运动神经入肌段损伤修复方法的实验研究
运动神经入肌段损伤修复方法的实验研究
韩树峰 韩西城 刘强 丁海明
摘 要：目的：探讨运动神经在进入肌肉的部位截断或合并缺损的修复方法。方法：Wister大白鼠36只随机分成3组：A组，运动神经直接埋入肌肉；B组，自体神经移植后埋入肌肉；C组，自体静脉移植后埋入肌肉。于术后3个月、6个月检测肌电活动，并光镜及电镜观察运动终板再生的情况。结果：神经电生理学、组织学及形态学实验表明A组优于B、C组(P<0.01)，B组与C组间无显著性差异(P>0.05)。结论：运动神经入肌段缺损无法直接埋入肌肉时，可考虑用静脉移植后埋入肌肉。
关键词：运动神经元 神经移植 移植，自体
多年来，人们一直在探讨用非神经移植体修复周围神经缺损[1]，其中静脉桥接神经干缺损可取得较好效果[2，3]。本实验设计了静脉移植修复神经入肌段缺损再做肌内埋置，效果满意。
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1 材料与方法
1.1 分组及手术方法 体重200～220g的Wistar大白鼠36只，随机分成3组，每组12只。于术后3个月、6个月每组各取6只观察。
手术方法：动物麻醉(1%戊巴比妥钠30～40mg/kg)，10倍手术显微镜下暴露右侧股神经，于进入股直肌处切断(均为两分支)，然后：
A组：于原入肌点近侧5mm处切开股直肌肌膜，将股神经两分支横行相距3mm埋入肌内。
B组：于入肌点切断股神经后，再向近端10mm处切断，原位吻合(外膜缝合)，远端用A组方法埋入股直肌。
C组：用B组方法造成股神经10mm缺损后，取相应长度股静脉，一端与股神经断端套接，另一端剪成3mm长的分叉，分叉部自然卷曲成管状。剪开股直肌肌膜，将分叉的静脉埋入肌内。
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1.2 观察项目
1.2.1 大体观察 桥接体及吻合口的形态，肌肉的收缩反应等。
1.2.2 神经电生理检测 用日产光电MEM-3202型肌电图仪，刺激电极置于股神经近端，记录电极刺入股直肌中部，测出神经肌肉传导速度[4]。
1.2.3 组织学观察 取股直肌做运动终板氯化金染色，做成玻片，显微镜下计数每mm2的终板数，同时观察肌肉的形态。
1.2.4 超微结构观察 取股直肌块顺肌纤维方向切片，用透射电镜观察。
2 结果
2.1 大体观察 术后无1例切口感染及皮肤溃疡。右后肢也未因结扎切取股静脉而出现瘀血肿胀。术后3月取材时，各组神经吻合口光滑平整，桥接体饱满，颜色与近端正常神经无异。A组股直肌明显较B、C组丰满，各组均有良好的收缩反应。术后6月取材时，各组神经及肌肉看不出明显差别，肌肉丰满，收缩有力。
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2.2 神经电生理检测 神经肌肉传导速度见表1，显示术后3月、6月A组均明显快于B、C组，B、C组间无显著性差异。
表1 神经肌肉传导速度 (m/s)
组别
鼠数
术后3月
术后6月
A神经直接埋置
6
14.4±2.5
16.4±1.2
B神经移植埋置
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6
8.4±1.5*
13.0±1.9*
C静脉移植埋置
6
9.4±1.6*△
12.4±1.5*△
注 *A与B及A与C比较 P<0.01 q检验
△B与C比较 P>0.05 q检验
2.3 组织学观察 运动终板氯化金染色，术后3个月均可见肌肉横纹较清楚，神经纤维在肌纤维间隙内分枝生长，末梢形成较幼稚的运动终板，终板形态欠规则，结构不清晰；术后6月终板成熟，形态规则，结构清晰(图1，2)。
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终板计数结果见表2，显示术后3、6月均A组多于B、C组(P<0.01)；B、C组间无显著性差异(P>0.05)。
表2 光镜运动终板计数
组别
鼠数
术后3月
术后6月
A神经直接埋置
6
182.5±20.75
193.2±23.34
B神经移植埋置
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6
123.0±16.91*
159.3±15.59*
C静脉移植埋置
6
120.0±15.22*△
140.0±14.0*△
注 *A与B及A与C比较 P<0.01 q检验
△B与C比较 P>0.05 q检验
2.4 超微结构观察 A组术后3月、6月均显示基本正常的肌肉超微结构。B、C组术后3月肌丝排列不整齐，M线、Z线弯曲[5]，线粒体、糖原较少；术后6月肌肉结构恢复正常，肌丝排列整齐，M线、Z线整齐，线粒体、糖原丰富。术后6月，A、B、C三组运动终板成熟，神经细胞形成的突触前膜及肌细胞膜形成的突触后膜清晰可见，并可见丰富的递质泡(图3、4)。
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图1 A组6月运动终板(氯化金染色×400) 图2 C组6月运动终板(氯化金染色×400) 图3 A组6月股直肌(透射电镜×10000) 图4 C组6月运动终板(透射电镜×30000)
3 讨论
运动神经入肌段损伤较难处理。Sorbie等[6]和Brunelli[7]做神经埋入肌肉的实验研究和临床应用，效果满意。张玲等[8]通过动物实验不仅证实神经埋入肌内能重建运动终板，而且在伴有神经缺损时，通过神经移植再埋入到肌内，同样可形成再生终板。本实验为切实观察神经埋入术的效果，将埋入点上移5mm，避免了神经直接长入原断端，取得了良好效果。这对临床工作很有指导意义，因为临床病例很难找到原入肌点。本实验结果显示神经直接埋置优于神经移植后再埋置，这可能是因为后者增加了一个吻合口，神经轴索再生阻力增加了。提示临床应用时尽可能做神经直接埋置。
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非神经移植体的发掘一直是国内外学者努力的方向之一[1]，1982年Chiu等[2]首先报道了静脉桥接周围神经的实验研究，以后我国也有动物实验和临床应用的报道[3]，效果较好。但以往所见报道都是静脉移植修复神经干的缺损，本实验用静脉移植修复运动神经入肌段缺损再埋入肌肉，结果与神经移植再埋入肌肉无显著性差异，提示在临床应用中，运动神经入肌段缺损无法直接埋入时，可考虑用静脉替代神经移植再埋入肌肉。
作者单位：韩树峰(山西医科大学第一医院，山西 太原 030001)
韩西城(山西医科大学第一医院，山西 太原 030001)
刘 强(山西医科大学第一医院，山西 太原 030001)
丁海明(山西医科大学第一医院，山西 太原 030001)
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参考文献
[1]朱家恺，刘军墀.周围神经外科的回顾与展望.中华显微外科杂志，1990，13(1)：35.
[2]Chiu DT，Janecka I，Krizek TJ，et al.Autogenous vein grafts as a conduit for nerve regeneration.Surg，1982，91(1)：226.
[3]尹维田，张君，高庆国，等.静脉桥接治疗周围神经缺损.中华显微外科杂志，1990，13(1)：13.
[4]佐佐木研一.颜面神经损伤后にちしする神经，筋单位の再生过程に关する实验の研究.齿科学报，1983，83(2)：249.
[5]林欣，董中，夏双印，等.肌肉不同部位神经植入的实验研究.中华显微外科杂志，1987，10(2)：87.
[6]Sorbie C，Porter TL.Reinnervation of paralysed muscles by direct motor nerve implantation.J Bone Joint surg (Br)，1969，51(1)：156.
[7]Brunelli G.Direct neurotization of severely damaged denervated muscles.Int Surg，1980，65(4)：329.
[8]张玲，除中伟，黄绥仁，等.运动终板再生的实验研究报告.手外科杂志，1985，1(1)：27., http://www.100md.com
韩树峰 韩西城 刘强 丁海明
摘 要：目的：探讨运动神经在进入肌肉的部位截断或合并缺损的修复方法。方法：Wister大白鼠36只随机分成3组：A组，运动神经直接埋入肌肉；B组，自体神经移植后埋入肌肉；C组，自体静脉移植后埋入肌肉。于术后3个月、6个月检测肌电活动，并光镜及电镜观察运动终板再生的情况。结果：神经电生理学、组织学及形态学实验表明A组优于B、C组(P<0.01)，B组与C组间无显著性差异(P>0.05)。结论：运动神经入肌段缺损无法直接埋入肌肉时，可考虑用静脉移植后埋入肌肉。
关键词：运动神经元 神经移植 移植，自体
多年来，人们一直在探讨用非神经移植体修复周围神经缺损[1]，其中静脉桥接神经干缺损可取得较好效果[2，3]。本实验设计了静脉移植修复神经入肌段缺损再做肌内埋置，效果满意。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 分组及手术方法 体重200～220g的Wistar大白鼠36只，随机分成3组，每组12只。于术后3个月、6个月每组各取6只观察。
手术方法：动物麻醉(1%戊巴比妥钠30～40mg/kg)，10倍手术显微镜下暴露右侧股神经，于进入股直肌处切断(均为两分支)，然后：
A组：于原入肌点近侧5mm处切开股直肌肌膜，将股神经两分支横行相距3mm埋入肌内。
B组：于入肌点切断股神经后，再向近端10mm处切断，原位吻合(外膜缝合)，远端用A组方法埋入股直肌。
C组：用B组方法造成股神经10mm缺损后，取相应长度股静脉，一端与股神经断端套接，另一端剪成3mm长的分叉，分叉部自然卷曲成管状。剪开股直肌肌膜，将分叉的静脉埋入肌内。
, 百拇医药
1.2 观察项目
1.2.1 大体观察 桥接体及吻合口的形态，肌肉的收缩反应等。
1.2.2 神经电生理检测 用日产光电MEM-3202型肌电图仪，刺激电极置于股神经近端，记录电极刺入股直肌中部，测出神经肌肉传导速度[4]。
1.2.3 组织学观察 取股直肌做运动终板氯化金染色，做成玻片，显微镜下计数每mm2的终板数，同时观察肌肉的形态。
1.2.4 超微结构观察 取股直肌块顺肌纤维方向切片，用透射电镜观察。
2 结果
2.1 大体观察 术后无1例切口感染及皮肤溃疡。右后肢也未因结扎切取股静脉而出现瘀血肿胀。术后3月取材时，各组神经吻合口光滑平整，桥接体饱满，颜色与近端正常神经无异。A组股直肌明显较B、C组丰满，各组均有良好的收缩反应。术后6月取材时，各组神经及肌肉看不出明显差别，肌肉丰满，收缩有力。
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2.2 神经电生理检测 神经肌肉传导速度见表1，显示术后3月、6月A组均明显快于B、C组，B、C组间无显著性差异。
表1 神经肌肉传导速度 (m/s)
组别
鼠数
术后3月
术后6月
A神经直接埋置
6
14.4±2.5
16.4±1.2
B神经移植埋置
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6
8.4±1.5*
13.0±1.9*
C静脉移植埋置
6
9.4±1.6*△
12.4±1.5*△
注 *A与B及A与C比较 P<0.01 q检验
△B与C比较 P>0.05 q检验
2.3 组织学观察 运动终板氯化金染色，术后3个月均可见肌肉横纹较清楚，神经纤维在肌纤维间隙内分枝生长，末梢形成较幼稚的运动终板，终板形态欠规则，结构不清晰；术后6月终板成熟，形态规则，结构清晰(图1，2)。
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终板计数结果见表2，显示术后3、6月均A组多于B、C组(P<0.01)；B、C组间无显著性差异(P>0.05)。
表2 光镜运动终板计数
组别
鼠数
术后3月
术后6月
A神经直接埋置
6
182.5±20.75
193.2±23.34
B神经移植埋置
, 百拇医药
6
123.0±16.91*
159.3±15.59*
C静脉移植埋置
6
120.0±15.22*△
140.0±14.0*△
注 *A与B及A与C比较 P<0.01 q检验
△B与C比较 P>0.05 q检验
2.4 超微结构观察 A组术后3月、6月均显示基本正常的肌肉超微结构。B、C组术后3月肌丝排列不整齐，M线、Z线弯曲[5]，线粒体、糖原较少；术后6月肌肉结构恢复正常，肌丝排列整齐，M线、Z线整齐，线粒体、糖原丰富。术后6月，A、B、C三组运动终板成熟，神经细胞形成的突触前膜及肌细胞膜形成的突触后膜清晰可见，并可见丰富的递质泡(图3、4)。
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图1 A组6月运动终板(氯化金染色×400) 图2 C组6月运动终板(氯化金染色×400) 图3 A组6月股直肌(透射电镜×10000) 图4 C组6月运动终板(透射电镜×30000)
3 讨论
运动神经入肌段损伤较难处理。Sorbie等[6]和Brunelli[7]做神经埋入肌肉的实验研究和临床应用，效果满意。张玲等[8]通过动物实验不仅证实神经埋入肌内能重建运动终板，而且在伴有神经缺损时，通过神经移植再埋入到肌内，同样可形成再生终板。本实验为切实观察神经埋入术的效果，将埋入点上移5mm，避免了神经直接长入原断端，取得了良好效果。这对临床工作很有指导意义，因为临床病例很难找到原入肌点。本实验结果显示神经直接埋置优于神经移植后再埋置，这可能是因为后者增加了一个吻合口，神经轴索再生阻力增加了。提示临床应用时尽可能做神经直接埋置。
, http://www.100md.com
非神经移植体的发掘一直是国内外学者努力的方向之一[1]，1982年Chiu等[2]首先报道了静脉桥接周围神经的实验研究，以后我国也有动物实验和临床应用的报道[3]，效果较好。但以往所见报道都是静脉移植修复神经干的缺损，本实验用静脉移植修复运动神经入肌段缺损再埋入肌肉，结果与神经移植再埋入肌肉无显著性差异，提示在临床应用中，运动神经入肌段缺损无法直接埋入时，可考虑用静脉替代神经移植再埋入肌肉。
作者单位：韩树峰(山西医科大学第一医院，山西 太原 030001)
韩西城(山西医科大学第一医院，山西 太原 030001)
刘 强(山西医科大学第一医院，山西 太原 030001)
丁海明(山西医科大学第一医院，山西 太原 030001)
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参考文献
[1]朱家恺，刘军墀.周围神经外科的回顾与展望.中华显微外科杂志，1990，13(1)：35.
[2]Chiu DT，Janecka I，Krizek TJ，et al.Autogenous vein grafts as a conduit for nerve regeneration.Surg，1982，91(1)：226.
[3]尹维田，张君，高庆国，等.静脉桥接治疗周围神经缺损.中华显微外科杂志，1990，13(1)：13.
[4]佐佐木研一.颜面神经损伤后にちしする神经，筋单位の再生过程に关する实验の研究.齿科学报，1983，83(2)：249.
[5]林欣，董中，夏双印，等.肌肉不同部位神经植入的实验研究.中华显微外科杂志，1987，10(2)：87.
[6]Sorbie C，Porter TL.Reinnervation of paralysed muscles by direct motor nerve implantation.J Bone Joint surg (Br)，1969，51(1)：156.
[7]Brunelli G.Direct neurotization of severely damaged denervated muscles.Int Surg，1980，65(4)：329.
[8]张玲，除中伟，黄绥仁，等.运动终板再生的实验研究报告.手外科杂志，1985，1(1)：27., http://www.100md.com