病毒性疾病
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【概述】
随着病毒学和免疫学研究的进展，人们对病毒性疾病(Viral diseases)的认识也逐渐发展。1940年以前，仅知有36种病毒能引起人类疾病，而其中多数疾病的病原体还不能用实验室方法进行分离和研究，例如麻疹、单纯疱疹、病毒性肝炎、流行性出血热等。近50年来对医学科学的理论研究和应用方面都取得了很大进展，例如免疫学的深入研究和新技术的应用，对病毒性疾病的发病机理和病原诊断有了进展；分子生物学的发展，对病毒的形态、结构、繁殖、遗传变异等获得更好的阐明；多种生物制品如疫苗、单克隆抗体、干扰素等，某些可用遗传工程方法来进行生产；对病毒性肝炎的病原学研究和动物模型的建立，和乙型肝炎病毒(HBV)抗原系统的研究，使乙型肝炎疫苗的制备获得成功，并得以应用于预防。特异性IgM的检测对多种病毒性疾病具有早期感染的诊断价值，例甲型、乙型、丙型肝炎，流行性出血热，流行性感冒等。近年来多聚酶链反应的广泛应用，可用于早期病毒核酸的诊断，进行特异性核酸序列分析，便于病毒结构的研究分析，也有助于发病机理的研究。轮状病毒和诺尔沃克(Norwalk)因子的发现阐明了冬季婴儿腹泻的病因学。由于病毒学、免疫学、分子生物学等基础学科的发展为病毒性疾病的诊断和防治提供了有利的条件。
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【病因】
病毒是最小的生物病原体，从20nm到300nm不等，其中最大的是痘类病毒，例如痘苗病毒为300nm×200nm，在普通光学显微镜下勉强可见，中等大小的如流行性感冒病毒，直径为80～100nm，小型病毒如流行性乙型脑炎病毒，直径为20nm，必须在电子显微镜下才能见到。病毒是由一种以核酸(核糖核酸RNA或脱氧核糖核酸DNA)为核心，可分为单股或双股，线形或球形。以蛋白质为外壳(衣壳capsid)而组成的微小颗粒。外壳含有许多具有一定形态的单位，称为子粒(capsomere)。子粒又按一定数目和排列方式构成各种对称形状，例如球形病毒是由于子粒排成对称的二十面体。某些病毒如流行性感冒病毒等，外面围由一层类脂或脂蛋白组成的，来自宿主细胞的囊膜(图11-1)。
病毒主要由核酸和蛋白质组成，每种病毒只有一种类型的核酸(RNA或DNA)，核酸是病毒的生命中枢，它是繁殖、致病和遗传变异的物质基础。如把病毒核酸提纯并接种于细胞，仍可出现细胞病变，并繁殖为具亲代相同特性的子代病毒。病毒的蛋白质具有保护作用，使核酸免受体内核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的破坏，从而增强病毒的感染力。病毒的蛋白质外壳具有抗原性，能刺激人体产生相应的抗体，后者与病毒的蛋白质相结合，使病毒失去感染性。病毒一般无完整的酶系统，但少数病毒，如流行性感冒病毒囊膜表面有血凝素和神经氨酸酶，二者协同能使病毒吸附在易感细胞表面，而后进入细胞发生感染，后者还可促进病毒从感染细胞内释放出来，这些都有利于致病的因素。
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【分型说明】
根据核酸的性质(RNA或DNA)、病毒的形态(立体对称或螺旋对称结构)和大小，对乙醚的抵抗力、有无囊膜、壳微粒数、核酸为双股或单股以及基本数等的不同，病毒的分类如表11-1。
表11—1 病毒分类
核酸
对称
有无囊膜
对乙醚敏感性
子粒数
病毒颗粒大小(nm)
病毒体核酸的分子(1×106)
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单股或双股(约数)
基因数
病毒科(族属)
DNA
20面立体对称
无
不敏感
32
18-26
1.5-1.8
单股
7
细小病毒(Parvoviridae)
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72
45-55
2.4- 5
双股(圆形)
10
乳头多瘤空泡病毒(Papovaviridae)
252
70-90
20-30
双股
50
腺病毒(Adenoviridae)
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有
敏感
162
100
54-92
双股
180
疱疹病毒(Herpetoviridae)
复合对称
复合囊膜
不敏感
230*300
160
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双股
400
痘病毒(Poxviridae)
20面立体对称
无
不敏感
32
20-30
2-2.8
单股
12
微小核糖核酸病毒(Picornaviridae)？
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12-15
双股
40
呼吸道肠道病毒(Reoviridae)
有
敏感
32？
40-70
3.4
单股
15
披膜病毒(Togaviridae)
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RNA
不明或复合对称
有
敏感
50-300
3.5
单股
12
沙粒病毒(Arenaviridae)
80-150
5-10
单股
30
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冠状病毒(Coronaviridae)
100
9
单股
50
逆转录(肿瘤)病毒(Retroviridae)
螺旋对称
有
敏感
90-100
7
单股
15
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本雅病毒(Bunyaviridae)
80-120
4
单股
15
正粘液病毒(Orthom yxoviridae)
150-300
6-8
单股
30
副粘液病毒(Param yxoviridae)
70*175
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3-4
单股
30
弹状病毒(rhabdovirdae)
病毒繁殖是在细胞内进行，当病毒进入宿主细胞后，改变细胞原来的新陈代谢途径，在细胞内合成病毒的核酸和蛋白质外壳，装配成完整的病毒，向细胞外释放。虽然各类病毒的繁殖机理并不完全相同，但绝大多数病毒都有如下的基本繁殖过程。①吸附：是通过病毒的特异性结构与宿主细胞上的相应受体相结合，且通过细胞特异性转录酶使病毒基因进行有效的转录。因此，病毒感染表现对某种细胞具有一定的亲嗜性，也即侵犯一定的组织和细胞，例如肝炎病毒侵犯肠道粘膜而后定位于肝细胞；天花、麻疹、风疹等病毒侵犯呼吸道粘膜而后定位于皮肤、神经系统。②穿入：易感细胞通过饱饮作用将整个病毒颗粒吞入细胞内，当病毒被吞进细胞后，可通过细胞内的溶酶体酶将病毒体的蛋白质衣壳溶解，此称脱壳，使核酸游离出来，当核酸一经游离出来后，大多立即移入细胞核内。③复制：就双股DNA来说，当病毒DNA转移到细胞核后，就将其并列盘旋的两条长链通过氢键的断裂并分开--分为两条单独的长链，分开的每条链各以其自身为样板，通过DNA聚合酶，并利用其周围已有的核苷酸进行复制，复制的二条链特异结合并成盘旋状。这样，继续复制下去，就不仅可复制出许多与原来结构一样的新的DNA分子，并从而也保证了病毒遗传信息的世代相传。双股RNA病毒的复制情况也大致如此。④翻译：当病毒核酸在复制完成后，就开始转录成为病毒的信使核糖核酸(mRNA)，然后从这种mRNA来指导译成具有一定特性的蛋白质(包括功能蛋白、各种酶和结构蛋白--病毒衣壳等)。DNA→mRNA上的遗传密码亦象电报密码一样，经过蛋白质把它翻译出来，即显示该病毒的性状。⑤成熟：细胞内新合成的核酸和蛋白质亚单位等通过一定的方式装配成为成熟的病毒体。病毒体成熟或装配机制比较复杂，其大致程序如下：一是整形待装，即将新复制的较大体积的核酸分子聚缩成较小体积，以便穿上或装入一定形态的衣壳内。按照病毒种类的不同，其穿着衣壳的方式有二种，有些病毒以核酸为支架，将许多壳微粒按一定方式围裹到上面，形成一定形式的衣壳，另些病毒以某种方式先形成一定形态的衣壳，并在其上留一裂口(由一段肽链分开)，而后再将核酸装进去，封口后即为完全病毒。无囊膜的病毒穿上衣壳后即已成熟，可释放到细胞外，再进入新的敏感细胞内进行繁殖，有囊膜的病毒则还要装配上囊膜后，才算成熟。
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【病毒感染细胞后的三种表现及其机理】
由于病毒的种类和性质不同，其感染细胞的表现亦不同，且机体的细胞免疫功能对病毒感染也起着重要的作用。归纳起来可分为三种表现形式即溶细胞型、 非溶细胞型及转化型。
(一)溶细胞型 由杀伤性强的病毒感染所致。在 光镜下见被感染的细胞先变圆、皱缩，继之死亡。电镜下可见病毒在细胞内繁殖、侵害的表现。主要由于病毒 抑制细胞DNA、RNA合成，使其本身蛋白质和核酸合 成障碍，且可造成溶酶体的损伤等。例如急性呼吸道感 染、病毒性脑炎等。
(二)非溶细胞型 这一类是有包膜或毒力较低的病毒与易感性较低的细胞可能形成稳定状态感染。在相当长的时间内病毒与细胞并存且同时增殖，病毒可 以传给子代细胞或感染邻近细胞。它主要损伤细胞膜，使细胞通透性增高，还可导致细胞膜的免疫损伤和破坏，部分能引起细胞融合，也可在胞浆或细胞核内形成包涵体。例：单纯疱疹病毒、痘病毒等。
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(三)转化型 病毒可诱导染色体断裂、损伤甚至 改变染色体数目，后者常见于肿瘤病毒，它也可促使细胞基因表达和调节的改变，且可将病毒整合于宿主细胞的染色体上，或以质粒的形式存在于细胞质中。一般病毒并不繁殖，但细胞会发生变化。例如疱疹病毒、多瘤病毒、人类逆转录病毒等。
【临床表现】
病毒性疾病的临床表现不一，一种病毒可引起不同类型的临床症候群，而一种临床症候群也可由多种不同病毒所引起。
(一)呼吸道感染临床综合征 主要表现为：上呼吸道感染、急性阻塞性喉-气管-支气管炎(哮吼)、毛细支气管炎、肺炎和流行性胸痛等，其主要病毒见表11-2。
表11-2 呼吸道病毒感染临床症候群
临床综合征
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主要病毒
1.上感
鼻病毒
冠状病毒
肠道病毒：ECHO粘液病毒：流感甲、乙，副流感Ⅰ～Ⅲ，RSV
腺病毒1-8 11 14 21
2.急性阻塞性-喉-气管-支气管炎
(哮吼)
肠道病毒：CoxA9，CoxB5，ECHO11粘液病毒：副流感I～Ⅲ，RSV
3.毛细支气管炎
肠道病毒 68型
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粘液病毒：RSV
副流感Ⅰ～Ⅲ，流感甲、乙腺病毒2 5 6
4.肺炎
肠道病毒：CoxA7、9，CoxB4、5，ECHO，68型Reo1
粘液病毒：流感甲，RSV，副流感腺病毒I～Ⅲ2-4 7 7a 11 14 21
5.流行性胸痛
肠道病毒：CoxB1～6
注：Cox柯萨奇病毒，ECHO埃可病毒，Reo呼肠病毒，RSV呼吸道合胞病毒
(二)神经系统感染临床综合征
主要表现为：脑炎、无菌性脑膜炎和瘫痪综合征，国内所见的主要病毒见表11-3。
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表11-3 神经系统病毒感染临床综合征
临床综合征
主要病毒
1.脑炎综合征
虫媒病毒：B组：流行性乙型脑炎病毒，森林脑炎病毒
肠道病毒：灰髓炎病毒I、Ⅱ、Ⅲ，CoxA CoxB ， E
CHO 肠道病毒
71型
疱疹病毒：单纯疱疹病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
狂犬病病毒
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巨细胞病毒(CMV)，EB(Epstein Barr)病毒
流行性腮腺炎病毒
流感病毒
腺病毒7a
2.无菌性脑膜
肠道病毒：灰髓炎I、Ⅱ、Ⅲ、Cox炎综合征 A7、9，散发病例有A1-6、8、10、11、14、16-18、22、24，CoxB1～5，散发病例有
B6ECHO2-4、6、7、9、11、14、16-19、25、30、33
散发病例有1、5、12、13、15、20-24、27、31、32
肠道病毒71型。
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单纯疱疹病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
流行性腮腺炎病毒
3.松弛性瘫痪
肠道病毒：灰髓炎病毒I、Ⅱ、Ⅲ、综合征 CoxA1、2、4、6-11、14、16、21 CoxB1-6
ECHO1-4，6、7、9、11-14、16、18、19、30
肠道病毒70、71型
单纯疱疹病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
腺病毒7
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注：同前
(三)皮肤、粘膜出疹性病毒疾病临床症候群
可表现为斑、丘疹直至出血点、瘀斑等，主要病毒见表11-4。
表11-4 皮肤粘膜出疹性病毒疾病临床综合征
临床综合征
主要病毒
1.斑疹和斑丘疹
肠道病毒：CoxA2、4、5、9、16、23
CoxB1、3~5ECHO1-7、9、11、14、16、18、19
肠道病毒71型、灰髓炎病毒。
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Reo2
巨细胞病毒(CMV)，EB病毒麻疹
病毒
风疹病毒
粘液病毒：副流感，RSV腺病毒:3.7
2.疱疹和脓疱
肠道病毒：CoxA4、5、9、10、16，CoxB3、5，ECHO4、9、11，肠道病毒71型
痘病毒和疱疹病毒：天花病毒、牛痘病毒、水痘带状疱疹病毒、单纯疱疹病毒、CMV病毒
3.荨麻疹
肠道病毒：CoxA9，CoxB3，ECHO11
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4.出血点或瘀点
肠道病毒：CoxA9，CoxB3，ECHO4、9
出血热病毒
5.多形皮疹
肠道病毒：CoxB4，ECHO6、11
6.疱疹性咽峡炎
肠道病毒：CoxA1-6、8、10、22
(四)心肌、心包病毒感染临床综合征表现为急性心肌炎和心包炎，主要病毒见表11-5。
表11-5 心肌、心包病毒感染临床综合征
临床综合征
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主要病毒
1.急性心肌炎
肠道病毒：CoxA1、4、9、16、23
CoxB1-5，灰髓炎病毒：ECHO6、9、11、19、22、25
疱疹病毒：水痘、带状疱疹病毒，EB
病毒，CMV病毒
粘液病毒：流感甲型、麻疹病毒、腮
腺炎病毒
腺病毒
狂犬病病毒
风疹病毒
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淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
2.心包炎
肠道病毒：CoxA1、4，CoxB1～5，灰髓
炎病毒，ECHO1、9
疱疹病毒：单纯疱疹病毒，水痘-带状
疱疹病毒，EB病毒
粘液病毒：流感甲、乙型，腮腺炎病毒
腺病毒
(五)其他临床综合征 表现为出血热者，国内主要是流行性出血热病毒和登革热病毒，引起胃肠炎症候群、肝炎综合征和眼结膜炎综合征的病毒见表11-6
表11-6 其他病毒感染综合征
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临床综合征
主要病毒
1.出血热综合征
登革热病毒
汉坦病毒(流行性出血热病毒)
2.胃肠炎综合征
轮状病毒，星状病毒，嵌杯病毒，Norwalk因子
Reo病毒，ECHO2、4、6～9、12、13、19～24
CoxA4，CoxB5
腺病毒
冠状病毒
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3.肝炎综合征
乙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒，甲型肝炎病毒(肠道病毒72型)，CoxA4、9，CoxB5i(新生儿肝炎)
CMV病毒，EB病毒
4.眼结膜炎综合征
腺病毒1～3、5～6、14
CoxA9、12、16、24，CoxB2，肠道病毒70型
ECHO1、4、6、9、11、12、20，新型肠道病毒(SEC17)
【实验检查】
(一)病毒和病毒抗原的检测
1.光镜检查法 用光学显微镜直接检查某些细胞中包涵体，如对巨细胞病毒(CMV)感染患者尿沉渣检查细胞中包涵体，麻疹患者口腔粘膜多核巨细胞(Warthin氏巨细胞)中包涵体，狂犬病脑组织神经细胞胞质中包涵体(Negri 氏小体)等。
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2.电镜检查法 用电子显微镜观察病毒颗粒的形态，适于检查含高浓度病毒的标本，往往需作超速离心予以浓缩，已被用于甲型肝炎、轮状病毒等的检测。近年来利用特异性免疫血清与标本混合孵育后，继而在电镜下观察(免疫电镜法IEM)，可提高阳性率，已被用于轮状病毒、鼻病毒、甲型和戊型肝炎病毒、疱疹病毒等的检测。
3.免疫荧光法(IFT)可快速、早期检测难以培养的病毒，如流行性出血热的汉坦病毒，也可用以检测上呼吸道上皮细胞内的流感病毒、腺病毒和呼吸道融合病毒(RSV)，疱疹水疱液中单纯疱疹病毒抗原，婴幼儿腹泻中的轮状病毒抗原等(图11-2)。
4.酶联免疫吸附检测法(ELISA) 方法简便可用分光光度比色计或肉眼观察结果，无需特殊设备，但需标准化的试剂和器材，方法原理参见图11-3。已被用于HBV、流行性出血热、单纯疱疹、轮状病毒和EB病毒等抗原的检测。
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5.固相放射免疫法(SPRIA)方法简便、快速、灵敏度高，但需要放射性核素实验室设备。方法原理参见图11-3，已被用于HBV、轮状和登革热等病毒抗原的检测。
6.反向被动血凝法(RPHA) 方法简便，不需特殊设备，但需提纯特异性和高效价抗体，其方法原理参见图11-4，已被用于腺病毒、CMV和HBV等抗原的检测。
7.单克隆抗体(McAb)检测抗原法 通过细胞融合技术，使小鼠的骨髓瘤细胞与分泌某抗体的淋巴细胞融合，产生一种淋巴细胞杂交瘤，既具有生长繁殖的特性，又具有分泌特异性抗体的功能，通过克隆化，能产生单一抗体，称为单克隆抗体，对病毒种和株具有特异性，避免了种与株的交义反应，提高诊断病毒的特异性和敏感性，例如流感单克隆抗体能检测流感病毒型和株的特异性。
8.聚丙烯酰胺电泳和免疫印迹法1979年根据Towblin将核酸转印技术应用于蛋白质的研究，建立了Western Blot即蛋白质转印技术，现应用该技术于抗原蛋白多肽成份的研究。它主要用聚丙稀酰胺垂直电泳，在凝胶分子筛的作用下，使不同大小的蛋白多肽结构分离出来，然后将凝胶上分离开的蛋白转移到醋酸纤维薄膜(NC)上，再用相应的染色进行检测，这技术广泛用于各种病毒表型变化等研究。
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核酸转印是现代分子克隆研究中不可缺少的实验手段，包括DNA转印(Sousthern Blot)及RNA转印(Northern Blot)两种。
9.聚合酶链反应(PCR)技术1985年美国Saiki等首先提出聚合酶链反应试验(Polymerse Chain Re-action，PCR)。PCR是试管内特异性DNA片段进行扩增的新方法，它可以将DNA片段扩增10万倍，因而就提高了试验的特异性和敏感性。逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)也可特异性的扩增RNA片段故此方法也适用于RNA结构的微生物的鉴定。近年来成为临床病原诊断的重要工具。
(二)病毒分离和鉴定 病毒分离和鉴定一般需时较长，对疾病的早期诊断帮助不大。早期和快速病原学诊断往往有赖于上述病毒和病毒抗原的检测，但为了分析病毒抗原的变异和摸清流行规律(例如流感)，病毒的分离和鉴定也属不可缺少，常用的实验室方法有以下三种。
1.动物接种 最常用的实验动物是乳鼠或1—3周龄的小白鼠，接种后待动物发病或死亡后进行解剖，以受染脏器继续传代，并可用中和试验进行鉴定。用于流行性乙型脑炎、柯萨奇病毒等感染。
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2.鸡胚接种 病人的含漱液经抗生素处理后，视不同胚龄，接种于尿囊、绒毛尿囊膜或羊膜，进行培养，待鸡胚发生变化(如濒死或出现痘疱等)，取羊水或尿囊液进行血凝或血凝抑制试验进一步鉴定，用于流感病毒、腮腺炎病毒等的鉴定。
3.细胞培养 可用原代、传代或二倍体细胞培养分离病毒，某些病毒增殖后可出现细胞病变，并可用特异性抗体进行中和试验来鉴定毒种细胞培养是目前实验室诊断病毒的主要方法。对某些不产生病变的病毒增殖可用免疫荧光染色、血球吸附、干扰现象等试验进行鉴定，如腺病毒、肠道病毒、风疹病毒等。
(三)免疫学诊断 用已知病毒抗原来检查未知抗体，病人血清采集后应置4℃冰箱内，一般需收集双份血清标本，即疾病早期和恢复期(病后3周左右)，同时测定，如抗体效价有4倍或4倍以上升高者，即可确诊为该病毒感染。测定病毒的特异性IgM，具有早期感染诊断价值，如有升高，即可确诊为该病毒的现症感染。
1.血凝抑制试验 可用于流感、副流感和流行性乙型脑炎，因这些病毒可凝集动物红细胞，加入相应抗体后可抑制血细胞凝集现象。
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2.补体结合试验 可用于流感、流行性乙型脑炎。用含已知病毒的材料制备抗原。检查病人血清中未知抗体。
3.中和试验 用于人群免疫水平的调查。
4.酶联免疫吸附试验见前，以已知抗原来测定抗体。
【治疗说明】
细菌感染时可用抗生素和抗菌药物治疗。抗病毒药物却因为病毒在细胞内复制，药物作用不如抗菌药物，且毒副反应较大，使病毒性感染成为当前人类关注的传染病。如：艾滋病传播迅速，各种病毒性肝炎散布于世界各地，另有新病毒发现，以上均严重危害人民健康。但近年来通过对病毒繁殖和宿主与病毒关系的深入的分子生物学研究，以及随着临床药理的近展，抗病毒药物治疗展示了有希望的前景。
(一)核苷类药物
, http://www.100md.com 1.阿糖腺苷(Adenosine arabinoside，Ara-A)是嘌呤核苷的同系物，能抑制病毒合成DNA。对疱疹病毒属如单纯疱疹、带状疱疹病毒作用最为显著。
2.病毒唑 (Ribavirine RBV) RBV具有广谱抗病毒作用，对DNA、RNA型多种病毒均有显著抑制作用。其作用机理为抑制病毒磷酸次黄嘌呤核苷脱氢酶，使不能合成鸟嘌呤核苷酸，从而抑制病毒合成和复制。它对流感、副流感、单纯疱疹、腺病毒、鼻病毒、甲型肝炎、乙脑、流行性出血热等均有抑制作用。
3.阿昔洛章 (无环鸟苷Acyclovir，ACV)ACV是嘌呤核苷的衍生物，可选择性的抑制疱疹病毒特异性胸腺嘧啶脱氧核苷酸酶，它为广谱抗病毒药物。它对疱疹病毒的毒性比对宿主细胞的毒性强得多，故对宿主细胞基本无害。与丙磺舒、青霉素类和头孢菌素类合用可提高ACR的作用。用于治疗疱疹性脑炎、免疫缺陷病人的全身性感染，对乙型肝炎也有一定效果。
, 百拇医药 4.更昔洛韦(丙氧鸟苷，Ganciclovir，GCV)其为ACV的衍生物，它对人类疱疹病毒有抑制作用。它与ACV的作用相类似，可与巨细胞病毒(CMV)的DNA结合，不断产生新的末端，有很强的抑制CMV繁殖作用。体外试验显示其作用强于ACV，注射或口服仅用于艾滋病人，因它对骨髓有抑制作用，可引起胰腺炎、神经肌肉疼痛等毒副作用。
5.双去氧胞嘧啶核苷(2＇3＇Diclexycytidine，DDC) 为目前已知核苷衍生物中抗人类免疫缺陷病毒(HIV)最强有力的药物。DDC通过抑制HIV复制周期中的逆转录酶而产生抗病毒作用。它用于治疗艾滋病(AIDS)及艾滋相关综合征(ARC)。
6.叠氮胸苷(Azidothymioline AET)本品为核苷类化合物，它可终止DNA链的延长而抑制病毒的复制。与DDC合用对HIV有协同作用，可阻止AET耐药性的出现。
7.双去氧肌苷(2＇-3＇-DidexyinasineDDI)属逆转录酶抑制剂，可用于治疗成人及儿童对AET有耐药的艾滋病毒感染者或严重的ARC患者。治疗后可改善AiDS或ARC患者的症状。
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(二)金刚烷胺及其乙基衍生物
1.盐酸金刚烷胺 可阻止病毒穿入细胞，用于预防甲型流感，也可起减轻症状或缩短病程等治疗作用。但有头痛、幻觉等副作用。
2.肽丁胺 为我国研制的抗DNA病毒药物，外用治疗单纯疱疹、带状疱疹的皮肤感染及乳突瘤病毒引起的尖锐湿疣。但有刺激性，不能全身用药。
(三)干扰素(Interferon，IFN) IFN是受病毒感染的宿主细胞对抗病毒及其核酸所产生的抗病毒蛋白，它可选择性的阻断病毒mRNA，从而抑制病毒蛋白的合成但对病毒无直接杀灭作用。干扰素可用于慢性肝炎、肾移植及AIDS伴卡氏肉瘤患者等。
(四)磷甲酸钠(Phosphonoformete PFA) 它为广谱抗病毒药物，能与CMV、EBV、HBV、HIV等病毒的DNA聚合酶及流感病毒等的RNA聚合酶结合，通过非竞争性抑制逆转录酶，从而阻断病毒的复制。PFA的作用与核苷类药物不同，为直接作用于核酸聚合酶的焦磷酸结合部位，不涉及胸腺嘧啶激酶，故对ACV等耐药的毒株仍有抑制作用，对暴发性乙型肝炎治疗也有一定疗效。
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近年来新抗病毒药物的研究受到广泛的重视，发展较快，其中效果较好的有①无环鸟苷的类似物或衍生物，如Penciclovir为长效无环鸟苷类，每日仅需给药一次，Famciclovir则口服治疗较好。②抗AIDS病药物有双脱羟基胸苷(Cl4-T)、Lamivudine(3Tc)等均为HIV逆转录酶抑制剂。国内中药制剂天花粉蛋白GLQ223、金丝桃素Haypericin对抑制HIV均有效。
疫苗是预防病毒性疾病的重要措施，早在18世纪即应用痘苗来预防天花获得成功，直至20世纪80年代全球范围内消灭了天花，才停止种痘。本世纪50年代出现灰髓炎疫苗，60年代有麻疹、腮腺炎和风疹疫苗，目前国际上预防病毒性疾病的疫苗见表11-7，但某些疫苗国内尚未普遍使用，有待于进一步大规模生产和推广使用。有希望的新疫苗将在今后陆续问世，如减毒活疫苗(Live attenuated Vaccine)和rDNA糖蛋白疫苗(rDNAglycoprotein Vaccine)应用于巨细胞病毒感染；减毒活疫苗和活的媒介病毒中cDNA疫苗(cDNAin live vector virus Vaccine)应用于登革热；三价亚单位(trivalent，subunit)副流感疫苗；rDNA糖蛋白疫苗和减毒活疫苗应用于合胞病毒感染；以及rDNA糖蛋白疫苗、活的媒介病毒中cDNA疫苗和亚单位或合成抗原(subunit or synthetic antigen)应用于艾滋病等。
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以下病毒性疾病的分类，各本专著均不相同，哈里逊内科学等则以病毒的基本结构，如RNA、DNA来分类，如RNA病毒感染包含流感、麻疹、腮腺炎、狂犬病、风疹等，DNA病毒感染则含单纯疱疹、巨细胞病毒感染、EB病毒感染、天花等。而西氏内科学则分为呼吸道感染，如流感、病毒性胃肠炎、麻疹、风疹、巨细胞病毒感染、传染性单核细胞增多症等；节肢动物源性，如日本乙型脑炎等；病毒性出血热如流行性出血热等；而狂犬病、脊髓灰质炎则归入神经系统疾病中，肝炎归入消化系统疾病中。
本书基本采取以病毒对器官的主要嗜性来分类如流感归入呼吸道感染，病毒性肝炎及流行性腮腺炎归入消化系统，乙型脑炎、狂犬病、脊髓灰质炎归入神经系统感染。同时结合习惯的归类，如出疹性病毒感染及病毒性出血热等。分类并无统一模式，只是希望便于读者归纳、阅读。
表11-7 预防病毒性疾病的主要疫苗
疾 病
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疫苗来源
病毒情况
接种方式
备 注
每人须接种：
灰髓炎
组织培养(人双倍体细胞，猴肾细胞)
减毒活疫苗
口服
麻疹
组织培养(鸡胚细胞)
灭活
皮下
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腮腺炎
组织培养(鸡胚细胞)
减毒活疫苗
皮下
国内尚未使用
风疹
组织培养(鸡胚细胞，兔或人双倍体细胞)
减毒活疫苗
皮下
国内尚未使用
在某种情况下需要使用的疫苗：
天花
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牛或羊的淋巴液
活疫苗
皮下
因天花已消灭，牛痘已停止接种，仅突然出现天花时才使用
黄热病
组织培养或鸡胚
减毒活疫苗
皮下
乙型肝炎
从健康带毒者提纯HBsAg
灭活或亚单位
皮下
, 百拇医药
流感
从酵母中HBsAg重组合高度提纯或亚病毒型(鸡胚)
亚单位
皮下
灭活
皮下
狂犬病*
人双倍体细胞培养
灭活
皮下
使用于经狂犬咬伤的疑似病人
腺病毒感染
, 百拇医药
人双倍体细胞培养
减毒活疫苗
口服
军队中急性呼吸道疾病腺病毒流行时应用
乙型脑炎
组织培养(地鼠肾)
灭活
皮下
水痘
人双倍体细胞培养
减毒活疫苗
皮下
*我国现用地鼠肾疫苗, 百拇医药
随着病毒学和免疫学研究的进展，人们对病毒性疾病(Viral diseases)的认识也逐渐发展。1940年以前，仅知有36种病毒能引起人类疾病，而其中多数疾病的病原体还不能用实验室方法进行分离和研究，例如麻疹、单纯疱疹、病毒性肝炎、流行性出血热等。近50年来对医学科学的理论研究和应用方面都取得了很大进展，例如免疫学的深入研究和新技术的应用，对病毒性疾病的发病机理和病原诊断有了进展；分子生物学的发展，对病毒的形态、结构、繁殖、遗传变异等获得更好的阐明；多种生物制品如疫苗、单克隆抗体、干扰素等，某些可用遗传工程方法来进行生产；对病毒性肝炎的病原学研究和动物模型的建立，和乙型肝炎病毒(HBV)抗原系统的研究，使乙型肝炎疫苗的制备获得成功，并得以应用于预防。特异性IgM的检测对多种病毒性疾病具有早期感染的诊断价值，例甲型、乙型、丙型肝炎，流行性出血热，流行性感冒等。近年来多聚酶链反应的广泛应用，可用于早期病毒核酸的诊断，进行特异性核酸序列分析，便于病毒结构的研究分析，也有助于发病机理的研究。轮状病毒和诺尔沃克(Norwalk)因子的发现阐明了冬季婴儿腹泻的病因学。由于病毒学、免疫学、分子生物学等基础学科的发展为病毒性疾病的诊断和防治提供了有利的条件。
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【病因】
病毒是最小的生物病原体，从20nm到300nm不等，其中最大的是痘类病毒，例如痘苗病毒为300nm×200nm，在普通光学显微镜下勉强可见，中等大小的如流行性感冒病毒，直径为80～100nm，小型病毒如流行性乙型脑炎病毒，直径为20nm，必须在电子显微镜下才能见到。病毒是由一种以核酸(核糖核酸RNA或脱氧核糖核酸DNA)为核心，可分为单股或双股，线形或球形。以蛋白质为外壳(衣壳capsid)而组成的微小颗粒。外壳含有许多具有一定形态的单位，称为子粒(capsomere)。子粒又按一定数目和排列方式构成各种对称形状，例如球形病毒是由于子粒排成对称的二十面体。某些病毒如流行性感冒病毒等，外面围由一层类脂或脂蛋白组成的，来自宿主细胞的囊膜(图11-1)。
病毒主要由核酸和蛋白质组成，每种病毒只有一种类型的核酸(RNA或DNA)，核酸是病毒的生命中枢，它是繁殖、致病和遗传变异的物质基础。如把病毒核酸提纯并接种于细胞，仍可出现细胞病变，并繁殖为具亲代相同特性的子代病毒。病毒的蛋白质具有保护作用，使核酸免受体内核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的破坏，从而增强病毒的感染力。病毒的蛋白质外壳具有抗原性，能刺激人体产生相应的抗体，后者与病毒的蛋白质相结合，使病毒失去感染性。病毒一般无完整的酶系统，但少数病毒，如流行性感冒病毒囊膜表面有血凝素和神经氨酸酶，二者协同能使病毒吸附在易感细胞表面，而后进入细胞发生感染，后者还可促进病毒从感染细胞内释放出来，这些都有利于致病的因素。
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【分型说明】
根据核酸的性质(RNA或DNA)、病毒的形态(立体对称或螺旋对称结构)和大小，对乙醚的抵抗力、有无囊膜、壳微粒数、核酸为双股或单股以及基本数等的不同，病毒的分类如表11-1。
表11—1 病毒分类
核酸
对称
有无囊膜
对乙醚敏感性
子粒数
病毒颗粒大小(nm)
病毒体核酸的分子(1×106)
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单股或双股(约数)
基因数
病毒科(族属)
DNA
20面立体对称
无
不敏感
32
18-26
1.5-1.8
单股
7
细小病毒(Parvoviridae)
, 百拇医药
72
45-55
2.4- 5
双股(圆形)
10
乳头多瘤空泡病毒(Papovaviridae)
252
70-90
20-30
双股
50
腺病毒(Adenoviridae)
, 百拇医药
有
敏感
162
100
54-92
双股
180
疱疹病毒(Herpetoviridae)
复合对称
复合囊膜
不敏感
230*300
160
, 百拇医药
双股
400
痘病毒(Poxviridae)
20面立体对称
无
不敏感
32
20-30
2-2.8
单股
12
微小核糖核酸病毒(Picornaviridae)？
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12-15
双股
40
呼吸道肠道病毒(Reoviridae)
有
敏感
32？
40-70
3.4
单股
15
披膜病毒(Togaviridae)
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RNA
不明或复合对称
有
敏感
50-300
3.5
单股
12
沙粒病毒(Arenaviridae)
80-150
5-10
单股
30
, 百拇医药
冠状病毒(Coronaviridae)
100
9
单股
50
逆转录(肿瘤)病毒(Retroviridae)
螺旋对称
有
敏感
90-100
7
单股
15
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本雅病毒(Bunyaviridae)
80-120
4
单股
15
正粘液病毒(Orthom yxoviridae)
150-300
6-8
单股
30
副粘液病毒(Param yxoviridae)
70*175
, 百拇医药
3-4
单股
30
弹状病毒(rhabdovirdae)
病毒繁殖是在细胞内进行，当病毒进入宿主细胞后，改变细胞原来的新陈代谢途径，在细胞内合成病毒的核酸和蛋白质外壳，装配成完整的病毒，向细胞外释放。虽然各类病毒的繁殖机理并不完全相同，但绝大多数病毒都有如下的基本繁殖过程。①吸附：是通过病毒的特异性结构与宿主细胞上的相应受体相结合，且通过细胞特异性转录酶使病毒基因进行有效的转录。因此，病毒感染表现对某种细胞具有一定的亲嗜性，也即侵犯一定的组织和细胞，例如肝炎病毒侵犯肠道粘膜而后定位于肝细胞；天花、麻疹、风疹等病毒侵犯呼吸道粘膜而后定位于皮肤、神经系统。②穿入：易感细胞通过饱饮作用将整个病毒颗粒吞入细胞内，当病毒被吞进细胞后，可通过细胞内的溶酶体酶将病毒体的蛋白质衣壳溶解，此称脱壳，使核酸游离出来，当核酸一经游离出来后，大多立即移入细胞核内。③复制：就双股DNA来说，当病毒DNA转移到细胞核后，就将其并列盘旋的两条长链通过氢键的断裂并分开--分为两条单独的长链，分开的每条链各以其自身为样板，通过DNA聚合酶，并利用其周围已有的核苷酸进行复制，复制的二条链特异结合并成盘旋状。这样，继续复制下去，就不仅可复制出许多与原来结构一样的新的DNA分子，并从而也保证了病毒遗传信息的世代相传。双股RNA病毒的复制情况也大致如此。④翻译：当病毒核酸在复制完成后，就开始转录成为病毒的信使核糖核酸(mRNA)，然后从这种mRNA来指导译成具有一定特性的蛋白质(包括功能蛋白、各种酶和结构蛋白--病毒衣壳等)。DNA→mRNA上的遗传密码亦象电报密码一样，经过蛋白质把它翻译出来，即显示该病毒的性状。⑤成熟：细胞内新合成的核酸和蛋白质亚单位等通过一定的方式装配成为成熟的病毒体。病毒体成熟或装配机制比较复杂，其大致程序如下：一是整形待装，即将新复制的较大体积的核酸分子聚缩成较小体积，以便穿上或装入一定形态的衣壳内。按照病毒种类的不同，其穿着衣壳的方式有二种，有些病毒以核酸为支架，将许多壳微粒按一定方式围裹到上面，形成一定形式的衣壳，另些病毒以某种方式先形成一定形态的衣壳，并在其上留一裂口(由一段肽链分开)，而后再将核酸装进去，封口后即为完全病毒。无囊膜的病毒穿上衣壳后即已成熟，可释放到细胞外，再进入新的敏感细胞内进行繁殖，有囊膜的病毒则还要装配上囊膜后，才算成熟。
, 百拇医药
【病毒感染细胞后的三种表现及其机理】
由于病毒的种类和性质不同，其感染细胞的表现亦不同，且机体的细胞免疫功能对病毒感染也起着重要的作用。归纳起来可分为三种表现形式即溶细胞型、 非溶细胞型及转化型。
(一)溶细胞型 由杀伤性强的病毒感染所致。在 光镜下见被感染的细胞先变圆、皱缩，继之死亡。电镜下可见病毒在细胞内繁殖、侵害的表现。主要由于病毒 抑制细胞DNA、RNA合成，使其本身蛋白质和核酸合 成障碍，且可造成溶酶体的损伤等。例如急性呼吸道感 染、病毒性脑炎等。
(二)非溶细胞型 这一类是有包膜或毒力较低的病毒与易感性较低的细胞可能形成稳定状态感染。在相当长的时间内病毒与细胞并存且同时增殖，病毒可 以传给子代细胞或感染邻近细胞。它主要损伤细胞膜，使细胞通透性增高，还可导致细胞膜的免疫损伤和破坏，部分能引起细胞融合，也可在胞浆或细胞核内形成包涵体。例：单纯疱疹病毒、痘病毒等。
, 百拇医药
(三)转化型 病毒可诱导染色体断裂、损伤甚至 改变染色体数目，后者常见于肿瘤病毒，它也可促使细胞基因表达和调节的改变，且可将病毒整合于宿主细胞的染色体上，或以质粒的形式存在于细胞质中。一般病毒并不繁殖，但细胞会发生变化。例如疱疹病毒、多瘤病毒、人类逆转录病毒等。
【临床表现】
病毒性疾病的临床表现不一，一种病毒可引起不同类型的临床症候群，而一种临床症候群也可由多种不同病毒所引起。
(一)呼吸道感染临床综合征 主要表现为：上呼吸道感染、急性阻塞性喉-气管-支气管炎(哮吼)、毛细支气管炎、肺炎和流行性胸痛等，其主要病毒见表11-2。
表11-2 呼吸道病毒感染临床症候群
临床综合征
, 百拇医药
主要病毒
1.上感
鼻病毒
冠状病毒
肠道病毒：ECHO粘液病毒：流感甲、乙，副流感Ⅰ～Ⅲ，RSV
腺病毒1-8 11 14 21
2.急性阻塞性-喉-气管-支气管炎
(哮吼)
肠道病毒：CoxA9，CoxB5，ECHO11粘液病毒：副流感I～Ⅲ，RSV
3.毛细支气管炎
肠道病毒 68型
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粘液病毒：RSV
副流感Ⅰ～Ⅲ，流感甲、乙腺病毒2 5 6
4.肺炎
肠道病毒：CoxA7、9，CoxB4、5，ECHO，68型Reo1
粘液病毒：流感甲，RSV，副流感腺病毒I～Ⅲ2-4 7 7a 11 14 21
5.流行性胸痛
肠道病毒：CoxB1～6
注：Cox柯萨奇病毒，ECHO埃可病毒，Reo呼肠病毒，RSV呼吸道合胞病毒
(二)神经系统感染临床综合征
主要表现为：脑炎、无菌性脑膜炎和瘫痪综合征，国内所见的主要病毒见表11-3。
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表11-3 神经系统病毒感染临床综合征
临床综合征
主要病毒
1.脑炎综合征
虫媒病毒：B组：流行性乙型脑炎病毒，森林脑炎病毒
肠道病毒：灰髓炎病毒I、Ⅱ、Ⅲ，CoxA CoxB ， E
CHO 肠道病毒
71型
疱疹病毒：单纯疱疹病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
狂犬病病毒
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巨细胞病毒(CMV)，EB(Epstein Barr)病毒
流行性腮腺炎病毒
流感病毒
腺病毒7a
2.无菌性脑膜
肠道病毒：灰髓炎I、Ⅱ、Ⅲ、Cox炎综合征 A7、9，散发病例有A1-6、8、10、11、14、16-18、22、24，CoxB1～5，散发病例有
B6ECHO2-4、6、7、9、11、14、16-19、25、30、33
散发病例有1、5、12、13、15、20-24、27、31、32
肠道病毒71型。
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单纯疱疹病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
流行性腮腺炎病毒
3.松弛性瘫痪
肠道病毒：灰髓炎病毒I、Ⅱ、Ⅲ、综合征 CoxA1、2、4、6-11、14、16、21 CoxB1-6
ECHO1-4，6、7、9、11-14、16、18、19、30
肠道病毒70、71型
单纯疱疹病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
腺病毒7
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注：同前
(三)皮肤、粘膜出疹性病毒疾病临床症候群
可表现为斑、丘疹直至出血点、瘀斑等，主要病毒见表11-4。
表11-4 皮肤粘膜出疹性病毒疾病临床综合征
临床综合征
主要病毒
1.斑疹和斑丘疹
肠道病毒：CoxA2、4、5、9、16、23
CoxB1、3~5ECHO1-7、9、11、14、16、18、19
肠道病毒71型、灰髓炎病毒。
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Reo2
巨细胞病毒(CMV)，EB病毒麻疹
病毒
风疹病毒
粘液病毒：副流感，RSV腺病毒:3.7
2.疱疹和脓疱
肠道病毒：CoxA4、5、9、10、16，CoxB3、5，ECHO4、9、11，肠道病毒71型
痘病毒和疱疹病毒：天花病毒、牛痘病毒、水痘带状疱疹病毒、单纯疱疹病毒、CMV病毒
3.荨麻疹
肠道病毒：CoxA9，CoxB3，ECHO11
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4.出血点或瘀点
肠道病毒：CoxA9，CoxB3，ECHO4、9
出血热病毒
5.多形皮疹
肠道病毒：CoxB4，ECHO6、11
6.疱疹性咽峡炎
肠道病毒：CoxA1-6、8、10、22
(四)心肌、心包病毒感染临床综合征表现为急性心肌炎和心包炎，主要病毒见表11-5。
表11-5 心肌、心包病毒感染临床综合征
临床综合征
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主要病毒
1.急性心肌炎
肠道病毒：CoxA1、4、9、16、23
CoxB1-5，灰髓炎病毒：ECHO6、9、11、19、22、25
疱疹病毒：水痘、带状疱疹病毒，EB
病毒，CMV病毒
粘液病毒：流感甲型、麻疹病毒、腮
腺炎病毒
腺病毒
狂犬病病毒
风疹病毒
, 百拇医药
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
2.心包炎
肠道病毒：CoxA1、4，CoxB1～5，灰髓
炎病毒，ECHO1、9
疱疹病毒：单纯疱疹病毒，水痘-带状
疱疹病毒，EB病毒
粘液病毒：流感甲、乙型，腮腺炎病毒
腺病毒
(五)其他临床综合征 表现为出血热者，国内主要是流行性出血热病毒和登革热病毒，引起胃肠炎症候群、肝炎综合征和眼结膜炎综合征的病毒见表11-6
表11-6 其他病毒感染综合征
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临床综合征
主要病毒
1.出血热综合征
登革热病毒
汉坦病毒(流行性出血热病毒)
2.胃肠炎综合征
轮状病毒，星状病毒，嵌杯病毒，Norwalk因子
Reo病毒，ECHO2、4、6～9、12、13、19～24
CoxA4，CoxB5
腺病毒
冠状病毒
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3.肝炎综合征
乙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒，甲型肝炎病毒(肠道病毒72型)，CoxA4、9，CoxB5i(新生儿肝炎)
CMV病毒，EB病毒
4.眼结膜炎综合征
腺病毒1～3、5～6、14
CoxA9、12、16、24，CoxB2，肠道病毒70型
ECHO1、4、6、9、11、12、20，新型肠道病毒(SEC17)
【实验检查】
(一)病毒和病毒抗原的检测
1.光镜检查法 用光学显微镜直接检查某些细胞中包涵体，如对巨细胞病毒(CMV)感染患者尿沉渣检查细胞中包涵体，麻疹患者口腔粘膜多核巨细胞(Warthin氏巨细胞)中包涵体，狂犬病脑组织神经细胞胞质中包涵体(Negri 氏小体)等。
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2.电镜检查法 用电子显微镜观察病毒颗粒的形态，适于检查含高浓度病毒的标本，往往需作超速离心予以浓缩，已被用于甲型肝炎、轮状病毒等的检测。近年来利用特异性免疫血清与标本混合孵育后，继而在电镜下观察(免疫电镜法IEM)，可提高阳性率，已被用于轮状病毒、鼻病毒、甲型和戊型肝炎病毒、疱疹病毒等的检测。
3.免疫荧光法(IFT)可快速、早期检测难以培养的病毒，如流行性出血热的汉坦病毒，也可用以检测上呼吸道上皮细胞内的流感病毒、腺病毒和呼吸道融合病毒(RSV)，疱疹水疱液中单纯疱疹病毒抗原，婴幼儿腹泻中的轮状病毒抗原等(图11-2)。
4.酶联免疫吸附检测法(ELISA) 方法简便可用分光光度比色计或肉眼观察结果，无需特殊设备，但需标准化的试剂和器材，方法原理参见图11-3。已被用于HBV、流行性出血热、单纯疱疹、轮状病毒和EB病毒等抗原的检测。
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5.固相放射免疫法(SPRIA)方法简便、快速、灵敏度高，但需要放射性核素实验室设备。方法原理参见图11-3，已被用于HBV、轮状和登革热等病毒抗原的检测。
6.反向被动血凝法(RPHA) 方法简便，不需特殊设备，但需提纯特异性和高效价抗体，其方法原理参见图11-4，已被用于腺病毒、CMV和HBV等抗原的检测。
7.单克隆抗体(McAb)检测抗原法 通过细胞融合技术，使小鼠的骨髓瘤细胞与分泌某抗体的淋巴细胞融合，产生一种淋巴细胞杂交瘤，既具有生长繁殖的特性，又具有分泌特异性抗体的功能，通过克隆化，能产生单一抗体，称为单克隆抗体，对病毒种和株具有特异性，避免了种与株的交义反应，提高诊断病毒的特异性和敏感性，例如流感单克隆抗体能检测流感病毒型和株的特异性。
8.聚丙烯酰胺电泳和免疫印迹法1979年根据Towblin将核酸转印技术应用于蛋白质的研究，建立了Western Blot即蛋白质转印技术，现应用该技术于抗原蛋白多肽成份的研究。它主要用聚丙稀酰胺垂直电泳，在凝胶分子筛的作用下，使不同大小的蛋白多肽结构分离出来，然后将凝胶上分离开的蛋白转移到醋酸纤维薄膜(NC)上，再用相应的染色进行检测，这技术广泛用于各种病毒表型变化等研究。
, 百拇医药
核酸转印是现代分子克隆研究中不可缺少的实验手段，包括DNA转印(Sousthern Blot)及RNA转印(Northern Blot)两种。
9.聚合酶链反应(PCR)技术1985年美国Saiki等首先提出聚合酶链反应试验(Polymerse Chain Re-action，PCR)。PCR是试管内特异性DNA片段进行扩增的新方法，它可以将DNA片段扩增10万倍，因而就提高了试验的特异性和敏感性。逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)也可特异性的扩增RNA片段故此方法也适用于RNA结构的微生物的鉴定。近年来成为临床病原诊断的重要工具。
(二)病毒分离和鉴定 病毒分离和鉴定一般需时较长，对疾病的早期诊断帮助不大。早期和快速病原学诊断往往有赖于上述病毒和病毒抗原的检测，但为了分析病毒抗原的变异和摸清流行规律(例如流感)，病毒的分离和鉴定也属不可缺少，常用的实验室方法有以下三种。
1.动物接种 最常用的实验动物是乳鼠或1—3周龄的小白鼠，接种后待动物发病或死亡后进行解剖，以受染脏器继续传代，并可用中和试验进行鉴定。用于流行性乙型脑炎、柯萨奇病毒等感染。
, 百拇医药
2.鸡胚接种 病人的含漱液经抗生素处理后，视不同胚龄，接种于尿囊、绒毛尿囊膜或羊膜，进行培养，待鸡胚发生变化(如濒死或出现痘疱等)，取羊水或尿囊液进行血凝或血凝抑制试验进一步鉴定，用于流感病毒、腮腺炎病毒等的鉴定。
3.细胞培养 可用原代、传代或二倍体细胞培养分离病毒，某些病毒增殖后可出现细胞病变，并可用特异性抗体进行中和试验来鉴定毒种细胞培养是目前实验室诊断病毒的主要方法。对某些不产生病变的病毒增殖可用免疫荧光染色、血球吸附、干扰现象等试验进行鉴定，如腺病毒、肠道病毒、风疹病毒等。
(三)免疫学诊断 用已知病毒抗原来检查未知抗体，病人血清采集后应置4℃冰箱内，一般需收集双份血清标本，即疾病早期和恢复期(病后3周左右)，同时测定，如抗体效价有4倍或4倍以上升高者，即可确诊为该病毒感染。测定病毒的特异性IgM，具有早期感染诊断价值，如有升高，即可确诊为该病毒的现症感染。
1.血凝抑制试验 可用于流感、副流感和流行性乙型脑炎，因这些病毒可凝集动物红细胞，加入相应抗体后可抑制血细胞凝集现象。
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2.补体结合试验 可用于流感、流行性乙型脑炎。用含已知病毒的材料制备抗原。检查病人血清中未知抗体。
3.中和试验 用于人群免疫水平的调查。
4.酶联免疫吸附试验见前，以已知抗原来测定抗体。
【治疗说明】
细菌感染时可用抗生素和抗菌药物治疗。抗病毒药物却因为病毒在细胞内复制，药物作用不如抗菌药物，且毒副反应较大，使病毒性感染成为当前人类关注的传染病。如：艾滋病传播迅速，各种病毒性肝炎散布于世界各地，另有新病毒发现，以上均严重危害人民健康。但近年来通过对病毒繁殖和宿主与病毒关系的深入的分子生物学研究，以及随着临床药理的近展，抗病毒药物治疗展示了有希望的前景。
(一)核苷类药物
, http://www.100md.com 1.阿糖腺苷(Adenosine arabinoside，Ara-A)是嘌呤核苷的同系物，能抑制病毒合成DNA。对疱疹病毒属如单纯疱疹、带状疱疹病毒作用最为显著。
2.病毒唑 (Ribavirine RBV) RBV具有广谱抗病毒作用，对DNA、RNA型多种病毒均有显著抑制作用。其作用机理为抑制病毒磷酸次黄嘌呤核苷脱氢酶，使不能合成鸟嘌呤核苷酸，从而抑制病毒合成和复制。它对流感、副流感、单纯疱疹、腺病毒、鼻病毒、甲型肝炎、乙脑、流行性出血热等均有抑制作用。
3.阿昔洛章 (无环鸟苷Acyclovir，ACV)ACV是嘌呤核苷的衍生物，可选择性的抑制疱疹病毒特异性胸腺嘧啶脱氧核苷酸酶，它为广谱抗病毒药物。它对疱疹病毒的毒性比对宿主细胞的毒性强得多，故对宿主细胞基本无害。与丙磺舒、青霉素类和头孢菌素类合用可提高ACR的作用。用于治疗疱疹性脑炎、免疫缺陷病人的全身性感染，对乙型肝炎也有一定效果。
, 百拇医药 4.更昔洛韦(丙氧鸟苷，Ganciclovir，GCV)其为ACV的衍生物，它对人类疱疹病毒有抑制作用。它与ACV的作用相类似，可与巨细胞病毒(CMV)的DNA结合，不断产生新的末端，有很强的抑制CMV繁殖作用。体外试验显示其作用强于ACV，注射或口服仅用于艾滋病人，因它对骨髓有抑制作用，可引起胰腺炎、神经肌肉疼痛等毒副作用。
5.双去氧胞嘧啶核苷(2＇3＇Diclexycytidine，DDC) 为目前已知核苷衍生物中抗人类免疫缺陷病毒(HIV)最强有力的药物。DDC通过抑制HIV复制周期中的逆转录酶而产生抗病毒作用。它用于治疗艾滋病(AIDS)及艾滋相关综合征(ARC)。
6.叠氮胸苷(Azidothymioline AET)本品为核苷类化合物，它可终止DNA链的延长而抑制病毒的复制。与DDC合用对HIV有协同作用，可阻止AET耐药性的出现。
7.双去氧肌苷(2＇-3＇-DidexyinasineDDI)属逆转录酶抑制剂，可用于治疗成人及儿童对AET有耐药的艾滋病毒感染者或严重的ARC患者。治疗后可改善AiDS或ARC患者的症状。
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(二)金刚烷胺及其乙基衍生物
1.盐酸金刚烷胺 可阻止病毒穿入细胞，用于预防甲型流感，也可起减轻症状或缩短病程等治疗作用。但有头痛、幻觉等副作用。
2.肽丁胺 为我国研制的抗DNA病毒药物，外用治疗单纯疱疹、带状疱疹的皮肤感染及乳突瘤病毒引起的尖锐湿疣。但有刺激性，不能全身用药。
(三)干扰素(Interferon，IFN) IFN是受病毒感染的宿主细胞对抗病毒及其核酸所产生的抗病毒蛋白，它可选择性的阻断病毒mRNA，从而抑制病毒蛋白的合成但对病毒无直接杀灭作用。干扰素可用于慢性肝炎、肾移植及AIDS伴卡氏肉瘤患者等。
(四)磷甲酸钠(Phosphonoformete PFA) 它为广谱抗病毒药物，能与CMV、EBV、HBV、HIV等病毒的DNA聚合酶及流感病毒等的RNA聚合酶结合，通过非竞争性抑制逆转录酶，从而阻断病毒的复制。PFA的作用与核苷类药物不同，为直接作用于核酸聚合酶的焦磷酸结合部位，不涉及胸腺嘧啶激酶，故对ACV等耐药的毒株仍有抑制作用，对暴发性乙型肝炎治疗也有一定疗效。
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近年来新抗病毒药物的研究受到广泛的重视，发展较快，其中效果较好的有①无环鸟苷的类似物或衍生物，如Penciclovir为长效无环鸟苷类，每日仅需给药一次，Famciclovir则口服治疗较好。②抗AIDS病药物有双脱羟基胸苷(Cl4-T)、Lamivudine(3Tc)等均为HIV逆转录酶抑制剂。国内中药制剂天花粉蛋白GLQ223、金丝桃素Haypericin对抑制HIV均有效。
疫苗是预防病毒性疾病的重要措施，早在18世纪即应用痘苗来预防天花获得成功，直至20世纪80年代全球范围内消灭了天花，才停止种痘。本世纪50年代出现灰髓炎疫苗，60年代有麻疹、腮腺炎和风疹疫苗，目前国际上预防病毒性疾病的疫苗见表11-7，但某些疫苗国内尚未普遍使用，有待于进一步大规模生产和推广使用。有希望的新疫苗将在今后陆续问世，如减毒活疫苗(Live attenuated Vaccine)和rDNA糖蛋白疫苗(rDNAglycoprotein Vaccine)应用于巨细胞病毒感染；减毒活疫苗和活的媒介病毒中cDNA疫苗(cDNAin live vector virus Vaccine)应用于登革热；三价亚单位(trivalent，subunit)副流感疫苗；rDNA糖蛋白疫苗和减毒活疫苗应用于合胞病毒感染；以及rDNA糖蛋白疫苗、活的媒介病毒中cDNA疫苗和亚单位或合成抗原(subunit or synthetic antigen)应用于艾滋病等。
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以下病毒性疾病的分类，各本专著均不相同，哈里逊内科学等则以病毒的基本结构，如RNA、DNA来分类，如RNA病毒感染包含流感、麻疹、腮腺炎、狂犬病、风疹等，DNA病毒感染则含单纯疱疹、巨细胞病毒感染、EB病毒感染、天花等。而西氏内科学则分为呼吸道感染，如流感、病毒性胃肠炎、麻疹、风疹、巨细胞病毒感染、传染性单核细胞增多症等；节肢动物源性，如日本乙型脑炎等；病毒性出血热如流行性出血热等；而狂犬病、脊髓灰质炎则归入神经系统疾病中，肝炎归入消化系统疾病中。
本书基本采取以病毒对器官的主要嗜性来分类如流感归入呼吸道感染，病毒性肝炎及流行性腮腺炎归入消化系统，乙型脑炎、狂犬病、脊髓灰质炎归入神经系统感染。同时结合习惯的归类，如出疹性病毒感染及病毒性出血热等。分类并无统一模式，只是希望便于读者归纳、阅读。
表11-7 预防病毒性疾病的主要疫苗
疾 病
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疫苗来源
病毒情况
接种方式
备 注
每人须接种：
灰髓炎
组织培养(人双倍体细胞，猴肾细胞)
减毒活疫苗
口服
麻疹
组织培养(鸡胚细胞)
灭活
皮下
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腮腺炎
组织培养(鸡胚细胞)
减毒活疫苗
皮下
国内尚未使用
风疹
组织培养(鸡胚细胞，兔或人双倍体细胞)
减毒活疫苗
皮下
国内尚未使用
在某种情况下需要使用的疫苗：
天花
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牛或羊的淋巴液
活疫苗
皮下
因天花已消灭，牛痘已停止接种，仅突然出现天花时才使用
黄热病
组织培养或鸡胚
减毒活疫苗
皮下
乙型肝炎
从健康带毒者提纯HBsAg
灭活或亚单位
皮下
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流感
从酵母中HBsAg重组合高度提纯或亚病毒型(鸡胚)
亚单位
皮下
灭活
皮下
狂犬病*
人双倍体细胞培养
灭活
皮下
使用于经狂犬咬伤的疑似病人
腺病毒感染
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人双倍体细胞培养
减毒活疫苗
口服
军队中急性呼吸道疾病腺病毒流行时应用
乙型脑炎
组织培养(地鼠肾)
灭活
皮下
水痘
人双倍体细胞培养
减毒活疫苗
皮下
*我国现用地鼠肾疫苗, 百拇医药