血清肌钙蛋白I升高与病毒性心肌炎诊断及病程关系探讨(1)
病毒性心肌炎(VMC)的诊断和预后判断仍然相当困难。除少数患者表现为心力衰竭、心腔扩大、新出现的传导阻滞、阿斯综合征及心源性休克外，多数患者临床诊断缺少客观依据[1]。血清肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白T(cTnT)被公认为高敏感、高特异反映心肌损伤的血清指标[2,3]。cTnI和cTnT诊断急性心肌梗塞的重要价值已确认。近年Smith等[4]报告，在免疫性心肌炎小鼠和心电图、超声心动图提供证据的心肌炎患者血清cTnI升高。部分作者将cTnI和cTnT作为心肌炎诊断依据之一[5,6]。在国家"九.五"课题范围内，我们定量测定临床诊断VMC患者血中cTnI变化，探讨cTnI升高与VMC诊断和病程的关系。
一、资料与方法
(一)临床资料
1.VMC组：按国内1995年急性病毒性心肌炎诊断标准，随机收集1995～1998年门诊与住院拟诊病毒性心肌炎282例，其中南京医科大学第一附属医院180例，西安医科大学第一附属医院50例，上海第二医科大学附属新华医院52例。每例患者至少2次测cTnI，其中117例测定时间在3个月以上。
2.对照组：72名献血员和医学生、42例室上速消融术前患者，共114份血清测定为参照值[2]。
(二)方法
1.血清cTnI定量测定：改良Bordor等夹心ELISA法，用抗人心肌cTnI单克隆抗体2B 1.9为第一抗体包被96孔酶联板，加待测血清后再用生物素标记的2F 6.6为第二抗体，形成双夹心，用碱性磷酸酶系统显色，波长405nm阅读，每次检测均置标准抗原cTnI0～100μg/L不同浓度作定量参照。已测定急性心肌梗塞患者血清作为阳性质控，正常人血清为阴性质控。上海和西安标本分离血清后冻藏，送南京统一作双盲检测。血清cTnI>7.0μg/L为阳性。
2.外周血淋巴细胞肠道病毒RNA检测用RT-PCR法同等条件操作。
3.南京25例cTnI持续阳性VMC患者测定血清对心肌M受体抑制滴度。
4.吸附试验：蛋白A能特异性地吸附血清中的抗体，用50μl蛋白A吸附10例患者血清后，经离心取上清测定cTnI水平。解离蛋白A上结合的抗体后，离心再测定此上清的cTnI水平，比较吸附前后cTnI数值的差异。
5.西安的50例VMC患者检测血淋巴细胞mtDNA缺失率，其中8例活检心肌与12例正常人心肌标本检测心肌细胞mtDNA缺失率。
6.部分病例检测血清柯萨奇B病毒(CVB)IgM及CVR中和抗体。
(三)统计方法
计数资料以均数±标准差表示，χ2检验或方差分析后Q检验分析结果。
二、结果
1.对照组：72例医学生与献血员血清cTnI为(2.61±3.20)μg/L, 42例室上速消融术前患者血清cTnI为(1.62±2.30)μg/L,重复性试验差值小于8.7%，添加回收率100.1%(94.6%～105.6%),按95%可信限，本研究cTnI上限为7.0μg/L(参照值偏态分布) [2]。10例cTnI升高的VMC患者血清用蛋白A吸附后，血清cTnI水平在吸附前后无明显改变。, 百拇医药(张寄南 苏恩本 魏瑾 赵美华 刘治全 荣烨之 马文珠)
一、资料与方法
(一)临床资料
1.VMC组：按国内1995年急性病毒性心肌炎诊断标准，随机收集1995～1998年门诊与住院拟诊病毒性心肌炎282例，其中南京医科大学第一附属医院180例，西安医科大学第一附属医院50例，上海第二医科大学附属新华医院52例。每例患者至少2次测cTnI，其中117例测定时间在3个月以上。
2.对照组：72名献血员和医学生、42例室上速消融术前患者，共114份血清测定为参照值[2]。
(二)方法
1.血清cTnI定量测定：改良Bordor等夹心ELISA法，用抗人心肌cTnI单克隆抗体2B 1.9为第一抗体包被96孔酶联板，加待测血清后再用生物素标记的2F 6.6为第二抗体，形成双夹心，用碱性磷酸酶系统显色，波长405nm阅读，每次检测均置标准抗原cTnI0～100μg/L不同浓度作定量参照。已测定急性心肌梗塞患者血清作为阳性质控，正常人血清为阴性质控。上海和西安标本分离血清后冻藏，送南京统一作双盲检测。血清cTnI>7.0μg/L为阳性。
2.外周血淋巴细胞肠道病毒RNA检测用RT-PCR法同等条件操作。
3.南京25例cTnI持续阳性VMC患者测定血清对心肌M受体抑制滴度。
4.吸附试验：蛋白A能特异性地吸附血清中的抗体，用50μl蛋白A吸附10例患者血清后，经离心取上清测定cTnI水平。解离蛋白A上结合的抗体后，离心再测定此上清的cTnI水平，比较吸附前后cTnI数值的差异。
5.西安的50例VMC患者检测血淋巴细胞mtDNA缺失率，其中8例活检心肌与12例正常人心肌标本检测心肌细胞mtDNA缺失率。
6.部分病例检测血清柯萨奇B病毒(CVB)IgM及CVR中和抗体。
(三)统计方法
计数资料以均数±标准差表示，χ2检验或方差分析后Q检验分析结果。
二、结果
1.对照组：72例医学生与献血员血清cTnI为(2.61±3.20)μg/L, 42例室上速消融术前患者血清cTnI为(1.62±2.30)μg/L,重复性试验差值小于8.7%，添加回收率100.1%(94.6%～105.6%),按95%可信限，本研究cTnI上限为7.0μg/L(参照值偏态分布) [2]。10例cTnI升高的VMC患者血清用蛋白A吸附后，血清cTnI水平在吸附前后无明显改变。, 百拇医药(张寄南 苏恩本 魏瑾 赵美华 刘治全 荣烨之 马文珠)