hCGβ在乳酸杆菌中的分泌性表达

http://www.100md.com 复旦大学上海医学院分子病毒学教育部重点实验室 上海200011 王红梅；李大金；姜红；袁正宏

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     复旦大学上海医学院分子病毒学教育部重点实验室 上海200011 王红梅；李大金；姜红；袁正宏

    关键词：乳酸杆菌；hCGβ；电穿孔转化

    摘要：目的:探索乳酸杆菌携带表达h CGβ避孕疫苗的抗生育作用。方法:用PCR从短小乳酸杆菌染色体中扩增得到S-层蛋白的信号肽序列,将其与h CGβ基因连接后克隆到乳酸杆菌整合型表达载体p Ilac的lac启动子下游,得到质粒p Ilac h CGβ,电穿孔转化干酪氏乳酸杆菌Lb. caseiCECT5 2 76。挑选转化后的耐药菌落,在含红霉素培养基中培养,抽提其染色体DNA,PCR及测序鉴定证实h CGβ基因整合到Lb.casei的基因组中。h CG放免检测上清及细胞裂解液中的h CGβ。结果:h CGβ基因已经整合到Lb.casei的基因组中;细菌产生的目的蛋白约有3/ 4分泌进入培养上清,而加入诱导剂乳糖2...

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