氟伐他汀对高脂血症模型兔血脂的影响及其与内膜增生的关系
作者：李东宝 沈潞华 谢苗荣 陈辉
单位：李东宝(山东省滨州地区中心医院心内科)；沈潞华 谢苗荣 陈辉(首都医科大学附属北京友谊医院心内科)
关键词：氟伐他汀；血脂；内膜；增生
首都医科大学学报000307 提要：为探讨氟伐他汀对血脂的影响及其与内膜增厚的关系，将髂动脉内膜剥脱术后高脂血症模型兔随机分为氟伐他汀组和非用药组(各组n＝28)，并设正常对照组(n=7)。分别于喂高脂饮食前及动脉剥脱术后1、2、4、8周，观察氟伐他汀组和非用药组动物血清TC、 TG 及LDL-C 的变化；并观察动脉剥脱术后1、2、4、8周氟伐他汀组和非用药组兔髂动脉切片的新生内膜、中膜厚度及内膜/中膜比值(I/M)。结果：氟伐他汀组血清TC、TG、LDL-C浓度明显低于非用药组(P<0.05)；氟伐他汀组的新生内膜厚度和I/M明显低于非用药组(P<0.01);动脉内膜厚度与TC、 TG、 LDL-C呈明显的直线相关(偏相关系数分别为0.911、0.892、0.942,P<0.01)。提示：氟伐他汀可调节血脂，有效抑制血管内膜过度增生。
, 百拇医药
中图分类号：R589.2； R972+.6
Effects of Fluvastatin on Serum
Lipid and its Relationship with Intimal
Hyperplasia in the Hyperlipidemic
Model of Rabbit after Iliac
Artery Endothelial Denudation
Shen Luhua, Xie Miaorong，Chen Hui
(Dept. of Cardiology,Beijing Friendship Hospital, Affiliate of Capital University of Medical Sciences)
, 百拇医药
Li Dongbao
(Binzhou Center Hospital)
Abstract: To investigate the effects of fluvastatin on blood lipid in inhyperlipidemic model of rabbit after iliac artery endothelial denudation and the relationship between serum lipid and intimal thickening in the study, the New Zealand white rabbits were randomized into three groups: drug-treatment group(n＝28),non-drug-treatment group(n=28)and control group(n=7). The atherosclerotic lesions were developed by endothelial denudation with balloon catheter and high dosage of cholesterol diet at the same time. The experimental animals were killed and iliac arteries were removed at 1、2、4、8 weeks after endothelial injury respectively and bloodsamples were taken at the same time. By the methods of routine HE staining, blood lipid measure and image analysis system, observed the effects of fluvastatin on the level of serum TC、TG、LDL-C and the thickness of intima and media,intima/media(I/M) ratio and the relationship between serumlipid and intimal thickening. The level of TC、TG、LDL-C in drug-treatment group was remarkably lower than that in non-drug-treatment group(P<0.05). The thickness of neointima and I/M in drug-treatment group was much thinner than that in non-drug-treatmeant group. Coefficient of linear correlation between intimal thickness and TC、TG、LDL-C were 0.911,0.892,0.942 (P<0.01) respectively.Fluvastain can lower blood lipid apparently, which may relate its effect to inhibiting excessive thickening of vascular intima.
, http://www.100md.com
Key words: fluvastatin; blood lipid; neointima; hyperplasia
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是导致心血管病死亡的重要因素之一。动脉粥样硬化的病因十分复杂，研究证实,高脂血症与AS有密切关系。3-羟基-3-甲基-戊二酰酶A还原酶抑制剂(即他汀类药物)是肝细胞合成胆固醇的限速酶，若抑制此酶则内源性胆固醇生成减少。氟伐他汀(fluvastatin)是人工合成的非compactin衍生的3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶抑制剂。1998年9月至11月，我们观察了氟伐他汀对高血脂动物模型的调脂作用及对血管内膜增厚的影响。
1 材料和方法
2.0～2.5 kg雄性新西兰白兔(购于北京生物制品和药品检验实验所动物中心)63只，用随机数字表随机分为：氟伐他汀组(n=28)：髂动脉内皮剥脱+高脂饲料+氟伐他汀；非用药组(n=28)：髂动脉内皮剥脱+高脂饲料；对照组(n=7)：基础饲料，不加处理因素。
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高脂饲料组成：胆固醇1.5 g/(d*只)+鸡蛋黄20 g/(d*只)。氟伐他汀(诺华公司提供，商品名来适可)用量为8～10 mg/(kg*d)。动脉内皮剥脱术前1周开始喂养至实验结束。三酰甘油试剂盒 ( GPO-PAP法)、 总胆固醇试剂盒(Chop-pap法)、低密度脂蛋白胆固醇试剂盒均购自北京中生生物工程技术公司。
动物模型制作：动物麻醉后暴露股动脉，逆行插入球囊导管20 cm左右(此时导管顶端达腹主动脉膈水平处)， 向球囊内注射生理盐水0.5～0.8 mL，测压约为0.606～0.808 MPa，继而缓慢回拉球囊到股动脉切口处，如此反复3次。 分别于动脉内皮剥脱术后1、2、4、8周及高脂饮食前经兔耳中央动脉取血3～5 mL，用酶法测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。每个时间点各处死动物7只，取损伤侧髂动脉用10%中性甲醛固定，脱水，包埋，制成蜡块备用。
切片常规HE染色,然后将氟伐他汀组、非用药组和对照组的动脉切片共63张输入MPIAS-500多媒体彩色病理图像分析系统，测量内膜、中膜厚度(d)。取线段以与内外弹力板垂直为准，且取内膜的最大厚度，每张切片取6个视野测定，取测定结果平均值。
, http://www.100md.com
统计学方法：用SPSS统计软件进行数据分析，数据以
±s表示，2组间比较用t检验，多组间比较用F检验，两两比较用q检验，直线偏相关系数用F检验(P<0.05)。
2 结果和讨论
3组家兔血清TC、TG及LDL-C的测定结果见表1。
氟伐他汀组和非用药组兔髂动脉内膜厚度、中膜厚度及内膜/中膜比值(I/M)见表2。
兔内膜厚度、中膜厚度与血脂的相关性：非用药组血清TC、TG、LDL-C变化与增生内膜厚度的偏相关系数分别为0.911、0.892、0.942(均P<0.01)，与I/M亦呈正相关(相关系数分别为0.921,0.779,0.936,均P<0.05)。
, 百拇医药
表1 氟伐他汀组、非用药组和对照组血脂浓度的变化 指标
组别
t(动脉剥脱术后)/周
0(n＝7)
1(n＝7)
2(n＝7)
4(n＝7)
8(n＝7)
c(TC)/ (mmol*L-1)
氟伐他汀组
2.31±0.21
, 百拇医药
13.61±3.74* *
18.49±2.25*
19.44±2.22*
29.28±6.73* *
非用药组
2.33±0.16
17.09±1.40
23.39±0.79
28.97±2.64
45.62±6.19
, http://www.100md.com
< c(TG)/ (mmol*L-1)
对照组
2.36±0.17
2.37±0.51
<
氟伐他汀组
0.72±0.05
0.79±0.04*
0.84±0.04*
1.08±0.15*
1.24±0.34* *
, 百拇医药
< c(LDL-C)/(mmol*L-1)
非用药组
0.74±0.06
0.92±0.07
0.99±0.04
1.39±0.22
1.57±0.18
对照组
0.76±0.05
0.75±0.06
氟伐他汀组
, 百拇医药 1.28±0.09
9.90±1.74*
14.10±1.21*
15.17±2.22*
22.08±4.47* *
非用药组
1.21±0.12
12.33±1.16
16.81±0.20
21.31±3.27
39.04±7.53
, 百拇医药
对照组
1.33±0.13
1.20±0.45
与非用药组和对照组相比*P<0.05, * *P<0.01表2 氟伐他汀组、非用药组内膜、中膜厚度及I/M比值 指标
组别
t(动脉剥脱术后)/周
1(n＝7)
2(n＝7)
4(n＝7)
8(n＝7)
d(内膜)/μm
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氟伐他汀组
48.32±10.63* *
165.52±8.55* *
229.66±50.70* *
186.30±13.44* *
非用药组
145.36±20.47
188.27±7.32
198.49±14.02
176.52±43.89
, 百拇医药
d(中膜)/μm
氟伐他汀组
148.01±17.05
153.73±10.41*
165.98±22.78*
142.07±12.65*
<
非用药组
151.63±18.57
234.10±8.78
345.63±34.07
, http://www.100md.com
477.50±91.60
I/M
氟伐他汀组
0.333±0.095* *
1.095±0.062* *
1.370±0.138* *
1.318±0.124* *
< <
非用药组
1.049±0.087
1.244±0.038
, 百拇医药
1.752±0.143
2.834±0.826
与非用药组相比*P<0.05, * *P<0.01
流行病学调查发现[1～4]，血浆TC浓度与缺血性心脏病的进展及其病死率有明确相关性。降脂治疗试验证明[5～8]，他汀类药物在降低TC、TG、LDL-C的同时，可使心肌梗死发生率降低,TC降低10%，心肌梗死发生率降低17%，心脏事件发生率降低23%。说明控制TC浓度可延缓冠心病的发生。本研究发现，氟伐他汀可明显降低血清TC、TG、LDL-C的浓度；术后1～8 h，氟伐他汀组的TC和TG均较非用药组明显降低(P<0.05，P<0.01),且随用药时间延长其降脂作用逐渐增强。术后氟伐他汀组和非用药组的LDL-C浓度逐渐增加。非用药组的LDL-C浓度明显高于氟伐他汀组(P<0.05)。兔髂动脉切片HE染色结果显示氟伐他汀组内膜、中膜厚度及I/M比均明显小于非用药组(P<0.05，P<0.01)，非用药组内膜厚度及I/M在各时间点均大于氟伐他汀组和对照组(P<0.05)。术后2、4周时非用药组中膜厚度大于氟伐他汀组和对照组(P<0.05)，而术后8周时3组无明显差异
, http://www.100md.com
本研究结果证实:氟伐他汀对血脂有明显的调节作用。有效地降低血脂(特别是降低TC和LDL-C)可能是氟伐他汀抑制动脉粥样硬化发生的机制之一。 参考文献
1，Kannel W B.Serum cholesterol lipoproteins and the risk of coronary heart disease.Framimghan study.Ann Intern Med,1997,74:1
2，John C L.Declining serum total cholesterol levels among US aduts.The National health and nutrition examination surveys.JAMA,1993,269:3002
3，Lamarche B.Prevalence of dyslipidemia phenotypes in ischemicaeart disease(prospective results from the qubbec cardiovascular study).Am J Cardiol,1995,75:1189
, http://www.100md.com
4，陶寿琪.心血管病流行病学进展.中华心血管杂志,1993,21:243
5，Scandinavian Simvatatin Survival Study Group.Randomized trial of mchesterol lowering in 4444 patients with coronary heart disease.The scandinavian simvisetin survival study(4s).Lancet,1994,344:1383～1389
6，Knops R E, Kroon A A,Mot M T,et al.Long-term experience(6 years) invastatin in patients with heterozygous familial hypercholesterol aemiai.Neth J Med,1995,46:171～178
, 百拇医药
7，Pitt B,Mancini G B J,Ekllis S G,et al.Pravastatin limitation of atherosclerosis in the coronary arteries(PLACI).J Am Coll Cardiol,1994,23:131
8，Spencer C M,Barradell L B.Gemfibrozil:Areappraisal of its pharmaoncal properties and place in the management of dyslipidemia.Drugs,1996,49:982～1018
收稿日期：1999-08-27, 百拇医药
单位：李东宝(山东省滨州地区中心医院心内科)；沈潞华 谢苗荣 陈辉(首都医科大学附属北京友谊医院心内科)
关键词：氟伐他汀；血脂；内膜；增生
首都医科大学学报000307 提要：为探讨氟伐他汀对血脂的影响及其与内膜增厚的关系，将髂动脉内膜剥脱术后高脂血症模型兔随机分为氟伐他汀组和非用药组(各组n＝28)，并设正常对照组(n=7)。分别于喂高脂饮食前及动脉剥脱术后1、2、4、8周，观察氟伐他汀组和非用药组动物血清TC、 TG 及LDL-C 的变化；并观察动脉剥脱术后1、2、4、8周氟伐他汀组和非用药组兔髂动脉切片的新生内膜、中膜厚度及内膜/中膜比值(I/M)。结果：氟伐他汀组血清TC、TG、LDL-C浓度明显低于非用药组(P<0.05)；氟伐他汀组的新生内膜厚度和I/M明显低于非用药组(P<0.01);动脉内膜厚度与TC、 TG、 LDL-C呈明显的直线相关(偏相关系数分别为0.911、0.892、0.942,P<0.01)。提示：氟伐他汀可调节血脂，有效抑制血管内膜过度增生。
, 百拇医药
中图分类号：R589.2； R972+.6
Effects of Fluvastatin on Serum
Lipid and its Relationship with Intimal
Hyperplasia in the Hyperlipidemic
Model of Rabbit after Iliac
Artery Endothelial Denudation
Shen Luhua, Xie Miaorong，Chen Hui
(Dept. of Cardiology,Beijing Friendship Hospital, Affiliate of Capital University of Medical Sciences)
, 百拇医药
Li Dongbao
(Binzhou Center Hospital)
Abstract: To investigate the effects of fluvastatin on blood lipid in inhyperlipidemic model of rabbit after iliac artery endothelial denudation and the relationship between serum lipid and intimal thickening in the study, the New Zealand white rabbits were randomized into three groups: drug-treatment group(n＝28),non-drug-treatment group(n=28)and control group(n=7). The atherosclerotic lesions were developed by endothelial denudation with balloon catheter and high dosage of cholesterol diet at the same time. The experimental animals were killed and iliac arteries were removed at 1、2、4、8 weeks after endothelial injury respectively and bloodsamples were taken at the same time. By the methods of routine HE staining, blood lipid measure and image analysis system, observed the effects of fluvastatin on the level of serum TC、TG、LDL-C and the thickness of intima and media,intima/media(I/M) ratio and the relationship between serumlipid and intimal thickening. The level of TC、TG、LDL-C in drug-treatment group was remarkably lower than that in non-drug-treatment group(P<0.05). The thickness of neointima and I/M in drug-treatment group was much thinner than that in non-drug-treatmeant group. Coefficient of linear correlation between intimal thickness and TC、TG、LDL-C were 0.911,0.892,0.942 (P<0.01) respectively.Fluvastain can lower blood lipid apparently, which may relate its effect to inhibiting excessive thickening of vascular intima.
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Key words: fluvastatin; blood lipid; neointima; hyperplasia
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是导致心血管病死亡的重要因素之一。动脉粥样硬化的病因十分复杂，研究证实,高脂血症与AS有密切关系。3-羟基-3-甲基-戊二酰酶A还原酶抑制剂(即他汀类药物)是肝细胞合成胆固醇的限速酶，若抑制此酶则内源性胆固醇生成减少。氟伐他汀(fluvastatin)是人工合成的非compactin衍生的3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶抑制剂。1998年9月至11月，我们观察了氟伐他汀对高血脂动物模型的调脂作用及对血管内膜增厚的影响。
1 材料和方法
2.0～2.5 kg雄性新西兰白兔(购于北京生物制品和药品检验实验所动物中心)63只，用随机数字表随机分为：氟伐他汀组(n=28)：髂动脉内皮剥脱+高脂饲料+氟伐他汀；非用药组(n=28)：髂动脉内皮剥脱+高脂饲料；对照组(n=7)：基础饲料，不加处理因素。
, http://www.100md.com
高脂饲料组成：胆固醇1.5 g/(d*只)+鸡蛋黄20 g/(d*只)。氟伐他汀(诺华公司提供，商品名来适可)用量为8～10 mg/(kg*d)。动脉内皮剥脱术前1周开始喂养至实验结束。三酰甘油试剂盒 ( GPO-PAP法)、 总胆固醇试剂盒(Chop-pap法)、低密度脂蛋白胆固醇试剂盒均购自北京中生生物工程技术公司。
动物模型制作：动物麻醉后暴露股动脉，逆行插入球囊导管20 cm左右(此时导管顶端达腹主动脉膈水平处)， 向球囊内注射生理盐水0.5～0.8 mL，测压约为0.606～0.808 MPa，继而缓慢回拉球囊到股动脉切口处，如此反复3次。 分别于动脉内皮剥脱术后1、2、4、8周及高脂饮食前经兔耳中央动脉取血3～5 mL，用酶法测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。每个时间点各处死动物7只，取损伤侧髂动脉用10%中性甲醛固定，脱水，包埋，制成蜡块备用。
切片常规HE染色,然后将氟伐他汀组、非用药组和对照组的动脉切片共63张输入MPIAS-500多媒体彩色病理图像分析系统，测量内膜、中膜厚度(d)。取线段以与内外弹力板垂直为准，且取内膜的最大厚度，每张切片取6个视野测定，取测定结果平均值。
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统计学方法：用SPSS统计软件进行数据分析，数据以
±s表示，2组间比较用t检验，多组间比较用F检验，两两比较用q检验，直线偏相关系数用F检验(P<0.05)。2 结果和讨论
3组家兔血清TC、TG及LDL-C的测定结果见表1。
氟伐他汀组和非用药组兔髂动脉内膜厚度、中膜厚度及内膜/中膜比值(I/M)见表2。
兔内膜厚度、中膜厚度与血脂的相关性：非用药组血清TC、TG、LDL-C变化与增生内膜厚度的偏相关系数分别为0.911、0.892、0.942(均P<0.01)，与I/M亦呈正相关(相关系数分别为0.921,0.779,0.936,均P<0.05)。
, 百拇医药
表1 氟伐他汀组、非用药组和对照组血脂浓度的变化 指标
组别
t(动脉剥脱术后)/周
0(n＝7)
1(n＝7)
2(n＝7)
4(n＝7)
8(n＝7)
c(TC)/ (mmol*L-1)
氟伐他汀组
2.31±0.21
, 百拇医药
13.61±3.74* *
18.49±2.25*
19.44±2.22*
29.28±6.73* *
非用药组
2.33±0.16
17.09±1.40
23.39±0.79
28.97±2.64
45.62±6.19
, http://www.100md.com
< c(TG)/ (mmol*L-1)
对照组
2.36±0.17
2.37±0.51
<
氟伐他汀组
0.72±0.05
0.79±0.04*
0.84±0.04*
1.08±0.15*
1.24±0.34* *
, 百拇医药
< c(LDL-C)/(mmol*L-1)
非用药组
0.74±0.06
0.92±0.07
0.99±0.04
1.39±0.22
1.57±0.18
对照组
0.76±0.05
0.75±0.06
氟伐他汀组
, 百拇医药 1.28±0.09
9.90±1.74*
14.10±1.21*
15.17±2.22*
22.08±4.47* *
非用药组
1.21±0.12
12.33±1.16
16.81±0.20
21.31±3.27
39.04±7.53
, 百拇医药
对照组
1.33±0.13
1.20±0.45
与非用药组和对照组相比*P<0.05, * *P<0.01表2 氟伐他汀组、非用药组内膜、中膜厚度及I/M比值 指标
组别
t(动脉剥脱术后)/周
1(n＝7)
2(n＝7)
4(n＝7)
8(n＝7)
d(内膜)/μm
, http://www.100md.com
氟伐他汀组
48.32±10.63* *
165.52±8.55* *
229.66±50.70* *
186.30±13.44* *
非用药组
145.36±20.47
188.27±7.32
198.49±14.02
176.52±43.89
, 百拇医药
d(中膜)/μm
氟伐他汀组
148.01±17.05
153.73±10.41*
165.98±22.78*
142.07±12.65*
<
非用药组
151.63±18.57
234.10±8.78
345.63±34.07
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477.50±91.60
I/M
氟伐他汀组
0.333±0.095* *
1.095±0.062* *
1.370±0.138* *
1.318±0.124* *
< <
非用药组
1.049±0.087
1.244±0.038
, 百拇医药
1.752±0.143
2.834±0.826
与非用药组相比*P<0.05, * *P<0.01
流行病学调查发现[1～4]，血浆TC浓度与缺血性心脏病的进展及其病死率有明确相关性。降脂治疗试验证明[5～8]，他汀类药物在降低TC、TG、LDL-C的同时，可使心肌梗死发生率降低,TC降低10%，心肌梗死发生率降低17%，心脏事件发生率降低23%。说明控制TC浓度可延缓冠心病的发生。本研究发现，氟伐他汀可明显降低血清TC、TG、LDL-C的浓度；术后1～8 h，氟伐他汀组的TC和TG均较非用药组明显降低(P<0.05，P<0.01),且随用药时间延长其降脂作用逐渐增强。术后氟伐他汀组和非用药组的LDL-C浓度逐渐增加。非用药组的LDL-C浓度明显高于氟伐他汀组(P<0.05)。兔髂动脉切片HE染色结果显示氟伐他汀组内膜、中膜厚度及I/M比均明显小于非用药组(P<0.05，P<0.01)，非用药组内膜厚度及I/M在各时间点均大于氟伐他汀组和对照组(P<0.05)。术后2、4周时非用药组中膜厚度大于氟伐他汀组和对照组(P<0.05)，而术后8周时3组无明显差异
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本研究结果证实:氟伐他汀对血脂有明显的调节作用。有效地降低血脂(特别是降低TC和LDL-C)可能是氟伐他汀抑制动脉粥样硬化发生的机制之一。 参考文献
1，Kannel W B.Serum cholesterol lipoproteins and the risk of coronary heart disease.Framimghan study.Ann Intern Med,1997,74:1
2，John C L.Declining serum total cholesterol levels among US aduts.The National health and nutrition examination surveys.JAMA,1993,269:3002
3，Lamarche B.Prevalence of dyslipidemia phenotypes in ischemicaeart disease(prospective results from the qubbec cardiovascular study).Am J Cardiol,1995,75:1189
, http://www.100md.com
4，陶寿琪.心血管病流行病学进展.中华心血管杂志,1993,21:243
5，Scandinavian Simvatatin Survival Study Group.Randomized trial of mchesterol lowering in 4444 patients with coronary heart disease.The scandinavian simvisetin survival study(4s).Lancet,1994,344:1383～1389
6，Knops R E, Kroon A A,Mot M T,et al.Long-term experience(6 years) invastatin in patients with heterozygous familial hypercholesterol aemiai.Neth J Med,1995,46:171～178
, 百拇医药
7，Pitt B,Mancini G B J,Ekllis S G,et al.Pravastatin limitation of atherosclerosis in the coronary arteries(PLACI).J Am Coll Cardiol,1994,23:131
8，Spencer C M,Barradell L B.Gemfibrozil:Areappraisal of its pharmaoncal properties and place in the management of dyslipidemia.Drugs,1996,49:982～1018
收稿日期：1999-08-27, 百拇医药