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编号:10494994
CILP-MBP基因重组蛋白的亚克隆构建及温度可溶性诱生表达
http://www.100md.com 中国医科大学 沈阳 110001 姚振宇;吕昌龙;于秉治;曹雅明
    参见附件(1593kb)。

     中国医科大学 沈阳 110001 姚振宇;吕昌龙;于秉治;曹雅明

    关键词:CILP;重组蛋白;亚克隆

    摘要:目的:构建Cartilage Intermediate Layer Protein(CILP)基因组后半部分(C2)亚克隆可溶性重组蛋白表达系统。方法:应用基因克隆技术,提取C2的3个首尾互相重叠的小片段的目的基因(C2F1,C2F2,C2F3),将其重新克隆到pMAL-eHis表达载体中,分别命名为C2F1,C2F2,C2F3-MBP,并尝试在用化学诱导(IPTC)的同时,用不同的温度(22℃,30℃,37℃)来诱导重组基因表达可溶性重组蛋白。结果:重新构建表达载体后,经过异丙基-硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)化学诱导,在各种诱导温度下重组载体均可表达目的基因蛋白,但在30℃下有大量的可溶性蛋白表达,而 ...

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