5-氮-2′-脱氧胞苷对RKO结肠癌细胞株p16/CDKN2基因去甲基化的转录调节作用
结直肠肿瘤|基因表达调控|基因|抑制|肿瘤,5-氮-2′-脱氧胞苷对RKO结肠癌细胞株P16,CDKN2基因去甲基化的转录调节作用,关键词：
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方晓明；孙立峰；彭佳萍；董琦；郑树 浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所 310009杭州 中华医学杂志 2003 23
关键词：结直肠肿瘤；基因表达调控；基因；抑制；肿瘤
目的 探讨DNA 5′CpG岛去甲基化对RKO结肠癌细胞株p16 CDKN2抑癌基因的转录调控作用及对细胞株生长增殖的生物学影响,寻找抗癌治疗的新靶点。方法 用特异性DNA甲基转移酶抑制剂5 氮 2′脱氧胞苷(5 Aza 2′deoxycytidine)作用结肠癌细胞株72h后,甲基特异性PCR(Methylation specificPCR ,MSP)、T A克隆及DNA测序分析甲基化状态,四唑盐(MTT)比色、逆转录聚合酶链反应(RT PCR)、荧光定量PCR(Real timePCR)、免疫组织化学染色(IHC)及蛋白印迹(Westernblot)检测用药前后RKO细胞株生长倍增时间以及对p16 CDKN2mRNA及蛋白表达的影响。结果 (1)未经5 Aza ...
关键词：结直肠肿瘤；基因表达调控；基因；抑制；肿瘤
目的 探讨DNA 5′CpG岛去甲基化对RKO结肠癌细胞株p16 CDKN2抑癌基因的转录调控作用及对细胞株生长增殖的生物学影响,寻找抗癌治疗的新靶点。方法 用特异性DNA甲基转移酶抑制剂5 氮 2′脱氧胞苷(5 Aza 2′deoxycytidine)作用结肠癌细胞株72h后,甲基特异性PCR(Methylation specificPCR ,MSP)、T A克隆及DNA测序分析甲基化状态,四唑盐(MTT)比色、逆转录聚合酶链反应(RT PCR)、荧光定量PCR(Real timePCR)、免疫组织化学染色(IHC)及蛋白印迹(Westernblot)检测用药前后RKO细胞株生长倍增时间以及对p16 CDKN2mRNA及蛋白表达的影响。结果 (1)未经5 Aza ...
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