HPLC法测定脑乐静中甘草酸的含量
【摘要】 目的 建立脑乐静中甘草酸的HPLC含量测定方法，研究脑乐静中甘草酸的含量。方法 运用超声波处理脑乐静样品并采用HPLC法测定甘草酸的含量。结果 脑乐静中甘草酸含量平均为1.36mg/ml。结论 运用HPLC法测定脑乐静中甘草酸的含量具有简便、快速、准确、灵敏、重现性好等优点。为脑乐静质量评价提供了依据。
关键词 脑乐静 HPLC 含量测定
【文献标识码】 B 【文章编号】 1609-6614(2003)12-1139-02
脑乐静[1]是中国药典收载的传统验方制剂，是由甘草流浸膏、小麦、大枣所组成，具有养心、健脑、安神之功，临床上用于精神忧郁、易惊失眠、烦躁及小儿夜不安寐。本文采用高效液相色谱法对脑乐静中甘草酸进行定量分析，现报道如下。
1 仪器、药品与试剂
, 百拇医药
LC-10ATVP高效液相色谱仪，SPD-10Avp可变波长检测器，C 18 色谱柱(4.6mm×25cm)，hT400型超声波检查仪。甲醇为色谱纯，醋酸铵、冰醋酸均为分析纯，甘草酸单铵盐为标准品(中国药品生物制品鉴定所)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:汉邦LichrospherC 18 柱(4.6mm×25cm);流动组:甲醇0.2mmol/L、醋酸铵一冰醋酸(67:33:1);流速:0.8ml/min;柱温:35℃;检测波长:250nm;进样量:10μl。对照品、样品及脑乐静的阴性对照高效液相色谱图，分别见图1、图2、图3。
2.2 样品溶液的制备 精密量取脑乐静10ml，置50ml量瓶中，加流动相适量，超声提取15min，放冷，加流动相至刻度，摇匀，即得。
图1 甘草酸单铵盐标准品的HPLC图(略)
, 百拇医药
图2 脑乐静样品的HPLC图 (略)
图3 脑乐静阴性对照品的HPLC图(略)
2.3 线性关系 精密称取甘草酸单铵盐标准品15.20mg，置100ml量瓶中，加流动相溶解，并稀释至刻度，充分摇匀，即得对照品储备液。分别精密量取对照品储备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，置50ml量瓶中，加流动相至刻度，制成不同浓度的标准品溶液，分别进样制得的标准品溶液10μl，测定峰面积结果见表1。以进样量为横坐标(x，μg)，以标准品的峰面积为纵坐标(y)作标准曲线，度计算得回归方程，Y=24+3674.54x，r=0.9999。结果表明，在3.04～15.20μg/ml范围内呈线性关系。
表1 标准曲线测定(略)
2.4 精密度试验 精密量取甘草酸单铵盐对照品溶液(0.1520mg/ml)10μl，重复进行7次，结果见表2。
, http://www.100md.com
表2 精密度试验(略)
2.5 稳定性试验 对同一对照品溶液，每隔1h进样1次， 每次10μl，结果见表3。
表3 稳定性试验(略)
2.6 重复性试验 取同一批脑乐静样品5份，按样品测定方法操作，结果显示，峰面积重复性良好。RSD为2.01%。
2.7 回收率试验 精密取同一批已知含量的样品9份，分别 置50ml量瓶中，分别精密加入甘草酸单铵盐对照品，流动相适量，照样品溶液制备项下的方法，自“超声处理”起，依法制备成样品液，进样10μl测定，计算回收率，结果见表4。
表4 回收率试验(略)
2.8 样品测定 精确量取样品溶液10μl，注入液相色谱仪测定，以外标法计算3批脑乐静中甘草酸的含量，分别为1.35mg/ml、1.37mg/ml、1.36mg/ml，平均值为1.36mg/ml。
, 百拇医药
3 讨论
(1)采用HPLC法测定脑乐静中甘草酸的含量，参考了有关HPLC测定甘草酸含量的方法的文献资料。
(2)含量测定结果显示，脑乐静中甘草酸的平均含量为1.36mg/ml。方法学考察显示，其精密度试验的RSD为0. 46%;稳定性试验的RSD为0.5%，重复性试验的RSD为2.01%;回收率试验的RSD为1.83%。均符合有关规定。用HPLC法测定脑乐静中甘草酸的含量，具有简便、快速、灵敏度高等特点，结果可靠。
参考文献
1 卫生部药典编委会.中华人民共和国药典，北京:化学工业出版社，2000，65，559.
作者单位:1 223001江苏省淮安药品检验所
2 210029南京中医药大学
(编辑 花楹), 百拇医药(潘翠华)
关键词 脑乐静 HPLC 含量测定
【文献标识码】 B 【文章编号】 1609-6614(2003)12-1139-02
脑乐静[1]是中国药典收载的传统验方制剂，是由甘草流浸膏、小麦、大枣所组成，具有养心、健脑、安神之功，临床上用于精神忧郁、易惊失眠、烦躁及小儿夜不安寐。本文采用高效液相色谱法对脑乐静中甘草酸进行定量分析，现报道如下。
1 仪器、药品与试剂
, 百拇医药
LC-10ATVP高效液相色谱仪，SPD-10Avp可变波长检测器，C 18 色谱柱(4.6mm×25cm)，hT400型超声波检查仪。甲醇为色谱纯，醋酸铵、冰醋酸均为分析纯，甘草酸单铵盐为标准品(中国药品生物制品鉴定所)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:汉邦LichrospherC 18 柱(4.6mm×25cm);流动组:甲醇0.2mmol/L、醋酸铵一冰醋酸(67:33:1);流速:0.8ml/min;柱温:35℃;检测波长:250nm;进样量:10μl。对照品、样品及脑乐静的阴性对照高效液相色谱图，分别见图1、图2、图3。
2.2 样品溶液的制备 精密量取脑乐静10ml，置50ml量瓶中，加流动相适量，超声提取15min，放冷，加流动相至刻度，摇匀，即得。
图1 甘草酸单铵盐标准品的HPLC图(略)
, 百拇医药
图2 脑乐静样品的HPLC图 (略)
图3 脑乐静阴性对照品的HPLC图(略)
2.3 线性关系 精密称取甘草酸单铵盐标准品15.20mg，置100ml量瓶中，加流动相溶解，并稀释至刻度，充分摇匀，即得对照品储备液。分别精密量取对照品储备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，置50ml量瓶中，加流动相至刻度，制成不同浓度的标准品溶液，分别进样制得的标准品溶液10μl，测定峰面积结果见表1。以进样量为横坐标(x，μg)，以标准品的峰面积为纵坐标(y)作标准曲线，度计算得回归方程，Y=24+3674.54x，r=0.9999。结果表明，在3.04～15.20μg/ml范围内呈线性关系。
表1 标准曲线测定(略)
2.4 精密度试验 精密量取甘草酸单铵盐对照品溶液(0.1520mg/ml)10μl，重复进行7次，结果见表2。
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表2 精密度试验(略)
2.5 稳定性试验 对同一对照品溶液，每隔1h进样1次， 每次10μl，结果见表3。
表3 稳定性试验(略)
2.6 重复性试验 取同一批脑乐静样品5份，按样品测定方法操作，结果显示，峰面积重复性良好。RSD为2.01%。
2.7 回收率试验 精密取同一批已知含量的样品9份，分别 置50ml量瓶中，分别精密加入甘草酸单铵盐对照品，流动相适量，照样品溶液制备项下的方法，自“超声处理”起，依法制备成样品液，进样10μl测定，计算回收率，结果见表4。
表4 回收率试验(略)
2.8 样品测定 精确量取样品溶液10μl，注入液相色谱仪测定，以外标法计算3批脑乐静中甘草酸的含量，分别为1.35mg/ml、1.37mg/ml、1.36mg/ml，平均值为1.36mg/ml。
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3 讨论
(1)采用HPLC法测定脑乐静中甘草酸的含量，参考了有关HPLC测定甘草酸含量的方法的文献资料。
(2)含量测定结果显示，脑乐静中甘草酸的平均含量为1.36mg/ml。方法学考察显示，其精密度试验的RSD为0. 46%;稳定性试验的RSD为0.5%，重复性试验的RSD为2.01%;回收率试验的RSD为1.83%。均符合有关规定。用HPLC法测定脑乐静中甘草酸的含量，具有简便、快速、灵敏度高等特点，结果可靠。
参考文献
1 卫生部药典编委会.中华人民共和国药典，北京:化学工业出版社，2000，65，559.
作者单位:1 223001江苏省淮安药品检验所
2 210029南京中医药大学
(编辑 花楹), 百拇医药(潘翠华)