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编号:10499781
常见STD的实验检查和质控
http://www.100md.com 《重庆医学》 2000年第2期
     作者:唐书谦 叶庆佾

    单位:第三军医大学西南医院皮肤科 重庆 400038

    关键词:

    重庆医学000234 STD病原体或血清学检查,各地所用的实验诊断方法基本一样 ,但阳性率却有差异,其原因有多种[1,2],如取材、染色方法、技术操作的正规 与熟练程度、所用试剂的特异性和稳定性,以及所用试剂的批号等均有一定的关系。以下是 对取材、病原体培养、染色和血清学检查等方法的几点看法,供同行参考。

    1 取材方法[3,4]应重视以下几点

    1.1 淋菌直接镜检和培养 淋病患者多合并有衣原体、支原体等感染,常 多项检查指标同时要求取材,如直接检查、培养检查、PCR检查、或支原体和衣原体也同时 取材等。同一个部位多次取材,常取不到足够的标本,影响检查的阳性率,而且对病人的尿 道粘膜也易造成损伤,病人难以接受。我们认为:男性尿道取材不应在同一时间内连续多次 取材,以分时、分次采取为宜,可考虑依标本的需要隔1~2小时后,或次日再取1~2项指标 较好。
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    1.2 尿道取材,应注意插入尿道的深度。男性标本:应插入前尿 道2~4cm。其次要争取病人合作,解除病人的怕痛或恐惧感。女性标本:从宫颈和尿道口同 时分别取材,能提高检查阳性率。用窥阴器取材时,应避免使用如石蜡油润滑剂等影响淋菌 培养生长的物质。

    1.3 支原体和衣原体均为细胞内病原体,所取标本应含有一定量上皮样细 胞,否则可造成假阴性延误诊断。

    1.4 检查阴道滴虫,棉拭子不能干燥 ,应立即涂片检查。冬季最好保持标本的一定温度,以有助于滴虫的活动,便于观察。

    1.5 梅毒标本暗视野检查 应尽量采取病损组织液;载物片要洁净,厚度 小于1mm。暗视野观察后的标本,可固定后留作其它如银染色法等检查,有利于进一步观察 证实。

    1.6 衣原体培养标本,未及时接种可置5℃存放;但超过18小时应 存于-70℃;如仅存于-20℃,约90%衣原体可死亡。
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    1.7 尿液(中段尿为宜)、CSF等体液标本,应离心沉淀后接种或涂片阳性率 较高。

    2 染色观察注意以下几点

    2.1 涂片不能太厚 淋菌棉拭子涂片,应在玻片上轻滚动而不能用力涂, 有利于观察菌体位于细胞内或外。标本固定时加温不能太高,以防细胞固缩或蛋白变性。

    2.2 淋菌革兰氏染色 染液配制和染色程序应标准化,严防染液污染、挥 发变干或发生沉淀,误导检查结果。

    2.3 免疫组化染色(如酶标、金标法等) 同类抗体厂家甚多,应注意抗体 的特异性和敏感性,有利于提高检查质量。

    2.4 注意同一染色或涂片可同时观察几种检查结果,如淋菌涂片革兰氏染 色,可同时观察到念珠菌感染;阴道滴虫涂片,同时可观察到霉菌、线索细胞等。
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    3 病原菌培养

    3.1 淋球菌培养 注意恒定准确的培养温度;注意冬天取材、培养基保温 对淋菌生长的影响;离实验室较远,可将标本取材接种后保温送实验室,可提高培养阳性率 。

    3.2 支原体培养 应强调培养前滤菌接种和培养出现反应后再次通过滤菌 二次接种,以避免染菌污染所产生的假阳性反应。

    3.3 服用过抗生素或新近用过某些阴道制剂的尿液、精液等标本不宜作培 养用。

    4 STD血清学检查[5]

    4.1 梅毒非特异性血清学检查,如RPR等试验,应注意试剂的特异性和敏感 性,要求操作正规、定量准确。阳性应进行特异性(如荧光密螺旋体吸附试验)确诊试验,并 结合临床综合考虑确诊。
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    4.2 注意排除技术性和生物性的假阳性。据报道估计技术性假阳性可达25% ,生物性假阳性比较复杂一些,除少数其他螺旋体感染(如品他)可能引起真阳性外,主要见 于非梅毒螺旋体感染性疾病(如麻疹等)和常见的一些慢性疾病,如红斑狼疮、麻风(可高达4 0%)等。作出阳性结果时,应对病史有详细了解,以利于提高诊断的准确性。

    4.3 临床考虑一期梅毒,而暗视野检查阴性,建议二天内再复查2次。如果 血清学检查阴性,建议4周后再复查一次较准确。

    4.4 HIV检查 除注意试剂特异和敏感性外,先取初筛试验(如EIA),待检 查阳性后做确诊试验证明,如免疫印迹(WB)等。

    4.5 血清试验滴度与疾 病活度有关,定性试验阳性后再作定量试验,有利于评价疗效。

    4.6 神经梅毒的诊断,不能作单一的血清学试验,应结合CSF白细胞计数和 CSF-血清学试验,必要时可用FTA-ABS等试验综合考虑确诊。
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    5 STD患者PCR检查

    现根据卫生部文件,PCR检查法一般不作为临床诊断依据,只能作为科学研究,但对HSV感染 有时可用PCR。

    6 关于购买STD试剂盒问题

    目前推销厂家较多,关键是试剂的特异性、稳定性,抗体效价有时与保存有关。新购抗体用 前均应预试验,确保质量。

    7 防止交叉感染应注意以下二点

    7.1 梅毒血清试验测试卡片,使用完应消毒处理后再丢掉。

    7.2 工作人员应戴手套,术后洗手;凡用后污染物不随意丢放,以免自身 或交叉感染。■

    参考文献:
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    [1]邵长庚.关于性传播疾病诊断标准的制定与应用.中华皮肤科杂志,1995,28(3) :139

    [2]王千秋,邵长庚.关于性病诊断标准的修订意见.中华皮肤科杂志,1998,31(2) :202

    [3]叶干运,徐文严,邵长庚.性播疾病.第1版,南京:江苏科学技术出版社,1988 :157

    [4]乐嘉豫.性病实验诊断的应用与质控《性传播疾病诊断与预防》.第1版,广东: 广东科技出版社,1996:378

    [5]龚匡隆,尤永燕,邵长庚.梅毒血清学试验的质量控制与质量保证.性传播疾 病诊断与预防.第1版.广东:广东科技出版社,1996:412, 百拇医药