盘状红斑狼疮皮损中IgG亚类的研究
孙晓杰 赵玉铭 王雅坤 赖鑫 白兆震 陈洪铎
关键词：盘状红斑狼疮 免疫球蛋白G 免疫荧光
红斑狼疮皮肤的真表皮交界处有免疫球蛋白沉积，这可能与狼疮的皮损形成有关。然而各IgG亚类在盘状红斑狼疮皮损中沉积有何差别，尚未见报道。我们应用免疫荧光技术对7例盘状红斑狼疮(discold lupus erythema tosus,DLE)皮损真表皮交界处免疫球蛋白G亚类沉积的强度、宽度进行了比较研究，报告如下。
1 材料与方法
1.1 病例 7例DLE标本符合DLE病理所见，且免疫病理示IgG沉积。男3例，女4例。平均年龄45岁。取材部位：面部6例，肩背部1例。皮损组织取材后用OCT复合物(美国MILES公司)包埋，液氮冷冻贮存于-70℃冰箱待检。
1.2 试剂及方法 抗体均购自Sigma公司。小鼠抗人IgG 1、IgG 2、IgG 3、IgG 4G亚类单克隆抗体工作浓度为1∶200。FITC标记羊抗鼠二抗工作浓度均为1∶40。采用间接免疫荧光技术染色。
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1.3 结果观察 (1)强度：分为-(无荧光带)、+(可见较弱荧光带)、(可见较清晰荧光带)、(见清晰明亮且较宽的黄绿色荧光带)；(2)宽度：荧光带的宽度以μm计量，用显微尺测量。
1.4 统计学处理 强度的比较采用秩和检验(Wilcoxon两样本比较法及Kruskal-Wallis法)。阳性率的比较采用χ 2 检验。宽度的比较采用t检验。
2 结果
2.1 IgG亚类的荧光强度 7例标本中，IgG 1、IgG 2、IgG 3均阳性7例，IgG 4阳性4例。皮损中的荧光强弱顺序均为IgG 1≥IgG 2>IgG 3>IgG 4。统计学检验示IgG 1和IgG 2荧光沉积强度明显强于IgG 3及IGg 4(秩和检验t值分别为80.5，77，84，均为P<0.01)，而其他各亚类之间无差别。各亚类之间阳性率无差别。
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2.2 IgG亚类的荧光沉积宽度 荧光沉积宽度为IgG 1>IgG 2>IgG 4>IgG 3，t检验示荧光沉积宽度IgG 1明显宽于IgG 3(t=5.37，P<0.05)，其他各亚类之间无显著差别。
3 讨论
关于盘状红班狼疮皮损中IgG亚类沉积形式以往未见报道。我们在研究中首次观察到DLE皮损中IgG 1和IgG 2的荧光强度均大于IgG 3和IgG 4，宽度则IgG 1沉积大于IgG 3。以上结果提示IgG 1和IgG 2是DLE皮损中沉积的主要IgG亚类，这些IgG亚类在DLE皮损的发生中可能起主要作用。自身免疫性疾病中各IgG亚类产生的比例不同。关于红斑狼疮皮肤损害的免疫机理，Aiba、Bennion等认为与自身抗体及其免疫复合物有关。抗SS-A/Ro自身抗体与SCLE及新生儿红斑狼疮(NLE)皮损的发生有关，并发现结合在SCLE皮肤中的IgG主要是IgG 1亚类[2，3]。
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红斑狼疮皮损形成可能是几种IgG亚类协同作用的结果，而非一种亚类所致，并可能与外界因素，如紫外线有关。Norris等认为抗体依赖细胞的细胞毒性(ADDC)是皮肤角质形成细胞损伤的重要机制[4]。他们与Furukawa等[5]的研究结果表明，UVL照射后，红斑狼疮患者血清中特异性可提取的核抗原SS-A/Ro、SS-B/La、RNP和Sm的自身抗体可吸附至培养的人类角质形成细胞上；抗SS-A/Ro抗体能结合至移植于裸鼠的人皮肤的角质形成细胞上；红斑狼疮患者血清中特异性抗SS-A/Ro、RNP和Sm抗体具有诱导ADCC的作用。而SS-A/Ro、SS-B/La和Sm的自身抗体主要是IgG 1,RNP抗体主要是IgG 2。由此我们进一步推测IgG 1和IGg 2是影响红斑狼疮皮损形成的主要亚类并协同发挥作用，这些自身抗体可与经紫外线照射后的角质形成细胞结合，通过激活补体和(或)ADCC作用而致组织损伤，引起皮损。
孙晓杰(研究生，现在沈阳市第七人民医院皮肤科)
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赵玉铭(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
王雅坤(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
赖鑫(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
白兆震(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
陈洪铎(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
参考文献
1，Aiba S,Yoshie O,Tomita Y,et al. Cross-reactivity of murine monoclonal anti-DNA antibodies with human and murine skin:a possible pathogenetic role in skin lesions of lupus erythematosus. J Invest Dermatol,1989,93(6):739-45
, 百拇医药
2，Bennion SD,Ferris C,Lieu TS.IgG subclasses in the serum and skin in subacute cutaneous lupus erythematosus and neonatal lupus erythematosus. J Invest Dermatol,1990,95:643-645
3，Norris DA,Lee LA. Antibody-dependent cellular cytotoxicity and skin disease. J Invest Dermatol,1985,85:165-175
4，Furukawa F,Kashihara-Sawami,Lyons MB,Norris DA.Binding of antibodies to the extractable nuclear antigens SS-A/Ro and SS-B/La is induced on the surface of human keratinocytes by ultraviolet light(UVL):implications for the pathogenesis of photosensitive cutaneous lupus[see comments]. J Invest Dermatol,1990,94(1):77-85, 百拇医药
关键词：盘状红斑狼疮 免疫球蛋白G 免疫荧光
红斑狼疮皮肤的真表皮交界处有免疫球蛋白沉积，这可能与狼疮的皮损形成有关。然而各IgG亚类在盘状红斑狼疮皮损中沉积有何差别，尚未见报道。我们应用免疫荧光技术对7例盘状红斑狼疮(discold lupus erythema tosus,DLE)皮损真表皮交界处免疫球蛋白G亚类沉积的强度、宽度进行了比较研究，报告如下。
1 材料与方法
1.1 病例 7例DLE标本符合DLE病理所见，且免疫病理示IgG沉积。男3例，女4例。平均年龄45岁。取材部位：面部6例，肩背部1例。皮损组织取材后用OCT复合物(美国MILES公司)包埋，液氮冷冻贮存于-70℃冰箱待检。
1.2 试剂及方法 抗体均购自Sigma公司。小鼠抗人IgG 1、IgG 2、IgG 3、IgG 4G亚类单克隆抗体工作浓度为1∶200。FITC标记羊抗鼠二抗工作浓度均为1∶40。采用间接免疫荧光技术染色。
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1.3 结果观察 (1)强度：分为-(无荧光带)、+(可见较弱荧光带)、(可见较清晰荧光带)、(见清晰明亮且较宽的黄绿色荧光带)；(2)宽度：荧光带的宽度以μm计量，用显微尺测量。
1.4 统计学处理 强度的比较采用秩和检验(Wilcoxon两样本比较法及Kruskal-Wallis法)。阳性率的比较采用χ 2 检验。宽度的比较采用t检验。
2 结果
2.1 IgG亚类的荧光强度 7例标本中，IgG 1、IgG 2、IgG 3均阳性7例，IgG 4阳性4例。皮损中的荧光强弱顺序均为IgG 1≥IgG 2>IgG 3>IgG 4。统计学检验示IgG 1和IgG 2荧光沉积强度明显强于IgG 3及IGg 4(秩和检验t值分别为80.5，77，84，均为P<0.01)，而其他各亚类之间无差别。各亚类之间阳性率无差别。
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2.2 IgG亚类的荧光沉积宽度 荧光沉积宽度为IgG 1>IgG 2>IgG 4>IgG 3，t检验示荧光沉积宽度IgG 1明显宽于IgG 3(t=5.37，P<0.05)，其他各亚类之间无显著差别。
3 讨论
关于盘状红班狼疮皮损中IgG亚类沉积形式以往未见报道。我们在研究中首次观察到DLE皮损中IgG 1和IgG 2的荧光强度均大于IgG 3和IgG 4，宽度则IgG 1沉积大于IgG 3。以上结果提示IgG 1和IgG 2是DLE皮损中沉积的主要IgG亚类，这些IgG亚类在DLE皮损的发生中可能起主要作用。自身免疫性疾病中各IgG亚类产生的比例不同。关于红斑狼疮皮肤损害的免疫机理，Aiba、Bennion等认为与自身抗体及其免疫复合物有关。抗SS-A/Ro自身抗体与SCLE及新生儿红斑狼疮(NLE)皮损的发生有关，并发现结合在SCLE皮肤中的IgG主要是IgG 1亚类[2，3]。
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红斑狼疮皮损形成可能是几种IgG亚类协同作用的结果，而非一种亚类所致，并可能与外界因素，如紫外线有关。Norris等认为抗体依赖细胞的细胞毒性(ADDC)是皮肤角质形成细胞损伤的重要机制[4]。他们与Furukawa等[5]的研究结果表明，UVL照射后，红斑狼疮患者血清中特异性可提取的核抗原SS-A/Ro、SS-B/La、RNP和Sm的自身抗体可吸附至培养的人类角质形成细胞上；抗SS-A/Ro抗体能结合至移植于裸鼠的人皮肤的角质形成细胞上；红斑狼疮患者血清中特异性抗SS-A/Ro、RNP和Sm抗体具有诱导ADCC的作用。而SS-A/Ro、SS-B/La和Sm的自身抗体主要是IgG 1,RNP抗体主要是IgG 2。由此我们进一步推测IgG 1和IGg 2是影响红斑狼疮皮损形成的主要亚类并协同发挥作用，这些自身抗体可与经紫外线照射后的角质形成细胞结合，通过激活补体和(或)ADCC作用而致组织损伤，引起皮损。
孙晓杰(研究生，现在沈阳市第七人民医院皮肤科)
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赵玉铭(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
王雅坤(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
赖鑫(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
白兆震(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
陈洪铎(中国医科大学第一临床学院皮肤科，沈阳 110001)
参考文献
1，Aiba S,Yoshie O,Tomita Y,et al. Cross-reactivity of murine monoclonal anti-DNA antibodies with human and murine skin:a possible pathogenetic role in skin lesions of lupus erythematosus. J Invest Dermatol,1989,93(6):739-45
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2，Bennion SD,Ferris C,Lieu TS.IgG subclasses in the serum and skin in subacute cutaneous lupus erythematosus and neonatal lupus erythematosus. J Invest Dermatol,1990,95:643-645
3，Norris DA,Lee LA. Antibody-dependent cellular cytotoxicity and skin disease. J Invest Dermatol,1985,85:165-175
4，Furukawa F,Kashihara-Sawami,Lyons MB,Norris DA.Binding of antibodies to the extractable nuclear antigens SS-A/Ro and SS-B/La is induced on the surface of human keratinocytes by ultraviolet light(UVL):implications for the pathogenesis of photosensitive cutaneous lupus[see comments]. J Invest Dermatol,1990,94(1):77-85, 百拇医药