EMD56431对犬冠脉和肠系膜动脉的作用
作者：杨兴海
单位：宜昌 443003 湖北三峡学院医学院药理室
关键词：EMD；钾通道开放剂；冠状动脉；肠系膜动脉
中国现代应用药学000307 摘要 目的：研究EMD对犬冠脉和肠系膜动脉的松弛作用。 方法：用20和60mmol/L KCl激动冠脉(+E,-E),观察EMD的松弛效应。同时观察格列本 脲对EMD松弛冠脉的影响及EMD对KCl量效曲线的改变。此外，还测定了EMD松弛犬肠系膜动脉 和冠脉的EC50。结果：0.7μmol/L EMD对20mmol/L KCl去极化冠 脉(+E,-E)呈非内皮依赖性松弛，而对60mmol/L KCl去极化冠脉无效；格列本脲能有效拮抗E MD对冠脉的松弛作用;EMD使5～30mmol/L KCl去极化冠脉量效曲线呈非平行右移，但对40mmo l/L以上浓度KCl去极化冠脉则失去拮抗作用，最大反应(Emax)不压低。EMD松弛犬肠 系膜动脉和冠脉的EC50(-logc)分别为6.2和6.44。结论：为非内皮依赖性血管平滑肌松弛剂，对冠脉的松弛作用约为肠系膜动脉的2倍。
, 百拇医药
Action of EMD56421 on isolated canine coronary
and mese nteric arteries
Yang Xinghai
(Depar tment of Pharmacology,Hubei Sanxia Xueyuan Medical College,Yichang 443003)
ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate the relaxant acti on of EMD on isolated canine coronary and mesenteric arteries.METHODS:20 and 60mmol/L KCl were used to pre-constricted coronary artery rings with o r without endothelium,and relaxant response of EMD was observed.In the presence of glibenclamide,the vasolaxant response to EMD in KCl pre-constricted coronary artery was studied and the change of EMD on the dose-response curves for KCl i nduced coronary artery constriction was observed.In addition,EC50 of EMD o n coronary and mesenteric arteries was measured.RESULTS:In the canin e coronary artery rings with or without endotelium,0.7μmol/L EMD caused signifi cant relaxant response of to pre-constricted coronary artery with 20mmol/L KCl. When coronary artery was pre-constricted with 60mmol/L KCl,relaxant effect of E MD was abolished.In the presence of glibenclamide,the vasolaxant response for EM D in KCl pre-contracted coronary artery was antagonized significantly.EMD shift ed the dose response curves for KCl(5～30mmol/L) induced constriction to the rig ht,but it had no antagonized response to higher concentration of KCL(≥40mmol/L) (Emax was not lowered).EMD produced a markedly concentration dependent red uction of contractile response to phenylephrine or KCl in coronary and mesenteri c arteries,their -logEC50 values were 6.20 and 6.44 respectively.CON CLUSION:EMD is a non-endothelium dependent preparation for vascular smoot h muscles relaxation,the relaxing action of EMD on mesenteric artery is two time s that of coronary artery.
, http://www.100md.com
KEY WORDS EMD,potassium channel openers ,canine coronary artery,mesenteric artery
EMD56431(EMD)为 新的一类钾通道开放剂，对高血压等心血管疾病具有较好效果，它通过激活血管平滑肌的Ik (ATP)而发挥降压作用[1]。本实验主要研究EMD对犬冠脉及肠系膜动脉的作用。
1 材料与方法
1.1 药品
EMD(同济医科大学姚伟星 教授提供)；格列本脲(glibenclamide,GLA，Sigma产品)；苯福林(phenylephrine,PPR，上 海第十制药厂)。
1.2 动物
, http://www.100md.com
健康杂种犬，体重8.9±1.5kg,♀♂兼用 。
1.3 方法
1.3.1 EMD对KCl致犬冠脉环收缩的影响 新鲜犬心在通 O2的K-H液中分离冠脉左旋支，按文献[2]方法去内皮(-E),并剪成约4mm长的冠 脉环，将其悬吊于含10ml K-H溶液浴槽中，溶液成分按mmol/L计:NaCl 118,KCl 4.7,CaCl 2 2.5,MgSO4 1.2,KH2PO4 1.18,NaHCO3 25，葡萄糖5.55。连续通入95%O2+5%C O2的混合气体37±0.5℃,pH 7.2～7.4,标本负荷2g,平衡2h,通过肌力传感器(JH-2A)将标 本张力记录于YEW-3066型二笔台式平衡记录仪，稳定15min后开始实验，将去内皮(-E)和未 去内皮(+E)的冠脉环分成对照组与EMD组，分别用20和60mmol/L KCl激动冠脉以引起收缩， 当冠脉收缩达峰值时，实验组加入EMD，对照组加入等量生理盐水(NS)，以KCl致冠脉收缩的 最大值为100%,观察30min内EMD松弛冠脉的作用强度，并计算血管松弛百分率(X2校正法检 验)。
, 百拇医药
1.3.2 GLA对EMD松弛冠脉环的影响 方法及条件同上，俟标本稳 定15min后，先用20mmol/L KCl激动冠脉，当收缩达峰值时一次性加入GLA 1.0μmol/L,6min 后加入EMD，观察其效应变化，对照组加入等量NS后观察变化。
1.3.3 EMD对犬冠脉环KCl量效曲线的影响 方法及条件同1.3.1,冠 脉平衡2h后，加入递增浓度的KCl(5～80mmol/L),以给药前KCl量效曲线为对照，分别制作给 不同浓度的EMD后KCl的量效曲线。
1.3.4 EMD对不同激动剂致犬肠系膜 动脉及冠脉收缩的松弛作用 取新鲜犬肠系膜，在通O2的K-H液中分离肠系膜动脉，并用 低钙(0.5mmol/L)K-H液进行实验，负荷1g,冠脉环标本制作方法及条件同1.3.1,标本平衡后 ，肠系膜动脉加入PPR 10μmol/L,冠脉加入20mmol/L KCl激动标本，俟收缩达坪值时，两种 标本分别累加递增浓度的EMD(0.01,0.1,0.3,1.0和3.0μmol/L),加药间隔7min,以PPR致 肠系膜动脉收缩和KCl致冠脉收缩的最大值为100%,计算用不同浓度的EMD后致标本松弛的%， 分别求出各自的EC50。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 EMD对 KCl致犬冠脉环收缩的影响
20和60mmol/L KCl迅速引起犬冠脉(+E,-E)收缩，对照组在收缩 达峰值后加入NS，可见30min内收缩始终处于坪值状态。无论冠脉有无内皮存在,0.7μmol /L EMD对20mmol/L KCl所致冠脉收缩可迅速引起松弛，但对60mmol/L KCl致冠脉收缩无效 ，见表1。
2.2 GLA对EMD致犬冠脉环松弛的影响
用20mmol/L KCl激动 冠脉致收缩达坪值后，一次性加入GLA 1.0μmol/L,未见曲线发生变化,6min后加入0.7μmol /L EMD,可见30min内EMD仅使冠脉松弛15.3%±3.4%(n=6),而加入等量NS后再加 EMD则冠脉松弛达97.4%±4.3%(n=5)。
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2.3 EMD对犬冠脉 环KCl量效曲线的影响
其中0.3μmol/L EMD对10，20mmol/L KCl可完全拮抗，对30mmol/L KCl仅部分拮抗，当KCl浓度升至40mmol/L及其以上浓度时，则EMD完全失去拮抗作用，最大 反应(Emax)不压低。
表1 0.7μmol/L EMD对KCl致犬冠脉环收缩的影 响/±s,n=5 组别
K+
/mmol.L-1
内皮
收缩力/g
松 弛强度
, 百拇医药
/%
给药前
给药后
NS
20
+E
1.52±0.3
1.52±0.3
0
20
-E
1.76±0.4
1.76±0.4
, 百拇医药
0
EMD
20
+E
1.53±0.5
0.05±0.02
97.4±3.7*
20
-E
1.87±0.5
0.05±0.03
97.4±5.8*
, 百拇医药
NS
60
+E
2.3±0.4
2.3±0.4
0
60
-E
2.1±0.3
2.1±0.3
0
EMD
60
, 百拇医药
+E
2.5±0.6
2.5±0.6
0
60
-E
2.3±0.5
2.3±0.5
0
注：与对照组比较，*P<0.01
2.4 EMD对不同激动剂致犬肠系膜动脉及冠脉环收缩的松弛作用
EMD对P PR和KCl引起的犬肠系膜动脉和冠脉的收缩呈剂量依赖性松弛，其中EMD对PPR致肠系膜动脉 收缩的EC50(-logc)为6.2,对KCl致冠脉收缩的EC50为6.44,对冠 脉的松弛作用约为肠系膜动脉的2倍。
, 百拇医药
3 讨 论
EMD对高钾去极化和PPR激动α受体所引起的血管收缩均表现出非内皮依赖性松弛，其作用机理系通过开放K+通道， 促进K+外流，致胞膜超极化，从而阻止Ca2+通过PDC钙通道(电压依赖性钙通道)进 入胞内，导致血管扩张[3]。因此，钾通道开放剂易受胞外钾浓度([K]。)的影响 ，当[K]。浓度较低时，胞内外K+浓差大，膜电位大，胞膜超极化。当[K]。浓度逐渐 升高时，胞内外K+浓差逐渐变小，膜电位小，胞膜去极化，此时膜电位(Em)接近钾的平衡 电位(Ek)。因此，当[K]。浓度增至40mmol/L以上时，EMD松弛血管作用完全取消[4 ]，实验中得到了证实。
EMD为苯并吡喃类钾通道开放剂，它的血管松弛作用可被选择 性K(ATP)通道阻滞剂GLA所拮抗。
, 百拇医药
参考文献
1，宋振玉，刘耕陶.当代药理学.第4版.北京：北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社出版，1994∶247.
2，李欣，程岚，等.莱马卡林与吡那地尔对动物血管平滑肌 的影响.同济医科大学学报，1993，22(5)∶328.
3，Anderson KE.Clinical pharmacology of potassium ch annel openers.Pharmacol Toxical,1992,70∶244.
4，Quast U.The K+ channel openers relax smooth mus cle by opening K+ channels?.Trends Pharmcol Sci,1993,14(9)∶332.
收稿日期：1998-02-24, http://www.100md.com
单位：宜昌 443003 湖北三峡学院医学院药理室
关键词：EMD；钾通道开放剂；冠状动脉；肠系膜动脉
中国现代应用药学000307 摘要 目的：研究EMD对犬冠脉和肠系膜动脉的松弛作用。 方法：用20和60mmol/L KCl激动冠脉(+E,-E),观察EMD的松弛效应。同时观察格列本 脲对EMD松弛冠脉的影响及EMD对KCl量效曲线的改变。此外，还测定了EMD松弛犬肠系膜动脉 和冠脉的EC50。结果：0.7μmol/L EMD对20mmol/L KCl去极化冠 脉(+E,-E)呈非内皮依赖性松弛，而对60mmol/L KCl去极化冠脉无效；格列本脲能有效拮抗E MD对冠脉的松弛作用;EMD使5～30mmol/L KCl去极化冠脉量效曲线呈非平行右移，但对40mmo l/L以上浓度KCl去极化冠脉则失去拮抗作用，最大反应(Emax)不压低。EMD松弛犬肠 系膜动脉和冠脉的EC50(-logc)分别为6.2和6.44。结论：为非内皮依赖性血管平滑肌松弛剂，对冠脉的松弛作用约为肠系膜动脉的2倍。
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Action of EMD56421 on isolated canine coronary
and mese nteric arteries
Yang Xinghai
(Depar tment of Pharmacology,Hubei Sanxia Xueyuan Medical College,Yichang 443003)
ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate the relaxant acti on of EMD on isolated canine coronary and mesenteric arteries.METHODS:20 and 60mmol/L KCl were used to pre-constricted coronary artery rings with o r without endothelium,and relaxant response of EMD was observed.In the presence of glibenclamide,the vasolaxant response to EMD in KCl pre-constricted coronary artery was studied and the change of EMD on the dose-response curves for KCl i nduced coronary artery constriction was observed.In addition,EC50 of EMD o n coronary and mesenteric arteries was measured.RESULTS:In the canin e coronary artery rings with or without endotelium,0.7μmol/L EMD caused signifi cant relaxant response of to pre-constricted coronary artery with 20mmol/L KCl. When coronary artery was pre-constricted with 60mmol/L KCl,relaxant effect of E MD was abolished.In the presence of glibenclamide,the vasolaxant response for EM D in KCl pre-contracted coronary artery was antagonized significantly.EMD shift ed the dose response curves for KCl(5～30mmol/L) induced constriction to the rig ht,but it had no antagonized response to higher concentration of KCL(≥40mmol/L) (Emax was not lowered).EMD produced a markedly concentration dependent red uction of contractile response to phenylephrine or KCl in coronary and mesenteri c arteries,their -logEC50 values were 6.20 and 6.44 respectively.CON CLUSION:EMD is a non-endothelium dependent preparation for vascular smoot h muscles relaxation,the relaxing action of EMD on mesenteric artery is two time s that of coronary artery.
, http://www.100md.com
KEY WORDS EMD,potassium channel openers ,canine coronary artery,mesenteric artery
EMD56431(EMD)为 新的一类钾通道开放剂，对高血压等心血管疾病具有较好效果，它通过激活血管平滑肌的Ik (ATP)而发挥降压作用[1]。本实验主要研究EMD对犬冠脉及肠系膜动脉的作用。
1 材料与方法
1.1 药品
EMD(同济医科大学姚伟星 教授提供)；格列本脲(glibenclamide,GLA，Sigma产品)；苯福林(phenylephrine,PPR，上 海第十制药厂)。
1.2 动物
, http://www.100md.com
健康杂种犬，体重8.9±1.5kg,♀♂兼用 。
1.3 方法
1.3.1 EMD对KCl致犬冠脉环收缩的影响 新鲜犬心在通 O2的K-H液中分离冠脉左旋支，按文献[2]方法去内皮(-E),并剪成约4mm长的冠 脉环，将其悬吊于含10ml K-H溶液浴槽中，溶液成分按mmol/L计:NaCl 118,KCl 4.7,CaCl 2 2.5,MgSO4 1.2,KH2PO4 1.18,NaHCO3 25，葡萄糖5.55。连续通入95%O2+5%C O2的混合气体37±0.5℃,pH 7.2～7.4,标本负荷2g,平衡2h,通过肌力传感器(JH-2A)将标 本张力记录于YEW-3066型二笔台式平衡记录仪，稳定15min后开始实验，将去内皮(-E)和未 去内皮(+E)的冠脉环分成对照组与EMD组，分别用20和60mmol/L KCl激动冠脉以引起收缩， 当冠脉收缩达峰值时，实验组加入EMD，对照组加入等量生理盐水(NS)，以KCl致冠脉收缩的 最大值为100%,观察30min内EMD松弛冠脉的作用强度，并计算血管松弛百分率(X2校正法检 验)。
, 百拇医药
1.3.2 GLA对EMD松弛冠脉环的影响 方法及条件同上，俟标本稳 定15min后，先用20mmol/L KCl激动冠脉，当收缩达峰值时一次性加入GLA 1.0μmol/L,6min 后加入EMD，观察其效应变化，对照组加入等量NS后观察变化。
1.3.3 EMD对犬冠脉环KCl量效曲线的影响 方法及条件同1.3.1,冠 脉平衡2h后，加入递增浓度的KCl(5～80mmol/L),以给药前KCl量效曲线为对照，分别制作给 不同浓度的EMD后KCl的量效曲线。
1.3.4 EMD对不同激动剂致犬肠系膜 动脉及冠脉收缩的松弛作用 取新鲜犬肠系膜，在通O2的K-H液中分离肠系膜动脉，并用 低钙(0.5mmol/L)K-H液进行实验，负荷1g,冠脉环标本制作方法及条件同1.3.1,标本平衡后 ，肠系膜动脉加入PPR 10μmol/L,冠脉加入20mmol/L KCl激动标本，俟收缩达坪值时，两种 标本分别累加递增浓度的EMD(0.01,0.1,0.3,1.0和3.0μmol/L),加药间隔7min,以PPR致 肠系膜动脉收缩和KCl致冠脉收缩的最大值为100%,计算用不同浓度的EMD后致标本松弛的%， 分别求出各自的EC50。
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2 结 果
2.1 EMD对 KCl致犬冠脉环收缩的影响
20和60mmol/L KCl迅速引起犬冠脉(+E,-E)收缩，对照组在收缩 达峰值后加入NS，可见30min内收缩始终处于坪值状态。无论冠脉有无内皮存在,0.7μmol /L EMD对20mmol/L KCl所致冠脉收缩可迅速引起松弛，但对60mmol/L KCl致冠脉收缩无效 ，见表1。
2.2 GLA对EMD致犬冠脉环松弛的影响
用20mmol/L KCl激动 冠脉致收缩达坪值后，一次性加入GLA 1.0μmol/L,未见曲线发生变化,6min后加入0.7μmol /L EMD,可见30min内EMD仅使冠脉松弛15.3%±3.4%(n=6),而加入等量NS后再加 EMD则冠脉松弛达97.4%±4.3%(n=5)。
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2.3 EMD对犬冠脉 环KCl量效曲线的影响
其中0.3μmol/L EMD对10，20mmol/L KCl可完全拮抗，对30mmol/L KCl仅部分拮抗，当KCl浓度升至40mmol/L及其以上浓度时，则EMD完全失去拮抗作用，最大 反应(Emax)不压低。
表1 0.7μmol/L EMD对KCl致犬冠脉环收缩的影 响/±s,n=5 组别
K+
/mmol.L-1
内皮
收缩力/g
松 弛强度
, 百拇医药
/%
给药前
给药后
NS
20
+E
1.52±0.3
1.52±0.3
0
20
-E
1.76±0.4
1.76±0.4
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0
EMD
20
+E
1.53±0.5
0.05±0.02
97.4±3.7*
20
-E
1.87±0.5
0.05±0.03
97.4±5.8*
, 百拇医药
NS
60
+E
2.3±0.4
2.3±0.4
0
60
-E
2.1±0.3
2.1±0.3
0
EMD
60
, 百拇医药
+E
2.5±0.6
2.5±0.6
0
60
-E
2.3±0.5
2.3±0.5
0
注：与对照组比较，*P<0.01
2.4 EMD对不同激动剂致犬肠系膜动脉及冠脉环收缩的松弛作用
EMD对P PR和KCl引起的犬肠系膜动脉和冠脉的收缩呈剂量依赖性松弛，其中EMD对PPR致肠系膜动脉 收缩的EC50(-logc)为6.2,对KCl致冠脉收缩的EC50为6.44,对冠 脉的松弛作用约为肠系膜动脉的2倍。
, 百拇医药
3 讨 论
EMD对高钾去极化和PPR激动α受体所引起的血管收缩均表现出非内皮依赖性松弛，其作用机理系通过开放K+通道， 促进K+外流，致胞膜超极化，从而阻止Ca2+通过PDC钙通道(电压依赖性钙通道)进 入胞内，导致血管扩张[3]。因此，钾通道开放剂易受胞外钾浓度([K]。)的影响 ，当[K]。浓度较低时，胞内外K+浓差大，膜电位大，胞膜超极化。当[K]。浓度逐渐 升高时，胞内外K+浓差逐渐变小，膜电位小，胞膜去极化，此时膜电位(Em)接近钾的平衡 电位(Ek)。因此，当[K]。浓度增至40mmol/L以上时，EMD松弛血管作用完全取消[4 ]，实验中得到了证实。
EMD为苯并吡喃类钾通道开放剂，它的血管松弛作用可被选择 性K(ATP)通道阻滞剂GLA所拮抗。
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参考文献
1，宋振玉，刘耕陶.当代药理学.第4版.北京：北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社出版，1994∶247.
2，李欣，程岚，等.莱马卡林与吡那地尔对动物血管平滑肌 的影响.同济医科大学学报，1993，22(5)∶328.
3，Anderson KE.Clinical pharmacology of potassium ch annel openers.Pharmacol Toxical,1992,70∶244.
4，Quast U.The K+ channel openers relax smooth mus cle by opening K+ channels?.Trends Pharmcol Sci,1993,14(9)∶332.
收稿日期：1998-02-24, http://www.100md.com