δ和κ阿片受体拮抗剂在治疗创伤低血容量性休克中的意义
胡德耀 潘学坤 刘良明 卢儒权
摘 要 目的：阐明介导创伤性休克的阿片受体亚型，并探讨相应的δ、κ阿片受体拮抗剂在治疗创伤低血容量性休克中的意义。方法：制造兔及大鼠的创伤低血容量性休克模型，休克兔分两部分进行实验。第1部分观察创伤低血容量性休克不同时间点，β-内啡肽(β-EP)与平均动脉压(MAP)及血流动力学的关系。第2部分兔脑室内分别注射生理盐水、β-EP抗血清、δ-阿片受体拮抗剂ICI 174864及κ阿片受体拮抗剂Nor-BNI，观察实验血流动力学、乳酸脱氢酶(LDH)、β-葡萄糖醛酸酶(β-G)。按上述方法制备休克大鼠模型，并经脑室内注射生理盐水、ICI 174864及Nor-BNI，观察血流动力学、存活时间及5小时存活率。结果：创伤低血容量性休克兔β-EP急剧升高，同时MAP及血流动力学参数下降，β-EP和MAP呈显著负相关，β-EP与血流动力学参数也有一定的相关性。β-EP抗血清有明显拮抗β-EP的作用；ICI 174864及Nor-BNI能有效地拮抗兔及大鼠创伤低血容量性休克，脑室内给药后MAP升高，血流动力学参数改善，血清LDH及β-G上升幅度减轻。休克大鼠存活时间延长，5小时存活率提高。结论：β-EP可能通过δ、κ阿片受体的介导，参与创伤低血容量性休克的病理生理过程，δ、κ阿片受体拮抗剂可能是一种新型的治疗创伤低血容量性休克的药物。
, 百拇医药
关键词：β-内啡肽 休克，创伤性，低血容量性 δ-阿片受体拮抗剂 κ阿片受体拮抗剂
文献报道，β-内啡肽(β-EP)主要通过其受体介导，参与多种循环性休克的病理生理过程。然而不同类型的休克介导的阿片受体不同：低血容量性休克及内毒素休克由δ和κ受体介导〔1-3〕，烧伤性休克由δ及μ受体介导〔4〕，但介导创伤性休克的阿片受体很少报道，尚需阐明。纳络酮对多种循环性休克有良好的治疗作用，但因其选择性不高，又阻断μ受体，故在创伤性休克中的使用颇受限制。目前有报道使用特异性δ、κ阿片受体拮抗剂抗低血容量性休克、内毒素性休克有效〔5，6〕，但对创伤低血容量性休克疗效如何值得研究。本研究探讨介导创伤低血容量性休克的阿片受体亚型，并探讨相应的δ、κ阿片受体拮抗剂的治疗作用。
1 材料与方法
1.1 创伤低血容量性休克兔血浆中β-EP变化规律及其与血流动力学改变的关系：
, 百拇医药
1.1.1 动物模型制备：家兔9只，乙醚麻醉，右颈总动脉插管至左心室，经二道生理记录仪放大连接到血流动力学分析系统(第二军医大学研制)，监测血流动力学指标。左股动脉插管以监测平均动脉压(MAP)，肝素抗凝，右股骨中段开放粉碎性骨折及经股动脉放血 ，15分钟内放至动物血压为6.67 kPa(1 kPa=7.5 mmHg)并维持45分钟，完成休克模型(为休克0分钟)。
1.1.2 方法：分别在休克前后不同时间监测血流动力学指标， MAP左室内收缩压(LVSP)，等容收缩压(IP)，左室内压最大上升与下降速度比(±dp/dtmax)，实测心肌最大收缩速度(Vpm)及心肌收缩向量环面积(Lo)；同时抽动脉血2 ml按放射免疫法作β-EP测定，抽血后补给等量的生理盐水。
1.1.3 结果：休克后0分钟与休克前比较，血浆中β-EP值显著升高，同时，MAP、LVSP、IP、Vpm、±dp/dtmax及Lo明显下降；休克后45分钟β-EP有所下降，MAP及其它血流动力学指标有所回升，随后上列指标都迅速恶化(表1)。
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表1 家兔创伤低血容量性休克后不同时间点血浆β-EP水平及血流动力学的变化(x±s)
指标
正常值
休克后时间(min)
0
45
90
180
300
β-EP(ng/L)
69±21
200±52**
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94±17
121±25**
215±57**
321±92**
MAP(kPa)
13.2±1.5
6.6±0.2**
8.6±0.5**
7.9±0.6**
6.3±1.6**
, http://www.100md.com
4.7±1.1**
LVSP(kPa)
21.0±1.5
10.9±1.0**
14.0±1.7**
13.0±1.1**
11.3±1.6**
9.8±3.3**
IP(kPa)
19.4±2.0
, 百拇医药
11.4±1.4**
13.0±1.4**
10.8±1.7**
9.4±2.3**
7.0±2.4**
Vpm(L/s)
10.3±2.9
6.3±1.0**
8.0±2.1**
7.6±2.6**
, 百拇医药
6.2±1.3**
5.0±1.2**
Lo
211.9±57.5
60.8±10.6**
69.4±12.5**
49.7±11.8**
41.2±16.3**
26.8±22.1**
+dp/dtmax(kPa/s)
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1 521±297
689±89**
827±133**
642±150**
559±163**
359±169**
-dp/dtmax(kPa/s)
987±17
463±120**
596±178**
, 百拇医药
489±190**
410±149**
310±91**
注：与正常值比较：**P<0.01
相关分析证明β-EP与MAP呈显著负相关，相关系数及可决系数均大于0.50；β-EP与其它血流动力学指标也有一定的相关性(P均<0.01)，但相关系数及可决系数均小于0.50(表2)。
表2 家兔创伤低血容量性休克后血浆中β-EP水平变化
与血流动力学各参数变化的相关性分析
指标
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r值
R2值
P值
MAP(kPa)
-0.71
0.60
<0.01
LVSP(kPa)
-0.42
0.18
<0.01
IP(kPa)
, 百拇医药 -0.38
0.14
<0.01
+dp/dtmax(kPa/s)
-0.32
0.10
<0.01
-dp/dtmax(kPa/s)
-0.26
0.09
<0.01
Vpm(L/s)
, http://www.100md.com
-0.29
0.06
<0.01
L0
-0.32
0.10
<0.01
注：r为相关系数；R2为可决系数
1.2 β-EP抗血清及δ、κ阿片受体特异性拮抗剂ICI174864、Nor-BNI对创伤低血容量性休克兔血流动力学的影响：
1.2.1 动物模型制备：创伤低血容量性休克家兔36只的模型制备方法同前。
, 百拇医药
1.2.2 方法：动物随机分为4组，Ⅰ组为生理盐水对照组(11只)，Ⅱ组为β-EP抗血清治疗组(9只)，Ⅲ组为ICI174864治疗组(8只)，Ⅳ组为Nor-BNI治疗组(8只)。模型完成后脑室内注射1.33×10-5(1/7 500)浓度β-EP 25 μl、ICI174864及Nor-BNI 25 μg(25 μl)。给药前后不同时间点监测血流动力学参数；同时抽取2 ml动脉血制备血清，按王继贵法测乳酸脱氢酶(LDH)、Fishman法测β-葡萄糖醛酸酶(β-G)，并输给2 ml生理盐水。
1.2.3 结果：从表3可见，β-EP抗血清及δ、κ阿片受体拮抗剂对创伤低血容量性休克有良好的治疗效果， 表现为MAP升高，血流动力学参数改善。给药后5分钟出现作用，一次脑室内注射作用可持续6小时之久，说明β-EP通过介导δ及κ阿片受体参与了创伤低血容量性休克的病理生理过程。
表3 β-EP抗血清、ICI174864和Nor-BNI对创伤低血容
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量性休克家兔不同时间点血流动力学的影响(x±s)
指标
组别
动物数
(只)
正常值
休克后
给药后时间(min)
5
30
90
180
300
, http://www.100md.com
MAP(kPa)
Ⅰ组
11
12.6±1.5
6.6±0.2
7.0±0.7
7.3±1.3
6.8±2.3
5.5±3.7
3.1± 3.0
Ⅱ组
9
, http://www.100md.com
13.9±1.3
6.6±0.2
11.9±1.1**
10.1±1.2**
9.0±2.0**
7.4±3.2**
5.9±5.5
Ⅲ组
8
13.0±1.5
6.6±0.1
, http://www.100md.com
9.6±1.4*
10.4±0.9**
10.3±2.0**
8.2±4.4**
8.1±4.8**
Ⅳ组
8
12.9±1.5
6.6±0.3
8.2±1.2
9.3±1.4**
, 百拇医药
8.8±1.8*
8.2±3.6**
7.5±3.5*
LVSP(kPa)
Ⅰ组
11
20.6±1.8
12.8±1.0
12.5±2.5
12.5±2.5
11.9±2.7
, 百拇医药
7.7±5.1
5.2±5.1
Ⅱ组
9
20.0±4.0
12.9±2.4
15.7±3.5*
15.7±2.8*
13.7±2.8
11.8±5.2*
12.2±2.9*
, 百拇医药
Ⅲ组
8
21.0±3.3
11.4±1.6
16.2±2.5*
16.7±1.4**
16.2±3.1**
13.6±4.1**
13.0±10.5*
Ⅳ组
8
, http://www.100md.com
19.2±4.0
10.8±2.4
12.4±4.3
13.2±3.5
12.7±2.8
12.5±5.2*
9.1±2.9**
IP(kPa)
Ⅰ组
11
16.6±2.4
10.1±2.1
, 百拇医药
9.3±2.0
9.3±3.7
9.2±3.7
6.2±4.5
3.4±4.3
Ⅱ组
9
17.4±5.2
9.4±2.2
14.3±2.4**
13.6±3.0**
12.0±4.2**
, 百拇医药
10.0±5.1*
7.7±6.7
Ⅲ组
8
18.4±3.7
9.4±2.6
14.7±2.9*
15.4±3.9*
13.8±2.6**
11.2±4.6*
9.8±4.6*
, http://www.100md.com
Ⅳ组
8
16.7±3.6
8.9±2.3
11.0±2.1*
11.6±2.1*
11.6±2.2*
11.0±5.3*
7.0±4.5*
+dp/dtmax
Ⅰ组
, 百拇医药
11
1635±496
757±268
738±233
688±320**
638±333
406±300
228±403
(kPa/s)
Ⅱ组
9
1680±387
, 百拇医药
853±195
1172±248**
1003±254**
864±325
717±442
504±471
Ⅲ组
8
1753±344
847±248
1170±274**
, http://www.100md.com
1263±280**
1 109±385**
832±488**
749±581*
Ⅳ组
8
1 641±450
743±198
881±232
976±293*
853±291*
, 百拇医药
806±396**
590±484*
-dp/dtmax
Ⅰ组
11
917±118
518±121
456±68
426±140
432±129
325±218
, http://www.100md.com 140±191
(kPa/s)
Ⅱ组
9
1000±300
492±104
755±195**
652±180**
658±305**
499±244*
413±368*
, 百拇医药
Ⅲ组
8
871±191
506±48
699±169**
746±115**
596±190**
549±239*
525±343*
Ⅳ组
8
, 百拇医药
1005±253
459±147
528±135
616±209**
599±157*
542±275*
437±300*
Lo
Ⅰ组
11
151±41
, http://www.100md.com
64±21
63±19
57±27
54±47
27±24
19±34
Ⅱ组
9
179±45
64±27
156±56**
105±44**
, 百拇医药
85±48
48±16
57±45
Ⅲ组
8
173±45
72±23
116±22**
138±43**
94±39
71±55**
71±69
, 百拇医药
Ⅳ组
8
173±63
58±27
72±34
90±41
89±64
80±30*
76±64
注：与Ⅰ组比较：*P<0.05，**P<0.01
表4显示兔创伤低血容量性休克后血清LDH和β-G持续性升高，给予ICI174864及Nor-BNI能使LDH和β-G上升幅度明显减轻。
, 百拇医药
表4 ICI174864和Nor-BNI对创伤低血容量性休克
家兔不同时间点血浆LDH和β-G水平的影响(x±s)
指标
组别
动物数
(只)
正常值
休克后
给药后时间(min)
45
90
180
, http://www.100md.com
300
LDH(U)
Ⅰ组
11
245±66
509±320
599±222
641±173
753±243
811±284
Ⅲ组
8
170±45
, 百拇医药
413±87
284±116**
344±121**
405±82**
475±113*
Ⅳ组
8
216±68
505±216
376±158*
492±195*
, 百拇医药
527±306*
713±294
β-G(U)
Ⅰ组
11
691±201
1332±437
1678±124
1645±227
1843±373
1962±407
Ⅲ组
, 百拇医药
8
662±130
1330±480
162±413**
1033±276**
1524±339
1543±544*
Ⅳ组
8
930±177
1158±302
891±445**
, http://www.100md.com
1085±510**
1489±117*
1546±330*
注：与Ⅰ组比较：*P<0.05，**P<0.01
1.3 ICI174864和Nor-BNI抗大鼠创伤低血容量性休克的作用：
1.3.1 动物模型制备：Wistar大鼠37只，随机分为3组，A组为生理盐水对照组(12只)，B组为ICI174864组(12只)，C组为Nor-BNI组(13只)。模型制备方法同上，脑室内注射给药剂量为10 μg，容量为10 μl。
1.3.2 方法：按上述方法测定实验动物血流动力学变化及存活时间。
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1.3.3 结果：给药后A、B、C 3组大鼠存活时间分别为(4.0±2.2)小时、(9.2±3.2)小时和(8.6±2.4)小时，5小时存活率分别为42%、100%和77%，B、C组与A组比较，P均<0.01。
ICI174864和Nor-BNI组对创伤低血容量性休克大鼠有明显的治疗作用，脑室内注射后MAP迅速升高，血流动力学改善(表5)。
表5 ICI174864和Nor-BNI对创伤低血容量性休克大
鼠不同时间点血流动力学的影响(x±s)
指标
组别
动物数
(只)
, http://www.100md.com
正常值
休克后
给药后时间(min)
5
30
90
180
300
MAP(kPa)
A组
12
12.9±2.0
6.7±0.2
, 百拇医药
7.8±1.2
8.5±1.3
7.1±3.0
4.7±4.3
3.5±4.4
B组
12
13.3±0.9
6.6±0.3
10.1±0.9*
10.8±0.5*
11.4±0.2**
, 百拇医药
11.2±1.4**
10.0±2.6**
C组
13
13.8±1.5
6.6±0.2
10.0±1.7*
11.0±1.3*
10.8±2.0**
10.3±2.2**
, http://www.100md.com 8.8±4.3**
LVSP(kPa)
A组
12
19.3±2.3
13.6±1.6
14.3±3.3
14.9±2.0
12.5±4.7
7.5±7.6
5.6±7.1
B组
, 百拇医药
12
19.8±1.7
12.8±2.3
17.6±3.5
19.3±2.2*
18.4±1.8**
18.1±2.3**
16.4±3.4**
C组
13
20.5±1.8
, http://www.100md.com
12.2±1.5
17.3±2.3*
19.2±1.8**
17.3±2.1**
16.5±2.8**
12.5±6.4**
IP(kPa)
A组
12
17.3±1.6
11.8±1.4
, 百拇医药
12.1±3.1*
11.8±2.2
11.3±4.6
7.1±6.4
5.6±6.7
B组
12
17.6±2.5
11.0±2.0
17.8±2.3*
16.8±2.5*
, http://www.100md.com
17.0±1.6**
16.7±2.2**
14.9±3.9**
C组
13
18.5±3.7
11.8±1.3
15.7±2.1
17.5±1.8*
16.3±2.0**
15.3±2.6**
, 百拇医药
11.7±5.6**
+dp/dtmax
A组
12
1 516±427
884±119
880±236
970±239
780±428
439±454
278±458
(kPa/s)
, http://www.100md.com
B组
12
1 372±550
860±191
1 427±498**
1483±395**
1 364±307**
1380±380**
1 207±502**
C组
13
, http://www.100md.com
1 630±412
908±239
1 384±350**
1560±298**
1 374±320**
1214±332**
892±476*
-dp/dtmax
A组
12
928±177
, http://www.100md.com
575±93
578±176
585±173
539±297
350±358
285±358
(kPa/s)
B组
12
962±298
576±131
842±251
, http://www.100md.com
906±229**
1 002±356**
898±292**
898±340**
C组
13
1 067±408
592±157
780±193
946±213**
915±152*
, 百拇医药
769±256**
582±342*
Vpm(L/s)
A组
12
12.9±2.9
9.2±2.3
9.1±2.0
10.3±3.4
8.4±4.0
5.0±4.6
4.2±5.3
, 百拇医药
B组
12
12.7±3.5
8.0±0.9
13.7±3.9**
14.7±3.4**
13.8± 2.5**
13.4±2.5**
11.8±3.5**
C组
13
, http://www.100md.com
13.8±3.1
9.1±2.8
12.2±2.9*
12.2±2.6*
12.2±3.1**
10.9±2.7**
9.9±4.6**
Lo
A组
12
201±40
, 百拇医药
84±19
83±23
97±40
75±46
40±46
32±46
B组
12
202±51
79±26
164±51**
192±76**
, http://www.100md.com
176±64**
159±50**
128±72**
C组
13
232±99
86±28
145±40**
180±49**
161±46**
126±47**
, http://www.100md.com
96±63**
注：与A组比较：*P<0.05，**P<0.01
2 讨 论
文献报道，低血容量性休克、内毒素休克等多种循环性休克时血浆中β-EP含量升高，麻醉动物，静注或脑室内注射β-EP导致剂量依赖性的血压下降〔7〕，纳络酮能有效地逆转，可见β-EP参与了上述休克的病理生理过程。本研究动态观察创伤低血容量性休克兔β-EP变化规律，证实创伤低血容量性休克时β-EP升高，而且与MAP呈显著负相关，其相关系数及可决系数均大于0.50，可见β-EP升高是MAP下降的重要原因之一。β-EP升高与血流动力学参数也有一定的相关性，我们也观察到脑室内注射β-EP抗血清，能有效地治疗兔创伤低血容量性休克的血流动力学障碍，提示β-EP可能参与了创伤低血容量性休克的病理生理过程。β-EP通过阿片受体介导发挥作用，有文献报道，介导低血容量性休克主要为δ及κ受体，介导内毒素休克主要为δ和κ受体〔3〕，介导烧伤休克主要为μ及δ受体〔4〕。我们及Holaday都报道δ受体拮抗剂治疗内毒素休克及低血容量性休克有效〔5，6〕。本研究对创伤低血容量性休克动物脑室内给予δ受体拮抗剂ICI174864和κ受体拮抗剂Nor-BNI，可逆转创伤低血容量性休克的血流动力学障碍，提高存活率，减轻动物LDH及β-G上升的幅度，表明β-EP是通过δ及κ阿片受体介导了创伤低血容量性休克的病理生理过程，用δ受体拮抗剂ICI174864及κ受体拮抗剂Nor-BNI脑室内注射可改善创伤低血容量性休克动物血流动力学指标，纠正代谢紊乱，延长存活时间，提高存活率。
, 百拇医药
基金项目：全军“九五”指令性攻关项目(96L041)
作者简介：胡德耀(1940-)，男(汉族)，江西南昌人，研究员，博士生导师。主要研究方向为抗休克药物的药理，获国家及军队科技成果9项，发表论文100余篇，著专著5部，现任全国、全军及重庆市新药评审委员，中国药理学会心血管专业学会常委，全军药学专业委员会军事药学专业组委员等。
作者单位：胡德耀(第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
潘学坤(第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
刘良明(第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
卢儒权(第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
, http://www.100md.com
参考文献
[1]Maria H,Paul L M,Jake P,et al.Endogenous opioid peptides and blood pressure regulation during controlled stepwise hemorrhagic hypotension.Circ Shock,1991,35:102-108.
[2]刘良明，胡德耀，卢儒权，等.δ、κ亚型阿片受体在促甲状腺素释放激素抗兔失血性休克中的作用.中国病理生理杂志，1998，14：118-120.
[3]许铁.内源性阿片物质在内毒素和心源性休克中的作用机制研究.生理科学进展，1993，24(3)：248-251.
[4]洪新如.下丘脑室房核β-内啡肽在大鼠烫伤休克中的作用及其受体机制的研究.生理科学进展，1993，24(3)：242-244.
, 百拇医药
[5]卢儒权，刘良明，胡德耀，等.TRH与ICI174864合用抗兔失血性休克作用.中国危重病急救医学，1996，8(10)：579-581.
[6]Holaday J W,Ruvio B A,Rolbles L E,et al.M154129 a putative delta antagonise reverse endotoxin shock without altering endophin anagisia.Life Sci,1982,31:2209-2214.
[7]陈腾，高瀚，徐宪虎，等.失血性休克对血浆β-内啡肽样免疫活性物质含量变化的实验研究.上海医学，1990，13：36-38., 百拇医药
摘 要 目的：阐明介导创伤性休克的阿片受体亚型，并探讨相应的δ、κ阿片受体拮抗剂在治疗创伤低血容量性休克中的意义。方法：制造兔及大鼠的创伤低血容量性休克模型，休克兔分两部分进行实验。第1部分观察创伤低血容量性休克不同时间点，β-内啡肽(β-EP)与平均动脉压(MAP)及血流动力学的关系。第2部分兔脑室内分别注射生理盐水、β-EP抗血清、δ-阿片受体拮抗剂ICI 174864及κ阿片受体拮抗剂Nor-BNI，观察实验血流动力学、乳酸脱氢酶(LDH)、β-葡萄糖醛酸酶(β-G)。按上述方法制备休克大鼠模型，并经脑室内注射生理盐水、ICI 174864及Nor-BNI，观察血流动力学、存活时间及5小时存活率。结果：创伤低血容量性休克兔β-EP急剧升高，同时MAP及血流动力学参数下降，β-EP和MAP呈显著负相关，β-EP与血流动力学参数也有一定的相关性。β-EP抗血清有明显拮抗β-EP的作用；ICI 174864及Nor-BNI能有效地拮抗兔及大鼠创伤低血容量性休克，脑室内给药后MAP升高，血流动力学参数改善，血清LDH及β-G上升幅度减轻。休克大鼠存活时间延长，5小时存活率提高。结论：β-EP可能通过δ、κ阿片受体的介导，参与创伤低血容量性休克的病理生理过程，δ、κ阿片受体拮抗剂可能是一种新型的治疗创伤低血容量性休克的药物。
, 百拇医药
关键词：β-内啡肽 休克，创伤性，低血容量性 δ-阿片受体拮抗剂 κ阿片受体拮抗剂
文献报道，β-内啡肽(β-EP)主要通过其受体介导，参与多种循环性休克的病理生理过程。然而不同类型的休克介导的阿片受体不同：低血容量性休克及内毒素休克由δ和κ受体介导〔1-3〕，烧伤性休克由δ及μ受体介导〔4〕，但介导创伤性休克的阿片受体很少报道，尚需阐明。纳络酮对多种循环性休克有良好的治疗作用，但因其选择性不高，又阻断μ受体，故在创伤性休克中的使用颇受限制。目前有报道使用特异性δ、κ阿片受体拮抗剂抗低血容量性休克、内毒素性休克有效〔5，6〕，但对创伤低血容量性休克疗效如何值得研究。本研究探讨介导创伤低血容量性休克的阿片受体亚型，并探讨相应的δ、κ阿片受体拮抗剂的治疗作用。
1 材料与方法
1.1 创伤低血容量性休克兔血浆中β-EP变化规律及其与血流动力学改变的关系：
, 百拇医药
1.1.1 动物模型制备：家兔9只，乙醚麻醉，右颈总动脉插管至左心室，经二道生理记录仪放大连接到血流动力学分析系统(第二军医大学研制)，监测血流动力学指标。左股动脉插管以监测平均动脉压(MAP)，肝素抗凝，右股骨中段开放粉碎性骨折及经股动脉放血 ，15分钟内放至动物血压为6.67 kPa(1 kPa=7.5 mmHg)并维持45分钟，完成休克模型(为休克0分钟)。
1.1.2 方法：分别在休克前后不同时间监测血流动力学指标， MAP左室内收缩压(LVSP)，等容收缩压(IP)，左室内压最大上升与下降速度比(±dp/dtmax)，实测心肌最大收缩速度(Vpm)及心肌收缩向量环面积(Lo)；同时抽动脉血2 ml按放射免疫法作β-EP测定，抽血后补给等量的生理盐水。
1.1.3 结果：休克后0分钟与休克前比较，血浆中β-EP值显著升高，同时，MAP、LVSP、IP、Vpm、±dp/dtmax及Lo明显下降；休克后45分钟β-EP有所下降，MAP及其它血流动力学指标有所回升，随后上列指标都迅速恶化(表1)。
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表1 家兔创伤低血容量性休克后不同时间点血浆β-EP水平及血流动力学的变化(x±s)
指标
正常值
休克后时间(min)
0
45
90
180
300
β-EP(ng/L)
69±21
200±52**
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94±17
121±25**
215±57**
321±92**
MAP(kPa)
13.2±1.5
6.6±0.2**
8.6±0.5**
7.9±0.6**
6.3±1.6**
, http://www.100md.com
4.7±1.1**
LVSP(kPa)
21.0±1.5
10.9±1.0**
14.0±1.7**
13.0±1.1**
11.3±1.6**
9.8±3.3**
IP(kPa)
19.4±2.0
, 百拇医药
11.4±1.4**
13.0±1.4**
10.8±1.7**
9.4±2.3**
7.0±2.4**
Vpm(L/s)
10.3±2.9
6.3±1.0**
8.0±2.1**
7.6±2.6**
, 百拇医药
6.2±1.3**
5.0±1.2**
Lo
211.9±57.5
60.8±10.6**
69.4±12.5**
49.7±11.8**
41.2±16.3**
26.8±22.1**
+dp/dtmax(kPa/s)
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1 521±297
689±89**
827±133**
642±150**
559±163**
359±169**
-dp/dtmax(kPa/s)
987±17
463±120**
596±178**
, 百拇医药
489±190**
410±149**
310±91**
注：与正常值比较：**P<0.01
相关分析证明β-EP与MAP呈显著负相关，相关系数及可决系数均大于0.50；β-EP与其它血流动力学指标也有一定的相关性(P均<0.01)，但相关系数及可决系数均小于0.50(表2)。
表2 家兔创伤低血容量性休克后血浆中β-EP水平变化
与血流动力学各参数变化的相关性分析
指标
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r值
R2值
P值
MAP(kPa)
-0.71
0.60
<0.01
LVSP(kPa)
-0.42
0.18
<0.01
IP(kPa)
, 百拇医药 -0.38
0.14
<0.01
+dp/dtmax(kPa/s)
-0.32
0.10
<0.01
-dp/dtmax(kPa/s)
-0.26
0.09
<0.01
Vpm(L/s)
, http://www.100md.com
-0.29
0.06
<0.01
L0
-0.32
0.10
<0.01
注：r为相关系数；R2为可决系数
1.2 β-EP抗血清及δ、κ阿片受体特异性拮抗剂ICI174864、Nor-BNI对创伤低血容量性休克兔血流动力学的影响：
1.2.1 动物模型制备：创伤低血容量性休克家兔36只的模型制备方法同前。
, 百拇医药
1.2.2 方法：动物随机分为4组，Ⅰ组为生理盐水对照组(11只)，Ⅱ组为β-EP抗血清治疗组(9只)，Ⅲ组为ICI174864治疗组(8只)，Ⅳ组为Nor-BNI治疗组(8只)。模型完成后脑室内注射1.33×10-5(1/7 500)浓度β-EP 25 μl、ICI174864及Nor-BNI 25 μg(25 μl)。给药前后不同时间点监测血流动力学参数；同时抽取2 ml动脉血制备血清，按王继贵法测乳酸脱氢酶(LDH)、Fishman法测β-葡萄糖醛酸酶(β-G)，并输给2 ml生理盐水。
1.2.3 结果：从表3可见，β-EP抗血清及δ、κ阿片受体拮抗剂对创伤低血容量性休克有良好的治疗效果， 表现为MAP升高，血流动力学参数改善。给药后5分钟出现作用，一次脑室内注射作用可持续6小时之久，说明β-EP通过介导δ及κ阿片受体参与了创伤低血容量性休克的病理生理过程。
表3 β-EP抗血清、ICI174864和Nor-BNI对创伤低血容
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量性休克家兔不同时间点血流动力学的影响(x±s)
指标
组别
动物数
(只)
正常值
休克后
给药后时间(min)
5
30
90
180
300
, http://www.100md.com
MAP(kPa)
Ⅰ组
11
12.6±1.5
6.6±0.2
7.0±0.7
7.3±1.3
6.8±2.3
5.5±3.7
3.1± 3.0
Ⅱ组
9
, http://www.100md.com
13.9±1.3
6.6±0.2
11.9±1.1**
10.1±1.2**
9.0±2.0**
7.4±3.2**
5.9±5.5
Ⅲ组
8
13.0±1.5
6.6±0.1
, http://www.100md.com
9.6±1.4*
10.4±0.9**
10.3±2.0**
8.2±4.4**
8.1±4.8**
Ⅳ组
8
12.9±1.5
6.6±0.3
8.2±1.2
9.3±1.4**
, 百拇医药
8.8±1.8*
8.2±3.6**
7.5±3.5*
LVSP(kPa)
Ⅰ组
11
20.6±1.8
12.8±1.0
12.5±2.5
12.5±2.5
11.9±2.7
, 百拇医药
7.7±5.1
5.2±5.1
Ⅱ组
9
20.0±4.0
12.9±2.4
15.7±3.5*
15.7±2.8*
13.7±2.8
11.8±5.2*
12.2±2.9*
, 百拇医药
Ⅲ组
8
21.0±3.3
11.4±1.6
16.2±2.5*
16.7±1.4**
16.2±3.1**
13.6±4.1**
13.0±10.5*
Ⅳ组
8
, http://www.100md.com
19.2±4.0
10.8±2.4
12.4±4.3
13.2±3.5
12.7±2.8
12.5±5.2*
9.1±2.9**
IP(kPa)
Ⅰ组
11
16.6±2.4
10.1±2.1
, 百拇医药
9.3±2.0
9.3±3.7
9.2±3.7
6.2±4.5
3.4±4.3
Ⅱ组
9
17.4±5.2
9.4±2.2
14.3±2.4**
13.6±3.0**
12.0±4.2**
, 百拇医药
10.0±5.1*
7.7±6.7
Ⅲ组
8
18.4±3.7
9.4±2.6
14.7±2.9*
15.4±3.9*
13.8±2.6**
11.2±4.6*
9.8±4.6*
, http://www.100md.com
Ⅳ组
8
16.7±3.6
8.9±2.3
11.0±2.1*
11.6±2.1*
11.6±2.2*
11.0±5.3*
7.0±4.5*
+dp/dtmax
Ⅰ组
, 百拇医药
11
1635±496
757±268
738±233
688±320**
638±333
406±300
228±403
(kPa/s)
Ⅱ组
9
1680±387
, 百拇医药
853±195
1172±248**
1003±254**
864±325
717±442
504±471
Ⅲ组
8
1753±344
847±248
1170±274**
, http://www.100md.com
1263±280**
1 109±385**
832±488**
749±581*
Ⅳ组
8
1 641±450
743±198
881±232
976±293*
853±291*
, 百拇医药
806±396**
590±484*
-dp/dtmax
Ⅰ组
11
917±118
518±121
456±68
426±140
432±129
325±218
, http://www.100md.com 140±191
(kPa/s)
Ⅱ组
9
1000±300
492±104
755±195**
652±180**
658±305**
499±244*
413±368*
, 百拇医药
Ⅲ组
8
871±191
506±48
699±169**
746±115**
596±190**
549±239*
525±343*
Ⅳ组
8
, 百拇医药
1005±253
459±147
528±135
616±209**
599±157*
542±275*
437±300*
Lo
Ⅰ组
11
151±41
, http://www.100md.com
64±21
63±19
57±27
54±47
27±24
19±34
Ⅱ组
9
179±45
64±27
156±56**
105±44**
, 百拇医药
85±48
48±16
57±45
Ⅲ组
8
173±45
72±23
116±22**
138±43**
94±39
71±55**
71±69
, 百拇医药
Ⅳ组
8
173±63
58±27
72±34
90±41
89±64
80±30*
76±64
注：与Ⅰ组比较：*P<0.05，**P<0.01
表4显示兔创伤低血容量性休克后血清LDH和β-G持续性升高，给予ICI174864及Nor-BNI能使LDH和β-G上升幅度明显减轻。
, 百拇医药
表4 ICI174864和Nor-BNI对创伤低血容量性休克
家兔不同时间点血浆LDH和β-G水平的影响(x±s)
指标
组别
动物数
(只)
正常值
休克后
给药后时间(min)
45
90
180
, http://www.100md.com
300
LDH(U)
Ⅰ组
11
245±66
509±320
599±222
641±173
753±243
811±284
Ⅲ组
8
170±45
, 百拇医药
413±87
284±116**
344±121**
405±82**
475±113*
Ⅳ组
8
216±68
505±216
376±158*
492±195*
, 百拇医药
527±306*
713±294
β-G(U)
Ⅰ组
11
691±201
1332±437
1678±124
1645±227
1843±373
1962±407
Ⅲ组
, 百拇医药
8
662±130
1330±480
162±413**
1033±276**
1524±339
1543±544*
Ⅳ组
8
930±177
1158±302
891±445**
, http://www.100md.com
1085±510**
1489±117*
1546±330*
注：与Ⅰ组比较：*P<0.05，**P<0.01
1.3 ICI174864和Nor-BNI抗大鼠创伤低血容量性休克的作用：
1.3.1 动物模型制备：Wistar大鼠37只，随机分为3组，A组为生理盐水对照组(12只)，B组为ICI174864组(12只)，C组为Nor-BNI组(13只)。模型制备方法同上，脑室内注射给药剂量为10 μg，容量为10 μl。
1.3.2 方法：按上述方法测定实验动物血流动力学变化及存活时间。
, http://www.100md.com
1.3.3 结果：给药后A、B、C 3组大鼠存活时间分别为(4.0±2.2)小时、(9.2±3.2)小时和(8.6±2.4)小时，5小时存活率分别为42%、100%和77%，B、C组与A组比较，P均<0.01。
ICI174864和Nor-BNI组对创伤低血容量性休克大鼠有明显的治疗作用，脑室内注射后MAP迅速升高，血流动力学改善(表5)。
表5 ICI174864和Nor-BNI对创伤低血容量性休克大
鼠不同时间点血流动力学的影响(x±s)
指标
组别
动物数
(只)
, http://www.100md.com
正常值
休克后
给药后时间(min)
5
30
90
180
300
MAP(kPa)
A组
12
12.9±2.0
6.7±0.2
, 百拇医药
7.8±1.2
8.5±1.3
7.1±3.0
4.7±4.3
3.5±4.4
B组
12
13.3±0.9
6.6±0.3
10.1±0.9*
10.8±0.5*
11.4±0.2**
, 百拇医药
11.2±1.4**
10.0±2.6**
C组
13
13.8±1.5
6.6±0.2
10.0±1.7*
11.0±1.3*
10.8±2.0**
10.3±2.2**
, http://www.100md.com 8.8±4.3**
LVSP(kPa)
A组
12
19.3±2.3
13.6±1.6
14.3±3.3
14.9±2.0
12.5±4.7
7.5±7.6
5.6±7.1
B组
, 百拇医药
12
19.8±1.7
12.8±2.3
17.6±3.5
19.3±2.2*
18.4±1.8**
18.1±2.3**
16.4±3.4**
C组
13
20.5±1.8
, http://www.100md.com
12.2±1.5
17.3±2.3*
19.2±1.8**
17.3±2.1**
16.5±2.8**
12.5±6.4**
IP(kPa)
A组
12
17.3±1.6
11.8±1.4
, 百拇医药
12.1±3.1*
11.8±2.2
11.3±4.6
7.1±6.4
5.6±6.7
B组
12
17.6±2.5
11.0±2.0
17.8±2.3*
16.8±2.5*
, http://www.100md.com
17.0±1.6**
16.7±2.2**
14.9±3.9**
C组
13
18.5±3.7
11.8±1.3
15.7±2.1
17.5±1.8*
16.3±2.0**
15.3±2.6**
, 百拇医药
11.7±5.6**
+dp/dtmax
A组
12
1 516±427
884±119
880±236
970±239
780±428
439±454
278±458
(kPa/s)
, http://www.100md.com
B组
12
1 372±550
860±191
1 427±498**
1483±395**
1 364±307**
1380±380**
1 207±502**
C组
13
, http://www.100md.com
1 630±412
908±239
1 384±350**
1560±298**
1 374±320**
1214±332**
892±476*
-dp/dtmax
A组
12
928±177
, http://www.100md.com
575±93
578±176
585±173
539±297
350±358
285±358
(kPa/s)
B组
12
962±298
576±131
842±251
, http://www.100md.com
906±229**
1 002±356**
898±292**
898±340**
C组
13
1 067±408
592±157
780±193
946±213**
915±152*
, 百拇医药
769±256**
582±342*
Vpm(L/s)
A组
12
12.9±2.9
9.2±2.3
9.1±2.0
10.3±3.4
8.4±4.0
5.0±4.6
4.2±5.3
, 百拇医药
B组
12
12.7±3.5
8.0±0.9
13.7±3.9**
14.7±3.4**
13.8± 2.5**
13.4±2.5**
11.8±3.5**
C组
13
, http://www.100md.com
13.8±3.1
9.1±2.8
12.2±2.9*
12.2±2.6*
12.2±3.1**
10.9±2.7**
9.9±4.6**
Lo
A组
12
201±40
, 百拇医药
84±19
83±23
97±40
75±46
40±46
32±46
B组
12
202±51
79±26
164±51**
192±76**
, http://www.100md.com
176±64**
159±50**
128±72**
C组
13
232±99
86±28
145±40**
180±49**
161±46**
126±47**
, http://www.100md.com
96±63**
注：与A组比较：*P<0.05，**P<0.01
2 讨 论
文献报道，低血容量性休克、内毒素休克等多种循环性休克时血浆中β-EP含量升高，麻醉动物，静注或脑室内注射β-EP导致剂量依赖性的血压下降〔7〕，纳络酮能有效地逆转，可见β-EP参与了上述休克的病理生理过程。本研究动态观察创伤低血容量性休克兔β-EP变化规律，证实创伤低血容量性休克时β-EP升高，而且与MAP呈显著负相关，其相关系数及可决系数均大于0.50，可见β-EP升高是MAP下降的重要原因之一。β-EP升高与血流动力学参数也有一定的相关性，我们也观察到脑室内注射β-EP抗血清，能有效地治疗兔创伤低血容量性休克的血流动力学障碍，提示β-EP可能参与了创伤低血容量性休克的病理生理过程。β-EP通过阿片受体介导发挥作用，有文献报道，介导低血容量性休克主要为δ及κ受体，介导内毒素休克主要为δ和κ受体〔3〕，介导烧伤休克主要为μ及δ受体〔4〕。我们及Holaday都报道δ受体拮抗剂治疗内毒素休克及低血容量性休克有效〔5，6〕。本研究对创伤低血容量性休克动物脑室内给予δ受体拮抗剂ICI174864和κ受体拮抗剂Nor-BNI，可逆转创伤低血容量性休克的血流动力学障碍，提高存活率，减轻动物LDH及β-G上升的幅度，表明β-EP是通过δ及κ阿片受体介导了创伤低血容量性休克的病理生理过程，用δ受体拮抗剂ICI174864及κ受体拮抗剂Nor-BNI脑室内注射可改善创伤低血容量性休克动物血流动力学指标，纠正代谢紊乱，延长存活时间，提高存活率。
, 百拇医药
基金项目：全军“九五”指令性攻关项目(96L041)
作者简介：胡德耀(1940-)，男(汉族)，江西南昌人，研究员，博士生导师。主要研究方向为抗休克药物的药理，获国家及军队科技成果9项，发表论文100余篇，著专著5部，现任全国、全军及重庆市新药评审委员，中国药理学会心血管专业学会常委，全军药学专业委员会军事药学专业组委员等。
作者单位：胡德耀(第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
潘学坤(第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
刘良明(第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
卢儒权(第三军医大学大坪医院野战外科研究所，重庆 400042)
, http://www.100md.com
参考文献
[1]Maria H,Paul L M,Jake P,et al.Endogenous opioid peptides and blood pressure regulation during controlled stepwise hemorrhagic hypotension.Circ Shock,1991,35:102-108.
[2]刘良明，胡德耀，卢儒权，等.δ、κ亚型阿片受体在促甲状腺素释放激素抗兔失血性休克中的作用.中国病理生理杂志，1998，14：118-120.
[3]许铁.内源性阿片物质在内毒素和心源性休克中的作用机制研究.生理科学进展，1993，24(3)：248-251.
[4]洪新如.下丘脑室房核β-内啡肽在大鼠烫伤休克中的作用及其受体机制的研究.生理科学进展，1993，24(3)：242-244.
, 百拇医药
[5]卢儒权，刘良明，胡德耀，等.TRH与ICI174864合用抗兔失血性休克作用.中国危重病急救医学，1996，8(10)：579-581.
[6]Holaday J W,Ruvio B A,Rolbles L E,et al.M154129 a putative delta antagonise reverse endotoxin shock without altering endophin anagisia.Life Sci,1982,31:2209-2214.
[7]陈腾，高瀚，徐宪虎，等.失血性休克对血浆β-内啡肽样免疫活性物质含量变化的实验研究.上海医学，1990，13：36-38., 百拇医药