐水组明显升高，而血浆和各组织中AngⅡ水平均有轻度下降(P>0.05)。③大剂量缬沙坦组、小剂量缬沙坦组干预4周后的SHR血浆和心、肾、肝组织中肾素活性较生理盐水组增高(P<0.05或<0.01)，且SHR心、肾、肝组织中肾素活性大剂量缬沙坦组干预4周后又明显高于苯那普利组；大剂量缬沙坦组、小剂量缬沙坦组血浆、各组织AngⅡ水平均明显增高(P<0.05或<0.01)。
结论：实验表明SHR血浆和组织内肾素—血管紧张素系统较WKY大鼠活跃。用血管紧张素转换酶抑制剂和AngⅡ的Ⅰ型受体拮抗剂干预后，组织内肾素—血管紧张素系统有明显变化，前者使AngⅡ水平抑制，后者反而升高，但脑组织保持相对稳定。
分类号：Q954.6—33 文献标识码：A
, 百拇医药
文章编号：1000—3614(2000)01—0056—03
Effect of Angiotensin Ⅱ Receptor Antagonist on Renin-Angiotensin System in Main Organs of
Spontaneously Hypertensive Rats
Yang Shangyin,Hu Zuoying,Cao Heng,et al.
Department of Cardiology,Yi Jishan Hospital,Wannan Medical College,Wuhu(241001),Anhui
Abstract：Objective：Levels of renin-angiotensin system(RAS) in main organs of spontaneously hypertensive rats (SHR) with inhibitor of angiotensin converting enzyme (ACE) benazepril and antagonist of I type specific angiotensin Ⅱ receptor valsartan were measured.
, http://www.100md.com
Methods：SHR were divided into four groups with Wistar Kyoto (WKY) rats group as control (n=6).We measured the levels of plasma renin activity and angiotensin Ⅱ in main organs of SHR and WKY rats groups by use of radioimmunoassay.
Results：①The levels of renin activity of heart,brain,kidney and liver in SHR were significantly higher than those in WKY rats(p<0.05).The levels of angiotensin Ⅱ in heart,brain,kidney,liver and lung in SHR were also higher than those in WKY rats.②After administrating benazepril for 4 weeks,renin activities in plasma and kidney were higher in SHR than those in normol saline group,but the levels of angiotensin Ⅱ in plasma and each organs in SHR were slightly lower (p>0.05).③After administrating valsartan for 4 weeks,renin activities in plasma,heart,kidney and liver in SHR were higher than those in normol saline group(p<0.05 or<0.01),however renin activities in heart,kidney and liver in SHR after administrating large dosage valsartan for 4 weeks were nigher than those after administrating benazepril group.The levels of angiotensin Ⅱ in plasma,and kidney in SHR after administrating valsartan for 4 weeks were significantly higher(p<0.05 or 0.01).
, 百拇医药
Conclusions：Experiments showed that RAS in plasma and main organs of SHR is more active than that of WKY rat,the RAS activity in tissues varied significantly after administrating ACE inhibitor and angiotensin Ⅱ type 1 receptor antagonist,the former reduced the angiotensin Ⅱ level,the later increased angiotensin Ⅱ level but its level in brain kept relatively stable.
Key words：Spontaneously hypertensive rats;Angiotensin converting enzyme;Antagonist of angiotensin Ⅱ type 1 receptor
, 百拇医药
(Chinese Circulation Journal,2000,15：56.)▲
血浆和组织内肾素—血管紧张素系统的变化对心血管组织的重塑有直接影响[1,2],这种影响与血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体(AT1)的变化有关[3,4]。本文报道血管紧张素转换酶抑制剂和AT1拮抗剂干预对自发性高血压大鼠(SHR)血浆和主要器官组织内的肾素—血管紧张素系统的影响。
1 材料和方法
材料 于1998年12月至1999年1月,选取的实验动物为14周龄的雄性SHR 24只,相同周龄的雄性Wistar Kyoto(WKY)大鼠6只,均由上海高血压研究所提供,动物合格证号62-37-2及02-37-1。实验药品为血管紧张素转换酶抑制剂,苯那普利(benazepril)和AT1拮抗剂缬沙坦(valsartan)由瑞士诺华公司提供。肾素放射免疫药盒、血管紧张素(Ang)放射免疫测试药盒由北京北方生物技术研究所提供,批号98-2。
, http://www.100md.com
方法 分组及用药：6只WKY大鼠作为血压正常对照组(WKY大鼠对照组)。24只SHR随机分为4组,每组6只,即生理盐水组、苯那普利组、小剂量缬沙坦组(小缬组)、大剂量缬沙坦组(大缬组)。WKY大鼠对照组和生理盐水组每天均用生理盐水10 ml/kg左右灌胃;苯那普利组每日用苯那普利1 mg/kg,小缬组、大缬组分别每日用缬沙坦8 mg/kg和24 mg/kg于每日上午九时加入相应剂量生理盐水灌胃,实验共4周。所有大鼠均自由饮水进食，活动不限。实验前与干预4周后分别称取体重及测尾动脉收缩压。
样品提取 实验4周后停药,于次日称量体重测血压,用2%硫贲妥纳40 mg/kg,腹腔注射,麻醉大鼠,断头,颈动脉取血,分别置入预冷的含抑肽酶、依地酸二钠的抗凝管内,在4℃下以3 000转/分 离心10分,分离血浆置-20℃以下保存备用。将心室肌分两部分称重,一半加入0.5 mol/L乙酸煮沸15分,冷却后匀浆,以3 000转/分 离心20分取上清液待测血管紧张素(Ang)Ⅱ水平,另一半按1∶10(重量∶体积)加入酶抑制剂,在冰浴中制成匀浆,4℃3 000转/分 离心20分,取上清液测肾素。同时取出脑、心、肾、肝、肺组织用上述方法分两部分制成匀浆,并取上清液待测。
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检测方法 ①肾素活性测定：实际上是测定血浆中AngⅠ的产生速度,即用双份血浆,1份让其直接与抗体反应,测其AngⅠ浓度,称为对照管;另1份在37℃中温育一段时间后,再让其与抗体反应,测其AngⅠ浓度,并除以温育时间,则为单位时间内AngⅠ的产生,称为肾素活性,血浆以ng/L、组织以ng/g表示;②AngⅡ水平测定采用均相竞争法直接测定标本中的AngⅡ含量,血浆以ng/L、组织以ng/g表示。操作步骤严格按试剂盒使用说明书进行。
数据处理 各观察指标以均数±标准差(±s)表示,样本均数比较采用t显著性检验。
2 结果
肾素活性变化：SHR的4组干预4周后血浆中肾素活性比WKY大鼠对照组略高,但无统计学意义,而心、脑、肾、肝中肾素活性均明显高于WKY大鼠对照组(P<0.05，表1)。大缬组、小缬组和苯那普利组干预4周后,血浆中肾素活性均明显高于生理盐水组(P<0.05～0.01),脑、肺中的肾素活性各组无差异;但心、肾、肝组织中的肾素活性,大缬组、小缬组明显高于生理盐水组,大缬组又明显高于苯那普利组;而苯那普利组仅血浆和肾组织中的肾素活性显著高于生理盐水组(P<0.01,表1)。
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表1 自发性高血压大鼠与WKY大鼠血浆和组织中肾素活性比较(±s) 组别
只数
血浆肾素活性
(ng/L)
组织中肾素活性(ng/g)
心
脑
肾
肺
肝
WKY大鼠对照组
6
, http://www.100md.com
2.65±0.69
1.37±0.38
2.07±0.39
10.87±2.13
6.62±0.61
4.35±0.93
自发性高血压大鼠
生理盐水组
6
3.06±0.77
2.11±0.42△
3.02±0.71△
, 百拇医药
14.92±2.29△
7.67±1.36
5.88±0.46△
苯那普利组
6
4.05±0.61*
2.86±0.78
3.12±0.84
21.25±2.36**
8.82±2.42
6.23±0.78
, http://www.100md.com
小剂量缬沙坦组
6
4.34±0.70*
2.97±0.61*
3.12±0.88
19.41±4.25*
8.68±1.24*
6.53±0.24*
大剂量缬沙坦组
6
4.98±0.75*
, 百拇医药
3.06±0.77
3.40±0.91
21.92±5.18*
9.47±1.74
6.95±0.47*
注：与生理盐水组比较*P<0.05 **P<0.01;与WKY大鼠对照组比较△P<0.05
AngⅡ水平的变化：生理盐水组血浆中AngⅡ水平略高于WKY大鼠对照组,但无显著差异,而苯那普利组，大缬组、小缬组干预4周后,心、脑、肾、肺、肝组织中的AngⅡ水平均明显高于WKY大鼠对照组。WKY大鼠对照组、SHR的4组组织中AngⅡ水平分布高低次序为肾、肺、肝、脑、心,以心肌水平最低(表2)。
, 百拇医药
表2 自发性高血压大鼠与WKY大鼠血浆和组织中血管紧张素Ⅱ水平的比较(±s) 组别
只数
血浆血管紧张素Ⅱ
(ng/L)
组织中血管紧张素Ⅱ(ng/g)
心
脑
肾
肺
肝
WKY大鼠对照组
6
, 百拇医药
595.70±129.25
119.10±17.53
278.44±43.72
3614.81±370.05
3143.32±812.29
1387.64±230.01
自发性高血压大鼠
生理盐水组
6
742.30±135.32
269.42±39.74△
, http://www.100md.com
364.82±64.64△
4389.81±366.56△
4332.43±717.58
2024.81±267.90△
苯那普利组
6
634.82±84.96
230.61±31.27
306.30±36.47
3894.43±406.97
, 百拇医药
3640.61±607.58
1709.13±326.17
小剂量缬沙坦组
6
952.81±139.80
330.42±55.35
378.94±44.31
5045.22±415.81*
4403.93±574.57*
2527.54±290.96*
, 百拇医药
大剂量缬沙坦组
6
1028.64±172.75
378.64±55.56**
419.33±75.04
5131.82±533.86*
4476.52±495.94*
2892.10±544.94*
注：与生理盐水组比较*P<0.05 **P<0.01;与WKY大鼠对照组比较△P<0.05
, 百拇医药
苯那普利组，大缬组、小缬组干预4周后与生理盐水组比较,苯那普利组血浆和各组织中的AngⅡ水平均有轻度下降,但无统计学差异。大缬组、小缬组干预4周后血浆和肺、肾组织中的AngⅡ水平均明显高于生理盐水组,心组织中的AngⅡ水平更高于生理盐水组(P<0.01,表2)。
3 讨论
肾素—血管紧张素系统包括肾素、血管紧张素、血管紧张素转换酶、AT1和AT2。从形成部位认识,肾素—血管紧张素系统包括循环肾素—血管紧张素系统,即经典途径形成的,和局部肾素—血管紧张素系统,属于自分泌和旁分泌系统,包括局部转换酶的存在[5～7]。
在高血压病的发生发展和靶器官损害上,肾素—血管紧张素系统有着极其重要的作用,而局部肾素—血管紧张素系统可能对靶器官的影响更为重要[2]。本文通过SHR与WKY大鼠对比并做药物干预试验后,观察到SHR比WKY大鼠血浆肾素活性略高,但无明显差异,而组织中肾素活性,除脑和肺无明显升高外,心、肾、肝均高于WKY大鼠。SHR经血管紧张素转换酶抑制剂和AT1拮抗剂干预4周后,血浆肾素活性均显著高于生理盐水组(P<0.05或<0.01)。血浆中前肾素原、肾素原、肾素、血管紧张素原、血管紧张素均不能对肾脏近球旁器的肾素分泌形成负反馈。肾素的分沁受近球旁器的β1受体、细胞内环—一磷酸腺苷水平、肾内压力感受器、致密斑Na+调节以及肾上腺素、AngⅡ和加压素的影响[1]。本文结果表明,血管紧张素转换酶抑制剂抑制了AngⅡ的形成,肾素分泌的负反馈减弱,导致血浆肾素活性增高;血管紧张素转换酶抑制剂对组织内的肾素活性影响,主要表现在肾脏,使肾组织的肾素活性增高。而AT1拮抗剂除脑、肺组织外,也可使血浆和心、肾、肝组织中的肾素活性增高。AT1拮抗剂阻断了细胞上的AngⅡ受体与AngⅡ结合,未结合的AngⅡ滞留在血循环中,使血浆中AngⅡ水平升高,进而对肾素的分泌起到一定的负反馈作用。在本文中大缬组、小缬组的血浆和心、肾、肝组织中肾素活性明显升高。可能是由于AngⅡ水平的升高刺激肾上腺髓质分泌肾上腺素增加，作用于近球旁器的β1受体引起肾素分泌增加,也可能与肾内压力感受器等因素有关,使肾素活性增高的因素超过了AngⅡ对肾素分泌的负反馈作用。
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在药物干预前,SHR血浆中AngⅡ水平略高于WKY大鼠，而心、脑、肾、肺、肝组织中的Ang Ⅱ水平明显高于WKY大鼠,表明AngⅡ水平与高血压的发生发展可能有关。据有关学者认为,AngⅡ有促生长因子作用[6～8],能使心血管细胞增生,组织重塑,导致靶器官功能障碍[9]。用血管紧张素转换酶抑制剂和AT1拮抗剂干预4周后血浆和组织中AngⅡ水平不同变化,前者使血浆和各组织中AngⅡ水平减低,后者使之升高。血管紧张素转换酶抑制剂使血浆和组织中Ang Ⅱ降低，有益于组织的重塑。AT1拮抗剂使血浆和某些组织中AngⅡ水平升高。但由于AT1拮抗剂阻滞了Ang Ⅱ受体，使Ang Ⅱ不起作用，有可能对组织的重塑不发挥影响。我们以前的工作已观察到AT1拮抗剂对SHR的心脏重量和心肌细胞横径与心肌湿重和体重比值均有明显下降[9],表明AT1拮抗剂有直接抑制心肌细胞增生作用,提示使用AT1拮抗剂后,不会因AngⅡ升高而出现细胞增生和组织重构的不良作用。
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作者简介：杨尚印(1939—) 男 主任医师 学士 硕士研究生导师 主要从事临床心血管药理研究
参考文献：
[1] Kathy K.Molecular biology of the renin-angiotensin system.Circulation,1993,87：1816—1825.
[2] Johnston CI.Tissue angiotensin converting enzyme in cardiac and vascular hypertrophy,repair,and remodeling.Hypertension,1994,23：258—263.
[3] Goodfriend TL.Angiotensin receptors and their antagonist.N Englard J Med,1996,334：1649—1654.
, 百拇医药
[4] Macfadyen RJ,Reid JL.Angiotensin receptor antagonists as a treatment for hypertension.J Hypertens,1994,12：1333—1336.
[5] Timmermans PBMWN,Smith RD,Wang PC.Angiotensin Ⅱ receptors and angiotensin Ⅱ receptor antagonists.Pharmacol Rev,1993,45：205—251.
[6] Steckelings V,Lebrum C.Role of brain angiotensin in careiovascular regulation.J CardiovasPharmacol,1992,19(Supp 16)：S73—S79.
[7] Mark Canlfield.Angiotensinogen in Human.Essential Hypertension,1996,28：1723—1725.
[8] Eggena P,Barrett JD.Regulation and functional consequences of angiotenogen gene expression.J Hyppertens,1992,10：1063—1068.
[9] 杨霆,胡作英,曹蘅,等.血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ拮抗剂对自发性高血压大鼠心肌肥厚的影响.中国病理生理杂志,1999,15：951—952.
收稿：1999-08-24
修回：1999-12-07, 百拇医药
单位：杨尚印(241001 安徽省芜湖市，皖南医学院弋矶山医院 心内科)；曹蘅(241001 安徽省芜湖市，皖南医学院弋矶山医院 心内科)；杨霆(241001 安徽省芜湖市，皖南医学院弋矶山医院 心内科)；俞国华(241001 安徽省芜湖市，皖南医学院弋矶山医院 心内科)；胡作英(南京市第一人民医院 心内科)
关键词：自发性高血压大鼠 肾素—血管紧张素系统 血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体拮抗剂
中国循环杂志000131 摘 要：目的：用缬沙坦(valsartan)和苯那普利(benazepril)干预自发性高血压大鼠(SHR)，观察大鼠主要组织内肾素—血管紧张素活性变化。
方法：将SHR随机分成4组(生理盐水组、苯那普利组、小剂量缬沙坦组、大剂量缬沙坦组，各组n=6)，并设Wistar Kyoto(WKY)大鼠为血压正常对照组(WKY大鼠对照组，n=6)，用放射免疫测定法观察各组血浆和主要器官组织内肾素—血管紧张素活性和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平。
, 百拇医药
结果：①SHR的4组心、脑、肾、肝中肾素活性较WKY大鼠对照组均明显增高(P<0.05)，组织中AngⅡ水平亦较WKY大鼠对照组增高。②用苯那普利组干预4周后的SHR，血浆和肾组织中肾素活性较生理盐水组明显升高，而血浆和各组织中AngⅡ水平均有轻度下降(P>0.05)。③大剂量缬沙坦组、小剂量缬沙坦组干预4周后的SHR血浆和心、肾、肝组织中肾素活性较生理盐水组增高(P<0.05或<0.01)，且SHR心、肾、肝组织中肾素活性大剂量缬沙坦组干预4周后又明显高于苯那普利组；大剂量缬沙坦组、小剂量缬沙坦组血浆、各组织AngⅡ水平均明显增高(P<0.05或<0.01)。
结论：实验表明SHR血浆和组织内肾素—血管紧张素系统较WKY大鼠活跃。用血管紧张素转换酶抑制剂和AngⅡ的Ⅰ型受体拮抗剂干预后，组织内肾素—血管紧张素系统有明显变化，前者使AngⅡ水平抑制，后者反而升高，但脑组织保持相对稳定。
分类号：Q954.6—33 文献标识码：A
, 百拇医药
文章编号：1000—3614(2000)01—0056—03
Effect of Angiotensin Ⅱ Receptor Antagonist on Renin-Angiotensin System in Main Organs of
Spontaneously Hypertensive Rats
Yang Shangyin,Hu Zuoying,Cao Heng,et al.
Department of Cardiology,Yi Jishan Hospital,Wannan Medical College,Wuhu(241001),Anhui
Abstract：Objective：Levels of renin-angiotensin system(RAS) in main organs of spontaneously hypertensive rats (SHR) with inhibitor of angiotensin converting enzyme (ACE) benazepril and antagonist of I type specific angiotensin Ⅱ receptor valsartan were measured.
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Methods：SHR were divided into four groups with Wistar Kyoto (WKY) rats group as control (n=6).We measured the levels of plasma renin activity and angiotensin Ⅱ in main organs of SHR and WKY rats groups by use of radioimmunoassay.
Results：①The levels of renin activity of heart,brain,kidney and liver in SHR were significantly higher than those in WKY rats(p<0.05).The levels of angiotensin Ⅱ in heart,brain,kidney,liver and lung in SHR were also higher than those in WKY rats.②After administrating benazepril for 4 weeks,renin activities in plasma and kidney were higher in SHR than those in normol saline group,but the levels of angiotensin Ⅱ in plasma and each organs in SHR were slightly lower (p>0.05).③After administrating valsartan for 4 weeks,renin activities in plasma,heart,kidney and liver in SHR were higher than those in normol saline group(p<0.05 or<0.01),however renin activities in heart,kidney and liver in SHR after administrating large dosage valsartan for 4 weeks were nigher than those after administrating benazepril group.The levels of angiotensin Ⅱ in plasma,and kidney in SHR after administrating valsartan for 4 weeks were significantly higher(p<0.05 or 0.01).
, 百拇医药
Conclusions：Experiments showed that RAS in plasma and main organs of SHR is more active than that of WKY rat,the RAS activity in tissues varied significantly after administrating ACE inhibitor and angiotensin Ⅱ type 1 receptor antagonist,the former reduced the angiotensin Ⅱ level,the later increased angiotensin Ⅱ level but its level in brain kept relatively stable.
Key words：Spontaneously hypertensive rats;Angiotensin converting enzyme;Antagonist of angiotensin Ⅱ type 1 receptor
, 百拇医药
(Chinese Circulation Journal,2000,15：56.)▲
血浆和组织内肾素—血管紧张素系统的变化对心血管组织的重塑有直接影响[1,2],这种影响与血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体(AT1)的变化有关[3,4]。本文报道血管紧张素转换酶抑制剂和AT1拮抗剂干预对自发性高血压大鼠(SHR)血浆和主要器官组织内的肾素—血管紧张素系统的影响。
1 材料和方法
材料 于1998年12月至1999年1月,选取的实验动物为14周龄的雄性SHR 24只,相同周龄的雄性Wistar Kyoto(WKY)大鼠6只,均由上海高血压研究所提供,动物合格证号62-37-2及02-37-1。实验药品为血管紧张素转换酶抑制剂,苯那普利(benazepril)和AT1拮抗剂缬沙坦(valsartan)由瑞士诺华公司提供。肾素放射免疫药盒、血管紧张素(Ang)放射免疫测试药盒由北京北方生物技术研究所提供,批号98-2。
, http://www.100md.com
方法 分组及用药：6只WKY大鼠作为血压正常对照组(WKY大鼠对照组)。24只SHR随机分为4组,每组6只,即生理盐水组、苯那普利组、小剂量缬沙坦组(小缬组)、大剂量缬沙坦组(大缬组)。WKY大鼠对照组和生理盐水组每天均用生理盐水10 ml/kg左右灌胃;苯那普利组每日用苯那普利1 mg/kg,小缬组、大缬组分别每日用缬沙坦8 mg/kg和24 mg/kg于每日上午九时加入相应剂量生理盐水灌胃,实验共4周。所有大鼠均自由饮水进食，活动不限。实验前与干预4周后分别称取体重及测尾动脉收缩压。
样品提取 实验4周后停药,于次日称量体重测血压,用2%硫贲妥纳40 mg/kg,腹腔注射,麻醉大鼠,断头,颈动脉取血,分别置入预冷的含抑肽酶、依地酸二钠的抗凝管内,在4℃下以3 000转/分 离心10分,分离血浆置-20℃以下保存备用。将心室肌分两部分称重,一半加入0.5 mol/L乙酸煮沸15分,冷却后匀浆,以3 000转/分 离心20分取上清液待测血管紧张素(Ang)Ⅱ水平,另一半按1∶10(重量∶体积)加入酶抑制剂,在冰浴中制成匀浆,4℃3 000转/分 离心20分,取上清液测肾素。同时取出脑、心、肾、肝、肺组织用上述方法分两部分制成匀浆,并取上清液待测。
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检测方法 ①肾素活性测定：实际上是测定血浆中AngⅠ的产生速度,即用双份血浆,1份让其直接与抗体反应,测其AngⅠ浓度,称为对照管;另1份在37℃中温育一段时间后,再让其与抗体反应,测其AngⅠ浓度,并除以温育时间,则为单位时间内AngⅠ的产生,称为肾素活性,血浆以ng/L、组织以ng/g表示;②AngⅡ水平测定采用均相竞争法直接测定标本中的AngⅡ含量,血浆以ng/L、组织以ng/g表示。操作步骤严格按试剂盒使用说明书进行。
数据处理 各观察指标以均数±标准差(±s)表示,样本均数比较采用t显著性检验。
2 结果
肾素活性变化：SHR的4组干预4周后血浆中肾素活性比WKY大鼠对照组略高,但无统计学意义,而心、脑、肾、肝中肾素活性均明显高于WKY大鼠对照组(P<0.05，表1)。大缬组、小缬组和苯那普利组干预4周后,血浆中肾素活性均明显高于生理盐水组(P<0.05～0.01),脑、肺中的肾素活性各组无差异;但心、肾、肝组织中的肾素活性,大缬组、小缬组明显高于生理盐水组,大缬组又明显高于苯那普利组;而苯那普利组仅血浆和肾组织中的肾素活性显著高于生理盐水组(P<0.01,表1)。
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表1 自发性高血压大鼠与WKY大鼠血浆和组织中肾素活性比较(±s) 组别
只数
血浆肾素活性
(ng/L)
组织中肾素活性(ng/g)
心
脑
肾
肺
肝
WKY大鼠对照组
6
, http://www.100md.com
2.65±0.69
1.37±0.38
2.07±0.39
10.87±2.13
6.62±0.61
4.35±0.93
自发性高血压大鼠
生理盐水组
6
3.06±0.77
2.11±0.42△
3.02±0.71△
, 百拇医药
14.92±2.29△
7.67±1.36
5.88±0.46△
苯那普利组
6
4.05±0.61*
2.86±0.78
3.12±0.84
21.25±2.36**
8.82±2.42
6.23±0.78
, http://www.100md.com
小剂量缬沙坦组
6
4.34±0.70*
2.97±0.61*
3.12±0.88
19.41±4.25*
8.68±1.24*
6.53±0.24*
大剂量缬沙坦组
6
4.98±0.75*
, 百拇医药
3.06±0.77
3.40±0.91
21.92±5.18*
9.47±1.74
6.95±0.47*
注：与生理盐水组比较*P<0.05 **P<0.01;与WKY大鼠对照组比较△P<0.05
AngⅡ水平的变化：生理盐水组血浆中AngⅡ水平略高于WKY大鼠对照组,但无显著差异,而苯那普利组，大缬组、小缬组干预4周后,心、脑、肾、肺、肝组织中的AngⅡ水平均明显高于WKY大鼠对照组。WKY大鼠对照组、SHR的4组组织中AngⅡ水平分布高低次序为肾、肺、肝、脑、心,以心肌水平最低(表2)。
, 百拇医药
表2 自发性高血压大鼠与WKY大鼠血浆和组织中血管紧张素Ⅱ水平的比较(±s) 组别
只数
血浆血管紧张素Ⅱ
(ng/L)
组织中血管紧张素Ⅱ(ng/g)
心
脑
肾
肺
肝
WKY大鼠对照组
6
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595.70±129.25
119.10±17.53
278.44±43.72
3614.81±370.05
3143.32±812.29
1387.64±230.01
自发性高血压大鼠
生理盐水组
6
742.30±135.32
269.42±39.74△
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364.82±64.64△
4389.81±366.56△
4332.43±717.58
2024.81±267.90△
苯那普利组
6
634.82±84.96
230.61±31.27
306.30±36.47
3894.43±406.97
, 百拇医药
3640.61±607.58
1709.13±326.17
小剂量缬沙坦组
6
952.81±139.80
330.42±55.35
378.94±44.31
5045.22±415.81*
4403.93±574.57*
2527.54±290.96*
, 百拇医药
大剂量缬沙坦组
6
1028.64±172.75
378.64±55.56**
419.33±75.04
5131.82±533.86*
4476.52±495.94*
2892.10±544.94*
注：与生理盐水组比较*P<0.05 **P<0.01;与WKY大鼠对照组比较△P<0.05
, 百拇医药
苯那普利组，大缬组、小缬组干预4周后与生理盐水组比较,苯那普利组血浆和各组织中的AngⅡ水平均有轻度下降,但无统计学差异。大缬组、小缬组干预4周后血浆和肺、肾组织中的AngⅡ水平均明显高于生理盐水组,心组织中的AngⅡ水平更高于生理盐水组(P<0.01,表2)。
3 讨论
肾素—血管紧张素系统包括肾素、血管紧张素、血管紧张素转换酶、AT1和AT2。从形成部位认识,肾素—血管紧张素系统包括循环肾素—血管紧张素系统,即经典途径形成的,和局部肾素—血管紧张素系统,属于自分泌和旁分泌系统,包括局部转换酶的存在[5～7]。
在高血压病的发生发展和靶器官损害上,肾素—血管紧张素系统有着极其重要的作用,而局部肾素—血管紧张素系统可能对靶器官的影响更为重要[2]。本文通过SHR与WKY大鼠对比并做药物干预试验后,观察到SHR比WKY大鼠血浆肾素活性略高,但无明显差异,而组织中肾素活性,除脑和肺无明显升高外,心、肾、肝均高于WKY大鼠。SHR经血管紧张素转换酶抑制剂和AT1拮抗剂干预4周后,血浆肾素活性均显著高于生理盐水组(P<0.05或<0.01)。血浆中前肾素原、肾素原、肾素、血管紧张素原、血管紧张素均不能对肾脏近球旁器的肾素分泌形成负反馈。肾素的分沁受近球旁器的β1受体、细胞内环—一磷酸腺苷水平、肾内压力感受器、致密斑Na+调节以及肾上腺素、AngⅡ和加压素的影响[1]。本文结果表明,血管紧张素转换酶抑制剂抑制了AngⅡ的形成,肾素分泌的负反馈减弱,导致血浆肾素活性增高;血管紧张素转换酶抑制剂对组织内的肾素活性影响,主要表现在肾脏,使肾组织的肾素活性增高。而AT1拮抗剂除脑、肺组织外,也可使血浆和心、肾、肝组织中的肾素活性增高。AT1拮抗剂阻断了细胞上的AngⅡ受体与AngⅡ结合,未结合的AngⅡ滞留在血循环中,使血浆中AngⅡ水平升高,进而对肾素的分泌起到一定的负反馈作用。在本文中大缬组、小缬组的血浆和心、肾、肝组织中肾素活性明显升高。可能是由于AngⅡ水平的升高刺激肾上腺髓质分泌肾上腺素增加，作用于近球旁器的β1受体引起肾素分泌增加,也可能与肾内压力感受器等因素有关,使肾素活性增高的因素超过了AngⅡ对肾素分泌的负反馈作用。
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在药物干预前,SHR血浆中AngⅡ水平略高于WKY大鼠，而心、脑、肾、肺、肝组织中的Ang Ⅱ水平明显高于WKY大鼠,表明AngⅡ水平与高血压的发生发展可能有关。据有关学者认为,AngⅡ有促生长因子作用[6～8],能使心血管细胞增生,组织重塑,导致靶器官功能障碍[9]。用血管紧张素转换酶抑制剂和AT1拮抗剂干预4周后血浆和组织中AngⅡ水平不同变化,前者使血浆和各组织中AngⅡ水平减低,后者使之升高。血管紧张素转换酶抑制剂使血浆和组织中Ang Ⅱ降低，有益于组织的重塑。AT1拮抗剂使血浆和某些组织中AngⅡ水平升高。但由于AT1拮抗剂阻滞了Ang Ⅱ受体，使Ang Ⅱ不起作用，有可能对组织的重塑不发挥影响。我们以前的工作已观察到AT1拮抗剂对SHR的心脏重量和心肌细胞横径与心肌湿重和体重比值均有明显下降[9],表明AT1拮抗剂有直接抑制心肌细胞增生作用,提示使用AT1拮抗剂后,不会因AngⅡ升高而出现细胞增生和组织重构的不良作用。
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作者简介：杨尚印(1939—) 男 主任医师 学士 硕士研究生导师 主要从事临床心血管药理研究
参考文献：
[1] Kathy K.Molecular biology of the renin-angiotensin system.Circulation,1993,87：1816—1825.
[2] Johnston CI.Tissue angiotensin converting enzyme in cardiac and vascular hypertrophy,repair,and remodeling.Hypertension,1994,23：258—263.
[3] Goodfriend TL.Angiotensin receptors and their antagonist.N Englard J Med,1996,334：1649—1654.
, 百拇医药
[4] Macfadyen RJ,Reid JL.Angiotensin receptor antagonists as a treatment for hypertension.J Hypertens,1994,12：1333—1336.
[5] Timmermans PBMWN,Smith RD,Wang PC.Angiotensin Ⅱ receptors and angiotensin Ⅱ receptor antagonists.Pharmacol Rev,1993,45：205—251.
[6] Steckelings V,Lebrum C.Role of brain angiotensin in careiovascular regulation.J CardiovasPharmacol,1992,19(Supp 16)：S73—S79.
[7] Mark Canlfield.Angiotensinogen in Human.Essential Hypertension,1996,28：1723—1725.
[8] Eggena P,Barrett JD.Regulation and functional consequences of angiotenogen gene expression.J Hyppertens,1992,10：1063—1068.
[9] 杨霆,胡作英,曹蘅,等.血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ拮抗剂对自发性高血压大鼠心肌肥厚的影响.中国病理生理杂志,1999,15：951—952.
收稿：1999-08-24
修回：1999-12-07, 百拇医药