四环素调控表达的反义bcl-2对人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC生长和凋亡的作用

http://www.100md.com 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院病理科 100730北京 关健；陈杰；赵和

神经母细胞瘤|脱噬作用|基因|BCl-2|肿瘤细胞|培养的,四环素调控表达的反义BCl-2对人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC生长和凋亡的作用

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     中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院病理科 100730北京 关健；陈杰；赵和

    关键词：神经母细胞瘤；脱噬作用；基因；bcl-2；肿瘤细胞；培养的

    摘要：目的 研究由四环素调控的反义bcl 2的表达对人神经母细胞瘤细胞系SK N MC细胞的生长和凋亡的作用并初步探讨其相关机制。方法 非定向克隆构建携带反义bcl 2cDNA片段的由四环素调控表达的真核细胞表达载体PUCCOMB1CMV/Asbcl 2 ;应用脂质体LipofectamineTM 介导转染SK N MC细胞 ,同时以空载体转染细胞作为对照。MTT法研究细胞的生长和增殖状况 ,提取DNA梯带和应用流式细胞术检测凋亡细胞。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)研究细胞凋亡中bcl xL/bcl xS 基因在mRNA水平上表达的变化。Western杂交检测bcl 2及其上下游相关基因caspase 3、PARP的变化。结果...

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