二甲双胍对NIDDM模型大鼠胰腺β细胞SUR的影响
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中国病理生理杂志 2000年第10期第16卷 第六届受体和信
作者：赵明 杜宏 冯根宝 王坚 王竹兰
单位：中国人民解放军南京总医院内分泌科，江苏 南京 210002
关键词：
中国病理生理杂志0010272
目的：本文运用现代分子生物学技术，检测糖尿病大鼠胰岛B细胞SUR的mRNA的表达水平，旨在探讨二甲双胍对其影响及其二甲双胍的作用机制。探讨二甲双胍对糖尿病大鼠胰腺B细胞中SUR的影响。方法：SD大鼠150～250 g，雄性，按随机原则把40只大鼠分成二组，每组20只。(1)NIDDM模型组：用小剂量链脲菌素尾静脉(25 mg/kg体重)注射，再用高热量饲料饲养，形成类似NIDDM的大鼠模型；(2)二甲双胍治疗组：NIDDM模型大鼠，加用二甲双胍250 mg*kg-1*d-1。分别在第4周、第12周、第24周测定血糖，在第24周取胰腺β细胞测定其SURmRNA的表达水平。胰腺β细胞的RNA提取是参照上海第一人民医院糖尿病研究室提供的方法分离出β细胞。RT-PCR: SUR引物5’TGCGACATTTGTGACACATG-3’、5’-CGTAAGCCACAGAATACCTGC-3’。β-actin引物5’GTGGGCCGCTGTAGGCACCAA-3’、5’-CTCTTTGATGTCGCACGATTTC-3’。前者由上海生物工程公司合成，RT-PCR采用Boehringer Mannheim Biochemicals公司的Titan单管RT-PCR系统，PCR 25次循环。分别在0、4、12、24周取其血和胰腺β细胞分别测定血糖、血脂、SUR的mRNA表达水平。结果：在NIDDM组随着血糖的升高和高血糖时间的延长，胰岛B细胞中SUR的mRNA表达水平呈下降趋势；而二甲双胍组在血糖有一定下降的基础上，其胰岛B细胞中SUR的mRNA表达水平下降不明显，二者相比，P<0.01。结论：磺脲类药物(SU)和胰岛β细胞膜上SUR特异性结合，阻断了细胞膜K+内流，这使得细胞膜静息电位发生改变，细胞膜去极化，后者又启动Ca++内流，Ca++内流触发β细胞排粒作用，胰岛素释放到细胞外。在本研究中，我们发现高血糖能减低NIDDM模型大鼠胰腺B细胞SUR的mRNA的表达，应用二甲双胍250 mg/kg/d,24周后其SUR的mRNA的表达水平和正常对照组相比，虽有下降但比糖尿病组有上升，P<0.01。我们认为二甲双胍能改善NIDDM的胰岛素敏感性可能和提高胰腺B细胞中的SUR的mRNA的表达水平有一定的关系。, http://www.100md.com
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目的：本文运用现代分子生物学技术，检测糖尿病大鼠胰岛B细胞SUR的mRNA的表达水平，旨在探讨二甲双胍对其影响及其二甲双胍的作用机制。探讨二甲双胍对糖尿病大鼠胰腺B细胞中SUR的影响。方法：SD大鼠150～250 g，雄性，按随机原则把40只大鼠分成二组，每组20只。(1)NIDDM模型组：用小剂量链脲菌素尾静脉(25 mg/kg体重)注射，再用高热量饲料饲养，形成类似NIDDM的大鼠模型；(2)二甲双胍治疗组：NIDDM模型大鼠，加用二甲双胍250 mg*kg-1*d-1。分别在第4周、第12周、第24周测定血糖，在第24周取胰腺β细胞测定其SURmRNA的表达水平。胰腺β细胞的RNA提取是参照上海第一人民医院糖尿病研究室提供的方法分离出β细胞。RT-PCR: SUR引物5’TGCGACATTTGTGACACATG-3’、5’-CGTAAGCCACAGAATACCTGC-3’。β-actin引物5’GTGGGCCGCTGTAGGCACCAA-3’、5’-CTCTTTGATGTCGCACGATTTC-3’。前者由上海生物工程公司合成，RT-PCR采用Boehringer Mannheim Biochemicals公司的Titan单管RT-PCR系统，PCR 25次循环。分别在0、4、12、24周取其血和胰腺β细胞分别测定血糖、血脂、SUR的mRNA表达水平。结果：在NIDDM组随着血糖的升高和高血糖时间的延长，胰岛B细胞中SUR的mRNA表达水平呈下降趋势；而二甲双胍组在血糖有一定下降的基础上，其胰岛B细胞中SUR的mRNA表达水平下降不明显，二者相比，P<0.01。结论：磺脲类药物(SU)和胰岛β细胞膜上SUR特异性结合，阻断了细胞膜K+内流，这使得细胞膜静息电位发生改变，细胞膜去极化，后者又启动Ca++内流，Ca++内流触发β细胞排粒作用，胰岛素释放到细胞外。在本研究中，我们发现高血糖能减低NIDDM模型大鼠胰腺B细胞SUR的mRNA的表达，应用二甲双胍250 mg/kg/d,24周后其SUR的mRNA的表达水平和正常对照组相比，虽有下降但比糖尿病组有上升，P<0.01。我们认为二甲双胍能改善NIDDM的胰岛素敏感性可能和提高胰腺B细胞中的SUR的mRNA的表达水平有一定的关系。, http://www.100md.com