西安地区献血员HGV与HBV及HCV混合感染
西安地区献血员HGV与HBV及HCV混合感染
李琳琳 张献清 穆士杰 李翠莹 陈晨
摘 要：目的 研究西安地区献血员中庚型肝炎病毒(HGV)与乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)混合感染情况. 方法 采用ELISA方法检测献血员342例血清中的 HBsAg 和抗-HCV,用逆转录聚合酶反应(RT-PCR)检测HGV-RNA. 结果 发现在西安地区HBsAg 与抗-HCV均为阴性的献血员中HGV-RNA阳性率为3.50%(7/200), HBsAg阳性,抗-HCV阴性献血员中HGV-RNA阳性率为8.77%(5/57),HBsAg阴性而抗-HCV 阳性献血员中HGV-RNA阳性率为9.26%(10/108),HBsAg与抗-HCV均为阳性的献血员HGV-RNA 阳性率为15.63%(5/32). 结论 HGV与HBV和(或)HCV联合感染的阳性率要明显高于HGV 单独感染的阳性率.
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关键词:庚型肝炎；乙型肝炎；丙型肝炎；重叠感；献血员
0 引言
庚型肝炎病毒(HGV)经非消化道传播，与HBV，HCV传播途径具有相似性. 既往的研究表明，急性肝炎、慢性肝炎及肝癌组织中有HGV感染的存在[1]. 为了研究献血员中HGV与HCV，HBV的混合感染情况，应用ELISA方法检测血清中HBsAg与抗-HCV，并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HGV-RNA，对其混合感染情况进行了分析.
1 对象和方法
1.1 对象 西安市部分郊县献血员342例，男160例，女182例，平均年龄35.7(24～48)岁. 其中HBsAg，抗-HCV均为阴性者200例， HBsAg 阳性而抗-HCV 阴性者57例，HBsAg阴性而抗-HCV阳性者108例，HBsAg与抗-HCV均为阳性者32例.
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1.2 方法 HBsAg与抗-HCV的检测采用厦门新创科技有限公司及北京万泰生物药业有限公司的ELISA试剂盒，按说明书进行操作. RT-PCR 试剂盒由华美生物工程公司提供，引物设计位于5′非编码区， 扩增片段为220 bp. 热循环仪为美国Thermolyne公司的Amplitron-Ⅱ型热循环仪. 两次扩增均在94℃预变性5 min, 循环参数为94℃ 45 s，50℃ 45 s，72℃ 45 s，共30个循环，最后一个循环延伸5 min，25 g.L-1琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察结果.
2 结果
2.1 HBsAg与抗-HCV阳性率 在所检测的2651例献血员中，共检出HBsAg阳性57例，阳性率为2.15%，抗-HCV阳性108例，阳性率为4.21%.
2.2 HGV-RNA阳性率 在所检测的397例献血员中，HGV-RNA阳性27例，阳性率为6.08%，其中HBsAg与抗-HCV均为阴性的献血员中HGV-RNA阳性率为3.5%(7/200)，HBsAg阳性而抗-HCV阴性的献血员中HGV-RNA阳性率为8.77%(5/57),HBsAg阴性而抗-HCV阳性献血员中HGV-RNA阳性率为9.26%(10/108), HBsAg与抗-HCV均为阳性的献血员中HGV-RNA阳性率为15.63%(5/32).
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3 讨论
HGV为正链单股RNA病毒，与HCV一样同属黄病毒科，正常人群中HGV-RNA阳性率的文献报道多是基于献血员的检测结果，而且世界各地HGV-RNA阳性率高低不一[2],造成这一差别的原因可能为地域性或种族性，但是其他因素如样本大小， 献血员的性质(自愿或职业)以及检验方法差别等也有关系. HGV在静脉吸毒者、 血液透析者及血液病或免疫缺陷等需要经常输血或血液制品的高危人群中的感染率明显增高，并在许多情况下与乙肝或丙肝混合感染. 葛宪民等[3]报道广西80 例肝炎病患者的庚型肝炎病毒感染率高达25%，其中85%合并HBV和HCV 感染，这也提示HGV与HBV，HCV有相同或相似的感染途径.
在西安地区献血员中，HGV与HBV和(或)HCV混合感染的阳性率要明显高于 HGV单独感染的阳性率. 本实验中RT-PCR引物位于5′UTR，贾继东等[2]报道，5′UTR 的核苷酸序列最为保守，因此绝大多数研究都根据5′UTR设计引物进行逆转录 PCR 来扩增HGV-RNA, 西班牙学者比较了根据5′UTR， NS3及NS5区引物PCR的结果，认为三者的阳性率无明显差别，一致性也很高，日本学者则发现基于5′UTR 区的套式PCR比基于NS3区的套式PCR更为敏感与特异. 西安地区献血员中HBsAg与抗-HCV均为阴性者HGV-RNA阳性率为3.5%，略高于国内其他地区的报道，而HGV与 HBV和(或)HCV联合感染率略低于国内其他报道[4]，其原因有待进一步研究. 这也进一步证实了HGV,HBV和HCV有共同的传播途径，HGV可与 HBV和(或)HCV同时或混合感染. 由于献血员HGV感染是医源性传播的主要途径， 在临床上给受血者带来严重危害，因此, 为了预防HGV的医源性传播，应对献血员进行HGV的筛查.
, 百拇医药
作者简介：李琳琳(1950-)，女(汉族)，河北省涉县人. 主管技师，发表论文15篇. Tel.(029)3299319 Email. sxkzd@fmmu.edu.cn
李琳琳(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
张献清(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
穆士杰(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
李翠莹(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
陈晨(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
参考文献：
, 百拇医药
[1] 魏 东,常锦红,陶其敏. 肝癌病人血清中庚型肝炎非结构基因(NS) 5区cDNA的序列分析[J]. 中华实验和临床病毒学杂志,1996;10(4):301-303.
[2] 贾继东,王宝恩.庚型病毒型肝炎的国外研究进展[J]. 中华肝脏病杂志,1997;5(1):63-65.
[3] 葛宪民,王树声,李丹亚et al. 广西庚型肝炎病毒分子生物学研究[J]. 中华实验和临床病毒学杂志,1996;10(4):384-385.
[4] 王瑞烈,谢建媚,刘家明et al. 病毒性肝炎患者中庚型肝炎病毒RNA检测及分析[J]. 中华肝脏病杂志,1997;5(1):13-15., http://www.100md.com
李琳琳 张献清 穆士杰 李翠莹 陈晨
摘 要：目的 研究西安地区献血员中庚型肝炎病毒(HGV)与乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)混合感染情况. 方法 采用ELISA方法检测献血员342例血清中的 HBsAg 和抗-HCV,用逆转录聚合酶反应(RT-PCR)检测HGV-RNA. 结果 发现在西安地区HBsAg 与抗-HCV均为阴性的献血员中HGV-RNA阳性率为3.50%(7/200), HBsAg阳性,抗-HCV阴性献血员中HGV-RNA阳性率为8.77%(5/57),HBsAg阴性而抗-HCV 阳性献血员中HGV-RNA阳性率为9.26%(10/108),HBsAg与抗-HCV均为阳性的献血员HGV-RNA 阳性率为15.63%(5/32). 结论 HGV与HBV和(或)HCV联合感染的阳性率要明显高于HGV 单独感染的阳性率.
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关键词:庚型肝炎；乙型肝炎；丙型肝炎；重叠感；献血员
0 引言
庚型肝炎病毒(HGV)经非消化道传播，与HBV，HCV传播途径具有相似性. 既往的研究表明，急性肝炎、慢性肝炎及肝癌组织中有HGV感染的存在[1]. 为了研究献血员中HGV与HCV，HBV的混合感染情况，应用ELISA方法检测血清中HBsAg与抗-HCV，并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HGV-RNA，对其混合感染情况进行了分析.
1 对象和方法
1.1 对象 西安市部分郊县献血员342例，男160例，女182例，平均年龄35.7(24～48)岁. 其中HBsAg，抗-HCV均为阴性者200例， HBsAg 阳性而抗-HCV 阴性者57例，HBsAg阴性而抗-HCV阳性者108例，HBsAg与抗-HCV均为阳性者32例.
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1.2 方法 HBsAg与抗-HCV的检测采用厦门新创科技有限公司及北京万泰生物药业有限公司的ELISA试剂盒，按说明书进行操作. RT-PCR 试剂盒由华美生物工程公司提供，引物设计位于5′非编码区， 扩增片段为220 bp. 热循环仪为美国Thermolyne公司的Amplitron-Ⅱ型热循环仪. 两次扩增均在94℃预变性5 min, 循环参数为94℃ 45 s，50℃ 45 s，72℃ 45 s，共30个循环，最后一个循环延伸5 min，25 g.L-1琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察结果.
2 结果
2.1 HBsAg与抗-HCV阳性率 在所检测的2651例献血员中，共检出HBsAg阳性57例，阳性率为2.15%，抗-HCV阳性108例，阳性率为4.21%.
2.2 HGV-RNA阳性率 在所检测的397例献血员中，HGV-RNA阳性27例，阳性率为6.08%，其中HBsAg与抗-HCV均为阴性的献血员中HGV-RNA阳性率为3.5%(7/200)，HBsAg阳性而抗-HCV阴性的献血员中HGV-RNA阳性率为8.77%(5/57),HBsAg阴性而抗-HCV阳性献血员中HGV-RNA阳性率为9.26%(10/108), HBsAg与抗-HCV均为阳性的献血员中HGV-RNA阳性率为15.63%(5/32).
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3 讨论
HGV为正链单股RNA病毒，与HCV一样同属黄病毒科，正常人群中HGV-RNA阳性率的文献报道多是基于献血员的检测结果，而且世界各地HGV-RNA阳性率高低不一[2],造成这一差别的原因可能为地域性或种族性，但是其他因素如样本大小， 献血员的性质(自愿或职业)以及检验方法差别等也有关系. HGV在静脉吸毒者、 血液透析者及血液病或免疫缺陷等需要经常输血或血液制品的高危人群中的感染率明显增高，并在许多情况下与乙肝或丙肝混合感染. 葛宪民等[3]报道广西80 例肝炎病患者的庚型肝炎病毒感染率高达25%，其中85%合并HBV和HCV 感染，这也提示HGV与HBV，HCV有相同或相似的感染途径.
在西安地区献血员中，HGV与HBV和(或)HCV混合感染的阳性率要明显高于 HGV单独感染的阳性率. 本实验中RT-PCR引物位于5′UTR，贾继东等[2]报道，5′UTR 的核苷酸序列最为保守，因此绝大多数研究都根据5′UTR设计引物进行逆转录 PCR 来扩增HGV-RNA, 西班牙学者比较了根据5′UTR， NS3及NS5区引物PCR的结果，认为三者的阳性率无明显差别，一致性也很高，日本学者则发现基于5′UTR 区的套式PCR比基于NS3区的套式PCR更为敏感与特异. 西安地区献血员中HBsAg与抗-HCV均为阴性者HGV-RNA阳性率为3.5%，略高于国内其他地区的报道，而HGV与 HBV和(或)HCV联合感染率略低于国内其他报道[4]，其原因有待进一步研究. 这也进一步证实了HGV,HBV和HCV有共同的传播途径，HGV可与 HBV和(或)HCV同时或混合感染. 由于献血员HGV感染是医源性传播的主要途径， 在临床上给受血者带来严重危害，因此, 为了预防HGV的医源性传播，应对献血员进行HGV的筛查.
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作者简介：李琳琳(1950-)，女(汉族)，河北省涉县人. 主管技师，发表论文15篇. Tel.(029)3299319 Email. sxkzd@fmmu.edu.cn
李琳琳(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
张献清(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
穆士杰(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
李翠莹(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
陈晨(第四军医大学西京医院输血科, 陕西 西安 710033)
参考文献：
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[1] 魏 东,常锦红,陶其敏. 肝癌病人血清中庚型肝炎非结构基因(NS) 5区cDNA的序列分析[J]. 中华实验和临床病毒学杂志,1996;10(4):301-303.
[2] 贾继东,王宝恩.庚型病毒型肝炎的国外研究进展[J]. 中华肝脏病杂志,1997;5(1):63-65.
[3] 葛宪民,王树声,李丹亚et al. 广西庚型肝炎病毒分子生物学研究[J]. 中华实验和临床病毒学杂志,1996;10(4):384-385.
[4] 王瑞烈,谢建媚,刘家明et al. 病毒性肝炎患者中庚型肝炎病毒RNA检测及分析[J]. 中华肝脏病杂志,1997;5(1):13-15., http://www.100md.com