急性白血病患儿sIL-3和sEPO的检测与意义
【摘要】 目的 探讨急性白血病患儿血清白介素-3(sIL-3)、血清促红细胞生成素(sEPO)水平的变化及其在白血病治疗中的价值。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测sIL-3，放射免疫分析法测定sEPO。结果 (1)sIL-3:ALL初治组为(195.83±108.25)pg/ml，AML初治组为(503.18±193.01)pg/ml，正常对照组为(192.50±93.25)pg/ml。ALL初治组与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)，AML初治组显著高于正常组(P<0.01)和ALL初治组(P<0.01);4周化疗骨髓完全缓解组ALL为(184.64±75.92)pg/ml，与初治组无差别(P>0.05)。骨髓完全缓解组AML为(441.25±54.52)pg/ml，与初治组无差别(P>0.05);ALL长期缓解组为(175.77±91.56)pg/ml，与4周缓解组及正常对照组比较均无差异(P>0.05)。(2)sFPO:初治组ALL(24例)为(42.47±26.47)mIU/ml，AML(11例)为(24.30±13.06)mIU/ml，正常对照组为(10.33±2.62)mIU/ml。ALL、AML显著高于正常对照组(P<0.01，P<0.05)，ALL显著高于AML(P<0.05);4周化疗骨髓完全缓解组ALL(14例)为(22.59±13.33)mIU/ml，AML(5例)为(22.85±12.66)mIU/ml，仍高于正常对照组(P<0.05);ALL组低于初治时水平(P<0.05)，AML与初治时无差异(P>0.05);长期缓解组ALL(13例)为(12.77±4.33)mIU/ml，低于第四周缓解组(P>0.05)，与正常对照组无差异(P<0.05)。sEPO与血红蛋白(Hb)之间呈显著负相关关系(P<0.01，n=54，不包括长期缓解组)。(3)sIL-3和sEPO之间及两者与骨髓红细胞计数无显著相关关系。结论 sIL-3很可能参与了AML的发病过程，ALL的发病不是通过sIL-3水平增高导致的;小儿急性白血病时EPO生成和代偿正常，白血病贫血不是EPO缺乏导致;IL-3对EPO生成无显著影响。因而急性白血病患儿使用sIL-3时一定要慎重，而使用EPO治疗效果可能有限。
, 百拇医药
关键词 白细胞介素-3 血清促红细胞生成素 急性白血病 贫血 治疗
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)10-0865-03
Meaningfulness of serum interleukin-3and serum erythropoietin
in acute leukemic children
Zhao Xiaoqing，Liu Yufeng
Children’s Hospital of Fudan University，Shanghai200032.
【Abstract】 Objective To study serum interleukin-3(sIL-3)and serum erythropoietin(sEPO)and their possible therapeutic efficacy in acute leukemic children.Methods The values of sIL-3were measured by sandwich ELISA and sEPOwere determined by radioimmunoassay.Results (1)sIL-3levels in ALL before therapy group were(195.83±108.25)pg/ml，in AML were(503.18±193.01)pg/ml，and healthy control were(192.50±93.25)pg/ml.There were no significant differences between ALLand healthy control(P>0.05).AMLwere significantly higher than that of healthycontrol(P<0.01)and ALL(P<0.01);complete remission(CR)group after4weeks ofchemotherapy in ALL were(184.64±75.92)pg/ml，AML were(441.25±54.52)pg/ml，both were no significant differences with that of before therapy group，respectively(P>0.05);the CR group of long time in ALLwas(175.77±91.56)pg/ml，which was no differences with that of healthy group and CR group after4weeks of chemotherapy(P>0.05).(2)sEPO levels in ALL before therapy were(42.47±26.47)mIU/ml，in AML were(24.30±13.06)mIU/ml，and healthy control were(10.33±2.62)mIU/ml.ALL and AML were significantly higher than that of healthy control respectively(P<0.01，P<0.05)，ALL were higher than that of AML(P<0.05);CR group after4weeks of chemotherapy in ALL were(22.59±13.33)mIU/ml，AML were(22.85±12.66)mIU/ml，both were still higher than that of healthy control(P<0.05).ALL werelower than before therapy group(P<0.05)，AML was no differences with that of before therapy group(P>0.05);CR group of long time in ALLwere(12.77±4.33)mIU/ml were lower than CR group after4weeks of therapy(P>0.05)，and no differences with that of healthy control(P<0.05).sEPO was significantly negative associated with Hb(P<0.01，n=54，not including the CR group of long time).(3)There were no correlations between sIL-3and sEPO，and neither between each of them and nucleated eryˉthrocytes counts of bone marrow.Conclusion sIL-3is probably one ofthe main causes of AML，and ALL is not caused by the increased sIL-3;Anemia of acute leukemic children is not caused by inadequate erythropoietin producˉtion;treatment of acute leukemic anemia with sIL-3should be taken with caution，and treatment with rHuEPO might be of limited efficacy.
, http://www.100md.com
Key words serum interleukin-3 serum erythropoietin acute leukemia anemia therapy
白血病是严重威胁儿童生命的恶性肿瘤。在急性白血病化疗前后，但作为多能干细胞刺激因子的白细胞介素-3(interleukin-3，IL-3)及反映体内红细胞生成能力的血清促红细胞生成素(serum erythropoietin，sEPO)的变化及其二者关系探讨较少。我们对急性白血病患儿血清IL-3(sIL-3)和sEPO进行了检测，现报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象与分组 选择2000年9月～2001年7月在郑州大学第一附属医院儿科收治的急性白血病患儿48例，男28例，女20例，平均年龄7.19岁。包括急性淋巴细胞白血病(ALL)组:L 1型30例，L 2 型7例。入院前未经治疗者(下称初治组)24例，其中入院后接受化疗并在4周内骨髓完全缓解者14例，已完全缓解6个月～3年者(长期缓解组)13例。急性髓性白血病(AML)组:M 1 型4例，M 2 型7例，入院前均未经治疗，其中入院后接受化疗并经4周化疗骨髓完全缓解者5例。同时选20例同龄健康儿童作为正常对照组。
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 诊治方法 ALL患儿参考1998年全国小儿血液病学术会议上提出的《小儿急性淋巴细胞白血病诊疗建议(第二次修订草案)》标准诊治:诱导缓解期接受激素诱导1周，VDLP方案治疗1个月;AML患儿采用2000年全国小儿血液病学术会议上提出的《儿童急性髓系白血病诊疗建议》标准诊治。
1.2.2 标本采集 取初治、完全缓解及正常儿童清晨空腹非抗凝血4ml，静置2h后，2500rpm离心20min，收集血清标本-70℃冻存。
1.2.3 测定方法 血清IL-3测定采用双抗夹心ELISA法，试剂为晶美生物工程有限公司进口分装产品;sEPO测定采用放射免疫分析法，试剂为北京华英生物技术研究所产品。实验均按说明书进行操作。
1.3 统计学方法 应用统计学分析软件包SPSS10.0进行统计学分析，统计方法采用t检验，方差分析等。
, 百拇医药
2 结果
2.1 sIL-3 ALL初治组与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)，AML初治组显著高于正常组(P<0.01)及ALL初治组(P<0.01);4周化疗骨髓完全缓解组ALL与初治组比较差异无显著性(P>0.05)，AML与初治组比较亦差异无显著性(P>0.05);ALL长期缓解组与4周化疗缓解组及正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)，见表1。
2.2 sEPO 初治组ALL、AML显著高于正常对照组(P<0.01，P<0.05)，ALL显著高于AML(P<0.05);4周化疗完全缓解组均仍高于正常对照组(P<0.05);ALL组低于初治时水平(P<0.05)，AML与初治时无差异(P>0.05);长期缓解组ALL低于4周缓解组(P>0.05)，与正常对照组无差异(P<0.05)，见表2。
sEPO与血红蛋白(Hb)之间呈显著负相关关系(P<0.01，n=54)。见图1。
, http://www.100md.com
sIL-3和sEPO之间及二者与骨髓红细胞计数之间无显著相关关系。
表1 各组sIL-3水平比较 (略)
表2 各组sEPO水平比较 (略)
图1 促红细胞生成素与血红蛋白相关性(略)
3 讨论
IL-3又称多能干细胞刺激因子，是造血生长因子家族成员中的一份子。IL-3由激活的T淋巴细胞、自然杀伤细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞分泌，具有调节多能造血干细胞定向分化和增殖的功能 [1] ，对多种细胞分化成熟起促进作用，如红细胞、中性粒细胞、巨核细胞、肥大细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞等。目前重组人IL-3(rhIL-3)初步试用于临床，主要用于骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血、恶性肿瘤化疗后骨髓抑制及自体骨髓移植后造血恢复等，并取得一定效果，而rhIL-3在白血病的治疗上存在着争议。Munoz L研究发现IL-3受体α链广泛表达在AML及B细胞ALL细胞表面，而在正常淋巴祖细胞则缺乏此受体表达 [2] 。我们发现IL-3在ALL缓解前后与正常对照组无差别，表明ALL的发病机制不是通过血液中IL-3的增高，但也有可能通过IL-3受体的高表达参与刺激白血病细胞增殖。IL-3在AML中显著增高，表明AML时IL-3在体内表达紊乱。已证明IL-3不仅促进多能干细胞增殖，也是AML细胞增殖的有效刺激物 [3] ，但很少使白血病细胞最终分化成熟 [4] ，所以增高的IL-3可能刺激白血病细胞的增殖从而参与了AML的发病。我们的结果与Elbaz O的研究一致 [5] 。因此提示急性白血病患儿使用sIL-3时一定要慎重。本研究AML4周化疗缓解后IL-3仍增高，可能和观察的时间短及病例数少有关，理论上长期缓解的患儿IL-3应该逐渐向正常水平恢复。具体机制尚需进一步探讨。
, 百拇医药
sEPO是红系造血的主要调节因子，对红系有特异性作用。Dowd [6] 等对24例急性白血病患儿(ALL22例，AML2例)随访4个月，同时测定sEPO及Hb水平，发现logEPO与Hb之间存在显著负相关关系(P<0.01，n=100)，与Corazˉza[7] 等的报道一致。而Rokicka-Piotrowicz [8] 等则认为急性白血病sEPO显著增高，但与Hb的增高不成比率。我们的结果显示ALL、AML患儿未经治疗时sEPO均显著增高，治疗后逐渐下降，sEPO与Hb呈显著负相关关系。表明急性白血病时EPO对贫血的负反馈机制是完整的，因此提示急性白血病贫血不是由于机体EPO产生不足导致，而可能主要是骨髓红系造血受抑制所致。
白细胞介素-3是多能干细胞刺激因子，具有调节多能造血干细胞定向分化和增殖的功能，能促进红系细胞生成，sEPO也与红细胞生成密切相关。而本文对白血病患儿研究未发现二者与白血病患者骨髓红细胞生成有显著相关 性，且sIL-3、sEPO也无相关。提示白血病贫血不是由于sEPO、sIL-3缺乏导致。二者在白血病治疗中的作用可能有限。
, 百拇医药
参考文献
1 董永绥.儿科免疫学.武汉:湖北科学技术出版社，1998，23.
2 Munoz L，Nomdedeu JF，Lopez O，et al.Interleukin-3receptor alpha chain(CD123)is widely expressed in hematologic malignancies.Haematologica，2001，86(12):1261-1269.
3 Guan Y，Hogge DE.Proliferative status of primitive hematopoietic proˉgenitors from patients with acute myelogenous leukemia(AML).Leukemia，2000，14(12):2135-2141.
, 百拇医药 4 Salem M，Delwel R，Mahmoud LA，et al.Maturation of human acute myeloid leukaemia in vitro:the response to five recombinant haematopoiˉetic factors in a serum-free system.Br J Haematol，1989，71(3):363-370.
5 Elbaz O，Shaltout A.Implication of Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor(GM-CSF)and Interleukin-3(IL-3)in Children with Acute Myeloid Leukaemia(AML);Malignancy.Hematol，2001，5(5):383-388.
6 Dowd MD，Morgan ER，Langman CB，et al.Serum erythropoietin levels in children with leukemia.Med Pediatr Oncol，1997，28(4):259-267.
, http://www.100md.com
7 Corazza F，Beguin Y，Bergmann P，et al.Anemia in children with cancer is associated with decreased erythropoietic activity and not with inadeˉquate erythropoietin production.Blood，1998，92(5):1793-1798.
8 Rokicka-Piotrowicz M，Paszkowska M，Kuratowska Z.Anemia and eryˉthropoietin level in some hematologymalignancies.Pol ArchMed Wewn，1994，92(5):409-416.
作者单位：1 200032 复旦大学上海医学院儿科医院
2 450052 郑州大学第一附属医院儿科
(收稿日期:2003-06-29)
(编辑 小川), http://www.100md.com(赵晓晴 刘玉峰)
, 百拇医药
关键词 白细胞介素-3 血清促红细胞生成素 急性白血病 贫血 治疗
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)10-0865-03
Meaningfulness of serum interleukin-3and serum erythropoietin
in acute leukemic children
Zhao Xiaoqing，Liu Yufeng
Children’s Hospital of Fudan University，Shanghai200032.
【Abstract】 Objective To study serum interleukin-3(sIL-3)and serum erythropoietin(sEPO)and their possible therapeutic efficacy in acute leukemic children.Methods The values of sIL-3were measured by sandwich ELISA and sEPOwere determined by radioimmunoassay.Results (1)sIL-3levels in ALL before therapy group were(195.83±108.25)pg/ml，in AML were(503.18±193.01)pg/ml，and healthy control were(192.50±93.25)pg/ml.There were no significant differences between ALLand healthy control(P>0.05).AMLwere significantly higher than that of healthycontrol(P<0.01)and ALL(P<0.01);complete remission(CR)group after4weeks ofchemotherapy in ALL were(184.64±75.92)pg/ml，AML were(441.25±54.52)pg/ml，both were no significant differences with that of before therapy group，respectively(P>0.05);the CR group of long time in ALLwas(175.77±91.56)pg/ml，which was no differences with that of healthy group and CR group after4weeks of chemotherapy(P>0.05).(2)sEPO levels in ALL before therapy were(42.47±26.47)mIU/ml，in AML were(24.30±13.06)mIU/ml，and healthy control were(10.33±2.62)mIU/ml.ALL and AML were significantly higher than that of healthy control respectively(P<0.01，P<0.05)，ALL were higher than that of AML(P<0.05);CR group after4weeks of chemotherapy in ALL were(22.59±13.33)mIU/ml，AML were(22.85±12.66)mIU/ml，both were still higher than that of healthy control(P<0.05).ALL werelower than before therapy group(P<0.05)，AML was no differences with that of before therapy group(P>0.05);CR group of long time in ALLwere(12.77±4.33)mIU/ml were lower than CR group after4weeks of therapy(P>0.05)，and no differences with that of healthy control(P<0.05).sEPO was significantly negative associated with Hb(P<0.01，n=54，not including the CR group of long time).(3)There were no correlations between sIL-3and sEPO，and neither between each of them and nucleated eryˉthrocytes counts of bone marrow.Conclusion sIL-3is probably one ofthe main causes of AML，and ALL is not caused by the increased sIL-3;Anemia of acute leukemic children is not caused by inadequate erythropoietin producˉtion;treatment of acute leukemic anemia with sIL-3should be taken with caution，and treatment with rHuEPO might be of limited efficacy.
, http://www.100md.com
Key words serum interleukin-3 serum erythropoietin acute leukemia anemia therapy
白血病是严重威胁儿童生命的恶性肿瘤。在急性白血病化疗前后，但作为多能干细胞刺激因子的白细胞介素-3(interleukin-3，IL-3)及反映体内红细胞生成能力的血清促红细胞生成素(serum erythropoietin，sEPO)的变化及其二者关系探讨较少。我们对急性白血病患儿血清IL-3(sIL-3)和sEPO进行了检测，现报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象与分组 选择2000年9月～2001年7月在郑州大学第一附属医院儿科收治的急性白血病患儿48例，男28例，女20例，平均年龄7.19岁。包括急性淋巴细胞白血病(ALL)组:L 1型30例，L 2 型7例。入院前未经治疗者(下称初治组)24例，其中入院后接受化疗并在4周内骨髓完全缓解者14例，已完全缓解6个月～3年者(长期缓解组)13例。急性髓性白血病(AML)组:M 1 型4例，M 2 型7例，入院前均未经治疗，其中入院后接受化疗并经4周化疗骨髓完全缓解者5例。同时选20例同龄健康儿童作为正常对照组。
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 诊治方法 ALL患儿参考1998年全国小儿血液病学术会议上提出的《小儿急性淋巴细胞白血病诊疗建议(第二次修订草案)》标准诊治:诱导缓解期接受激素诱导1周，VDLP方案治疗1个月;AML患儿采用2000年全国小儿血液病学术会议上提出的《儿童急性髓系白血病诊疗建议》标准诊治。
1.2.2 标本采集 取初治、完全缓解及正常儿童清晨空腹非抗凝血4ml，静置2h后，2500rpm离心20min，收集血清标本-70℃冻存。
1.2.3 测定方法 血清IL-3测定采用双抗夹心ELISA法，试剂为晶美生物工程有限公司进口分装产品;sEPO测定采用放射免疫分析法，试剂为北京华英生物技术研究所产品。实验均按说明书进行操作。
1.3 统计学方法 应用统计学分析软件包SPSS10.0进行统计学分析，统计方法采用t检验，方差分析等。
, 百拇医药
2 结果
2.1 sIL-3 ALL初治组与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)，AML初治组显著高于正常组(P<0.01)及ALL初治组(P<0.01);4周化疗骨髓完全缓解组ALL与初治组比较差异无显著性(P>0.05)，AML与初治组比较亦差异无显著性(P>0.05);ALL长期缓解组与4周化疗缓解组及正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)，见表1。
2.2 sEPO 初治组ALL、AML显著高于正常对照组(P<0.01，P<0.05)，ALL显著高于AML(P<0.05);4周化疗完全缓解组均仍高于正常对照组(P<0.05);ALL组低于初治时水平(P<0.05)，AML与初治时无差异(P>0.05);长期缓解组ALL低于4周缓解组(P>0.05)，与正常对照组无差异(P<0.05)，见表2。
sEPO与血红蛋白(Hb)之间呈显著负相关关系(P<0.01，n=54)。见图1。
, http://www.100md.com
sIL-3和sEPO之间及二者与骨髓红细胞计数之间无显著相关关系。
表1 各组sIL-3水平比较 (略)
表2 各组sEPO水平比较 (略)
图1 促红细胞生成素与血红蛋白相关性(略)
3 讨论
IL-3又称多能干细胞刺激因子，是造血生长因子家族成员中的一份子。IL-3由激活的T淋巴细胞、自然杀伤细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞分泌，具有调节多能造血干细胞定向分化和增殖的功能 [1] ，对多种细胞分化成熟起促进作用，如红细胞、中性粒细胞、巨核细胞、肥大细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞等。目前重组人IL-3(rhIL-3)初步试用于临床，主要用于骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血、恶性肿瘤化疗后骨髓抑制及自体骨髓移植后造血恢复等，并取得一定效果，而rhIL-3在白血病的治疗上存在着争议。Munoz L研究发现IL-3受体α链广泛表达在AML及B细胞ALL细胞表面，而在正常淋巴祖细胞则缺乏此受体表达 [2] 。我们发现IL-3在ALL缓解前后与正常对照组无差别，表明ALL的发病机制不是通过血液中IL-3的增高，但也有可能通过IL-3受体的高表达参与刺激白血病细胞增殖。IL-3在AML中显著增高，表明AML时IL-3在体内表达紊乱。已证明IL-3不仅促进多能干细胞增殖，也是AML细胞增殖的有效刺激物 [3] ，但很少使白血病细胞最终分化成熟 [4] ，所以增高的IL-3可能刺激白血病细胞的增殖从而参与了AML的发病。我们的结果与Elbaz O的研究一致 [5] 。因此提示急性白血病患儿使用sIL-3时一定要慎重。本研究AML4周化疗缓解后IL-3仍增高，可能和观察的时间短及病例数少有关，理论上长期缓解的患儿IL-3应该逐渐向正常水平恢复。具体机制尚需进一步探讨。
, 百拇医药
sEPO是红系造血的主要调节因子，对红系有特异性作用。Dowd [6] 等对24例急性白血病患儿(ALL22例，AML2例)随访4个月，同时测定sEPO及Hb水平，发现logEPO与Hb之间存在显著负相关关系(P<0.01，n=100)，与Corazˉza[7] 等的报道一致。而Rokicka-Piotrowicz [8] 等则认为急性白血病sEPO显著增高，但与Hb的增高不成比率。我们的结果显示ALL、AML患儿未经治疗时sEPO均显著增高，治疗后逐渐下降，sEPO与Hb呈显著负相关关系。表明急性白血病时EPO对贫血的负反馈机制是完整的，因此提示急性白血病贫血不是由于机体EPO产生不足导致，而可能主要是骨髓红系造血受抑制所致。
白细胞介素-3是多能干细胞刺激因子，具有调节多能造血干细胞定向分化和增殖的功能，能促进红系细胞生成，sEPO也与红细胞生成密切相关。而本文对白血病患儿研究未发现二者与白血病患者骨髓红细胞生成有显著相关 性，且sIL-3、sEPO也无相关。提示白血病贫血不是由于sEPO、sIL-3缺乏导致。二者在白血病治疗中的作用可能有限。
, 百拇医药
参考文献
1 董永绥.儿科免疫学.武汉:湖北科学技术出版社，1998，23.
2 Munoz L，Nomdedeu JF，Lopez O，et al.Interleukin-3receptor alpha chain(CD123)is widely expressed in hematologic malignancies.Haematologica，2001，86(12):1261-1269.
3 Guan Y，Hogge DE.Proliferative status of primitive hematopoietic proˉgenitors from patients with acute myelogenous leukemia(AML).Leukemia，2000，14(12):2135-2141.
, 百拇医药 4 Salem M，Delwel R，Mahmoud LA，et al.Maturation of human acute myeloid leukaemia in vitro:the response to five recombinant haematopoiˉetic factors in a serum-free system.Br J Haematol，1989，71(3):363-370.
5 Elbaz O，Shaltout A.Implication of Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor(GM-CSF)and Interleukin-3(IL-3)in Children with Acute Myeloid Leukaemia(AML);Malignancy.Hematol，2001，5(5):383-388.
6 Dowd MD，Morgan ER，Langman CB，et al.Serum erythropoietin levels in children with leukemia.Med Pediatr Oncol，1997，28(4):259-267.
, http://www.100md.com
7 Corazza F，Beguin Y，Bergmann P，et al.Anemia in children with cancer is associated with decreased erythropoietic activity and not with inadeˉquate erythropoietin production.Blood，1998，92(5):1793-1798.
8 Rokicka-Piotrowicz M，Paszkowska M，Kuratowska Z.Anemia and eryˉthropoietin level in some hematologymalignancies.Pol ArchMed Wewn，1994，92(5):409-416.
作者单位：1 200032 复旦大学上海医学院儿科医院
2 450052 郑州大学第一附属医院儿科
(收稿日期:2003-06-29)
(编辑 小川), http://www.100md.com(赵晓晴 刘玉峰)