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编号:10169009
第四节 血清脂蛋白非电泳定量法
http://www.100md.com 《动脉粥样硬化》
血清脂蛋白非电泳定量法、高密度脂蛋白胆固醇、血清低密度脂蛋白、高密度脂蛋白亚组份胆固醇检测,第四节 血清脂蛋白非电泳定量法

一、高密度脂蛋白胆固醇测定

血浆中脂蛋白有多种,测定其各自的含量对于了解机体正常及疾病过程中脂质代谢状况有重要的临床意义。HDL是一组不均一的脂蛋白颗粒,其胆固醇含量占血浆总胆固醇量的25%~35%。由于血浆中所有脂蛋白均含有胆固醇,因此,只有先分离出HDL才能对其进行定量。分离HDL的方法中,沉淀法是目前临床使用最多的方法,操作简便快速。沉淀法原理是利用多聚阴离子和二价阳离子共同作用于脂蛋白,并选择性地使含ApoB的VLDL和LDL脂蛋白沉淀,再测定含HDL的上清液胆固醇,即高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。定量HDL全量是很困难的,因为它是蛋白质和脂类的混合物,故以测定HDL中所含胆固醇含量作为HDL定量依据。

要测定血清中HDL-C,就必需先沉淀HDL以外的脂蛋白,即VLDL和LDL。使血清中VLDL和LDL沉淀的试剂很多,常用的有四种:①肝素-锰沉淀法,该法操作简便易行,一旦遇上血脂升高的标本,有沉淀不完全的差异;②硫酸葡聚糖-镁法,该法也简单易行,试剂较贵而难买到;③聚乙二醇法,虽然简便易行,若遇高脂血症标本,其重复性差;④磷钼钨酸-镁法,操作简便易行,结果准确,是目前临床推荐使用的方法;⑤另有一种不沉淀VLDL和LDL也可直接测定HDL的方法,称之为直接测定法。其原理是,先用一种封阻血清VLDL和LDL,而不封阻HDL,当测胆固醇的酶试剂加入后,酶可作用于HDL的胆固醇进行化学反应,测出其浓度,但酶试剂就无法使已被试剂封阻的VLDL和LDL的胆固醇进行反应,这种直接法操作更为简便,无需离心等繁杂步骤,便于在自动生化分析仪上进行HDL-C测定,结果准确可靠,缺点是成本过高。下面仅介绍目前推荐使用的方法。

(一)原理

磷钨酸-镁(PTA-Mg2+)沉淀血清中含ApoB的脂蛋白(VLDL、LDL),上清液中只含HDL,用酶法测定上清液中胆固醇,即HDL-C。

生成的醌亚胺与HDL中的CE及FC成正比。

2.试剂组成

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