常氧及慢性缺氧的肺动脉内皮细胞急性缺氧后血栓素合酶(TXS)基因及PGI2、TXA2代谢产物的变化
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中国病理生理杂志 2000年第10期第16卷 第六届受体和信
作者：孔炜 王迪浔
单位：同济医科大学病理生理教研室，湖北 武汉 430030
关键词：
目的
目的：前列环素(PGI2)和血栓素A2(TXA2)均是花生四烯酸经环氧合酶(COX)途径生成的代谢产物，分别由前列环素合酶和血栓素合酶催化产生。本实验动态观察了常氧及慢性缺氧的肺动脉内皮细胞血栓素合酶(TXS)基因表达的变化及培养基上清中PGI2及TXA2的代谢产物6-Keto-PGF1α、TXB2随急性缺氧的变化。方法：采用连代常氧和缺氧培养的肺动脉内皮细胞，分别在2、4、6代给予急性缺氧刺激6 h，分为四组：常氧组(N)、急性缺氧6 h组(NH)、慢性缺氧后复氧12 h组(H)、慢性缺氧后复氧12 h再急性缺氧6 h组(HH)。提取各组总RNA。将载有大鼠血栓素合酶基因片段的PBR322质粒，转化大肠杆菌HB101，扩增后提取质粒，经酶切、电泳后回收TXS 0.5 kb的cDNA片段作为探针，地高辛随机引物法标记探针作斑点杂交。以β-actin为对照，目的基因与对照的积分光密度比值作半定量分析。用放免法测定培养基上清中PGI2、TXA2代谢产物6-Keto-PGF1α、TXB2的变化。结果：常氧培养的PAEC急性缺氧后TXS mRNA、6-Keto-PGF1α、TXB2均增加，TXA2/PGI2在2、4代减少，第6代基本不变；慢性缺氧培养的PAEC急性缺氧后，6-Keto-PGF1α在2、4代减少，第6代不变；TXS mRNA、TXB2第4代增加，第6代减少，TXA2/PGI2在2、4代增加，第6代减少。结论：慢性缺氧改变了急性缺氧时肺动脉内皮细胞血栓素合酶(TXS)基因表达及TXA2与PGI2的比例，可能影响了肺动脉高压的发展及机体对慢性缺氧的习服过程。, 百拇医药
单位：同济医科大学病理生理教研室，湖北 武汉 430030
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目的
目的：前列环素(PGI2)和血栓素A2(TXA2)均是花生四烯酸经环氧合酶(COX)途径生成的代谢产物，分别由前列环素合酶和血栓素合酶催化产生。本实验动态观察了常氧及慢性缺氧的肺动脉内皮细胞血栓素合酶(TXS)基因表达的变化及培养基上清中PGI2及TXA2的代谢产物6-Keto-PGF1α、TXB2随急性缺氧的变化。方法：采用连代常氧和缺氧培养的肺动脉内皮细胞，分别在2、4、6代给予急性缺氧刺激6 h，分为四组：常氧组(N)、急性缺氧6 h组(NH)、慢性缺氧后复氧12 h组(H)、慢性缺氧后复氧12 h再急性缺氧6 h组(HH)。提取各组总RNA。将载有大鼠血栓素合酶基因片段的PBR322质粒，转化大肠杆菌HB101，扩增后提取质粒，经酶切、电泳后回收TXS 0.5 kb的cDNA片段作为探针，地高辛随机引物法标记探针作斑点杂交。以β-actin为对照，目的基因与对照的积分光密度比值作半定量分析。用放免法测定培养基上清中PGI2、TXA2代谢产物6-Keto-PGF1α、TXB2的变化。结果：常氧培养的PAEC急性缺氧后TXS mRNA、6-Keto-PGF1α、TXB2均增加，TXA2/PGI2在2、4代减少，第6代基本不变；慢性缺氧培养的PAEC急性缺氧后，6-Keto-PGF1α在2、4代减少，第6代不变；TXS mRNA、TXB2第4代增加，第6代减少，TXA2/PGI2在2、4代增加，第6代减少。结论：慢性缺氧改变了急性缺氧时肺动脉内皮细胞血栓素合酶(TXS)基因表达及TXA2与PGI2的比例，可能影响了肺动脉高压的发展及机体对慢性缺氧的习服过程。, 百拇医药