重组葡激酶溶栓作用的研究
张艳 李卫平 明亮 李京培 徐叔云
摘 要 目的 研究重组葡激酶的溶栓作用。方法 通过测定家兔血浆优球蛋白溶解时间(ELT)、纤维蛋白原降解产物(FDP)的含量及纤维蛋白原(Fg)的含量，以观察重组葡激酶对家兔纤维溶解活性的影响。采用家兔动静脉旁路血栓形成法、家兔肺栓塞法及大鼠体外血栓形成法模型，以观察重组葡激酶的溶栓作用。结果 重组葡激酶(6 250 U.kg-1,1.25万U.kg-1)可明显缩短ELT，增加FDP含量，对Fg含量无明显影响；重组葡激酶(8 333 U.kg-1,2.5万U.kg-1,7.5万U.kg-1)在3种血栓形成模型上，均有溶栓作用。结论 重组葡激酶具有明显的溶栓作用。
, 百拇医药
关键词：重组葡激酶 溶栓作用
溶血栓药包括内源性或外源性纤溶酶原激活剂，直接或间接激活纤溶酶原，使其转化为纤溶酶，而纤溶酶则能降解血栓中的成分纤维蛋白，从而溶解血栓。重组葡激酶是采用基因工程技术研制出的高效特异的一种间接作用方式的新溶栓剂。实验中，我们首先观察了该药对家兔纤维溶解活性的影响，然后采用了体内血栓形成的二种模型及体外血栓形成的一种模型对其溶栓作用进行了探讨。
1 材料
1.1 动物 健康大耳白兔，体重2～2.5 kg，♂♀各半；健康Wistar大鼠，体重180～220 g，♂♀各半，均购自安徽医科大学实验动物中心，合格证号：皖实动准01号。
1.2 药品与试剂 重组葡激酶(recombination staphylokinase， r-Sak)，由安徽省安科生物高技术公司提供，批号：980810，白色冻干粉针剂，每支2 mg，效价每支12.5万U，临用前以生理盐水稀释；尿激酶(urokinase， UK)，由上海生物化学制药厂生产，每瓶1×104 U，批号：971124；生理盐水，安徽省蚌埠第一制药厂生产，批号：980706-5。
, 百拇医药
2 试验方法
2.1 重组葡激酶对家兔纤维溶解活性的影响[1] 取健康大耳白兔32只，♂♀各半，随机分为4组，每组8只，即生理盐水对照组(等容量)、尿激酶组(1×104 U*kg-1)、重组葡激酶小剂量组(6 250 U*kg-1)及大剂量组(1.25×104 U*kg-1)，以30 g*L-1戌巴比妥钠(30 mg*kg-1)静脉麻醉后，背位固定于兔板上，手术分离出颈总动脉备用，从耳缘静脉注射给药。于给药前及给药后15、45 min，分别自兔颈总动脉取血5.8 ml，其中1.8 ml置于38 g*L-1枸缘酸钠0.2 ml抗凝管中，以加钙法测定家兔血浆优球蛋白溶解时间(ELT)；2 ml分离血清后，按照葡萄球菌聚集实验方法，测定兔血清纤维蛋白原降解产物(FDP)的含量；2 ml置干燥肝素抗凝管中，按双缩脲显色法测定血浆纤维蛋白原(Fg)的含量。
, 百拇医药
2.2 重组葡激酶对家兔动静脉旁路血栓的溶解作用 将健康大耳白兔40只随机分为5组，♂♀各半，体重配对，每组8只，即生理盐水组(等容量)、尿激酶组(1×104 U*kg-1)、重组葡激酶小剂量组(8 333 U*kg-1)、重组葡激酶中剂量组(2.5×104 U*kg-1)及重组葡激酶大剂量组(7.5×104 U*kg-1)参照文献[2]戊巴比妥钠静脉麻醉家兔后，分离右颈总动脉及左颈外静脉，取内径为2 mm，长16 cm的硅化聚乙烯管，内置一根长8 cm的4号手术线，管内充满肝素生理盐水(5×104 U*L-1)，将聚乙烯管的一端插入右颈总动脉，另一端插入左颈外静脉，开放血流，15 min后，股静脉注射试药，然后继续观察15 min，中断血流，取出丝线称重。
2.3 重组葡激酶对家兔肺栓塞的溶解作用 取健康大耳白兔50只，♂♀各半，随机分为5组，分组同2.2，每组10只。家兔肺栓塞模型参照[3]方法制备，家兔用戊巴比妥钠静脉麻醉后，背位固定于兔板上，先用干燥灭菌注射器从耳动脉取血1 ml，并与凝血酶水溶液剂混合制备出人工血栓，将血栓置于伊文蓝中染色10 min，同时分离好一侧颈外静脉备用，然后称取染色好的30 mg左右的血栓用生理盐水20 ml经颈外静脉注入体内，耳缘静脉给试药。24 h后处死动物，从肺动脉内取出血栓称重，以观察试药的溶栓效果。
, 百拇医药
Tab 1 Effects of r-Sak on ELT of rabbits(X±s, n=8)
Group
Drug
/U*kg-1
Pre-drug ELT
/min
Post-drug ELT /min
ELT(15min)
△ELT(15min)
ELT(45min)
, http://www.100md.com △ELT(45min)
NS
—
300.2±44.38
312.5±45.66
12.2±21.95
327.3±36.93
29.6±32.02
UK
10000
324.1±39.17
159.3±33.67
, 百拇医药
-164.7±17.47**
333.8±39.58
9.7±15.20*
r-Sak
6250
330.0±31.75
9.8±4.29
-320.2±31.29**△△
52.7±20.27
-277.3±29.83**△△
, 百拇医药
12500
301.2±32.07
9.2±3.91
-292.0±34.82**△△
50.3±16.20
-250.8±28.64**△△
*P>0.05,**P<0.01 vs control; △△P<0.01 vs UK; Newman-Keuls test was adopted Tab 2 Effects of r-Sak on FDP of rabbits(X±s, n=8)
Group
, 百拇医药
Drug
/U*kg-1
Pre-drug FDP
/mg*L-1
Post-drug FDP/mg*L-1
FDP(15min)
△FDP(15min)
FDP(45min)
△FDP(45min)
NS
—
, http://www.100md.com
0.75±0.46
0.87±0.35
0.12±0.35
0.87±0.35
0.12±0.35
UK
10000
0.87±0.64
6.0±2.13
5.12±2.10**
4.75±2.12
3.87±2.29*
, 百拇医药
r-Sak
6250
0.87±0.35
6.50±2.07
5.62±2.19**△
5.50±2.07
4.62±2.26**△
12500
0.75±0.46
6.50±2.97
6.25±2.05**△
, 百拇医药
6.0±2.13
5.25±2.43**△
*P<0.05, **P<0.01 vs control; △P>0.05 vs UK; Kruskal-Wallis test was adopted Tab 3 Effects of r-Sak on Fg of rabbits( X±s, n=8)
Group
Drug
/U*kg-1
Pre-drug Fg
/mg.L-1
, 百拇医药
Post-drug Fg / mg.L-1
Fg(15min)
△Fg(15min)
Fg(45min)
△Fg(45min)
NS
—
318.5±130.73
316.6±116.20
-6.12±37.18
306.5±98.29
, 百拇医药
-10.0±33.34
UK
10000
323.7±94.91
317.5±75.36
-6.25±38.69*
313.8±77.73
-2.87±29.85*
r-Sak
6250
336.3±93.97
, 百拇医药
315.1±67.08
-20.25±42.17*△
323.5±67.44
7.34±42.70*△
12500
340.3±83.69
334.5±86.0
-5.87±41.19*△
330.1±80.55
-4.37±27.12*△
, http://www.100md.com
*P>0.05 vs control; △P>0.05 vs UK; Newman-Keuls test was adopted Tab 4 Effects of r-Sak on thrombolysis of rabbits and rats(X±s, n=8,10,10)
Group
Drug
/U*kg-1
In man-made
artery-rein
circulation
of rabbits
, http://www.100md.com
Thrombosis
Weight/mg
Blocking in lung artery of rabbits
Thrombosis of rats in vitro
Pre-drug
thrombosis
weight/mg
Post-drug
thrombosis
weight/mg
Difference of
, http://www.100md.com
thrombosis
weight/mg
Thrombosis
length
/mm
Thrombosis
wet weight
/mg
Thrombosis
dried weight
/mg
NS
, 百拇医药
—
39.62±
12.59
31.40±
1.34
20.0±
2.98
11.60±
2.45
9.10±
2.80
166.2±
55.56
, http://www.100md.com
31.70±
7.10
UK
10000
23.37±
8.78**
31.50±
1.35
14.10±
2.76
17.40±
2.41**
, 百拇医药
3.50±
1.64**
80.0±
20.92**
17.7±
7.55**
r-Sak
8333
30.50±
8.15*△
30.60±
, 百拇医药 1.07
14.90±
2.13
15.70±
2.21**△
6.10±
2.76*△
93.2±
23.90△
20.4±
5.46△
25000
, 百拇医药
25.25±
8.51**△
31.10±
1.19
13.70±
2.05
17.40±
1.95**△
4.30±
2.35*△
80.3±
20.29**△
, http://www.100md.com
19.2±
5.86△
75000
22.62±
7.67**△
30.90±
1.19
12.70±
2.94
18.20±
2.65**△
3.40±
, 百拇医药
2.22**△
76.5±
19.51**△
17.7±
5.81**△
*P<0.05,**P<0.01 vs control;compared with UK group,△P>0.05 vs UK;Newman-Keuls test and Kruskal-Wallis test was adopted
2.4 重组葡激酶对大鼠体外血栓形成的影响[4] 取健康Wistar大鼠50只，♂♀各半，随机分为5组，分组同2.2，每组10只。参照Chandler体外血栓形成法，大鼠戊巴比妥钠腹腔麻醉后，股静脉注射试药，药后5 min，从腹主动脉取血1.8 ml，置于硅胶血栓管中，套紧血栓管装入T×L-B型体外血栓血小板粘附两用仪，启动转盘，旋转15 min后在流体效应作用下形成血栓，倾出血栓，量其长度并称湿重后，移置恒温烤箱中，64℃烘烤30 min后，称血栓干重。
, 百拇医药
3 结果
3.1 重组葡激酶对家兔纤维溶解活性的影响 从表1结果可见，给药后15 min，尿激酶组及二种剂量的重组葡激酶组和对照组相比有明显缩短ELT作用，给药后45 min，二种剂量的重组葡激酶仍有明显作用。从表2可见，给药后15及45 min，尿激酶组及二种剂量的重组葡激酶组与对照组相比，均可增加FDP的含量。从表3结果可见，给药后15及45 min，各组对纤维蛋白原含量的影响与对照组相比，差异无显著性。
3.2 重组葡激酶对家兔动静脉旁路血栓的溶解作用 表4结果显示，尿激酶组及3种剂量的重组葡激酶组的血栓湿重与对照组相比，差异有显著性，重量明显减轻。
3.3 重组葡激酶对家兔实验性肺栓塞的溶解作用 表4结果显示，尿激酶组及二种剂量的重组葡激酶组的栓重差值与对照组相比差异有显著性，尿激酶及重组葡激酶具明显的溶解肺血栓作用。
, http://www.100md.com
3.4 重组葡激酶对大鼠体外血栓形成的影响 表4结果显示，尿激酶组及3种剂量的重组葡激酶组与对照组相比，可明显缩短大鼠体外血栓长度，减轻大鼠体外血栓的湿重及干重，其缩短血栓长度的作用具有明显的量效关系。
4 讨论[5，6]
尿激酶作为纤溶酶原直接激活剂，可直接激活纤溶酶原，将其分子中的精氨酸560-缬氨酸561间的肽键断裂，形成纤溶酶，后者产生纤溶作用可使血栓溶解。而重组葡激酶则先与纤溶酶原结合形成复合物，在此复合物中的纤溶酶原转变为纤溶酶，纤溶酶-葡激酶复合物激活纤溶酶原转化为纤溶酶，从而降解纤维蛋白。为了观察试药对纤维蛋白溶解活性的影响，本文设计了3个指标。即优球蛋白溶解时间(ELT)、葡萄球菌聚集试验(用于FDP含量的检测)及纤维蛋白原含量(Fg)测定，结果表明，尿激酶及重组葡激酶可使家兔ELT明显缩短、FDP显著增加，而Fg无明显改变，说明试药均可增强纤溶活性，而纤溶活性对血栓的结局起着重要的作用。
, http://www.100md.com
此外，我们还采用了动静脉旁路血栓法及肺血栓法两种体内模型对试药进行了溶栓作用观察。其中动静脉旁路血栓法所形成的混合血栓，结果类似动脉中的白色血栓，与生理病理情况比较接近，而且方法简便，实用性很强。肺血栓法也表现出结果稳定、方法简单、重复性高的优点。在两种模型上，r-Sak均出现明显的溶栓作用。
最后采用的体外血栓形成法系采用了体外旋转仪内形成血栓的方法，在此模型上，也可看出r-Sak的溶栓作用。
作者简介：张艳，女，38岁，副教授；
徐叔云，男，教授，博士生导师，中国药理学会副理事长
张艳(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
李卫平(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
, http://www.100md.com
明亮(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
李京培(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
徐叔云(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
参考文献
1.叶应妩， 李健斋， 王玉琛主编. 临床实验诊断学， 北京：人民卫生出版社， 1994：1159～72
2.徐叔云， 卞如濂， 陈 修主编. 药理实验方法学， 北京：人民卫生出版社， 1991:1124
3.陈 奇主编. 中药药理研究方法学， 北京：人民卫生出版社，1993:510～2
4.陈 奇主编. 中药药理研究方法学， 北京：人民卫生出版社， 1993:570～1
5.陈 修， 陈维洲， 曾贵云主编. 心血管药理学， 北京：人民卫生出版社， 第2版， 1997:570～7
6.中华人民共和国卫生部药政局. 新药(西药)临床前研究指导原则汇编， 1993:70～1, 百拇医药
摘 要 目的 研究重组葡激酶的溶栓作用。方法 通过测定家兔血浆优球蛋白溶解时间(ELT)、纤维蛋白原降解产物(FDP)的含量及纤维蛋白原(Fg)的含量，以观察重组葡激酶对家兔纤维溶解活性的影响。采用家兔动静脉旁路血栓形成法、家兔肺栓塞法及大鼠体外血栓形成法模型，以观察重组葡激酶的溶栓作用。结果 重组葡激酶(6 250 U.kg-1,1.25万U.kg-1)可明显缩短ELT，增加FDP含量，对Fg含量无明显影响；重组葡激酶(8 333 U.kg-1,2.5万U.kg-1,7.5万U.kg-1)在3种血栓形成模型上，均有溶栓作用。结论 重组葡激酶具有明显的溶栓作用。
, 百拇医药
关键词：重组葡激酶 溶栓作用
溶血栓药包括内源性或外源性纤溶酶原激活剂，直接或间接激活纤溶酶原，使其转化为纤溶酶，而纤溶酶则能降解血栓中的成分纤维蛋白，从而溶解血栓。重组葡激酶是采用基因工程技术研制出的高效特异的一种间接作用方式的新溶栓剂。实验中，我们首先观察了该药对家兔纤维溶解活性的影响，然后采用了体内血栓形成的二种模型及体外血栓形成的一种模型对其溶栓作用进行了探讨。
1 材料
1.1 动物 健康大耳白兔，体重2～2.5 kg，♂♀各半；健康Wistar大鼠，体重180～220 g，♂♀各半，均购自安徽医科大学实验动物中心，合格证号：皖实动准01号。
1.2 药品与试剂 重组葡激酶(recombination staphylokinase， r-Sak)，由安徽省安科生物高技术公司提供，批号：980810，白色冻干粉针剂，每支2 mg，效价每支12.5万U，临用前以生理盐水稀释；尿激酶(urokinase， UK)，由上海生物化学制药厂生产，每瓶1×104 U，批号：971124；生理盐水，安徽省蚌埠第一制药厂生产，批号：980706-5。
, 百拇医药
2 试验方法
2.1 重组葡激酶对家兔纤维溶解活性的影响[1] 取健康大耳白兔32只，♂♀各半，随机分为4组，每组8只，即生理盐水对照组(等容量)、尿激酶组(1×104 U*kg-1)、重组葡激酶小剂量组(6 250 U*kg-1)及大剂量组(1.25×104 U*kg-1)，以30 g*L-1戌巴比妥钠(30 mg*kg-1)静脉麻醉后，背位固定于兔板上，手术分离出颈总动脉备用，从耳缘静脉注射给药。于给药前及给药后15、45 min，分别自兔颈总动脉取血5.8 ml，其中1.8 ml置于38 g*L-1枸缘酸钠0.2 ml抗凝管中，以加钙法测定家兔血浆优球蛋白溶解时间(ELT)；2 ml分离血清后，按照葡萄球菌聚集实验方法，测定兔血清纤维蛋白原降解产物(FDP)的含量；2 ml置干燥肝素抗凝管中，按双缩脲显色法测定血浆纤维蛋白原(Fg)的含量。
, 百拇医药
2.2 重组葡激酶对家兔动静脉旁路血栓的溶解作用 将健康大耳白兔40只随机分为5组，♂♀各半，体重配对，每组8只，即生理盐水组(等容量)、尿激酶组(1×104 U*kg-1)、重组葡激酶小剂量组(8 333 U*kg-1)、重组葡激酶中剂量组(2.5×104 U*kg-1)及重组葡激酶大剂量组(7.5×104 U*kg-1)参照文献[2]戊巴比妥钠静脉麻醉家兔后，分离右颈总动脉及左颈外静脉，取内径为2 mm，长16 cm的硅化聚乙烯管，内置一根长8 cm的4号手术线，管内充满肝素生理盐水(5×104 U*L-1)，将聚乙烯管的一端插入右颈总动脉，另一端插入左颈外静脉，开放血流，15 min后，股静脉注射试药，然后继续观察15 min，中断血流，取出丝线称重。
2.3 重组葡激酶对家兔肺栓塞的溶解作用 取健康大耳白兔50只，♂♀各半，随机分为5组，分组同2.2，每组10只。家兔肺栓塞模型参照[3]方法制备，家兔用戊巴比妥钠静脉麻醉后，背位固定于兔板上，先用干燥灭菌注射器从耳动脉取血1 ml，并与凝血酶水溶液剂混合制备出人工血栓，将血栓置于伊文蓝中染色10 min，同时分离好一侧颈外静脉备用，然后称取染色好的30 mg左右的血栓用生理盐水20 ml经颈外静脉注入体内，耳缘静脉给试药。24 h后处死动物，从肺动脉内取出血栓称重，以观察试药的溶栓效果。
, 百拇医药
Tab 1 Effects of r-Sak on ELT of rabbits(X±s, n=8)
Group
Drug
/U*kg-1
Pre-drug ELT
/min
Post-drug ELT /min
ELT(15min)
△ELT(15min)
ELT(45min)
, http://www.100md.com △ELT(45min)
NS
—
300.2±44.38
312.5±45.66
12.2±21.95
327.3±36.93
29.6±32.02
UK
10000
324.1±39.17
159.3±33.67
, 百拇医药
-164.7±17.47**
333.8±39.58
9.7±15.20*
r-Sak
6250
330.0±31.75
9.8±4.29
-320.2±31.29**△△
52.7±20.27
-277.3±29.83**△△
, 百拇医药
12500
301.2±32.07
9.2±3.91
-292.0±34.82**△△
50.3±16.20
-250.8±28.64**△△
*P>0.05,**P<0.01 vs control; △△P<0.01 vs UK; Newman-Keuls test was adopted Tab 2 Effects of r-Sak on FDP of rabbits(X±s, n=8)
Group
, 百拇医药
Drug
/U*kg-1
Pre-drug FDP
/mg*L-1
Post-drug FDP/mg*L-1
FDP(15min)
△FDP(15min)
FDP(45min)
△FDP(45min)
NS
—
, http://www.100md.com
0.75±0.46
0.87±0.35
0.12±0.35
0.87±0.35
0.12±0.35
UK
10000
0.87±0.64
6.0±2.13
5.12±2.10**
4.75±2.12
3.87±2.29*
, 百拇医药
r-Sak
6250
0.87±0.35
6.50±2.07
5.62±2.19**△
5.50±2.07
4.62±2.26**△
12500
0.75±0.46
6.50±2.97
6.25±2.05**△
, 百拇医药
6.0±2.13
5.25±2.43**△
*P<0.05, **P<0.01 vs control; △P>0.05 vs UK; Kruskal-Wallis test was adopted Tab 3 Effects of r-Sak on Fg of rabbits( X±s, n=8)
Group
Drug
/U*kg-1
Pre-drug Fg
/mg.L-1
, 百拇医药
Post-drug Fg / mg.L-1
Fg(15min)
△Fg(15min)
Fg(45min)
△Fg(45min)
NS
—
318.5±130.73
316.6±116.20
-6.12±37.18
306.5±98.29
, 百拇医药
-10.0±33.34
UK
10000
323.7±94.91
317.5±75.36
-6.25±38.69*
313.8±77.73
-2.87±29.85*
r-Sak
6250
336.3±93.97
, 百拇医药
315.1±67.08
-20.25±42.17*△
323.5±67.44
7.34±42.70*△
12500
340.3±83.69
334.5±86.0
-5.87±41.19*△
330.1±80.55
-4.37±27.12*△
, http://www.100md.com
*P>0.05 vs control; △P>0.05 vs UK; Newman-Keuls test was adopted Tab 4 Effects of r-Sak on thrombolysis of rabbits and rats(X±s, n=8,10,10)
Group
Drug
/U*kg-1
In man-made
artery-rein
circulation
of rabbits
, http://www.100md.com
Thrombosis
Weight/mg
Blocking in lung artery of rabbits
Thrombosis of rats in vitro
Pre-drug
thrombosis
weight/mg
Post-drug
thrombosis
weight/mg
Difference of
, http://www.100md.com
thrombosis
weight/mg
Thrombosis
length
/mm
Thrombosis
wet weight
/mg
Thrombosis
dried weight
/mg
NS
, 百拇医药
—
39.62±
12.59
31.40±
1.34
20.0±
2.98
11.60±
2.45
9.10±
2.80
166.2±
55.56
, http://www.100md.com
31.70±
7.10
UK
10000
23.37±
8.78**
31.50±
1.35
14.10±
2.76
17.40±
2.41**
, 百拇医药
3.50±
1.64**
80.0±
20.92**
17.7±
7.55**
r-Sak
8333
30.50±
8.15*△
30.60±
, 百拇医药 1.07
14.90±
2.13
15.70±
2.21**△
6.10±
2.76*△
93.2±
23.90△
20.4±
5.46△
25000
, 百拇医药
25.25±
8.51**△
31.10±
1.19
13.70±
2.05
17.40±
1.95**△
4.30±
2.35*△
80.3±
20.29**△
, http://www.100md.com
19.2±
5.86△
75000
22.62±
7.67**△
30.90±
1.19
12.70±
2.94
18.20±
2.65**△
3.40±
, 百拇医药
2.22**△
76.5±
19.51**△
17.7±
5.81**△
*P<0.05,**P<0.01 vs control;compared with UK group,△P>0.05 vs UK;Newman-Keuls test and Kruskal-Wallis test was adopted
2.4 重组葡激酶对大鼠体外血栓形成的影响[4] 取健康Wistar大鼠50只，♂♀各半，随机分为5组，分组同2.2，每组10只。参照Chandler体外血栓形成法，大鼠戊巴比妥钠腹腔麻醉后，股静脉注射试药，药后5 min，从腹主动脉取血1.8 ml，置于硅胶血栓管中，套紧血栓管装入T×L-B型体外血栓血小板粘附两用仪，启动转盘，旋转15 min后在流体效应作用下形成血栓，倾出血栓，量其长度并称湿重后，移置恒温烤箱中，64℃烘烤30 min后，称血栓干重。
, 百拇医药
3 结果
3.1 重组葡激酶对家兔纤维溶解活性的影响 从表1结果可见，给药后15 min，尿激酶组及二种剂量的重组葡激酶组和对照组相比有明显缩短ELT作用，给药后45 min，二种剂量的重组葡激酶仍有明显作用。从表2可见，给药后15及45 min，尿激酶组及二种剂量的重组葡激酶组与对照组相比，均可增加FDP的含量。从表3结果可见，给药后15及45 min，各组对纤维蛋白原含量的影响与对照组相比，差异无显著性。
3.2 重组葡激酶对家兔动静脉旁路血栓的溶解作用 表4结果显示，尿激酶组及3种剂量的重组葡激酶组的血栓湿重与对照组相比，差异有显著性，重量明显减轻。
3.3 重组葡激酶对家兔实验性肺栓塞的溶解作用 表4结果显示，尿激酶组及二种剂量的重组葡激酶组的栓重差值与对照组相比差异有显著性，尿激酶及重组葡激酶具明显的溶解肺血栓作用。
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3.4 重组葡激酶对大鼠体外血栓形成的影响 表4结果显示，尿激酶组及3种剂量的重组葡激酶组与对照组相比，可明显缩短大鼠体外血栓长度，减轻大鼠体外血栓的湿重及干重，其缩短血栓长度的作用具有明显的量效关系。
4 讨论[5，6]
尿激酶作为纤溶酶原直接激活剂，可直接激活纤溶酶原，将其分子中的精氨酸560-缬氨酸561间的肽键断裂，形成纤溶酶，后者产生纤溶作用可使血栓溶解。而重组葡激酶则先与纤溶酶原结合形成复合物，在此复合物中的纤溶酶原转变为纤溶酶，纤溶酶-葡激酶复合物激活纤溶酶原转化为纤溶酶，从而降解纤维蛋白。为了观察试药对纤维蛋白溶解活性的影响，本文设计了3个指标。即优球蛋白溶解时间(ELT)、葡萄球菌聚集试验(用于FDP含量的检测)及纤维蛋白原含量(Fg)测定，结果表明，尿激酶及重组葡激酶可使家兔ELT明显缩短、FDP显著增加，而Fg无明显改变，说明试药均可增强纤溶活性，而纤溶活性对血栓的结局起着重要的作用。
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此外，我们还采用了动静脉旁路血栓法及肺血栓法两种体内模型对试药进行了溶栓作用观察。其中动静脉旁路血栓法所形成的混合血栓，结果类似动脉中的白色血栓，与生理病理情况比较接近，而且方法简便，实用性很强。肺血栓法也表现出结果稳定、方法简单、重复性高的优点。在两种模型上，r-Sak均出现明显的溶栓作用。
最后采用的体外血栓形成法系采用了体外旋转仪内形成血栓的方法，在此模型上，也可看出r-Sak的溶栓作用。
作者简介：张艳，女，38岁，副教授；
徐叔云，男，教授，博士生导师，中国药理学会副理事长
张艳(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
李卫平(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
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明亮(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
李京培(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
徐叔云(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)
参考文献
1.叶应妩， 李健斋， 王玉琛主编. 临床实验诊断学， 北京：人民卫生出版社， 1994：1159～72
2.徐叔云， 卞如濂， 陈 修主编. 药理实验方法学， 北京：人民卫生出版社， 1991:1124
3.陈 奇主编. 中药药理研究方法学， 北京：人民卫生出版社，1993:510～2
4.陈 奇主编. 中药药理研究方法学， 北京：人民卫生出版社， 1993:570～1
5.陈 修， 陈维洲， 曾贵云主编. 心血管药理学， 北京：人民卫生出版社， 第2版， 1997:570～7
6.中华人民共和国卫生部药政局. 新药(西药)临床前研究指导原则汇编， 1993:70～1, 百拇医药