胃泌素释放肽前体对小细胞肺癌诊断作用的初探
胃泌素释放肽前体对小细胞肺癌诊断作用的初探
吴京 于方治
关键词：胃泌素释放肽前体；小细胞肺癌；诊断
胃泌素释放肽(GRP)是脑肠激素的一种。肺癌与GRP的关系是1978年在人胚胎肺的内分泌细胞中发现蛙皮素(bombesin)样免疫活性之后开始认识的[1]。其后的研究表明，GRP是小细胞肺癌(SCLC)的重要产物，血GRP水平是SCLC重要的标志物[2]，但其测定方法繁琐，难以普及。研究表明，测定胃泌素释放肽前体(ProGRP)作为SCLC标志物是完全可行的[3，4]。ProGRP因部分氨基酸残基的不同，存在3种分子型。利用针对3种分子的共同序列，即ProGRP(31-98)的酶免疫分析药盒，测定了162例血清标本，其中SCLC组23例，非小细胞肺癌(NSCLC)组70例，肺良性疾病组30例，非疾病参考组39例。作为对照，同时测定了神经元特异性烯醇化酶(NSE)活性。
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材料与方法 ProGRP(31-98)测定：ィムチェック- ProGRP(31-98)KIT ， 为96孔微孔板式双抗体夹心法ELISA药盒，东燃株式会社(日本)出品， 批号：990422。按说明书操作，显色完毕在MGC318酶标仪上读取各孔690 nm波长吸光度值。在药盒内附坐标纸上绘制标准曲线，并据此求出血清标本的浓度值。NSE测定：ES300 全自动酶免分析仪和相应的NSE配套试剂，Boehringer Mannheim公司(德国)出品。按试剂说明书设定仪器参数，自动测试，并打印报告。标本：为本院体检或就诊病人血清标本。其中正常对照组39例，男25例，女14例，年龄20～69岁；肺良性疾病组30例，男18例，女12例，年龄32～74岁，病种包括间质性肺炎、慢性阻塞性肺气肿、支气管扩张和肺结核；NSCLC组70例，男49例，女21例，年龄18～76岁，其中鳞状细胞癌25例，腺癌45例；SCLC组23例，男20例，女3例，年龄40～72岁；以上肿瘤诊断以细胞学或病理组织学诊断为依据。标本采取后，均置-20 ℃冻存。本文统计学方法采用非参数的秩和检验和率的χ2检验，均以P<0.05为差异具有显著性。
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结果 SCLC组血清ProGRP(31-98)浓度的中位数为244 ng/L，正常对照组、良性疾病组、肺鳞癌组与肺腺癌组中位数则分别为14.5，14.5，15.0和15.0 ng/L；从浓度分布看，小细胞肺癌组有13例血清ProGRP(31-98)浓度>100 ng/L，而其余各组几乎都<40 ng/L，仅肺腺癌组有1例为90 ng/L，差异有显著性(P<0.005)；其余各组血清ProGRP(31-98)浓度分布和中位数则十分接近，差异无显著性(P>0.1)。选定良性疾病组的ProGRP(31-98)最高值40 ng/L为界定(cutoff)值，NSE则选定12 mg/L为cutoff值。此恰与试剂商所提供的cutoff值[ProGRP(31-98)：46 ng/L；NSE：13 mg/L]接近。据此分别统计了ProGRP(31-98)和NSE对于各组的阳性率，ProGRP(31-98)对于小细胞肺癌和非小细胞肺癌的敏感度分别为65%(15/23)和1%(1/70)；而NSE相应的敏感度分别为61%(14/23 )和16%(11/70)。ProGRP(31-98)在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期小细胞肺癌中的阳性率分别是69%、50%和75%；而NSE相应的阳性率分别是36%、68%和100%。
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讨论 NSE是已知SCLC的标志物，已广泛应用于临床。ProGRP(31-98)作为新的标志物在SCLC诊断及疾病进展监测等方面的临床价值受到持续的关注[8，9]。本组资料显示，ProGRP(31-98)对小细胞肺癌的阳性率为65%，高于NSE(61%)，但两组间的差异无显著性(P>0.1)。然而进一步的ROC曲线分析则表明，ProGRP(31-98)的曲线位置更靠近左上角，表明它是优于NSE的小细胞肺癌标志物，此一结果与已有报道相符[5]。值得注意的是，ProGRP(31-98)在肺癌中总的阳性率仅为17%(16 /93)，远低于NSE的27%(25/93)，其原因在于本组NSCLC组中ProGRP(31-98)的阳性率极低，为1.4%，低于已有报道[6]，这可能是由于肺癌分型中的构成差异所致。但即使根据文献[4，5，7]，ProGRP(31-98)在NSCLC中阳性率也不超过10%，而本组NSE的阳性率达到16% (11/70 )，文献[5，7]报道更可高达22%～33%，表明ProGRP(31-98)对于SCLC是一个高度特异的标志物，且较NSE具有更高的特异性。这对于临床肺癌的鉴别诊断和组织分型可能具有更重要的意义。此外，依照小细胞肺癌的临床分期分别统计ProGRP(31-98)和NSE的阳性率，NSE的阳性率随着临床病期的进展，逐步上升，而ProGRP(31-98)并未显示这种平行关系。Yamaguchi等[5]报道，ProGRP(31-98)在疾病的早期即可升高，因而可能用于小细胞肺癌的早期诊断。本组临床Ⅱ期中ProGRP(31-98)的敏感度达69%，高于总的敏感度，也明显高于NSE的36%(P<0.05)，提示在Ⅱ期病例中应有相当高的阳性率。由于本组未能收集到较早期的病例，且总例数也嫌少，ProGRP(31-98)在早期诊断中的价值，尚有待进一步的观察。最后应指出的是，本组SCLC组血清ProGRP(31-98)浓度的平均值为298 pg/ml，是cutoff值的7.5倍，而NSE平均测定值为21.9 ng/ml，为相应cutoff值的1.8倍，说明SCLC患者血清ProGRP(31-98)浓度值升高幅度大。这样，对测试结果的判读极为有利，提高了测试结果的可靠性。这也是ProGRP(31-98)试验一个显著的特点。
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作者单位：吴京(200030 上海市胸科医院检验科)
于方治(200030 上海市胸科医院检验科)
参考文献
[1]Wharton J, Polak JM, Bloom SR, et al. Bombesin-like immunoreactivity in the lung. Nature, 1978，273:769-770.
[2]Yamaguchi K, Abe K, Kameya T, et al. Production and molecular size heterogeneity of immunoreactive gastrin-releasing peptide in fetal and adult lungs and primary lung tumors. Cancer Res, 1983，43:3932-3939.
, 百拇医药
[3]Maruno K, Yamaguchi K, Suzuki M, et al. Immunoreactive gastrin-releasing peptide as a specific tumor marker in patients with small cell lung carcinoma. Cancer Res， 1989，49:629-632.
[4]Miyake Y, Kodama T, Yamaguchi K. Pro-gastrin-releasing peptide (31-98) is a specific tumor marker in patients with small cell lung carcinoma. Cancer Res, 1994，54: 2136-2140.
[5]Yamaguchi K, Aoyagi K, Urakami K. et al. Enzym-linked immunosorbent assay of pro-gastrin-releasing peptide for small cell lung cancer patients in comparison with neuron-specific enolase measurement. Jpn J Cancer Res, 1995, 86:698-705.
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[6]福田正明，冈三喜男. 肺癌. 日本临床, 1996, 54:1610-1615.
[7]Takada M, Kusunoki Y, Masuda N, et al. Pro-gastrin-releasing peptide (31-98) as a tumor marker of small-cell lung cancer: comparative evaluation with neuron-specific enolase. Bri J Cancer, 1996, 73:1227-1232.
[8]Stieber P, Dienemann H, Schalhorn A, et al. Pro-gastrin-releasing peptide (ProGRP)-a useful marker in small cell lung carcinomas. Anticancer Res, 1999, 19:2673-2678.
[9]Niho S, Nishiwaki Y, Goto K, et al. Significance of serum pro-gastrin-releasing peptide as a predictor of small cell lung cancer: comparative evaluation with neuron-specific enolase and carcinoembryonic antigen. Lung Cancer, 2000, 27:159-167., 百拇医药
吴京 于方治
关键词：胃泌素释放肽前体；小细胞肺癌；诊断
胃泌素释放肽(GRP)是脑肠激素的一种。肺癌与GRP的关系是1978年在人胚胎肺的内分泌细胞中发现蛙皮素(bombesin)样免疫活性之后开始认识的[1]。其后的研究表明，GRP是小细胞肺癌(SCLC)的重要产物，血GRP水平是SCLC重要的标志物[2]，但其测定方法繁琐，难以普及。研究表明，测定胃泌素释放肽前体(ProGRP)作为SCLC标志物是完全可行的[3，4]。ProGRP因部分氨基酸残基的不同，存在3种分子型。利用针对3种分子的共同序列，即ProGRP(31-98)的酶免疫分析药盒，测定了162例血清标本，其中SCLC组23例，非小细胞肺癌(NSCLC)组70例，肺良性疾病组30例，非疾病参考组39例。作为对照，同时测定了神经元特异性烯醇化酶(NSE)活性。
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材料与方法 ProGRP(31-98)测定：ィムチェック- ProGRP(31-98)KIT ， 为96孔微孔板式双抗体夹心法ELISA药盒，东燃株式会社(日本)出品， 批号：990422。按说明书操作，显色完毕在MGC318酶标仪上读取各孔690 nm波长吸光度值。在药盒内附坐标纸上绘制标准曲线，并据此求出血清标本的浓度值。NSE测定：ES300 全自动酶免分析仪和相应的NSE配套试剂，Boehringer Mannheim公司(德国)出品。按试剂说明书设定仪器参数，自动测试，并打印报告。标本：为本院体检或就诊病人血清标本。其中正常对照组39例，男25例，女14例，年龄20～69岁；肺良性疾病组30例，男18例，女12例，年龄32～74岁，病种包括间质性肺炎、慢性阻塞性肺气肿、支气管扩张和肺结核；NSCLC组70例，男49例，女21例，年龄18～76岁，其中鳞状细胞癌25例，腺癌45例；SCLC组23例，男20例，女3例，年龄40～72岁；以上肿瘤诊断以细胞学或病理组织学诊断为依据。标本采取后，均置-20 ℃冻存。本文统计学方法采用非参数的秩和检验和率的χ2检验，均以P<0.05为差异具有显著性。
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结果 SCLC组血清ProGRP(31-98)浓度的中位数为244 ng/L，正常对照组、良性疾病组、肺鳞癌组与肺腺癌组中位数则分别为14.5，14.5，15.0和15.0 ng/L；从浓度分布看，小细胞肺癌组有13例血清ProGRP(31-98)浓度>100 ng/L，而其余各组几乎都<40 ng/L，仅肺腺癌组有1例为90 ng/L，差异有显著性(P<0.005)；其余各组血清ProGRP(31-98)浓度分布和中位数则十分接近，差异无显著性(P>0.1)。选定良性疾病组的ProGRP(31-98)最高值40 ng/L为界定(cutoff)值，NSE则选定12 mg/L为cutoff值。此恰与试剂商所提供的cutoff值[ProGRP(31-98)：46 ng/L；NSE：13 mg/L]接近。据此分别统计了ProGRP(31-98)和NSE对于各组的阳性率，ProGRP(31-98)对于小细胞肺癌和非小细胞肺癌的敏感度分别为65%(15/23)和1%(1/70)；而NSE相应的敏感度分别为61%(14/23 )和16%(11/70)。ProGRP(31-98)在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期小细胞肺癌中的阳性率分别是69%、50%和75%；而NSE相应的阳性率分别是36%、68%和100%。
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讨论 NSE是已知SCLC的标志物，已广泛应用于临床。ProGRP(31-98)作为新的标志物在SCLC诊断及疾病进展监测等方面的临床价值受到持续的关注[8，9]。本组资料显示，ProGRP(31-98)对小细胞肺癌的阳性率为65%，高于NSE(61%)，但两组间的差异无显著性(P>0.1)。然而进一步的ROC曲线分析则表明，ProGRP(31-98)的曲线位置更靠近左上角，表明它是优于NSE的小细胞肺癌标志物，此一结果与已有报道相符[5]。值得注意的是，ProGRP(31-98)在肺癌中总的阳性率仅为17%(16 /93)，远低于NSE的27%(25/93)，其原因在于本组NSCLC组中ProGRP(31-98)的阳性率极低，为1.4%，低于已有报道[6]，这可能是由于肺癌分型中的构成差异所致。但即使根据文献[4，5，7]，ProGRP(31-98)在NSCLC中阳性率也不超过10%，而本组NSE的阳性率达到16% (11/70 )，文献[5，7]报道更可高达22%～33%，表明ProGRP(31-98)对于SCLC是一个高度特异的标志物，且较NSE具有更高的特异性。这对于临床肺癌的鉴别诊断和组织分型可能具有更重要的意义。此外，依照小细胞肺癌的临床分期分别统计ProGRP(31-98)和NSE的阳性率，NSE的阳性率随着临床病期的进展，逐步上升，而ProGRP(31-98)并未显示这种平行关系。Yamaguchi等[5]报道，ProGRP(31-98)在疾病的早期即可升高，因而可能用于小细胞肺癌的早期诊断。本组临床Ⅱ期中ProGRP(31-98)的敏感度达69%，高于总的敏感度，也明显高于NSE的36%(P<0.05)，提示在Ⅱ期病例中应有相当高的阳性率。由于本组未能收集到较早期的病例，且总例数也嫌少，ProGRP(31-98)在早期诊断中的价值，尚有待进一步的观察。最后应指出的是，本组SCLC组血清ProGRP(31-98)浓度的平均值为298 pg/ml，是cutoff值的7.5倍，而NSE平均测定值为21.9 ng/ml，为相应cutoff值的1.8倍，说明SCLC患者血清ProGRP(31-98)浓度值升高幅度大。这样，对测试结果的判读极为有利，提高了测试结果的可靠性。这也是ProGRP(31-98)试验一个显著的特点。
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作者单位：吴京(200030 上海市胸科医院检验科)
于方治(200030 上海市胸科医院检验科)
参考文献
[1]Wharton J, Polak JM, Bloom SR, et al. Bombesin-like immunoreactivity in the lung. Nature, 1978，273:769-770.
[2]Yamaguchi K, Abe K, Kameya T, et al. Production and molecular size heterogeneity of immunoreactive gastrin-releasing peptide in fetal and adult lungs and primary lung tumors. Cancer Res, 1983，43:3932-3939.
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[4]Miyake Y, Kodama T, Yamaguchi K. Pro-gastrin-releasing peptide (31-98) is a specific tumor marker in patients with small cell lung carcinoma. Cancer Res, 1994，54: 2136-2140.
[5]Yamaguchi K, Aoyagi K, Urakami K. et al. Enzym-linked immunosorbent assay of pro-gastrin-releasing peptide for small cell lung cancer patients in comparison with neuron-specific enolase measurement. Jpn J Cancer Res, 1995, 86:698-705.
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[6]福田正明，冈三喜男. 肺癌. 日本临床, 1996, 54:1610-1615.
[7]Takada M, Kusunoki Y, Masuda N, et al. Pro-gastrin-releasing peptide (31-98) as a tumor marker of small-cell lung cancer: comparative evaluation with neuron-specific enolase. Bri J Cancer, 1996, 73:1227-1232.
[8]Stieber P, Dienemann H, Schalhorn A, et al. Pro-gastrin-releasing peptide (ProGRP)-a useful marker in small cell lung carcinomas. Anticancer Res, 1999, 19:2673-2678.
[9]Niho S, Nishiwaki Y, Goto K, et al. Significance of serum pro-gastrin-releasing peptide as a predictor of small cell lung cancer: comparative evaluation with neuron-specific enolase and carcinoembryonic antigen. Lung Cancer, 2000, 27:159-167., 百拇医药