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编号:10395729
神经双端侧吻合、端侧吻合与带血运神经移植的对照实验研究
http://www.100md.com 《中华医学实践杂志》 2003年第5期
     【摘要】 目的 比较神经双端侧吻合、端侧吻合与神经移植三种术式修复神经缺损的能力差异,进一步探讨神经双端侧吻合术式的临床应用可行性,为临床神经缺损的修复提供新的术式及其理论根据。方法 健康成年白兔24只,取右侧为实验侧,左侧为对照侧。按手术方法的不同随机分为3组,每组8只。A组为神经双端侧吻合组,B组为神经端侧吻合组,C组为带血运的神经移植组。结果 术后6个月各组动物的展趾反射、针刺疼痛实验、步态观察结果提示三组实验动物均有感觉和运动神经功能的恢复。肌湿重比率,感觉、运动神经传导速度,肌横截面积恢复率,远端神经轴突数目恢复率显示带血运的神经移植组与神经双端侧吻合组、神经端侧吻合组差异分别具有显著性,神经移植组与神经端侧吻合组差异无显著性。神经形态、功能的恢复速度以带血运的神经移植组恢复最快,神经双端侧吻合组速度次之,神经端侧吻合组速度最慢。免疫荧光金染色结果观察:免疫荧光金染色阳性标记细胞在荧光显微镜下呈现大小不规则的黄白色。A组:同侧L 6,7 、S 1,2 脊髓节段的前角背外侧、腹内侧和相应节段的脊神经节均出现典型的Flu-Au荧光标记细胞。B组:同侧L 6,7 、S 1,2 脊髓节段的前角腹内侧和相应节段的脊神经节出现典型的Flu-Au荧光标记细胞。C组:同侧L 6,7 、S 1,2 脊髓节段脊髓节段的前角背外侧和相应节段的脊神经节均出现典型的Flu-Au荧光标记细胞。结论 (1)带血运的神经移植组修复神经效果与神经双端侧吻合组、神经端侧吻合组相比差异显著,带血运的神经移植组修复效果最好。(2)神经双端侧吻合组与神经端侧吻合组差异无显著性,神经双端侧吻合与神经端侧吻合均是颇有潜在临床应用价值的手术方式。关键词 神经双端侧吻合 神经端侧吻合 神经移植 神经再生 荧光标记
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    【文献标识码】 A 【文章编号】 1684-2030(2003)05-0394-03

    The controlled experimental study of double end-to-side

    neurorrhaphy,end-to-side neurorrhaphy and nerve graft with vessels

    Zhou Weidong,Tian Mingxia

    Department of Vascular Surgery,Qingdao Shinan District People’s Hospital,Qingdao266002.

    【文献标识码】 A 【文章编号】 1684-2030(2003)05-0394-03
, 百拇医药
    The controlled experimental study of double end-to-side

    neurorrhaphy,end-to-side neurorrhaphy and nerve graft with vessels

    Zhou Weidong,Tian Mingxia

    Department of Vascular Surgery,Qingdao Shinan District People’s Hospital,Qingdao266002.

    【Abstract】 Objective To explore the nerve repair disparity of dobule end-to-side neurorrhaphy,end-to-side neurorrhaphy and nerve graft with vessels and to discuss the possibilities of clinical application.To provide new methods and theoretical basis for clinical nerve defects.Methods 24mature rabbits were divided randomly into three groups,namely group A、group B and group C.Group A:doubleend-to-side neurorrhaphy,Group B:end-to-side neurorrhaphy,Group C:nerve graftwith blood.Results Extend-toe reflection,pin-pain try and gait observation sixmonths after operation revealed the functional recovery of sensory and motor inthree groups.The anterior tibia muscle wet weight、the recovery rate of transection area of muscle fiber,SCNV and MCNV,the recovery rate of distal nerve axˉons revealed that there were significant difference between nerve graft and double end-to-side neurorrhaphy,end-to-side neurorrhaphy.There were no significant difference between nerve graft and double end-to-side neurorrhaˉphy.The nerve morphology and function recovery of nerve graft group were the most quick among the three groups.That of nerve end-to-side neurorrhaphy were the most slow.Fluorescence microscope observation:Positive marked cell were yellow and white.Group A:Flu-Au marked cell were displayed on the collateral L 6,7 S 1,2 spinal segment anterior corner and corresponding spinal ganglion.Group B:Flu-Au marked cell werw displayed on the collateral L 6,7 S 1,2 spinal segment anterior corner abdominal part and corresponding spinal ganglion.Group C:Flu-Au marked cell were displayed on the collateral L 6,7 S 1,2 spinal segment anterior corner dorsalpart and corresponding spinal ganglion.Conˉclusion (1)There were snigificantdifference between the effect of nerve graft and double end-to-side neurorrhaˉphy,end-to-side neurorrhaphy.The effect of nerve graft was the most satisfied,(2)There were no significant differˉence between end-to-side neurorrhaphy anddouble end-to-side neurorrhaphy.Both of them may have potential value to be applied in clinical cases.
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    Key words double end-to-side neurorrhaphy end-to-side neurorrhaphy nerve graft nerve regenerate fluoresce mark

    周围神经端侧吻合手术方式可以追溯到20世纪初期,1903年Balance等 [1] 第一次报告了此手术方式,直到1992年Viterbo等 [2~4] 完成了神经端侧吻合的一系列实验和临床应用研究以后,才因为其广阔的临床应用前景而受到了全世界的关注。近年来有关神经端侧吻合的基础研究和临床应用研究日益增多。目前有关神经双端侧吻合与神经移植的疗效对比研究尚未见报道,本实验以兔的坐骨神经损伤模型为实验对象,采用免疫荧光金逆行标记法,通过再生神经纤维的逆行轴浆运输,观察阳性标记神经元胞体的分布和组成,并且结合图象分析仪从功能恢复、组织形态学分析以及神经电生理检测等方面对神经双端侧吻合、端侧吻合以及带血运神经移植做了对照实验研究。

    1 材料与方法
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    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 健康成年白兔24只,平均月龄3个月,雄雌不限,体重(1.58~1.95)kg,平均(1.71±0.25)kg。

    1.1.2 实验试剂 (1)免疫荧光金Flu-Au、氯化金、硫代硫酸钠;(2)甲醛、乙醇、氨水、10%苏木素酒精溶液(成熟的)。

    1.1.3 主要仪器设备 Neuromatic2000神经电生理检测仪(丹麦);Moller手术显微镜(德国);显微手术器械(宁波);电子分析天平(上海);Leica切片机(德国);Olympus照相显微镜(日本);恒温干燥箱(上海);普通冰箱(中国);Leica显微镜(德国);图像分析仪(北京)。

    1.2 实验方法

    1.2.1 动物分组 健康成年白兔24只,平均月龄3个月,雌雄不限,体重(1.58~1.95)kg,平均(1.71±0.25)kg,按手术方法的不同随机分为3组,每组8只。A组:神经双端侧吻合组,8只。B组:神经端侧吻合组,8只。C组:带血运的神经移植组,8只。各实验组均取右侧为实验侧,左侧为对照侧。
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    1.2.2 手术方法 A组:神经双端侧吻合组 实验侧:腓神经的远近端分别以端侧吻合方式吻合在胫神经上,两吻合口相距3cm。对照侧:不做处理。B组:端侧吻合组 实验侧:腓神经的远端以端侧吻合方式吻合在胫神经干上,近端埋于肌肉组织中。对照侧:不做处理。C组:带血运神经移植组实验侧:于腓神经上选取长约3cm的一段,两端切断以后分别以端端吻合方式吻合,注意不要损伤神经周围的血管网。对照侧:不做处理。

    1.2.3 荧光金免疫标记方法 6个月后手术观察各吻合口情况并做荧光金标记:A、B组,分别自远端端侧吻合口以远1cm处注射1μl荧光金试剂;C组,自腓神经远端吻合口以远1cm处注射1μl荧光金试剂;72h后神经电生理测试完毕后取脊髓L 6,7 S 1,2 ,封片后荧光显微镜下(波长310~330nm,10×10)观察阳性标记细胞的位置和数量。

    1.2.4 神经电生理测试 A、B、C各组实验动物注射荧光试剂后72h,分别构建不同的神经传导通路,进行电生理测 试。分别刺激各组不同神经通路的近端,于远端相应的胫前肌或腓肠肌内记录动作电位。分别测试感觉、运动神经传导速度,求出其恢复率。
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    1.2.5 观察指标 (1)大体观察:展趾反射、针刺疼痛试验、皮毛以及步态变化;(2)吻合口处神经粗细、颜色以及血运情况;(3)脊髓节段荧光显色情况;(4)电测试中动作电位的记录;(5)胫前肌湿重恢复率=实验侧/对照侧×100%;(6)感觉、运动神经传导速度恢复率=实验侧/对照侧×100%;(7)胫前肌纤维横截面积恢复率=实验侧/对照侧×100%;(8)远端轴突数目恢复率=实验侧远端数目/实验侧近端数目×100%。

    1.3 统计学处理 各组数据均采用均数±标准差表示(X±s),方差齐性检验后进行q检验(Newman-Keuls法)。统计学检验均为双侧。

    2 结果

    2.1 术后大体观察 见表1。

    表1 术后大体观察各组功能恢复情况 (略)

    表1可看出:C组的功能恢复最快,A组次之,B组最慢。
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    2.2 组织学切片观察 各个实验组吻合口远端神经轴突粗细不均匀,胫前肌不同程度的萎缩,带血运神经移植组程度最轻,神经端侧吻合组最重。

    2.3 电生理检测与分析 A、B、C三组均于神经远端所支配的肌肉内记录到典型的动作电位。其中A组:刺激胫神经近端时于远端胫前肌内记录到动作电位。刺激腓神经近端于远端胫前肌内记录到动作电位。B组刺激胫神经近端于远端的胫前肌和腓肠肌内均记录到典型的动作电位。C组刺激腓神经近端于远端的胫前肌内记录到典型的动作电位。

    2.4 免疫荧光金染色结果观察 阳性标记细胞的特征:荧光显微镜下阳性标记细胞呈现大小不规则的黄白色。A组:同侧L 6,7 S 1,2 脊髓节段的前角背外侧、腹内侧和相应节段的脊神经节均出现典型的Flu-Au荧光标记细胞。B组:同侧L 6,7 S 1,2 脊髓节段的前角腹内侧和相应节段的脊神经节出现典型的Flu-Au荧光标记细胞。C组:同侧L 6,7 S 1,2 脊髓节段的前角背外侧和相应节段的脊神经节均出现典型的Flu-Au荧光标记细胞。
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    2.5 其他观察指标 见表2。表2 3组其他观察指标情况 (略)

    3 讨论

    目前的基础以及临床研究均已经表明神经端侧吻合后能够由正常的神经干上形成侧芽,使损伤的神经功能获得不同程度的恢复。周围神经端侧吻合术的临床应用的历史悠久。早在1903年,Hams和Low在治疗臂丛神经上干损伤时将上干的远端植入颈部C 7 神经根上。同年Balance等 [1] 将面神经远端吻合于同侧副神经上干上治疗面神经瘫痪,但是手术以后出现肩部和面部的同时运动。1993年巴西Viterbo [3] 等将神经端侧吻合技术重新应用于临床上,治疗面神经瘫痪时用腓肠神经移植于患侧和健侧面神经颞支颧支之间,神经一端与健侧面神经颞支、颧支远端行端端吻合,另一端与健侧面神经颞支、颧支之间行端侧吻合。手术8个月患者眼睑可以自主闭合。从此以后有学者报道将舌下神经与面神经行端侧吻合治疗舌下神经损伤,疗效满意。1995年Viterbo [4] 再次报告了1例臂丛神经撕脱伤患者,采用神经端侧吻合的方法治疗,手术中膈神经和C 5、6 神经用神经移植段以端侧吻合的方法桥接。术后1年肌电图检查:胸大肌、三角肌均存在独立的运动电位。1997年国内陈振兵等 [5,6] 报道了3例在做腓肠神经移植的同时,行腓肠神经远端与腓浅神经端侧吻合,术后9个月随访发现,足外侧皮肤感觉恢复正常。1998年,罗永湘等 [7,8] 报告了用神经端侧吻合后治疗尺神经缺损2例,两端分别缺损7cm和6cm,把尺神经远端接到正中神经侧方,术后半年尺神经感觉和运动都恢复到了良好的功能。1999年范启申等 [9] 也报道了23例感觉神经行端侧吻合的疗效:其中腓肠神经远端与腓浅神经性端侧吻合13例,桡神经浅支与未受损的桡神经浅支端侧吻合10例。手术后随访半年到2年,皮肤感觉恢复的优良率为95.7%。同年陈辉等 [10] 采用隐神经断端与腓肠神经做端侧吻合3例,以恢复皮瓣的感觉。手术后随访6~12个月,皮瓣感觉恢复良好。尽管已经有大量的实验研究表明,神经端侧吻合后神经的侧枝能够发芽再生,并且临床上应用已经取得了初步的疗效,但是临床应用当中还是应该严格的把握手术适应证。其主要适用于:(1)神经根性撕脱伤,不能够行原位修复以及神经转位、移植的;(2)神经缺损较大的,不能够行端端吻合或是神经移植效果不佳者;(3)自体神经移植致使供区神经缺损,可以将供区的神经远断端与临近正常的神经干相吻合。
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    临床上治疗神经缺损的经典方法是神经移植与神经转位,但是此二者均以牺牲自体神经为其缺点。虽然目前神 经端侧吻合的确切机制尚不是很清楚,但是对其临床应用的效果大多数人是持肯定态度的,尤其是神经缺损长度比较长、且神经近端无法寻找(如臂丛神经撕脱伤等)而不能做神经的端端吻合时提供了一种可选择的路径,临床应用的报道也是日益增多。如果能够证明端侧神经吻合优于或是相近于神经移植与神经转位术,则端侧吻合就拥有了广泛的临床应用前景,目前这方面的研究尚未见报道,端侧吻合是否更为优越尚须进一步研究,而且如何进一步促进神经侧枝发芽得到有效的神经再支配的能力,仍将是今后研究的重点。

    本实验的结果证明,带血运的神经移植组修复神经效果与神经双端侧吻合组、神经端侧吻合组相比差异有显著性,带血运的神经移植组修复效果最好。神经双端侧吻合组与神经端侧吻合组差异无显著性,神经双端侧吻合与神经端侧吻合均是颇有潜在临床应用价值的手术方式。

    参考文献
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    1 Balance C,Stewart P.Remarks in the operative treatment of chronic faˉcial plastic peripheral origin,J Br Med,1993,2:1009-1011.

    2 Viterbo F,Trindade JC,Hoshino K,et al.Two end-to-side neurorrhaˉphies and nerve graftt with removal of the epineural sheath:experimental study in rat.Br J Plast Surg,1994,47:75-80.

    3 Viterbo F.A new method for treatment of facial plasy:The crossface nerve transplantation with end-to-side neurorrhaphy.Rev Soc Bras Cir Plast Est Reconstr,1993,8:29-35.
, http://www.100md.com
    4 Viterbo F,Franciosi LF,Palkhares A.Nerve grafting and end-to-side neurorrhaphies connecting the phrenic nerve to the brachial plexus.Plast Reconstr,1995,96:494-495.

    5 陈振兵,王发斌,洪光样,等.腓浅神经与腓肠神经端侧吻合的临床观察.中华手外科杂志,1997,13:122-124.

    6 陈振兵,洪光样,王发斌,等.神经端侧吻合技术的临床应用.中华显微外科杂志,1997,20:136-137.

    7 罗永湘,王体沛,方煌.神经端侧吻合治疗尺神经缺损的初步探讨.中国修复重建外科杂志,1997,11:338-339.

    8 罗永湘,王体沛,方煌.神经端侧吻合的临床应用.中华显微外科杂志,1998,21:90-92.

    9 范启申,王金武,周祥吉,等.神经端侧缝合后修复感觉神经长段缺损的临床观察.中华显微外科杂志,1999,22(增):5-7.10 陈辉,陈绍宗,李跃军.神经端侧吻合重建皮瓣感觉修复足跟软组织缺损.中国修复重建外科杂志,1999,13:14-15.

    (收稿日期:2003-01-25) (编辑 一坤), 百拇医药(周伟东)