北柴胡中黄酮类化合物的分离鉴定
作者：梁鸿 赵玉英 崔艳君 刘沁舡
单位：北京大学药学院天然药化研究室, 北京 100083
关键词：柴胡；化学；黄酮类；分离和提纯；色原酮酸
北京医科大学学报000308 [摘 要] 目的：研究北柴胡的化学成分。方法：用色谱法和波谱解析方法对北柴胡根的化学成分进行分离和结构鉴定。结果：共得到8个化合物：柴胡色原酮酸(1)，芦丁(2)，槲皮素(3)，异鼠李素(4)，异鼠李素3-O-葡萄糖甙(5)，葛根素(6)，7,4′-二羟基-异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖甙(7),色氨酸(8)。结论：化合物1为新的天然产物，其余化合物均为首次从北柴胡中获得。
[中图分类号] R932.41 [文献标识码] A
[文章编号] 1000-1530(2000)03-0223-03
, http://www.100md.com
Flavonoids from the roots of Bupleurum chinense DC.
LIANG Hong, ZHAO Yu-Ying, CUI Yan-Jun, LIU Qin-Xiang
(Division of Natural Medicinal Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences，Peking University, Beijing 100083)
ABSTRACT Objective: To study the chemical constituents of the roots of Bupleurum chinense DC. Methods: Chemical compounds were isolated and their structures were identified by the repeated chromatographies and spectral analyses. Results: Eight compounds were obtained as saikochromic acid (1), rutin (2), quercetin(3), isorhamnetin(4), isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside(5), puerarin(6), 7,4′-dihydroxy-isoflavone 7-O-β-D-glucoside(7) and tryptophane(8). Conclusion: Compound 1 was a new natural product, and compounds 2-7 were obtained from the plant for the first time.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Bupleurum chinense/chem； Flavones/isol; Saikochromic acid▲
柴胡为伞形科(Umbelliferae)柴胡属(Bupleurum)植物。具疏散退热，舒肝升阳之功效，主治感冒发热，寒热往来，疟疾，胸肋胀痛，月经不调及子宫脱垂等症。现代药理研究证明柴胡具有解热、镇痛、镇静、抗炎、免疫增强、保肝利胆、抗菌、抗病毒及抗肿瘤等作用。全世界有柴胡属植物200种，我国已报道有42种，17变种及7变形(潘胜利等。中国的药用柴胡及其药理作用的研究。第三届中药研讨会论文摘要集，上海，1996，27-28)。《中华人民共和国药典》 (1995年版) 规定北柴胡Bupleurum chinense DC. 和南柴胡B. scorzonerifolium Willd为药用柴胡。国内、外学者对北柴胡的药理活性研究较多，化学方面仅对北柴胡挥发油成分及北柴胡皂甙含量测定有报道。我们对北柴胡化学成分进行了较系统的研究，从北柴胡根的95%(体积分数)乙醇提取物中分离得到了皂甙、黄酮、色原酮、有机酸等成分[1～5]，现又分离鉴定了8个化合物，分别为：柴胡色原酮酸(1)，芦丁(2)，槲皮素(3)，异鼠李素(4)，异鼠李素3-O-葡萄糖甙(5)，葛根素(6)，7,4′-二羟基-异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖甙(7)及色氨酸(8)。化合物1为新的天然产物，其余化合物均为首次从北柴胡中分离得到。
, http://www.100md.com
化合物1为淡黄色针晶， 1HNMR给出6.15(1H,d,J=1.6 Hz), 6.43(1H,d,J=1.6 Hz), 6.51(1H,s)3个质子信号，13CNMR显示9个碳信号。以上数据与从北柴胡得到的色原酮母核数据相似，所以1可能为色原酮类化合物。其IRυmaxcm-1呈现2 200～2 800(COOH)和1 668,1 620(C=O)为α，β-不饱和COOH特征吸收。EI-MS给出222[M]+，178[M-COOH+H]+，149[M-COOH-CO]+ 等明显的分子离子峰和碎片峰，所以确定化合物1为5,7-二羟基-2-羧基色原酮，该化合物为一新的天然产物，命名为柴胡色原酮酸(saikochromic acid)。
1 仪器及药材
熔点用X4型显微熔点仪测定，温度计未校正。红外光谱用Perkin-Elmer 983型仪器测定，KBr压片。紫外光谱用Shimadzu UV-260型分光光度仪测定。核磁共振用Bruker AM-500型核磁共振仪测定，TMS作为内标。质谱用Kyky-ZHP-5#型质谱仪测定。以上测定由本校重点实验室及分析仪器测试中心进行。
, http://www.100md.com
北柴胡Bupleurum chinense DC购自陕西省宝鸡市医药公司第二批发站。由本院天然药物学系陈虎彪教授鉴定。
2 提取和分离
北柴胡干燥根粉20.0 kg经95%(体积分数)EtOH渗滤，提取物依次用EtOAc、n-BuOH萃取。得n-BuOH部分296 g，取其中229.5 g经硅胶(200～300目)干柱色谱，CHCl3-MeOH-H2O(体积比为65∶35∶10)洗脱得29个组分(Fr.1-Fr.29)，Fr.29经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物1(10.0 mg)，化合物2(70.0 mg)；Fr.28经反复硅胶柱色谱得化合物6(40.0 mg)；Fr.1经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物3(5.0 mg)及化合物4(10.0 mg)；Fr.10经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物8(40.0 mg)。EtOAc部分以石油醚和甲醇分配得甲醇部分(385.0 g)及石油醚部分，取甲醇部分281.0 g经硅胶柱色谱CHCl3-MeOH梯度洗脱得20流份，流份20经反复硅胶柱色谱得化合物5(30.0 mg)及化合物7(29.0 mg)。
, 百拇医药
3 结构鉴定
化合物1：淡黄色针晶，IRυKBrmax cm-1: 3 410,2 200-2 800(COOH), 2 915,2 846(CH), 1 668,1 620(C=O), 1 610,1 507(芳环)， 1 415，1 346，1 171，801。 EI-MS m/z：222[M]+，194，178[M-COOH+H]+，149[M-COOH-CO]+，44。 1HNMR(DMSO-d6)：6.15(1H,d,J=1.6 Hz，6-H), 6.43(1H,d,J=1.6 Hz，8-H), 6.51(1H, s， 3-H)。
13 CNMR(DMSO-d6)(C-2～C-10，)：164.2，108.0，183.2，162.2，98.5，163.7，93.9，157.6，104.4。为柴胡色原酮酸(saikochromic acid)。
, http://www.100md.com
化合物2：淡黄色粉末，mp.180～188 ℃，HCl-Mg粉反应及Molish反应阳性，与芦丁标准品共薄层，Rf值一致。1HNMR(δ,DMSO-d6)：6.18(1H，d,J=2 Hz,H-6)，6.37(1H,d,J=2 Hz,H-8),6.83(1H,d,J=8 Hz, H-5′), 7.53(1H,dd,J=8,2 Hz, H-6′), 7.54(1H,d,J=2 Hz, H-2′)，5.33(1H,d,J=8 Hz,glc H-1), 5.17(1H,brs, rham H-1)。 13CNMR(DMSO-d6,δ)数据(表1)与文献[6]报道完全一致。故鉴定化合物2为芦丁。
表1 黄酮类化合物的碳谱数据(δ，DMSO-d6)
Table 1 13CNMR data of flavonoids(δ，DMSO-d6)
, http://www.100md.com
C
5
A
B
7
2
156.1
156.1
152.2
153.9
3
133.0
132.7
, 百拇医药
122.6
122.2
4
177.3
176.9
178.5
174.6
5
161.0
160.8
127.1
127.0
6
, 百拇医药
98.6
98.4
115.0
115.5
7
164.0
163.7
162.6
161.3
8
93.6
93.5
102.1
, 百拇医药
103.4
Aglycone
9
156.3
156.1
157.6
157.2
10
103.9
103.7
116.8
118.4
1′
, http://www.100md.com
121.0
120.7
123.9
123.6
2′
115.1
114.9
129.9
129.9
3′
149.3
149.0
115.0
, http://www.100md.com
114.9
4′
146.6
146.5
147.3
156.9
5′
113.4
112.9
115.0
114.9
6′
122.0
, 百拇医药
121.9
129.9
129.9
CH3O
55.6
55.4
glc
1
100.7
100.9
100.0
2
74.2
, 百拇医药
74.0
73.1
3
77.3
76.1
77.1
4
69.8
70.8
69.6
5
76.3
75.7
, http://www.100md.com
76.3
6
60.6
66.6
60.6
rha
1
100.6
2
70.0
3
69.8
4
, 百拇医药
71.5
5
68.0
6
17.6
化合物3：淡黄色粉末，mp.313～314℃，与槲皮素标准品共薄层，Rf值一致。 1HNMR(δ,DMSO-d6)：6.17(1H,d,J=2 Hz, H-6), 6.39(1H,d,J=2 Hz, H-8), 6.37(1H,d,J=8 Hz, H-5′), 7.53(1H,dd,J=8,2 Hz, H-6′), 7.65(1H,d,J=2 Hz, H-2′)。
化合物4：黄色片状结晶, 1HNMR(δ,DMSO-d6): 6.18(1H,d,J=2 Hz,H-6), 6.46(1H,d,J=2 Hz,H-8), 6.93(1H,d,J=8 Hz,H-5′),7.68(1H,dd,J=8,2 Hz, H-6′),7.74(1H,d,J=2 Hz,H-2′),3.83(3H,s,CH3), 9.38,9.70, 10.73, 12.45 (1H,s,4×OH)。化合物4的 13CNMR数据与文献[6]报道的异鼠李素数据完全一致，故鉴定化合物4为异鼠李素。
, 百拇医药
化合物5：黄色针状结晶， UVλMeOHmax nm：349.4，255.0(黄酮醇甙)；NaOMe：411.4，233.4(4′-OH)；NaOAc：361.4，261.0(7-OH)；NaOAc/H3BO3：351.8，254.2(无邻二酚OH)；AlCl3：398.4，361.8，367.4，235.6(5-OH)；AlCl3/HCl：397.8，358.0，268.0，235.6(无邻二酚OH)。 1HNMR(δ,DMSO-d6):6.18(1H,d,J=2 Hz, H-6),6.45(1H,d,J=2 Hz,H-8),6.90(1H,d,J=8 Hz, H-5′), 7.48(1H,d，J=8,2 Hz,H-6′), 7.93(1H,d,J=2 Hz, H-2′), 3.83(3H,s,CH3), 5.55(1H，d，J=8 Hz，glc H-1)。比较化合物5与水仙甙(A)[4]的 13CNMR数据(见表1)，除了比水仙甙少一个鼠李糖信号且葡萄糖6位向高场位移约6外，其余数据一致。FAB-MS(m/z)：479[M+H]+。故鉴定化合物5为异鼠李素-3-O-葡萄糖甙。
, 百拇医药
化合物6： 淡黄色针晶，mp.203～205℃, UVλMeOHmax nm：250(异黄酮)， 1HNMR(DMSO-d6, δ):7.39(2H,d,J=8.0 Hz,H-2′,6′), 6.80(2H,d,J=8.0 Hz, H-3′,5′), 7.94(1H,d, J=8.0 Hz,H-5), 6.99(1H,d,J=8.0 Hz,H-6), 8.31(1H,s, H-2), 4.82(1H,d, J=8.0 Hz,glc H-1)。 13CNMR数据同文献[7]报道的葛根素数据一致。故鉴定化合物6为葛根素。
化合物7：淡黄色针状结晶，UVλMeOHmax nm：260(异黄酮)，NaOAc:259.8(无游离7-OH)。 1HNMR(δ,DMSO-d6):7.39(2H,d,J=8.0 Hz,H-2′,6′), 6.80(2H,d,J=8.0 Hz,H-3′,5′), 8.03(1H,d,J=8.0 Hz,H-5), 7.13(1H,dd,J=8.0,2.0 Hz,H-6), 7.22(1H,d,J=2.0 Hz,H-8), 8.38(1H,s, H-2), 5.09(1H,d,J=7.0 Hz, glc H-1) 。比较化合物7与7，4′-二羟基异黄酮(B)[7]的 13CNMR数据(见表1)，C-7向高场位移1.3, C-10向低场位移1.6 , 符合甙化位移规律。FAB-MS(m/z):417[M+H]+ 。鉴定化合物7结构为7，4′-二羟基-异黄酮7-O-β-D-葡萄糖甙。
, http://www.100md.com
化合物8：淡黄色粉末， 1HNMR(DMSO-d6):2.99(1H,dd，J=8.5,15.0 Hz,β-H), 3.31(1H, dd,J=3.8,15.0 Hz, β-H), 3.47(1H,dd,J=3.8,8.5 Hz, α-H), 7.34(1H,d, J=8.0 Hz,H-8), 6.96(1H,t,J=8.0 Hz,H-6), 7.55(1H,d,J=8.0 Hz,H-5), 7.05 (1H,t,J=8.0 Hz,H-7), 7.22(1H,s,H-2)。EI-MS(m/z):204[M]+,159[M-COOH]+,130[100,M-CH(NH2)COOH]+。 13CNMR(DMSO-d6):124.0(C-2),109.6(C-3), 127.2(C-4),116.3(C-5),116.1(C-6),120.8(C-7),111.2(C-8),136.3(C-9), 54.7(C-α),27.1(C-β),170.2(COOH)。根据以上数据确定化合物8为色氨酸。■基金项目：国家自然科学基金(29632050)资助课题；
, http://www.100md.com
参考文献
[1]梁 鸿，赵玉英，白焱晶，等. 柴胡皂甙Ⅴ的结构鉴定[J].药学学报，1998，33(4)：282-285
[2]梁 鸿，赵玉英，邱海蕴，等. 北柴胡中新皂甙的结构鉴定[J].药学学报，1998，33(1)：37-41
[3]Liang H，Zhao YY，Zhang RY， et al. A new chromone glycoside from Bupleurum chinense[J]. J Chin Chem Lett, 1998,9(1):69-70
[4]Liang H,Bai YJ,Zhao YY, et al. The chemical constituents from the roots of Bupleurum chinense DC[J]. J Chin Pharm Sci, 1998,7(2):98-99
, 百拇医药
[5]Li QC, Ling H, Zhao YY, et al. The chemical constituents from the roots of Bupleurum chinense[J]. J Chin Pharm Sci, 1997,6(3):165-167
[6]Harborne JB, Mabry TJ. The flavonoids:advances in research[M]. London: Chapman and Hall,1982.72
[7]龚运淮. 天然有机化合物的13C核磁共振化学位移[M]. 昆明：云南科技出版社,1986.168
收稿日期：2000-01-25, 百拇医药
单位：北京大学药学院天然药化研究室, 北京 100083
关键词：柴胡；化学；黄酮类；分离和提纯；色原酮酸
北京医科大学学报000308 [摘 要] 目的：研究北柴胡的化学成分。方法：用色谱法和波谱解析方法对北柴胡根的化学成分进行分离和结构鉴定。结果：共得到8个化合物：柴胡色原酮酸(1)，芦丁(2)，槲皮素(3)，异鼠李素(4)，异鼠李素3-O-葡萄糖甙(5)，葛根素(6)，7,4′-二羟基-异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖甙(7),色氨酸(8)。结论：化合物1为新的天然产物，其余化合物均为首次从北柴胡中获得。
[中图分类号] R932.41 [文献标识码] A
[文章编号] 1000-1530(2000)03-0223-03
, http://www.100md.com
Flavonoids from the roots of Bupleurum chinense DC.
LIANG Hong, ZHAO Yu-Ying, CUI Yan-Jun, LIU Qin-Xiang
(Division of Natural Medicinal Chemistry, School of Pharmaceutical Sciences，Peking University, Beijing 100083)
ABSTRACT Objective: To study the chemical constituents of the roots of Bupleurum chinense DC. Methods: Chemical compounds were isolated and their structures were identified by the repeated chromatographies and spectral analyses. Results: Eight compounds were obtained as saikochromic acid (1), rutin (2), quercetin(3), isorhamnetin(4), isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside(5), puerarin(6), 7,4′-dihydroxy-isoflavone 7-O-β-D-glucoside(7) and tryptophane(8). Conclusion: Compound 1 was a new natural product, and compounds 2-7 were obtained from the plant for the first time.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Bupleurum chinense/chem； Flavones/isol; Saikochromic acid▲
柴胡为伞形科(Umbelliferae)柴胡属(Bupleurum)植物。具疏散退热，舒肝升阳之功效，主治感冒发热，寒热往来，疟疾，胸肋胀痛，月经不调及子宫脱垂等症。现代药理研究证明柴胡具有解热、镇痛、镇静、抗炎、免疫增强、保肝利胆、抗菌、抗病毒及抗肿瘤等作用。全世界有柴胡属植物200种，我国已报道有42种，17变种及7变形(潘胜利等。中国的药用柴胡及其药理作用的研究。第三届中药研讨会论文摘要集，上海，1996，27-28)。《中华人民共和国药典》 (1995年版) 规定北柴胡Bupleurum chinense DC. 和南柴胡B. scorzonerifolium Willd为药用柴胡。国内、外学者对北柴胡的药理活性研究较多，化学方面仅对北柴胡挥发油成分及北柴胡皂甙含量测定有报道。我们对北柴胡化学成分进行了较系统的研究，从北柴胡根的95%(体积分数)乙醇提取物中分离得到了皂甙、黄酮、色原酮、有机酸等成分[1～5]，现又分离鉴定了8个化合物，分别为：柴胡色原酮酸(1)，芦丁(2)，槲皮素(3)，异鼠李素(4)，异鼠李素3-O-葡萄糖甙(5)，葛根素(6)，7,4′-二羟基-异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖甙(7)及色氨酸(8)。化合物1为新的天然产物，其余化合物均为首次从北柴胡中分离得到。
, http://www.100md.com
化合物1为淡黄色针晶， 1HNMR给出6.15(1H,d,J=1.6 Hz), 6.43(1H,d,J=1.6 Hz), 6.51(1H,s)3个质子信号，13CNMR显示9个碳信号。以上数据与从北柴胡得到的色原酮母核数据相似，所以1可能为色原酮类化合物。其IRυmaxcm-1呈现2 200～2 800(COOH)和1 668,1 620(C=O)为α，β-不饱和COOH特征吸收。EI-MS给出222[M]+，178[M-COOH+H]+，149[M-COOH-CO]+ 等明显的分子离子峰和碎片峰，所以确定化合物1为5,7-二羟基-2-羧基色原酮，该化合物为一新的天然产物，命名为柴胡色原酮酸(saikochromic acid)。
1 仪器及药材
熔点用X4型显微熔点仪测定，温度计未校正。红外光谱用Perkin-Elmer 983型仪器测定，KBr压片。紫外光谱用Shimadzu UV-260型分光光度仪测定。核磁共振用Bruker AM-500型核磁共振仪测定，TMS作为内标。质谱用Kyky-ZHP-5#型质谱仪测定。以上测定由本校重点实验室及分析仪器测试中心进行。
, http://www.100md.com
北柴胡Bupleurum chinense DC购自陕西省宝鸡市医药公司第二批发站。由本院天然药物学系陈虎彪教授鉴定。
2 提取和分离
北柴胡干燥根粉20.0 kg经95%(体积分数)EtOH渗滤，提取物依次用EtOAc、n-BuOH萃取。得n-BuOH部分296 g，取其中229.5 g经硅胶(200～300目)干柱色谱，CHCl3-MeOH-H2O(体积比为65∶35∶10)洗脱得29个组分(Fr.1-Fr.29)，Fr.29经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物1(10.0 mg)，化合物2(70.0 mg)；Fr.28经反复硅胶柱色谱得化合物6(40.0 mg)；Fr.1经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物3(5.0 mg)及化合物4(10.0 mg)；Fr.10经Sephadex LH-20柱色谱,MeOH洗脱得化合物8(40.0 mg)。EtOAc部分以石油醚和甲醇分配得甲醇部分(385.0 g)及石油醚部分，取甲醇部分281.0 g经硅胶柱色谱CHCl3-MeOH梯度洗脱得20流份，流份20经反复硅胶柱色谱得化合物5(30.0 mg)及化合物7(29.0 mg)。
, 百拇医药
3 结构鉴定
化合物1：淡黄色针晶，IRυKBrmax cm-1: 3 410,2 200-2 800(COOH), 2 915,2 846(CH), 1 668,1 620(C=O), 1 610,1 507(芳环)， 1 415，1 346，1 171，801。 EI-MS m/z：222[M]+，194，178[M-COOH+H]+，149[M-COOH-CO]+，44。 1HNMR(DMSO-d6)：6.15(1H,d,J=1.6 Hz，6-H), 6.43(1H,d,J=1.6 Hz，8-H), 6.51(1H, s， 3-H)。
13 CNMR(DMSO-d6)(C-2～C-10，)：164.2，108.0，183.2，162.2，98.5，163.7，93.9，157.6，104.4。为柴胡色原酮酸(saikochromic acid)。
, http://www.100md.com
化合物2：淡黄色粉末，mp.180～188 ℃，HCl-Mg粉反应及Molish反应阳性，与芦丁标准品共薄层，Rf值一致。1HNMR(δ,DMSO-d6)：6.18(1H，d,J=2 Hz,H-6)，6.37(1H,d,J=2 Hz,H-8),6.83(1H,d,J=8 Hz, H-5′), 7.53(1H,dd,J=8,2 Hz, H-6′), 7.54(1H,d,J=2 Hz, H-2′)，5.33(1H,d,J=8 Hz,glc H-1), 5.17(1H,brs, rham H-1)。 13CNMR(DMSO-d6,δ)数据(表1)与文献[6]报道完全一致。故鉴定化合物2为芦丁。
表1 黄酮类化合物的碳谱数据(δ，DMSO-d6)
Table 1 13CNMR data of flavonoids(δ，DMSO-d6)
, http://www.100md.com
C
5
A
B
7
2
156.1
156.1
152.2
153.9
3
133.0
132.7
, 百拇医药
122.6
122.2
4
177.3
176.9
178.5
174.6
5
161.0
160.8
127.1
127.0
6
, 百拇医药
98.6
98.4
115.0
115.5
7
164.0
163.7
162.6
161.3
8
93.6
93.5
102.1
, 百拇医药
103.4
Aglycone
9
156.3
156.1
157.6
157.2
10
103.9
103.7
116.8
118.4
1′
, http://www.100md.com
121.0
120.7
123.9
123.6
2′
115.1
114.9
129.9
129.9
3′
149.3
149.0
115.0
, http://www.100md.com
114.9
4′
146.6
146.5
147.3
156.9
5′
113.4
112.9
115.0
114.9
6′
122.0
, 百拇医药
121.9
129.9
129.9
CH3O
55.6
55.4
glc
1
100.7
100.9
100.0
2
74.2
, 百拇医药
74.0
73.1
3
77.3
76.1
77.1
4
69.8
70.8
69.6
5
76.3
75.7
, http://www.100md.com
76.3
6
60.6
66.6
60.6
rha
1
100.6
2
70.0
3
69.8
4
, 百拇医药
71.5
5
68.0
6
17.6
化合物3：淡黄色粉末，mp.313～314℃，与槲皮素标准品共薄层，Rf值一致。 1HNMR(δ,DMSO-d6)：6.17(1H,d,J=2 Hz, H-6), 6.39(1H,d,J=2 Hz, H-8), 6.37(1H,d,J=8 Hz, H-5′), 7.53(1H,dd,J=8,2 Hz, H-6′), 7.65(1H,d,J=2 Hz, H-2′)。
化合物4：黄色片状结晶, 1HNMR(δ,DMSO-d6): 6.18(1H,d,J=2 Hz,H-6), 6.46(1H,d,J=2 Hz,H-8), 6.93(1H,d,J=8 Hz,H-5′),7.68(1H,dd,J=8,2 Hz, H-6′),7.74(1H,d,J=2 Hz,H-2′),3.83(3H,s,CH3), 9.38,9.70, 10.73, 12.45 (1H,s,4×OH)。化合物4的 13CNMR数据与文献[6]报道的异鼠李素数据完全一致，故鉴定化合物4为异鼠李素。
, 百拇医药
化合物5：黄色针状结晶， UVλMeOHmax nm：349.4，255.0(黄酮醇甙)；NaOMe：411.4，233.4(4′-OH)；NaOAc：361.4，261.0(7-OH)；NaOAc/H3BO3：351.8，254.2(无邻二酚OH)；AlCl3：398.4，361.8，367.4，235.6(5-OH)；AlCl3/HCl：397.8，358.0，268.0，235.6(无邻二酚OH)。 1HNMR(δ,DMSO-d6):6.18(1H,d,J=2 Hz, H-6),6.45(1H,d,J=2 Hz,H-8),6.90(1H,d,J=8 Hz, H-5′), 7.48(1H,d，J=8,2 Hz,H-6′), 7.93(1H,d,J=2 Hz, H-2′), 3.83(3H,s,CH3), 5.55(1H，d，J=8 Hz，glc H-1)。比较化合物5与水仙甙(A)[4]的 13CNMR数据(见表1)，除了比水仙甙少一个鼠李糖信号且葡萄糖6位向高场位移约6外，其余数据一致。FAB-MS(m/z)：479[M+H]+。故鉴定化合物5为异鼠李素-3-O-葡萄糖甙。
, 百拇医药
化合物6： 淡黄色针晶，mp.203～205℃, UVλMeOHmax nm：250(异黄酮)， 1HNMR(DMSO-d6, δ):7.39(2H,d,J=8.0 Hz,H-2′,6′), 6.80(2H,d,J=8.0 Hz, H-3′,5′), 7.94(1H,d, J=8.0 Hz,H-5), 6.99(1H,d,J=8.0 Hz,H-6), 8.31(1H,s, H-2), 4.82(1H,d, J=8.0 Hz,glc H-1)。 13CNMR数据同文献[7]报道的葛根素数据一致。故鉴定化合物6为葛根素。
化合物7：淡黄色针状结晶，UVλMeOHmax nm：260(异黄酮)，NaOAc:259.8(无游离7-OH)。 1HNMR(δ,DMSO-d6):7.39(2H,d,J=8.0 Hz,H-2′,6′), 6.80(2H,d,J=8.0 Hz,H-3′,5′), 8.03(1H,d,J=8.0 Hz,H-5), 7.13(1H,dd,J=8.0,2.0 Hz,H-6), 7.22(1H,d,J=2.0 Hz,H-8), 8.38(1H,s, H-2), 5.09(1H,d,J=7.0 Hz, glc H-1) 。比较化合物7与7，4′-二羟基异黄酮(B)[7]的 13CNMR数据(见表1)，C-7向高场位移1.3, C-10向低场位移1.6 , 符合甙化位移规律。FAB-MS(m/z):417[M+H]+ 。鉴定化合物7结构为7，4′-二羟基-异黄酮7-O-β-D-葡萄糖甙。
, http://www.100md.com
化合物8：淡黄色粉末， 1HNMR(DMSO-d6):2.99(1H,dd，J=8.5,15.0 Hz,β-H), 3.31(1H, dd,J=3.8,15.0 Hz, β-H), 3.47(1H,dd,J=3.8,8.5 Hz, α-H), 7.34(1H,d, J=8.0 Hz,H-8), 6.96(1H,t,J=8.0 Hz,H-6), 7.55(1H,d,J=8.0 Hz,H-5), 7.05 (1H,t,J=8.0 Hz,H-7), 7.22(1H,s,H-2)。EI-MS(m/z):204[M]+,159[M-COOH]+,130[100,M-CH(NH2)COOH]+。 13CNMR(DMSO-d6):124.0(C-2),109.6(C-3), 127.2(C-4),116.3(C-5),116.1(C-6),120.8(C-7),111.2(C-8),136.3(C-9), 54.7(C-α),27.1(C-β),170.2(COOH)。根据以上数据确定化合物8为色氨酸。■基金项目：国家自然科学基金(29632050)资助课题；
, http://www.100md.com
参考文献
[1]梁 鸿，赵玉英，白焱晶，等. 柴胡皂甙Ⅴ的结构鉴定[J].药学学报，1998，33(4)：282-285
[2]梁 鸿，赵玉英，邱海蕴，等. 北柴胡中新皂甙的结构鉴定[J].药学学报，1998，33(1)：37-41
[3]Liang H，Zhao YY，Zhang RY， et al. A new chromone glycoside from Bupleurum chinense[J]. J Chin Chem Lett, 1998,9(1):69-70
[4]Liang H,Bai YJ,Zhao YY, et al. The chemical constituents from the roots of Bupleurum chinense DC[J]. J Chin Pharm Sci, 1998,7(2):98-99
, 百拇医药
[5]Li QC, Ling H, Zhao YY, et al. The chemical constituents from the roots of Bupleurum chinense[J]. J Chin Pharm Sci, 1997,6(3):165-167
[6]Harborne JB, Mabry TJ. The flavonoids:advances in research[M]. London: Chapman and Hall,1982.72
[7]龚运淮. 天然有机化合物的13C核磁共振化学位移[M]. 昆明：云南科技出版社,1986.168
收稿日期：2000-01-25, 百拇医药