轻身调脂片对高血脂大鼠丙二醛及超氧化物歧化酶的影响
詹丽芬 孙晋民 孙立 张玉芝 徐放
摘 要 目的：研究轻身调脂片(Qing)对高血脂大鼠丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法：Wistar大鼠35只，按性别，体重分层又随机的原则分为正常对照组，高脂模型组，小剂量防治组，大剂量治疗组。血脂用Cobas Fara 自动生化分析仪检测，MDA按硫代巴比妥酸(TBA)法检测，SOD用肾上腺素自氧化法检测。结果：大鼠高脂食20 d后,模型组血胆固醇(ChoL)和MDA明显高于正常对照组(P<0.01),小剂量防治能使血MDA下降(P<0.05),血脂下降缓慢，直到实验终结时，才恢复到正常水平。实验第55 d时，模型组肝MDA仍高于对照组(P<0.05)。SOD在实验全程中基本无变化。结论：小剂量Qing与高脂食物同服，可防治血脂升高，抑制血浆和肝MDA的增加。大剂量能同时降低血脂和肝中MDA。大小剂量组在第55 d的实验中未发现对红细胞和肝中SOD有影响。
关键词：高血脂 丙二醛 超氧化物歧化酶
, 百拇医药
轻身调脂片(Qing)是由泽泻、地黄、山楂等多味中药经提取加工制成。临床上对治疗高血脂症，动脉硬化，高血压等病而致的头晕、头痛、失眠及肢体麻木等症具有显著疗效。本文仅就该药对高血脂动物体内MDA 和SOD 的影响报告如下。
1 材料与方法
1.1 药物 Qing由沈阳市中医研究所提供，每片重0.3 g，相当生药4.0 g，批号900901，实验时，将片剂研成粉末，按各实验组用药剂量以一定比例掺入饲料中。
1.2 动物及分组 中国医科大学实验动物部提供，Wistar健康大鼠35只，体重(150±5)g，雌雄各半，按性别，体重先分层，后随机分为4组，除大剂量治疗组为5只外，其余各组均为10只。
1.3 实验时程及给药时程 实验全程55 d 。其中对照组始终给基础饲料，其余3组前20 d给高脂饲料，后35 d改为基础饲料。病理模型组及正常对照组皆不给药；小剂量 防治组 实验全程给药，大剂量治疗组前20 d不给药，从第21 d 开始给药，直至实验全程毕。
, 百拇医药
1.4 饲料及给药方案 正常对照组实验全程皆饲以基础饲料。高脂饲料是在基础饲料中加入脂类和甲巯咪唑配成[1]。小剂量防治组在混合好的高脂饲料中按3%加入Qing粉末；大剂量治疗组按15%加入药片粉末。进食量一般为体重的10%，故小剂量组相当每天口服3 g/kg，大剂量组相当每天口服15 g/kg。
1.5 样本处理及指标检测方法 部分血样分离血清，用瑞士Roche公司 Cobas Fara 自动生化分析仪，按临床常规检测甘油三酯(TG)和胆固醇(ChoL)[2]。另一部分肝素抗凝，全血离心分出血浆供检测MDA含量之用；余下血球以生理盐水洗3次，加蒸馏水溶血，70℃～80℃ 15 min两次以去除血红蛋白，离心分出上清液供检测红细胞SOD活性。肝脏称干重加任氏液适量用匀浆器使之匀浆化，4℃放置一夜自然沉淀，取上清悬浊液加适量蒸馏水稀释成一定浓度，供检测MDA含量及SOD活性用。
MDA测定用硫代巴比妥酸(TBA)反应法，在1%磷酸中进行，测535 nm 和510 nm光密度差值(Δ535-510)，通过计算求出MDA含量[3]。SOD活性检测用肾上腺素自氧化法[4],反应在EDTA及Na2CO3组成的pH 9.8碱性液中进行，以紫外分光310 nm定时测定光密度增加值，通过计算求出SOD活性，其活性与对光密度增加值的抑制成正比。
, 百拇医药
2 结果
2.1 大鼠高脂食20 d及停用高脂食35 d后血脂的变化表1说明，给高脂饲料20 d与正常对照组相比，TG有所升高，ChoL明显升高(P<0.01)。小量Qing有一定预防效果，TG与高脂模型组相比降低约20%,与正常对照组相似；ChoL与高脂模型组相比降低约9%,但仍高于正常对照组。停用高脂饲料后血脂皆可恢复。给药组在小量防治时似乎有一定促进恢复效果。
表1 轻身调脂片对高脂食大鼠血脂的影响
Tab.1 Effect of Qing tablet on blood lipid in rats with
hyperlipoid feed (X±s,mmol/L)
项目
, http://www.100md.com 组别
n
实验20 d
实验 55 d
TG
正常对照
5
0.932±0.353
0.862±0.284
高脂模型
5
1.158±0.435
, 百拇医药
1.094±0.284
小量防治
5
0.944±0.329
0.870±0.272
大量治疗
5
—
0.914±0.216
ChoL
正常对照
5
, http://www.100md.com
1.674±0.295
1.928±0.435
高脂模型
5
6.304±1.778**
2.532±0.229
小量防治
5
5.722±1.992
1.744±0.291
大量治疗
, http://www.100md.com
5
—
2.549±0.543
与对照组比较** P<0.01
2.2 高脂食和Qing对高血脂大鼠血清MDA及红细胞SOD的影响表2说明，大鼠高脂食20 d时，血清MDA明显升高(P<0.01),小剂量药物同步投与防治MDA升高亦有意义(P<0.05)，约降低24%。各组动物红细胞SOD活性以肾上腺素自氧化抑制%表示，结果表明，各组数值之间无差异(P>0.05),说明高脂及药物对红细胞SOD未发生明显影响。
表2 轻身调脂片对高血脂大鼠血清MDA及
红细胞SOD(抑制%)的影响(X±s)
, http://www.100md.com Tab.2 Effect of Qing tablet on MDA(nmol/ml)
of plasma and SOD(inhibit%) of RBC in
hyperlipoid rats (X±s)
组别
n
项目
实验20 d
实验 55 d
正常对照
5
MDA
, 百拇医药
212.4±55.6
227.2±54.6
SOD
51.2±15.5
58.7±16.7
高脂模型
5
MDA
320.5±50.7**
211.5±57.8
SOD
47.5±14.7
, http://www.100md.com
62.9±18.3
小量防治
5
MDA
242.5±52.1*
198.7±41.8
SOD
59.1±10.9
56.3±13.5
大量治疗
5
MDA
, http://www.100md.com
—
232.4±56.7
SOD
—
57.9±14.3
与对照组比较** P<0.01； 与模型组相比* P<0.05
2.3 Qing对大鼠肝MDA及 SOD的影响由表3可知，肝中MDA的变化与血液类似。但实验终结时高脂模型组MDA含量仍高于正常对照组这一点与血浆不同，因血脂在停用高脂食后易恢复，故MDA含量亦趋向正常值。但肝受累恢复慢，故MDA仍高。无论是小剂量防治还是大剂量治疗，药物对大鼠肝MDA的抑制均稍差，降低约13%。实验终结时，各组肝SOD未见有意义的差别。
, http://www.100md.com
表3 轻身调脂片对高血脂大鼠肝MDA及
SOD的影响(X±s)
Tab.3 Effect of Qing tablet on MDA(nmol/mg)and SOD
(inhibit%) of liver in hyperlipoid rats(X±s)
组 别
n
MDA(nmol/mg)
SOD(抑制%)
正常对照
5
, 百拇医药
49.7±11.7〓
80.9±2.2
高脂模型
5
72.4±13.5*
81.2±4.4
小量防治
5
62.8±12.5〓
78.2±4.2
大量治疗
5
, http://www.100md.com
63.5±13.3〓
75.8±3.8
与对照组比较* P<0.05
3 讨论
3.1 Qing对血脂的影响
本实验已经证明，该药与高脂食同步服用确实有一定的防治血脂升高的效果，且小剂量的药物即能显著地防治高脂血症。因本实验设计中，没有必要观察大剂量药物与高脂食同步给与的防治效果，故结果中没有类似数据。当然，Qing大剂量应有同等或更好的同步防治效果。
3.2 Qing对大鼠血清和肝MDA的影响
实验第20 d时，小剂量防治组与高脂模型组血清MDA有明显差异(P<0.05),说明小量同步服药可降低MDA的水平。而此种变化恰恰类似血脂水平下降，这种脂质和MDA水平一致性下降的实验结果足以反映出该药不但可降低血脂，同时可抑制脂质过氧化，降低血清MDA水平，这对减少MDA在细胞内沉积，保护血管及维持细胞正常生理功能有重要意义。停用高脂食35 d后，小剂量防治组与高脂模型组MDA均恢复到正常水平，而此时两组血脂也恢复到正常水平，说明血清MDA水平与血脂高低有密切关系。
, http://www.100md.com
实验终结时，肝脏MDA检测结果表明，当血脂已经恢复到正常水平时，肝MDA仍然较高，但无统计意义。估计MDA在肝中与蛋白质、核酸等成分交联的比较紧密，难以分离，故恢复较慢。
3.3 Qing对大鼠SOD基本无影响
SOD可催化氧自由基的歧化反应，是机体清除氧自由基的重要酶。当心肌缺血，衰老，炎症等使自由基增加时，组织中清除氧自由基的SOD活性降低，导致氧自由基堆积，后者可使膜脂质过氧化而致组织损伤。本实验表明，各组大鼠红细胞(两次检测)和肝(一次检测)SOD均无降低，间接反应大鼠体内氧自由基均无增加。这对保护细胞，延缓衰老具有重要意义。
国家中医药管理局课题，89Y12
詹丽芬(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
孙晋民(中国医科大学老年病防治研究中心)
, 百拇医药
孙立(中国医科大学第一临床学院内科)
张玉芝(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
徐放(沈阳市中医研究所)
参考文献
1，徐叔云，卞如濂，陈修.降血脂药及抗动脉粥样硬化药的筛选.药理实验方法学，北京：人民卫生出版社，1985.781～783
2，詹丽芬，徐放，赫梅生.轻身调脂片对动物血脂及脂蛋白影响的实验研究.中国医药学报，1997，12(6)：20～22
3，魏明竟.血浆过氧化脂质的测定及其临床意义.国外医学临床生物化学与检验学分册，1984，5(1)：6～8
4，丁克祥.刺玫果冲剂对SOD活性的影响.老年学杂志，1989，9(6)：353～354, http://www.100md.com
摘 要 目的：研究轻身调脂片(Qing)对高血脂大鼠丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法：Wistar大鼠35只，按性别，体重分层又随机的原则分为正常对照组，高脂模型组，小剂量防治组，大剂量治疗组。血脂用Cobas Fara 自动生化分析仪检测，MDA按硫代巴比妥酸(TBA)法检测，SOD用肾上腺素自氧化法检测。结果：大鼠高脂食20 d后,模型组血胆固醇(ChoL)和MDA明显高于正常对照组(P<0.01),小剂量防治能使血MDA下降(P<0.05),血脂下降缓慢，直到实验终结时，才恢复到正常水平。实验第55 d时，模型组肝MDA仍高于对照组(P<0.05)。SOD在实验全程中基本无变化。结论：小剂量Qing与高脂食物同服，可防治血脂升高，抑制血浆和肝MDA的增加。大剂量能同时降低血脂和肝中MDA。大小剂量组在第55 d的实验中未发现对红细胞和肝中SOD有影响。
关键词：高血脂 丙二醛 超氧化物歧化酶
, 百拇医药
轻身调脂片(Qing)是由泽泻、地黄、山楂等多味中药经提取加工制成。临床上对治疗高血脂症，动脉硬化，高血压等病而致的头晕、头痛、失眠及肢体麻木等症具有显著疗效。本文仅就该药对高血脂动物体内MDA 和SOD 的影响报告如下。
1 材料与方法
1.1 药物 Qing由沈阳市中医研究所提供，每片重0.3 g，相当生药4.0 g，批号900901，实验时，将片剂研成粉末，按各实验组用药剂量以一定比例掺入饲料中。
1.2 动物及分组 中国医科大学实验动物部提供，Wistar健康大鼠35只，体重(150±5)g，雌雄各半，按性别，体重先分层，后随机分为4组，除大剂量治疗组为5只外，其余各组均为10只。
1.3 实验时程及给药时程 实验全程55 d 。其中对照组始终给基础饲料，其余3组前20 d给高脂饲料，后35 d改为基础饲料。病理模型组及正常对照组皆不给药；小剂量 防治组 实验全程给药，大剂量治疗组前20 d不给药，从第21 d 开始给药，直至实验全程毕。
, 百拇医药
1.4 饲料及给药方案 正常对照组实验全程皆饲以基础饲料。高脂饲料是在基础饲料中加入脂类和甲巯咪唑配成[1]。小剂量防治组在混合好的高脂饲料中按3%加入Qing粉末；大剂量治疗组按15%加入药片粉末。进食量一般为体重的10%，故小剂量组相当每天口服3 g/kg，大剂量组相当每天口服15 g/kg。
1.5 样本处理及指标检测方法 部分血样分离血清，用瑞士Roche公司 Cobas Fara 自动生化分析仪，按临床常规检测甘油三酯(TG)和胆固醇(ChoL)[2]。另一部分肝素抗凝，全血离心分出血浆供检测MDA含量之用；余下血球以生理盐水洗3次，加蒸馏水溶血，70℃～80℃ 15 min两次以去除血红蛋白，离心分出上清液供检测红细胞SOD活性。肝脏称干重加任氏液适量用匀浆器使之匀浆化，4℃放置一夜自然沉淀，取上清悬浊液加适量蒸馏水稀释成一定浓度，供检测MDA含量及SOD活性用。
MDA测定用硫代巴比妥酸(TBA)反应法，在1%磷酸中进行，测535 nm 和510 nm光密度差值(Δ535-510)，通过计算求出MDA含量[3]。SOD活性检测用肾上腺素自氧化法[4],反应在EDTA及Na2CO3组成的pH 9.8碱性液中进行，以紫外分光310 nm定时测定光密度增加值，通过计算求出SOD活性，其活性与对光密度增加值的抑制成正比。
, 百拇医药
2 结果
2.1 大鼠高脂食20 d及停用高脂食35 d后血脂的变化表1说明，给高脂饲料20 d与正常对照组相比，TG有所升高，ChoL明显升高(P<0.01)。小量Qing有一定预防效果，TG与高脂模型组相比降低约20%,与正常对照组相似；ChoL与高脂模型组相比降低约9%,但仍高于正常对照组。停用高脂饲料后血脂皆可恢复。给药组在小量防治时似乎有一定促进恢复效果。
表1 轻身调脂片对高脂食大鼠血脂的影响
Tab.1 Effect of Qing tablet on blood lipid in rats with
hyperlipoid feed (X±s,mmol/L)
项目
, http://www.100md.com 组别
n
实验20 d
实验 55 d
TG
正常对照
5
0.932±0.353
0.862±0.284
高脂模型
5
1.158±0.435
, 百拇医药
1.094±0.284
小量防治
5
0.944±0.329
0.870±0.272
大量治疗
5
—
0.914±0.216
ChoL
正常对照
5
, http://www.100md.com
1.674±0.295
1.928±0.435
高脂模型
5
6.304±1.778**
2.532±0.229
小量防治
5
5.722±1.992
1.744±0.291
大量治疗
, http://www.100md.com
5
—
2.549±0.543
与对照组比较** P<0.01
2.2 高脂食和Qing对高血脂大鼠血清MDA及红细胞SOD的影响表2说明，大鼠高脂食20 d时，血清MDA明显升高(P<0.01),小剂量药物同步投与防治MDA升高亦有意义(P<0.05)，约降低24%。各组动物红细胞SOD活性以肾上腺素自氧化抑制%表示，结果表明，各组数值之间无差异(P>0.05),说明高脂及药物对红细胞SOD未发生明显影响。
表2 轻身调脂片对高血脂大鼠血清MDA及
红细胞SOD(抑制%)的影响(X±s)
, http://www.100md.com Tab.2 Effect of Qing tablet on MDA(nmol/ml)
of plasma and SOD(inhibit%) of RBC in
hyperlipoid rats (X±s)
组别
n
项目
实验20 d
实验 55 d
正常对照
5
MDA
, 百拇医药
212.4±55.6
227.2±54.6
SOD
51.2±15.5
58.7±16.7
高脂模型
5
MDA
320.5±50.7**
211.5±57.8
SOD
47.5±14.7
, http://www.100md.com
62.9±18.3
小量防治
5
MDA
242.5±52.1*
198.7±41.8
SOD
59.1±10.9
56.3±13.5
大量治疗
5
MDA
, http://www.100md.com
—
232.4±56.7
SOD
—
57.9±14.3
与对照组比较** P<0.01； 与模型组相比* P<0.05
2.3 Qing对大鼠肝MDA及 SOD的影响由表3可知，肝中MDA的变化与血液类似。但实验终结时高脂模型组MDA含量仍高于正常对照组这一点与血浆不同，因血脂在停用高脂食后易恢复，故MDA含量亦趋向正常值。但肝受累恢复慢，故MDA仍高。无论是小剂量防治还是大剂量治疗，药物对大鼠肝MDA的抑制均稍差，降低约13%。实验终结时，各组肝SOD未见有意义的差别。
, http://www.100md.com
表3 轻身调脂片对高血脂大鼠肝MDA及
SOD的影响(X±s)
Tab.3 Effect of Qing tablet on MDA(nmol/mg)and SOD
(inhibit%) of liver in hyperlipoid rats(X±s)
组 别
n
MDA(nmol/mg)
SOD(抑制%)
正常对照
5
, 百拇医药
49.7±11.7〓
80.9±2.2
高脂模型
5
72.4±13.5*
81.2±4.4
小量防治
5
62.8±12.5〓
78.2±4.2
大量治疗
5
, http://www.100md.com
63.5±13.3〓
75.8±3.8
与对照组比较* P<0.05
3 讨论
3.1 Qing对血脂的影响
本实验已经证明，该药与高脂食同步服用确实有一定的防治血脂升高的效果，且小剂量的药物即能显著地防治高脂血症。因本实验设计中，没有必要观察大剂量药物与高脂食同步给与的防治效果，故结果中没有类似数据。当然，Qing大剂量应有同等或更好的同步防治效果。
3.2 Qing对大鼠血清和肝MDA的影响
实验第20 d时，小剂量防治组与高脂模型组血清MDA有明显差异(P<0.05),说明小量同步服药可降低MDA的水平。而此种变化恰恰类似血脂水平下降，这种脂质和MDA水平一致性下降的实验结果足以反映出该药不但可降低血脂，同时可抑制脂质过氧化，降低血清MDA水平，这对减少MDA在细胞内沉积，保护血管及维持细胞正常生理功能有重要意义。停用高脂食35 d后，小剂量防治组与高脂模型组MDA均恢复到正常水平，而此时两组血脂也恢复到正常水平，说明血清MDA水平与血脂高低有密切关系。
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实验终结时，肝脏MDA检测结果表明，当血脂已经恢复到正常水平时，肝MDA仍然较高，但无统计意义。估计MDA在肝中与蛋白质、核酸等成分交联的比较紧密，难以分离，故恢复较慢。
3.3 Qing对大鼠SOD基本无影响
SOD可催化氧自由基的歧化反应，是机体清除氧自由基的重要酶。当心肌缺血，衰老，炎症等使自由基增加时，组织中清除氧自由基的SOD活性降低，导致氧自由基堆积，后者可使膜脂质过氧化而致组织损伤。本实验表明，各组大鼠红细胞(两次检测)和肝(一次检测)SOD均无降低，间接反应大鼠体内氧自由基均无增加。这对保护细胞，延缓衰老具有重要意义。
国家中医药管理局课题，89Y12
詹丽芬(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
孙晋民(中国医科大学老年病防治研究中心)
, 百拇医药
孙立(中国医科大学第一临床学院内科)
张玉芝(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
徐放(沈阳市中医研究所)
参考文献
1，徐叔云，卞如濂，陈修.降血脂药及抗动脉粥样硬化药的筛选.药理实验方法学，北京：人民卫生出版社，1985.781～783
2，詹丽芬，徐放，赫梅生.轻身调脂片对动物血脂及脂蛋白影响的实验研究.中国医药学报，1997，12(6)：20～22
3，魏明竟.血浆过氧化脂质的测定及其临床意义.国外医学临床生物化学与检验学分册，1984，5(1)：6～8
4，丁克祥.刺玫果冲剂对SOD活性的影响.老年学杂志，1989，9(6)：353～354, http://www.100md.com