HPLC法测定美洛昔康片的含量
作者：马宁 罗艳 孟庆玉 钟硕宇 何燕
单位：罗艳(湖南财经学院职工医院药剂科)；马宁 孟庆玉 钟硕宇 何燕(湖南医药工业研究所 长沙 410014)
关键词：美洛昔康片；反相高效液相色谱法
中国现代应用药学000220 摘要 目的：建立了反相高效液相色谱法测定美洛昔康片含量的方法。 方法：选用YWG C18色谱柱，以0.2mol/L醋酸铵-甲醇(1∶1)为流 动相，检测波长为270nm，流速为1ml/min。结果：美洛昔康的线性范围0 .1～0.5μg/ml,r=0.9996,n=5;回收率为101.1%，RSD=1.15% 。结论：方法准确、快速、简便，且不受辅料干扰。
Determination of meloxicam tablets by HPLC
, 百拇医药
Ma Ning(Ma N),Luo Yan(Luo Y),Men Qinyu(Men QY)
(Hun an Pharmaceutical and Industry Institute,Changsha 410014)
ABSTRACT OBJECTIVE：A RP HPLC was used to determine the content of meloxicam in tablets.METHOD:The HPLC system consisted of YWG C18 column(250mm×4.6mm 10μm),0.2M ammonium acetate-methanol(1∶1) m ixture as mobile phase,with detection at 270nm,flow rate 1ml/min and column temp erature at room temperature.RESULTS:The linear range was 0.1～0.5μg /ml(r=0.9996,n=5).The mean recovery was 101.1%,RSD=1.15% .CONCLUSION:This method is simple,sensitive and accurate.It can be o perated without interference of excipient.
, 百拇医药
KEY WORDS Meloxicam,HPL C
美洛昔康(Meloxicam)为新型的非甾体消炎镇痛药(NSAIDS)，在我国属 四类新药。其结构名称：2-甲基-4羟基-N-(5-甲基-2-噻唑基)-2H-1,2-苯并噻嗪 -3-甲酰胺1,1-二氧化物。
1 仪器与试剂
仪器： 高效液相色谱仪(Waters):510型恒流泵，2487型紫外检测器，U6K型进样阀；HS高级色谱工 作站Ver3.5(杭州英谱)。
美洛昔康片(规格：7.5mg),美洛昔康对照品(含量:99.51%)均由 本所提供。醋酸铵，甲醇均为分析纯。
2 试验方法与结果
2.1 色谱条件的选择
, 百拇医药
2.1.1 色谱柱的选择 十八烷基硅烷键合硅胶柱。
2.1.2 流动相的选择 (A)0.2M醋酸铵-甲醇
马宁，女，36岁。1987年毕业于沈阳药学院药学系。现为湖南医药工 业研究所分析室主任，助理研究员。主要从事新药质量标准的制定和研究，研究成果曾获得 省级科学进步四等奖
(1∶1)[1]；(B)甲醇-水-乙腈-冰醋酸[(55∶45∶5∶2),庚烷磺酸钠5mM/L] [2]组分复杂,不易控制。(C)甲醇-1%醋酸铵(稀氨水调pH=9.1)(42∶58)[3] ，pH值偏高,对色谱柱损伤大。经试验确证，条件(A)较适合本品。
2.1.3 流速 1ml/min。
2.1.4 测定波长的选 择 本品主要相关杂质有中间体1：2-氨基-5-甲基-噻唑；中间体2：4-羟基-2- 甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯1,1-二氧化物。分别用流动相溶解中间体1，2， 及美洛昔康样品配成适当浓度，照分光光度法在200～400nm波长范围内扫描，结果见图1，2 ，3。
, 百拇医药
图1 美洛昔康紫外图谱/C=0.0102 μg.ml-1
图2 中间体1紫外图谱/C=1.0 2×10-4mg.ml-1
图3 中间体2紫外图谱/C=1.1 ×10-4mg.ml-1
图谱分析:美洛昔康与中间体2在363nm、271nm和325nm、270nm处有最大吸收，而中间体1在 259nm有最大吸收，300nm以上没有吸收峰，因此如果选择360nm作测定波长，则中间体1将检 测不出，故选取270nm作为测定波长，则三者皆可兼顾。
2.1.5 中间体、杂质分离情况及检测限的确立 分别取美洛昔康样品、 中间体1，2适量，用流动相溶解，配成适当浓度，分别取10μl注入液相色谱仪，得HPLC图谱4,5,6，7。
, http://www.100md.com
图4 美洛昔康HPLC图
图5 中间体1 HPLC图
图6 中间体2 HPLC图
图7 样品+中间体1+中间体2 HPLC图
结果表明：①在本色谱条件下，美洛昔康与主要相关物质能够得到有效分离和检测。②杂质 最低检出限(LOD)：中间体1 1.12ng；中间体2 0.1μg；美洛昔康最低检出限(LOD) 1.19×1 0-4ng。
2.2 含量测定方法的确立
样品溶液的配制 取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于含美洛昔康20mg)于 50ml量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,即得。
, 百拇医药
对照品溶液的配制：取美洛昔 康对照品约20mg置于50ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
分别取上述溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算结果，即得。
2.2.1 线性关系考察 取美洛昔康对照品约50mg,精密称定,置于50m l量瓶中。用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取1.0，2.0，3.0，4.0和5.0ml于10ml量 瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图,计算峰面积与浓 度的关系,回归方程为:S=20815768C+83561.7578，r=0.9996(n=5)。表明 美洛昔康在0.1～0.5μg/ml范围内呈良好的线性关系。
2.2.2 精密度考察 精密吸取上述4号对照品溶液10μl，重复进样6 次，按峰面积计算RSD为0.73%(n=6)。
, 百拇医药
2.2.3 溶液稳定性考察 对照品溶液及样品溶液均置于无色透明容量瓶 中,放置24h,对照品溶液峰面积与样品溶液峰面积比值基本不变,说明本品在流动相溶液中稳 定。
2.2.4 回收率测定 取空白辅料，按处方量加入美洛昔康对照品 适量，依法配制样品溶液和对照品溶液，测定，计算，计算回收率结果如下表1。
表1 回收率测定结果 样 品
加入量/mg
测得量/mg
回收率/%
1
21.62
22.01
, 百拇医药
101.8
2
20.53
20.41
99.42
3
19.81
19.82
100.1
4
23.25
23.83
102.5
, http://www.100md.com
5
22.34
22.84
102.2
6
24.60
24.67
100.3
2.2.5 样品的含量测定 依法配制样品溶液和对照品溶液, 分别取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法计算,结果见表2。表2 美洛昔康片含量测定结果/以标示量计 样品批号
981001
981002
, http://www.100md.com
981003
含量/%
101.3
100.7
101.0
参考文献
1，戈顺娣，等.用高效液相色谱法测定吡罗昔康检栓剂的含 量.药学学报，1998,23(1)∶23.
2，P.Lees Ⅱ,A. D. Sedgwlck:British Veterinary Journ al,147,2.
3，Peter Luger,Klaus Daneck:Europe an Journal of Pharmaceutical Sciences,1996，4∶175.
收稿日期：1999-01-15, 百拇医药
单位：罗艳(湖南财经学院职工医院药剂科)；马宁 孟庆玉 钟硕宇 何燕(湖南医药工业研究所 长沙 410014)
关键词：美洛昔康片；反相高效液相色谱法
中国现代应用药学000220 摘要 目的：建立了反相高效液相色谱法测定美洛昔康片含量的方法。 方法：选用YWG C18色谱柱，以0.2mol/L醋酸铵-甲醇(1∶1)为流 动相，检测波长为270nm，流速为1ml/min。结果：美洛昔康的线性范围0 .1～0.5μg/ml,r=0.9996,n=5;回收率为101.1%，RSD=1.15% 。结论：方法准确、快速、简便，且不受辅料干扰。
Determination of meloxicam tablets by HPLC
, 百拇医药
Ma Ning(Ma N),Luo Yan(Luo Y),Men Qinyu(Men QY)
(Hun an Pharmaceutical and Industry Institute,Changsha 410014)
ABSTRACT OBJECTIVE：A RP HPLC was used to determine the content of meloxicam in tablets.METHOD:The HPLC system consisted of YWG C18 column(250mm×4.6mm 10μm),0.2M ammonium acetate-methanol(1∶1) m ixture as mobile phase,with detection at 270nm,flow rate 1ml/min and column temp erature at room temperature.RESULTS:The linear range was 0.1～0.5μg /ml(r=0.9996,n=5).The mean recovery was 101.1%,RSD=1.15% .CONCLUSION:This method is simple,sensitive and accurate.It can be o perated without interference of excipient.
, 百拇医药
KEY WORDS Meloxicam,HPL C
美洛昔康(Meloxicam)为新型的非甾体消炎镇痛药(NSAIDS)，在我国属 四类新药。其结构名称：2-甲基-4羟基-N-(5-甲基-2-噻唑基)-2H-1,2-苯并噻嗪 -3-甲酰胺1,1-二氧化物。
1 仪器与试剂
仪器： 高效液相色谱仪(Waters):510型恒流泵，2487型紫外检测器，U6K型进样阀；HS高级色谱工 作站Ver3.5(杭州英谱)。
美洛昔康片(规格：7.5mg),美洛昔康对照品(含量:99.51%)均由 本所提供。醋酸铵，甲醇均为分析纯。
2 试验方法与结果
2.1 色谱条件的选择
, 百拇医药
2.1.1 色谱柱的选择 十八烷基硅烷键合硅胶柱。
2.1.2 流动相的选择 (A)0.2M醋酸铵-甲醇
马宁，女，36岁。1987年毕业于沈阳药学院药学系。现为湖南医药工 业研究所分析室主任，助理研究员。主要从事新药质量标准的制定和研究，研究成果曾获得 省级科学进步四等奖
(1∶1)[1]；(B)甲醇-水-乙腈-冰醋酸[(55∶45∶5∶2),庚烷磺酸钠5mM/L] [2]组分复杂,不易控制。(C)甲醇-1%醋酸铵(稀氨水调pH=9.1)(42∶58)[3] ，pH值偏高,对色谱柱损伤大。经试验确证，条件(A)较适合本品。
2.1.3 流速 1ml/min。
2.1.4 测定波长的选 择 本品主要相关杂质有中间体1：2-氨基-5-甲基-噻唑；中间体2：4-羟基-2- 甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯1,1-二氧化物。分别用流动相溶解中间体1，2， 及美洛昔康样品配成适当浓度，照分光光度法在200～400nm波长范围内扫描，结果见图1，2 ，3。
, 百拇医药
图1 美洛昔康紫外图谱/C=0.0102 μg.ml-1
图2 中间体1紫外图谱/C=1.0 2×10-4mg.ml-1
图3 中间体2紫外图谱/C=1.1 ×10-4mg.ml-1
图谱分析:美洛昔康与中间体2在363nm、271nm和325nm、270nm处有最大吸收，而中间体1在 259nm有最大吸收，300nm以上没有吸收峰，因此如果选择360nm作测定波长，则中间体1将检 测不出，故选取270nm作为测定波长，则三者皆可兼顾。
2.1.5 中间体、杂质分离情况及检测限的确立 分别取美洛昔康样品、 中间体1，2适量，用流动相溶解，配成适当浓度，分别取10μl注入液相色谱仪，得HPLC图谱4,5,6，7。
, http://www.100md.com
图4 美洛昔康HPLC图
图5 中间体1 HPLC图
图6 中间体2 HPLC图
图7 样品+中间体1+中间体2 HPLC图
结果表明：①在本色谱条件下，美洛昔康与主要相关物质能够得到有效分离和检测。②杂质 最低检出限(LOD)：中间体1 1.12ng；中间体2 0.1μg；美洛昔康最低检出限(LOD) 1.19×1 0-4ng。
2.2 含量测定方法的确立
样品溶液的配制 取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于含美洛昔康20mg)于 50ml量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,即得。
, 百拇医药
对照品溶液的配制：取美洛昔 康对照品约20mg置于50ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
分别取上述溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算结果，即得。
2.2.1 线性关系考察 取美洛昔康对照品约50mg,精密称定,置于50m l量瓶中。用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取1.0，2.0，3.0，4.0和5.0ml于10ml量 瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图,计算峰面积与浓 度的关系,回归方程为:S=20815768C+83561.7578，r=0.9996(n=5)。表明 美洛昔康在0.1～0.5μg/ml范围内呈良好的线性关系。
2.2.2 精密度考察 精密吸取上述4号对照品溶液10μl，重复进样6 次，按峰面积计算RSD为0.73%(n=6)。
, 百拇医药
2.2.3 溶液稳定性考察 对照品溶液及样品溶液均置于无色透明容量瓶 中,放置24h,对照品溶液峰面积与样品溶液峰面积比值基本不变,说明本品在流动相溶液中稳 定。
2.2.4 回收率测定 取空白辅料，按处方量加入美洛昔康对照品 适量，依法配制样品溶液和对照品溶液，测定，计算，计算回收率结果如下表1。
表1 回收率测定结果 样 品
加入量/mg
测得量/mg
回收率/%
1
21.62
22.01
, 百拇医药
101.8
2
20.53
20.41
99.42
3
19.81
19.82
100.1
4
23.25
23.83
102.5
, http://www.100md.com
5
22.34
22.84
102.2
6
24.60
24.67
100.3
2.2.5 样品的含量测定 依法配制样品溶液和对照品溶液, 分别取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法计算,结果见表2。表2 美洛昔康片含量测定结果/以标示量计 样品批号
981001
981002
, http://www.100md.com
981003
含量/%
101.3
100.7
101.0
参考文献
1，戈顺娣，等.用高效液相色谱法测定吡罗昔康检栓剂的含 量.药学学报，1998,23(1)∶23.
2，P.Lees Ⅱ,A. D. Sedgwlck:British Veterinary Journ al,147,2.
3，Peter Luger,Klaus Daneck:Europe an Journal of Pharmaceutical Sciences,1996，4∶175.
收稿日期：1999-01-15, 百拇医药