异丁司特药代动力学的研究
作者：曾凡波 崔小瑞 周漠炯 熊友玲 张华锋 王涛 刘纪寿
单位：曾凡波 崔小瑞 周漠炯 熊友玲 张华锋 王涛 (同济医科大学药学院药物研究室，武汉 430030 )；刘纪寿(广东珠海丽珠集团药物研究所，珠海 529020)
关键词：异丁司特；药代动力学；色谱法；高效液相
同济医科大学学报000306 摘要 应用高效液相色谱分离测定的方法，研究了犬 口服异丁司特的药代动力学。回收率参数>95%，检测灵敏度为1 ng/ml，变异系数<5%，口服 异丁司特后吸收迅速，24 h内基本消除，应用AIC法对异丁司特的血药浓度-时间曲线拟合, 口服后在犬体内药代动力学过程符合一室模型。
中图法分类号 R969.1， R446.1
Pharmacokinetic Studies of Ibudlast in D ogs
, 百拇医药
Zeng Fanbo Cui Xiaorui Zhou Mojiong et al
(Drug Research Institute, School of Pharmacy, Tongji Me dical University, Wuhan 430030)
Abstract By using high performance liquid chromatography (HPLC) , the pharmacokinetics was studied in dogs after oral feeding Ibudlast. The mean recoveries of Ibudlast were more than 95 %, the sensitivity was 1 ng/ml and the coefficient of variation was less than 5 %. After oral administration, Ibudlast was quickly absorbed and almost all of it was eliminated within 24 h. The blood concentration-time cure for Ibudlast was adequately fitted to one compartment model.
, http://www.100md.com
Key words Ibudlast; pharmacokinetics; chromatography
异丁司特(Ibudilast)是扩支气管药，选择性拮抗过敏反应慢反应物质(SRS-A.白三烯) 引起的支气管收缩，并能改善脑血管障碍[1]。本文拟从药代动力学方面进行实验 研究，为异丁司特临床应用提供药代动力学实验依据。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
异丁司特由广东珠海丽珠集团药物研究所合成，乙醚为上海马陆化工厂产品(AR级)。甲醇 为上海振兴化工厂产品(AR级)。CMC-Na批准文号为Q/HG 13-227-79，应用浓度为5 g /L溶液。双蒸馏水。
1.2 动物
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10只健康犬，雌雄各半，由同济医科大学实验动物学部提供，体重(10±1) kg。
1.3 实验方法
1.3.1给药及样本收集处理:用5g/LCMC-Na溶液将异丁司特配成10mg/ml混悬液备用，动物实验前12h禁食不禁水，然后经口给药，剂量为10mg/kg。给药后于15min、30min、1h、3.5h、8h、12h、24h时在犬足静脉取血(每次采血3ml)，血样置肝素化的试管中，经3500r/min离心5min，分离血浆0.5ml，加10ml乙醚(AR级)分3次提取，液氮冷冻分离乙醚层，乙醚用氮气吹干，残留物用0.1ml流动相溶解，取20μl进样。
1.3.2 高效液相色谱(HPLC)条件:用日立655型HPLC系统，色谱条件：C18反相柱 ；流动相为75∶25的甲醇水，流速：1 ml/min，检测波长318 nm，纸速0.5 cm/min,进样量 20 μl。
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1.3.3 标准曲线及质量控制：异丁司特用流动相配成系列浓度 1.9、 3.8、 7.6、 15.5、31、62 mg/L，进样测定峰面积，以浓度对峰面积作图绘制标准曲线。样品测定时， 控制稀释倍数，使其浓度落在标准曲线范围内。
1.3.4 回收率：精密取定不同量的异丁司特，用甲醇-水(10∶90)溶液配制使其异丁 司特浓度为0.1、1.0、5.0 mg/L,然后各精确取1 ml加犬空白血浆至0.5 ml，按检样方 法处理，HPLC测定其峰面积代入标准曲线方程计算浓度和回收率。
1.3.5 变异系数：取异丁司特标准液(10 mg/L) 1 ml，置10 ml容量瓶中，在氮气中 蒸发至干，加入空白血浆至刻度，充分摇匀，然后进行分装，放入冰箱中冰冻。待做药动参 数测定时按上法处理，同日内处理测定日内变异系数。
1.4 数据处理
, 百拇医药
犬经口给予异丁司特的血药浓度-时间数据，应用AIC法[2]拟合模室，采用中国数 学药理学会编制的3P97药代动力学程序包，计算有关药代动力学参数。
2 结果
2.1 HPLC分离情况
空白血浆与犬口服异丁司特后血浆的HPLC分离效果好，异丁司特的HPLC分离保留时间为10 min，与其它杂质峰无干扰，属基线分离，本条件下异丁司特检测灵敏度为1 ng/ml。
2.2 标准曲线及质量控制
应用本法测定异丁司特浓度在1.0～60 mg/L范围时线性关系良好，以浓度与峰面积绘成曲 线，其标准曲线方程为：Y=1036.34+1082.43X,r=0.999。同一浓度样品在 同一条件下，不同时间所测样品的日间变异系数(CV%)为1.58%。
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2.3 回收率
浓度为0.1 mg/L(n=3)、1.0 mg/L(n=3)、5.0 mg/L(n=3)的血浆中，异丁司 特经乙醚提取后 的回收率分别为(95.33±1.52)%和(97.63±1.01)%,(96.34±0.59)%;可见异丁司 特用犬血浆稀释后回收率均在95%以上，平均变异系数(CV%)在0.62～1.6之间。
2.4 血药浓度和药代动力学参数
犬经口给异丁司特后在体内吸收迅速，血药浓度-时间曲线均有吸收和消除两相(图1)， 应用AIC法[2]将所测血药-时间数据，分别用单室和双室模型拟合，结果单室AIC 值为43.47,双室AIC值为114.65。根据两种AIC值判断，犬口服异丁司特药代动力学过程符合一室开放模型，W=1时计算各种参数。其主要药代动力学参数为T1/2 (Ka) 0.6 h、 t1/2(ke)3.32 h、T(peak)1.45 h、C(max)9.68 μg/ml 、AUC 57.31 μg./(h.ml)、CL/F(s) 1.09 mg/h.(μg/ml)、V/F(c)4.41(mg)/(μg .ml)。
, 百拇医药
图1 犬口服异丁司特后血药浓度-时间 曲线(n=10)
3 讨论
异丁司特为扩支气管药，在日本1989年上市，本实验应用HPLC检测方法，结果可见应用HP LC方法的灵敏度高(最小检出量为1 ng/ml)，分离效果好，在异丁司特出峰时间无杂质峰 干扰，稳定性强(日间变异系数小于5%)的特点，异丁司特在犬口服T1/2(Ka)值为 0.6 h，表明其吸收迅速，达峰时间为1.45 h，有利于及时发挥治疗作用从消除半衰期和 清除率来看，异丁司特消除较快，24 h后其血药浓度仅为(0.1±0.015) μg/ml，结果与 文献报道[3]中应用同位素放射示踪法测定的结果一致，表明该 药无明显蓄积作用 ，避免了药物蓄积所致的不良反应。
(本工作得到了药剂教研室邱昌贵副教授的支持，特此致谢)
, 百拇医药
曾凡波，男，1951年生，副教授
参 考 文 献
1，王泽民主编. 当代结构药物全集. 北京:科学技术出版社, 1996. 5244～52 45
2，奚念珠主编. 药剂学，第3版. 北京：人民卫生出版社， 1996. 502～504
3，高木皓一，远藤恭平，永津芳雄. 3-Isobutyryl-2-isopropylpyrazolo [1,5-a]pyridine(KC-404)の体内动态に关ぉる研究(第1)ラシト,ィヌぉょびサ にぉける吸收分布,排泄. 应用药理, 1985, 30(6)： 967
(1999-01-28 收稿), 百拇医药
单位：曾凡波 崔小瑞 周漠炯 熊友玲 张华锋 王涛 (同济医科大学药学院药物研究室，武汉 430030 )；刘纪寿(广东珠海丽珠集团药物研究所，珠海 529020)
关键词：异丁司特；药代动力学；色谱法；高效液相
同济医科大学学报000306 摘要 应用高效液相色谱分离测定的方法，研究了犬 口服异丁司特的药代动力学。回收率参数>95%，检测灵敏度为1 ng/ml，变异系数<5%，口服 异丁司特后吸收迅速，24 h内基本消除，应用AIC法对异丁司特的血药浓度-时间曲线拟合, 口服后在犬体内药代动力学过程符合一室模型。
中图法分类号 R969.1， R446.1
Pharmacokinetic Studies of Ibudlast in D ogs
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Zeng Fanbo Cui Xiaorui Zhou Mojiong et al
(Drug Research Institute, School of Pharmacy, Tongji Me dical University, Wuhan 430030)
Abstract By using high performance liquid chromatography (HPLC) , the pharmacokinetics was studied in dogs after oral feeding Ibudlast. The mean recoveries of Ibudlast were more than 95 %, the sensitivity was 1 ng/ml and the coefficient of variation was less than 5 %. After oral administration, Ibudlast was quickly absorbed and almost all of it was eliminated within 24 h. The blood concentration-time cure for Ibudlast was adequately fitted to one compartment model.
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Key words Ibudlast; pharmacokinetics; chromatography
异丁司特(Ibudilast)是扩支气管药，选择性拮抗过敏反应慢反应物质(SRS-A.白三烯) 引起的支气管收缩，并能改善脑血管障碍[1]。本文拟从药代动力学方面进行实验 研究，为异丁司特临床应用提供药代动力学实验依据。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
异丁司特由广东珠海丽珠集团药物研究所合成，乙醚为上海马陆化工厂产品(AR级)。甲醇 为上海振兴化工厂产品(AR级)。CMC-Na批准文号为Q/HG 13-227-79，应用浓度为5 g /L溶液。双蒸馏水。
1.2 动物
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10只健康犬，雌雄各半，由同济医科大学实验动物学部提供，体重(10±1) kg。
1.3 实验方法
1.3.1给药及样本收集处理:用5g/LCMC-Na溶液将异丁司特配成10mg/ml混悬液备用，动物实验前12h禁食不禁水，然后经口给药，剂量为10mg/kg。给药后于15min、30min、1h、3.5h、8h、12h、24h时在犬足静脉取血(每次采血3ml)，血样置肝素化的试管中，经3500r/min离心5min，分离血浆0.5ml，加10ml乙醚(AR级)分3次提取，液氮冷冻分离乙醚层，乙醚用氮气吹干，残留物用0.1ml流动相溶解，取20μl进样。
1.3.2 高效液相色谱(HPLC)条件:用日立655型HPLC系统，色谱条件：C18反相柱 ；流动相为75∶25的甲醇水，流速：1 ml/min，检测波长318 nm，纸速0.5 cm/min,进样量 20 μl。
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1.3.3 标准曲线及质量控制：异丁司特用流动相配成系列浓度 1.9、 3.8、 7.6、 15.5、31、62 mg/L，进样测定峰面积，以浓度对峰面积作图绘制标准曲线。样品测定时， 控制稀释倍数，使其浓度落在标准曲线范围内。
1.3.4 回收率：精密取定不同量的异丁司特，用甲醇-水(10∶90)溶液配制使其异丁 司特浓度为0.1、1.0、5.0 mg/L,然后各精确取1 ml加犬空白血浆至0.5 ml，按检样方 法处理，HPLC测定其峰面积代入标准曲线方程计算浓度和回收率。
1.3.5 变异系数：取异丁司特标准液(10 mg/L) 1 ml，置10 ml容量瓶中，在氮气中 蒸发至干，加入空白血浆至刻度，充分摇匀，然后进行分装，放入冰箱中冰冻。待做药动参 数测定时按上法处理，同日内处理测定日内变异系数。
1.4 数据处理
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犬经口给予异丁司特的血药浓度-时间数据，应用AIC法[2]拟合模室，采用中国数 学药理学会编制的3P97药代动力学程序包，计算有关药代动力学参数。
2 结果
2.1 HPLC分离情况
空白血浆与犬口服异丁司特后血浆的HPLC分离效果好，异丁司特的HPLC分离保留时间为10 min，与其它杂质峰无干扰，属基线分离，本条件下异丁司特检测灵敏度为1 ng/ml。
2.2 标准曲线及质量控制
应用本法测定异丁司特浓度在1.0～60 mg/L范围时线性关系良好，以浓度与峰面积绘成曲 线，其标准曲线方程为：Y=1036.34+1082.43X,r=0.999。同一浓度样品在 同一条件下，不同时间所测样品的日间变异系数(CV%)为1.58%。
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2.3 回收率
浓度为0.1 mg/L(n=3)、1.0 mg/L(n=3)、5.0 mg/L(n=3)的血浆中，异丁司 特经乙醚提取后 的回收率分别为(95.33±1.52)%和(97.63±1.01)%,(96.34±0.59)%;可见异丁司 特用犬血浆稀释后回收率均在95%以上，平均变异系数(CV%)在0.62～1.6之间。
2.4 血药浓度和药代动力学参数
犬经口给异丁司特后在体内吸收迅速，血药浓度-时间曲线均有吸收和消除两相(图1)， 应用AIC法[2]将所测血药-时间数据，分别用单室和双室模型拟合，结果单室AIC 值为43.47,双室AIC值为114.65。根据两种AIC值判断，犬口服异丁司特药代动力学过程符合一室开放模型，W=1时计算各种参数。其主要药代动力学参数为T1/2 (Ka) 0.6 h、 t1/2(ke)3.32 h、T(peak)1.45 h、C(max)9.68 μg/ml 、AUC 57.31 μg./(h.ml)、CL/F(s) 1.09 mg/h.(μg/ml)、V/F(c)4.41(mg)/(μg .ml)。
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图1 犬口服异丁司特后血药浓度-时间 曲线(n=10)
3 讨论
异丁司特为扩支气管药，在日本1989年上市，本实验应用HPLC检测方法，结果可见应用HP LC方法的灵敏度高(最小检出量为1 ng/ml)，分离效果好，在异丁司特出峰时间无杂质峰 干扰，稳定性强(日间变异系数小于5%)的特点，异丁司特在犬口服T1/2(Ka)值为 0.6 h，表明其吸收迅速，达峰时间为1.45 h，有利于及时发挥治疗作用从消除半衰期和 清除率来看，异丁司特消除较快，24 h后其血药浓度仅为(0.1±0.015) μg/ml，结果与 文献报道[3]中应用同位素放射示踪法测定的结果一致，表明该 药无明显蓄积作用 ，避免了药物蓄积所致的不良反应。
(本工作得到了药剂教研室邱昌贵副教授的支持，特此致谢)
, 百拇医药
曾凡波，男，1951年生，副教授
参 考 文 献
1，王泽民主编. 当代结构药物全集. 北京:科学技术出版社, 1996. 5244～52 45
2，奚念珠主编. 药剂学，第3版. 北京：人民卫生出版社， 1996. 502～504
3，高木皓一，远藤恭平，永津芳雄. 3-Isobutyryl-2-isopropylpyrazolo [1,5-a]pyridine(KC-404)の体内动态に关ぉる研究(第1)ラシト,ィヌぉょびサ にぉける吸收分布,排泄. 应用药理, 1985, 30(6)： 967
(1999-01-28 收稿), 百拇医药