HPLC法测定肝炎康颗粒中丹参酮Ⅱ 2 的含量
http://www.100md.com
中华中西医杂志 2003年10月 第4卷 第20期
【摘要】 目的 测定肝炎康中丹参酮Ⅱ 2 的含量。方法 样品用甲醇超声提取，过滤，蒸干，残渣用甲醇溶解后，经HPLC测定。色谱柱:Spherisorb RP-18(10μm)250mm×4mm，柱温25℃，流动相:甲醇-水(75:25)，检测波长254nm。结果 肝炎康颗粒冲剂中丹参酮Ⅱ2 与其它成分分离良好，丹参酮Ⅱ 2 对照品线性浓度范围0.4～2.0μg，r=0.9996，平均回收率为98.2%，RSD为2.36%(n=5)。结论 本方法灵敏度高、操作简便、结果准确，可用于肝炎康中丹参酮Ⅱ 2 的含量测定。
关键词 肝炎康颗粒 丹参酮Ⅱ 2 HPLC
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2003)20-2921-01
肝炎康是由丹参、溪黄草、红枣、五味子等十味中药材配伍，经制剂加工而成的中成药颗粒冲剂，其对降低谷丙转氨酶，治疗急、慢性肝炎具有较好的临床效果，其中丹参酮Ⅱ 2 为其中的活性成分。中科院广西植物研究所制药厂所生产的肝炎康颗粒还未采用HPLC法来检测丹参酮Ⅱ 2 含量，现本文采用HPLC法对肝炎康产品中丹参酮Ⅱ 2 含量进行检测并对检测方法进行了研究，以便对肝炎康颗粒进行更为有效的控制，此方法具有操作简便、结果准确、灵敏度高等优点，为产品的质量控制提供了更加科学的检测依据。
, 百拇医药
1 仪器与试剂
1.1 仪器 美国Waters公司HPLC采用510泵，810色谱工作台，U6K手动进样台，Waters410RI检测器，梅特勒AT200电子天平。丹参酮Ⅱ 2 对照品购自中国药品生物制品检定所，肝炎康颗粒冲剂由中科院广西植物研究所制药厂提供，甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:Spherisob RP-18(10μm)250mm×4mm，柱温35℃，流动相:甲醇-水(75:25)，检测波长270nm，进样量10μl [1] 。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取10mg丹参酮Ⅱ 2 对照品，置10ml容量瓶中加甲醇适量使溶解，并加甲醇稀释至刻度，摇匀，配制成0.1mg/ml对照品溶液。对照品溶液避光保存。
, 百拇医药
2.3 供试品溶液的制备 取肝炎康颗粒冲剂10包，去除铝薄外包装，称重(10.0g/包)，混匀后取10g左右，研细，过4号筛，精密称取1g，置于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，超声15min，过滤至50ml容量瓶中，水浴加热挥干甲醇。残渣用甲醇少量多次提取，每次超声10min，提取液转至25ml容量瓶中并定容，用微孔滤膜过滤，取续滤液备用。
2.4 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置于5ml容量瓶中，加甲醇定容。分别吸取以上5种浓度的对照品溶液，按上述色谱条件，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，得回归方程:Y=2875227.1X-25427.6(r=0.9996)，丹参酮Ⅱ 2 在0.4～ 2.0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验 精密吸取同一丹参酮Ⅱ 2 对照浓度溶液，按上述色谱条件，重复进样5次，其RSD为0.53%(n=5)，表明精密度良好。
, 百拇医药
2.6 重复性试验 取同一批号样品5份，按供试品溶液制备方法制备，按上述色谱条件进行测定。
2.7 加样回收率试验 取同一已知丹参酮Ⅱ 2 含量的肝炎康颗粒冲剂细粉，精密称取5份，分别准确加入不同浓度的对照品溶液，各份均依供试品溶液制备项下方法制备，按色谱条件项下方法进行测定，计算平均回收率和RSD分别为97.8%和2.61%(n=5)。
2.8 稳定性试验 对供试品溶液制备好后，分别在0、40、80、120、160、200、240min进样测定，结果丹参酮Ⅱ 2 峰面积基本保持不变，RSD为2.12%。
2.9 样品含量测定 按样品溶液制备项下方法制备样品溶液。取10μl注入高效液项色谱仪，记录色谱峰面积，外标法计算，结果见表1。
表1 肝炎康颗粒冲剂丹参酮Ⅱ 2 含量
, http://www.100md.com
3 讨论
原中科院广西植物研究所制药厂生产的肝炎康颗粒冲剂中丹参酮Ⅱ 2 的检测只采用定性方法来控制药品的质量不够确切与准确，而通过采用HPLC定量的方法来控制药品的质量更具直观性和准确性。
从本方法所检测的数据来分析，本方法具有灵敏度高、操作简便、结果准确，可用于肝炎康颗粒冲剂中丹参酮Ⅱ 2 的含量监测。同时肝炎康颗粒冲剂中其它的有效成分亦应采用HPLC的方法来控制其内在质量。
参考文献
1 何跃进.HPLC法测定肾康颗粒中丹酮Ⅱ 2 的含量.中草药，2003，34(6):528.
作者单位:541006广西桂林中国科学院广西植物研究所
(编辑小 川), 百拇医药(阮)
关键词 肝炎康颗粒 丹参酮Ⅱ 2 HPLC
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2003)20-2921-01
肝炎康是由丹参、溪黄草、红枣、五味子等十味中药材配伍，经制剂加工而成的中成药颗粒冲剂，其对降低谷丙转氨酶，治疗急、慢性肝炎具有较好的临床效果，其中丹参酮Ⅱ 2 为其中的活性成分。中科院广西植物研究所制药厂所生产的肝炎康颗粒还未采用HPLC法来检测丹参酮Ⅱ 2 含量，现本文采用HPLC法对肝炎康产品中丹参酮Ⅱ 2 含量进行检测并对检测方法进行了研究，以便对肝炎康颗粒进行更为有效的控制，此方法具有操作简便、结果准确、灵敏度高等优点，为产品的质量控制提供了更加科学的检测依据。
, 百拇医药
1 仪器与试剂
1.1 仪器 美国Waters公司HPLC采用510泵，810色谱工作台，U6K手动进样台，Waters410RI检测器，梅特勒AT200电子天平。丹参酮Ⅱ 2 对照品购自中国药品生物制品检定所，肝炎康颗粒冲剂由中科院广西植物研究所制药厂提供，甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:Spherisob RP-18(10μm)250mm×4mm，柱温35℃，流动相:甲醇-水(75:25)，检测波长270nm，进样量10μl [1] 。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取10mg丹参酮Ⅱ 2 对照品，置10ml容量瓶中加甲醇适量使溶解，并加甲醇稀释至刻度，摇匀，配制成0.1mg/ml对照品溶液。对照品溶液避光保存。
, 百拇医药
2.3 供试品溶液的制备 取肝炎康颗粒冲剂10包，去除铝薄外包装，称重(10.0g/包)，混匀后取10g左右，研细，过4号筛，精密称取1g，置于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，超声15min，过滤至50ml容量瓶中，水浴加热挥干甲醇。残渣用甲醇少量多次提取，每次超声10min，提取液转至25ml容量瓶中并定容，用微孔滤膜过滤，取续滤液备用。
2.4 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置于5ml容量瓶中，加甲醇定容。分别吸取以上5种浓度的对照品溶液，按上述色谱条件，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，得回归方程:Y=2875227.1X-25427.6(r=0.9996)，丹参酮Ⅱ 2 在0.4～ 2.0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验 精密吸取同一丹参酮Ⅱ 2 对照浓度溶液，按上述色谱条件，重复进样5次，其RSD为0.53%(n=5)，表明精密度良好。
, 百拇医药
2.6 重复性试验 取同一批号样品5份，按供试品溶液制备方法制备，按上述色谱条件进行测定。
2.7 加样回收率试验 取同一已知丹参酮Ⅱ 2 含量的肝炎康颗粒冲剂细粉，精密称取5份，分别准确加入不同浓度的对照品溶液，各份均依供试品溶液制备项下方法制备，按色谱条件项下方法进行测定，计算平均回收率和RSD分别为97.8%和2.61%(n=5)。
2.8 稳定性试验 对供试品溶液制备好后，分别在0、40、80、120、160、200、240min进样测定，结果丹参酮Ⅱ 2 峰面积基本保持不变，RSD为2.12%。
2.9 样品含量测定 按样品溶液制备项下方法制备样品溶液。取10μl注入高效液项色谱仪，记录色谱峰面积，外标法计算，结果见表1。
表1 肝炎康颗粒冲剂丹参酮Ⅱ 2 含量
, http://www.100md.com
3 讨论
原中科院广西植物研究所制药厂生产的肝炎康颗粒冲剂中丹参酮Ⅱ 2 的检测只采用定性方法来控制药品的质量不够确切与准确，而通过采用HPLC定量的方法来控制药品的质量更具直观性和准确性。
从本方法所检测的数据来分析，本方法具有灵敏度高、操作简便、结果准确，可用于肝炎康颗粒冲剂中丹参酮Ⅱ 2 的含量监测。同时肝炎康颗粒冲剂中其它的有效成分亦应采用HPLC的方法来控制其内在质量。
参考文献
1 何跃进.HPLC法测定肾康颗粒中丹酮Ⅱ 2 的含量.中草药，2003，34(6):528.
作者单位:541006广西桂林中国科学院广西植物研究所
(编辑小 川), 百拇医药(阮)