恶性肿瘤患者血浆凝血因子Ⅶ和UPA及PAI-1的变化
作者：孙达春 李小亮 何志国 张爱华
单位：孙达春 (珠海市人民医院 暨南大学医学院第三附属医院 珠海市，519000)；李小亮 (珠海市人民医院 暨南大学医学院第三附属医院 珠海市，519000)；何志国 (珠海市人民医院 暨南大学医学院第三附属医院 珠海市，519000)；张爱华 (珠海市人民医院 暨南大学医学院第三附属医院 珠海市，519000)
关键词：恶性肿瘤；因子Ⅶ；尿激酶；纤溶酶原灭活剂
临床血液学杂志000302 摘要 目的：研究血液中凝血因子Ⅶ，尿激酶型纤溶酶原激活物(UPA)和抑制物-1(PAI-1)水平对恶性肿瘤的影响。方法：FⅦa采用重组可溶性组织因子(rSTF)一期法，FⅦ：C采用经典一期法，FⅦ：Ag、UPA和PAI-1采用ELISA法测定。结果：①肿瘤组FⅦ：Ag、FⅦa、UPA和PAI-1较对照组显著升高(P<0.01～0.001)。②中、晚期肿瘤组FⅦa、UPA较早期组升高；已转移组FⅦa、UPA和PAI-1 较未转移组高；死亡组全部指标较存活组显著升高(P<0.05～0.01)。③FⅦa与UPA、PAI-1水平呈正相关。结论：恶性肿瘤患者血液中FⅦ：Ag、FⅦa、UPA和PAI-1显著升高，后三者为肿瘤进展和转移的独立危险因素。
, 百拇医药
Clinical research of plasma coagulation FⅦ, UPA and
PAI-1 level in malignant tumor patients
SUN Da-chun
(The People′s Hospital of Zhuhai,The Third Affiliated Hospital of JNUMC, Zhuhai 519000)
LI Xiao-liang
(The People′s Hospital of Zhuhai,The Third Affiliated Hospital of JNUMC, Zhuhai 519000)
, 百拇医药 HE Zhi-guo
(The People′s Hospital of Zhuhai,The Third Affiliated Hospital of JNUMC, Zhuhai 519000)
ZHANG Ai-hua
(The People′s Hospital of Zhuhai,The Third Affiliated Hospital of JNUMC, Zhuhai 519000)
Abstract Objective:To study the level of plasma coagulation FⅦ, UPA and PAI-1 in patients of malignant tumor.Methods:FⅦa was determinated by one-phase clotting method using recombinant soluble tissue fator (rSTF). FⅦ:C was determnated by classic one phase clotting method, FⅦ:Ag, UPA and PAI-1 were method by ELISA.Results:①FⅦ:Ag, FⅦa,UPA and PAI-1 level in malignent tumor patients were higher than those in normal group (P<0.01～0.001). ②FⅦa、UPA level in malignent tumor patients of median and later period were higher than early period.FⅦa,UPA and PAI-1 in metastasied group were higher than unmetastasized group.These four indexs n death group were higher than survived group (P<0.05～0.01).③FⅦa level positively correlated with UPA and PAI-1 level in tumor group.Conclusion:The plasma level of FⅦ:Ag,FⅦa, UPA and PAI-1 in patients of malignance tumor have a significant rise than normal subjects.The latter three indexs are independent risk factors of tumor deteriorating and metastasis.
, 百拇医药
Key words Malignant tumor Factor Ⅶ Uokinase Plasminog inactivators
恶性肿瘤患者常常因出、凝血功能异常而导致病理性高凝状态(hypercoagulable state,HCS)，后者与肿瘤的病情和预后有密切关系，因此，血浆FⅦ水平与恶性肿瘤的关系引人注目。最新研究还表明〔1～2〕，尿激酶型纤溶酶原激活物(UPA)介导的纤维蛋白溶解参入了肿瘤的浸润和转移。为研究FⅦ、UPA和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)对肿瘤的影响，我们对50例恶性肿瘤患者血浆FⅦ抗原(FⅦ：Ag)、FⅦ凝血活性(FⅦ：C)、活化的FⅦ(FⅦa)和UPA及PAI-1水平进行测定分析，报道如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象
恶性肿瘤组：50例，男31例、女19例。平均年龄50.1(17～78)岁。其中肺癌16例、肠癌12例、乳腺癌9例、淋巴癌7例、其它6例，全部病例经病理或细胞学诊断。正常对照组：30例，为健康正常人。男18例、女12例，平均年龄48.6(18～68)岁。均排除心、脑、肝、肾疾病及糖尿病。两组人员受试前2周均未吸烟或使用抗凝溶栓剂。
, http://www.100md.com
1.2 研究方法
标本处理：采集空腹静脉血(枸椽酸钠抗凝)，12 ℃条件下，3000 r/min离心10 min，血浆分装后置于-70 ℃冰箱待检。检测前标本立即在37 ℃水浴中融化15 min，避免FⅦ冷激活。主要试剂：FⅦ：Ag检测试剂盒，FⅦa检测试剂盒，乏凝血因子Ⅶ计算血浆(Stago公司)。乏因子Ⅶ血浆、人脑含钙组织凝血活酶(Helena BioSciences)。UPA检测试剂盒(ADI公司)，PAI-1检测试剂盒(福建太阳公司)。检测方法：FⅦ：C测定采用经典一期法，FⅦa测定采用重组可溶性组织因子(rSTF)一期法〔3〕，FⅦ：C、FⅦa均在ACL-200型全自动血凝检测仪上自动检测。FⅦ：Ag、UPA、PAI-1均采用ELISA法，在ELX-800型全自动酶标比色仪上自动检测。
1.3 统计方法
组间比较采用t检验，指标之间相关性以相关系数r描述。
, 百拇医药
2 结果
恶性肿瘤患者血浆FⅦ、UPA和PAI-1变化见表1。肿瘤组FⅦ：Ag、FⅦa、UPA和PAI-1显著高于对照组(P<0.01～0.001)。血浆FⅦ、UPA和PAI-1与患者病情的关系见表2。中、晚期组FⅦa、UPA较早期组高；已转移组FⅦa、UPA和PAI-1较未转移组，死亡组较存活组，均显著升高(P<0.05～0.01)。血浆FⅦ与UPA、PAI-1水平相关性比较，FⅦa与UPA、PAI-1之间呈正相关(r=0.37，P<0.01；r=0.29，P<0.05)；FⅦ：Ag、FⅦ：C与UPA、PAI-1之间均无相关性。
表1 恶性肿瘤患者血浆FⅦ与UPA、PAI-1的变化
±s 组别
例数
FⅦ:Ag/%
, 百拇医药
FⅦ:C/%
FⅦa/μg.L-1
UPA/μg.L-1
PAI-1/μg.L-1
正常对照组
30
75.42±17.72
115.41±31.64
2.83±2.98
0.38±0.18
, 百拇医药
9.71±3.37
恶性肿瘤组
50
155.10±37.122)
127.58±42.31
4.45±1.812)
0.56±0.271)
12.1±3.781)
与正常对照组比较 1) P<0.01 2) P<0.001表2 恶性肿瘤患者血浆FⅦ、UPA、PAI-1与病情的关系±s 组别
, 百拇医药
例数
FⅦ:Ag/%
FⅦ:C/%
FⅦa/μg.L-1
UPA/μg.L-1
PAI-1/μg.L-1
早期
8
142.31±24.11
121.31±28.11
, 百拇医药 3.41±1.27
0.39±0.17
10.82±3.11
中、晚期
42
157.36±32.37
128.80±39.47
4.64±1.681)
0.58±0.241)
12.38±3.87
未转移
, 百拇医药
29
148.81±30.79
123.46±32.41
3.98±1.22
0.46±0.19
9.37±3.93
已转移
21
163.94±34.21
133.22±35.22
5.08±1.532)
, http://www.100md.com 0.67±0.202)
15.42±5.112)
2周内存活
44
150.47±31.48
124.56±37.37
4.23±1.49
0.52±0.28
11.36±3.71
2周内死亡
6
, http://www.100md.com 189.55±34.121)
149.87±23.161)
5.97±1.671)
0.77±0.142)
17.71±3.882)
与各自对照比较 1) P<0.05 2) P<0.013 讨论
人血浆中FⅦ主要以酶原形式存在，而活性形式的FⅦa含量仅约1%。近年来，FⅦ作为外源性凝血途径的第一蛋白酶，被视为HCS的危险因子，FⅦ和(或)FⅦa水平与HCS和血栓性疾病之间相关性的研究〔4〕在国外受到广泛重视。临床和实验证明，HCS是恶性肿瘤的常见病理过程，因此有理由推测FⅦ水平可能与恶性肿瘤，特别是肿瘤的转移有密切关系。
, 百拇医药
UPA是一种丝氨酸蛋白水解酶，由肿瘤细胞或其它细胞分泌，活性UPA可以通过对纤溶酶的激活而降解胞外基质和基底膜〔1，2〕，从而促进肿瘤细胞的侵袭和转移。PAI-1是血浆中UPA的重要生理抑制剂，对UPA介导的纤维蛋白溶解起调节作用〔5〕。
本文表1结果显示恶性肿瘤患者血液中除FⅦ：C外，其余指标均显著高于对照组(P<0.01～0.001)，揭示肿瘤患者存在明显的凝血和纤溶激活状态。在FⅦ：Ag和FⅦa高水平条件下，当有诱发因素存在时(如内皮受损、组织因子释放)，即可启动凝血反应。UPA和PAI-1水平增高提示在血液HCS和血栓形成基础上，体内可能形成一个高效的纤溶活化系统，进而通过参入胞外基质和基底膜降解，促进肿瘤细胞的侵袭和转移。与文献报道〔6〕冠心病患者FⅦ：C显著升高所不同的是，本组病例FⅦ：C升高并不显著，其原因考虑因在FⅦ：C测定过程中，部分被激活为FⅦa所致〔7〕。
, 百拇医药
表2结果表明中、晚期组FⅦa、UPA，已转移组FⅦa、UPA和PAI-1，较各自对照显著升高。说明肿瘤患者凝血和纤溶的激活程度与病情进展密切相关。并且上述指标间相关性比较显示，FⅦa、UPA和PAI-1均为恶性肿瘤进展和转移的独立危险因素。死亡组5项指标均升高，提示肿瘤患者凝血和纤溶过度激活，预示其病情危笃，已届终末期。由此可见，测定血液FⅦ和UPA及PAI-1水平，不仅对恶性肿瘤的诊断具有参考价值，并且有利于对肿瘤病情和预后的判定，从而为及时合理的治疗提供依据。
参考文献
1，Duggan C, Maguire T, Mcdermott E, et al. Urokinase plasminogen activator and urokinase plasminogen activator receptor in breast cancer.Int J Cancer, 1995,61:597～600
, 百拇医药
2，Fem M, Bendahi Po, Borg A, et al, Urokinase plasminogen activator, a strong independent prognostic factor in breast cancer,onalyset in steroid receptor cytosols with a luminometric immunoassay. Europ J Cancer,1996,32A:793～801
3，Morrissey J H, Macik B G, Neuenschuander P F, et al. Quantitation of activated factor Ⅶ levels in plasma using a tissue factor mutant selectively deficient in promofing factor Ⅶ activation. Blood,1993,81:734～744
, 百拇医药
4，Morrissey J H. Plasma factor Ⅶa:Meaurement and protential clinical signisicance.Haemostesis,1996,26:66～71
5，Grondahl-Hansen J, Christensen I J, Rosenguist C, et al. High levels of urokinase-type plasminogen activator and its inhibitor PAI-1 in cytosolic extracts of breast carcinoma are associated with poor prognosis. Cancer Res, 1993,53:2513～2521
6，Ruddock V, Meade T W. Factor Ⅶ activity and ischaemic heart disease:Fatal and nonfatal events.Q J Med,1994,87:403～408
7，杨延泽，廖春梅综述.凝血因子FⅦ研究新进展.国外医学生理、病理科学与临床分册，1997,17:240～243
收稿：2000-01-08, 百拇医药
单位：孙达春 (珠海市人民医院 暨南大学医学院第三附属医院 珠海市，519000)；李小亮 (珠海市人民医院 暨南大学医学院第三附属医院 珠海市，519000)；何志国 (珠海市人民医院 暨南大学医学院第三附属医院 珠海市，519000)；张爱华 (珠海市人民医院 暨南大学医学院第三附属医院 珠海市，519000)
关键词：恶性肿瘤；因子Ⅶ；尿激酶；纤溶酶原灭活剂
临床血液学杂志000302 摘要 目的：研究血液中凝血因子Ⅶ，尿激酶型纤溶酶原激活物(UPA)和抑制物-1(PAI-1)水平对恶性肿瘤的影响。方法：FⅦa采用重组可溶性组织因子(rSTF)一期法，FⅦ：C采用经典一期法，FⅦ：Ag、UPA和PAI-1采用ELISA法测定。结果：①肿瘤组FⅦ：Ag、FⅦa、UPA和PAI-1较对照组显著升高(P<0.01～0.001)。②中、晚期肿瘤组FⅦa、UPA较早期组升高；已转移组FⅦa、UPA和PAI-1 较未转移组高；死亡组全部指标较存活组显著升高(P<0.05～0.01)。③FⅦa与UPA、PAI-1水平呈正相关。结论：恶性肿瘤患者血液中FⅦ：Ag、FⅦa、UPA和PAI-1显著升高，后三者为肿瘤进展和转移的独立危险因素。
, 百拇医药
Clinical research of plasma coagulation FⅦ, UPA and
PAI-1 level in malignant tumor patients
SUN Da-chun
(The People′s Hospital of Zhuhai,The Third Affiliated Hospital of JNUMC, Zhuhai 519000)
LI Xiao-liang
(The People′s Hospital of Zhuhai,The Third Affiliated Hospital of JNUMC, Zhuhai 519000)
, 百拇医药 HE Zhi-guo
(The People′s Hospital of Zhuhai,The Third Affiliated Hospital of JNUMC, Zhuhai 519000)
ZHANG Ai-hua
(The People′s Hospital of Zhuhai,The Third Affiliated Hospital of JNUMC, Zhuhai 519000)
Abstract Objective:To study the level of plasma coagulation FⅦ, UPA and PAI-1 in patients of malignant tumor.Methods:FⅦa was determinated by one-phase clotting method using recombinant soluble tissue fator (rSTF). FⅦ:C was determnated by classic one phase clotting method, FⅦ:Ag, UPA and PAI-1 were method by ELISA.Results:①FⅦ:Ag, FⅦa,UPA and PAI-1 level in malignent tumor patients were higher than those in normal group (P<0.01～0.001). ②FⅦa、UPA level in malignent tumor patients of median and later period were higher than early period.FⅦa,UPA and PAI-1 in metastasied group were higher than unmetastasized group.These four indexs n death group were higher than survived group (P<0.05～0.01).③FⅦa level positively correlated with UPA and PAI-1 level in tumor group.Conclusion:The plasma level of FⅦ:Ag,FⅦa, UPA and PAI-1 in patients of malignance tumor have a significant rise than normal subjects.The latter three indexs are independent risk factors of tumor deteriorating and metastasis.
, 百拇医药
Key words Malignant tumor Factor Ⅶ Uokinase Plasminog inactivators
恶性肿瘤患者常常因出、凝血功能异常而导致病理性高凝状态(hypercoagulable state,HCS)，后者与肿瘤的病情和预后有密切关系，因此，血浆FⅦ水平与恶性肿瘤的关系引人注目。最新研究还表明〔1～2〕，尿激酶型纤溶酶原激活物(UPA)介导的纤维蛋白溶解参入了肿瘤的浸润和转移。为研究FⅦ、UPA和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)对肿瘤的影响，我们对50例恶性肿瘤患者血浆FⅦ抗原(FⅦ：Ag)、FⅦ凝血活性(FⅦ：C)、活化的FⅦ(FⅦa)和UPA及PAI-1水平进行测定分析，报道如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象
恶性肿瘤组：50例，男31例、女19例。平均年龄50.1(17～78)岁。其中肺癌16例、肠癌12例、乳腺癌9例、淋巴癌7例、其它6例，全部病例经病理或细胞学诊断。正常对照组：30例，为健康正常人。男18例、女12例，平均年龄48.6(18～68)岁。均排除心、脑、肝、肾疾病及糖尿病。两组人员受试前2周均未吸烟或使用抗凝溶栓剂。
, http://www.100md.com
1.2 研究方法
标本处理：采集空腹静脉血(枸椽酸钠抗凝)，12 ℃条件下，3000 r/min离心10 min，血浆分装后置于-70 ℃冰箱待检。检测前标本立即在37 ℃水浴中融化15 min，避免FⅦ冷激活。主要试剂：FⅦ：Ag检测试剂盒，FⅦa检测试剂盒，乏凝血因子Ⅶ计算血浆(Stago公司)。乏因子Ⅶ血浆、人脑含钙组织凝血活酶(Helena BioSciences)。UPA检测试剂盒(ADI公司)，PAI-1检测试剂盒(福建太阳公司)。检测方法：FⅦ：C测定采用经典一期法，FⅦa测定采用重组可溶性组织因子(rSTF)一期法〔3〕，FⅦ：C、FⅦa均在ACL-200型全自动血凝检测仪上自动检测。FⅦ：Ag、UPA、PAI-1均采用ELISA法，在ELX-800型全自动酶标比色仪上自动检测。
1.3 统计方法
组间比较采用t检验，指标之间相关性以相关系数r描述。
, 百拇医药
2 结果
恶性肿瘤患者血浆FⅦ、UPA和PAI-1变化见表1。肿瘤组FⅦ：Ag、FⅦa、UPA和PAI-1显著高于对照组(P<0.01～0.001)。血浆FⅦ、UPA和PAI-1与患者病情的关系见表2。中、晚期组FⅦa、UPA较早期组高；已转移组FⅦa、UPA和PAI-1较未转移组，死亡组较存活组，均显著升高(P<0.05～0.01)。血浆FⅦ与UPA、PAI-1水平相关性比较，FⅦa与UPA、PAI-1之间呈正相关(r=0.37，P<0.01；r=0.29，P<0.05)；FⅦ：Ag、FⅦ：C与UPA、PAI-1之间均无相关性。
表1 恶性肿瘤患者血浆FⅦ与UPA、PAI-1的变化
±s 组别例数
FⅦ:Ag/%
, 百拇医药
FⅦ:C/%
FⅦa/μg.L-1
UPA/μg.L-1
PAI-1/μg.L-1
正常对照组
30
75.42±17.72
115.41±31.64
2.83±2.98
0.38±0.18
, 百拇医药
9.71±3.37
恶性肿瘤组
50
155.10±37.122)
127.58±42.31
4.45±1.812)
0.56±0.271)
12.1±3.781)
与正常对照组比较 1) P<0.01 2) P<0.001表2 恶性肿瘤患者血浆FⅦ、UPA、PAI-1与病情的关系
±s 组别, 百拇医药
例数
FⅦ:Ag/%
FⅦ:C/%
FⅦa/μg.L-1
UPA/μg.L-1
PAI-1/μg.L-1
早期
8
142.31±24.11
121.31±28.11
, 百拇医药 3.41±1.27
0.39±0.17
10.82±3.11
中、晚期
42
157.36±32.37
128.80±39.47
4.64±1.681)
0.58±0.241)
12.38±3.87
未转移
, 百拇医药
29
148.81±30.79
123.46±32.41
3.98±1.22
0.46±0.19
9.37±3.93
已转移
21
163.94±34.21
133.22±35.22
5.08±1.532)
, http://www.100md.com 0.67±0.202)
15.42±5.112)
2周内存活
44
150.47±31.48
124.56±37.37
4.23±1.49
0.52±0.28
11.36±3.71
2周内死亡
6
, http://www.100md.com 189.55±34.121)
149.87±23.161)
5.97±1.671)
0.77±0.142)
17.71±3.882)
与各自对照比较 1) P<0.05 2) P<0.013 讨论
人血浆中FⅦ主要以酶原形式存在，而活性形式的FⅦa含量仅约1%。近年来，FⅦ作为外源性凝血途径的第一蛋白酶，被视为HCS的危险因子，FⅦ和(或)FⅦa水平与HCS和血栓性疾病之间相关性的研究〔4〕在国外受到广泛重视。临床和实验证明，HCS是恶性肿瘤的常见病理过程，因此有理由推测FⅦ水平可能与恶性肿瘤，特别是肿瘤的转移有密切关系。
, 百拇医药
UPA是一种丝氨酸蛋白水解酶，由肿瘤细胞或其它细胞分泌，活性UPA可以通过对纤溶酶的激活而降解胞外基质和基底膜〔1，2〕，从而促进肿瘤细胞的侵袭和转移。PAI-1是血浆中UPA的重要生理抑制剂，对UPA介导的纤维蛋白溶解起调节作用〔5〕。
本文表1结果显示恶性肿瘤患者血液中除FⅦ：C外，其余指标均显著高于对照组(P<0.01～0.001)，揭示肿瘤患者存在明显的凝血和纤溶激活状态。在FⅦ：Ag和FⅦa高水平条件下，当有诱发因素存在时(如内皮受损、组织因子释放)，即可启动凝血反应。UPA和PAI-1水平增高提示在血液HCS和血栓形成基础上，体内可能形成一个高效的纤溶活化系统，进而通过参入胞外基质和基底膜降解，促进肿瘤细胞的侵袭和转移。与文献报道〔6〕冠心病患者FⅦ：C显著升高所不同的是，本组病例FⅦ：C升高并不显著，其原因考虑因在FⅦ：C测定过程中，部分被激活为FⅦa所致〔7〕。
, 百拇医药
表2结果表明中、晚期组FⅦa、UPA，已转移组FⅦa、UPA和PAI-1，较各自对照显著升高。说明肿瘤患者凝血和纤溶的激活程度与病情进展密切相关。并且上述指标间相关性比较显示，FⅦa、UPA和PAI-1均为恶性肿瘤进展和转移的独立危险因素。死亡组5项指标均升高，提示肿瘤患者凝血和纤溶过度激活，预示其病情危笃，已届终末期。由此可见，测定血液FⅦ和UPA及PAI-1水平，不仅对恶性肿瘤的诊断具有参考价值，并且有利于对肿瘤病情和预后的判定，从而为及时合理的治疗提供依据。
参考文献
1，Duggan C, Maguire T, Mcdermott E, et al. Urokinase plasminogen activator and urokinase plasminogen activator receptor in breast cancer.Int J Cancer, 1995,61:597～600
, 百拇医药
2，Fem M, Bendahi Po, Borg A, et al, Urokinase plasminogen activator, a strong independent prognostic factor in breast cancer,onalyset in steroid receptor cytosols with a luminometric immunoassay. Europ J Cancer,1996,32A:793～801
3，Morrissey J H, Macik B G, Neuenschuander P F, et al. Quantitation of activated factor Ⅶ levels in plasma using a tissue factor mutant selectively deficient in promofing factor Ⅶ activation. Blood,1993,81:734～744
, 百拇医药
4，Morrissey J H. Plasma factor Ⅶa:Meaurement and protential clinical signisicance.Haemostesis,1996,26:66～71
5，Grondahl-Hansen J, Christensen I J, Rosenguist C, et al. High levels of urokinase-type plasminogen activator and its inhibitor PAI-1 in cytosolic extracts of breast carcinoma are associated with poor prognosis. Cancer Res, 1993,53:2513～2521
6，Ruddock V, Meade T W. Factor Ⅶ activity and ischaemic heart disease:Fatal and nonfatal events.Q J Med,1994,87:403～408
7，杨延泽，廖春梅综述.凝血因子FⅦ研究新进展.国外医学生理、病理科学与临床分册，1997,17:240～243
收稿：2000-01-08, 百拇医药