HPLC法测定富马酸美托洛尔缓释片的含量
【文献标识码】 B 【文章编号】 1684-2030(2003)10-0930-02
富马酸美托洛尔(metoprolol fumarate)为新型β 1 -受体阻滞剂,根据其结构特点,本文选用HPLC法测定富马酸美托洛尔的含量,该方法快速、准确、重现性好,现介绍如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药 Waters515高压泵,Waters2487紫外检测器,Waters717自动进样器。富马酸美托洛尔对照品及富马酸美托洛尔缓释片由山东临淄制药厂提供,乙腈为色谱纯,醋酸铵、三乙胺、磷酸与冰醋酸均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 色谱条件 phenomenex-C 18 250×4.60mm色谱柱。流动相为醋酸铵溶液(取醋酸铵3.9g,加水810ml使溶解,加三乙胺2ml,磷酸3ml与冰醋酸10ml)-乙腈(81∶19)。流速1.0ml/min。检测波长274nm。
1.2.2 对照品贮备溶液制备 精密称取富马酸美托洛尔对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含5mg的溶液,作为对照品贮备溶液。
2 结果
2.1 工作曲线 精密量取对照品贮备溶液0.4、1、1.6、2、2.4、3、4ml,分别置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取20μl,照上述色谱条件,分别进样测定,得色谱图(见图1)。以对照品峰面积(Y)对浓度(X)进行线性回归,求得回归方程:Y=4899.64X-8687.48,r=0.9999,线性范围18.92~189.2μg/ml。
2.2 回收率 精密称取富马酸美托洛尔对照品约76、95、114mg与1片处方量的辅料,分别置100ml量瓶中,加水适量,振摇使富马酸美托洛尔溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过;精密量取续滤液5ml,置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀;按照含量测定下的方法,计算回收率。测得相对平均回收率为99.8%,RSD为0.97%(n=5)。
图1 富马酸美托洛尔高效液相色谱图 略
2.3 溶液稳定性考察 取上述线性关系考察项下的对照品溶液(浓度为189.2μg/ml),在室温条件下分别于0、1、2、4、6、8h,照上述色谱条件分别进行测定,结果表明,在8h内峰面积几乎无变化。
2.4 重复性试验 精密称取富马酸美托洛尔缓释片的细粉适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含富马酸美托洛尔0.1mg的溶液,照含量测定项下的方法,测定含量,RSD为0.62%(n=5)。
2.5 样品测定 取富马酸美托洛尔缓释片20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于富马酸美托洛尔95mg),置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,滤过;精密量取续滤液5ml,置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取20μl,照上述色谱条件,分别进样测定,根据回归方程计算样品含量,结果见表1。
表1 富马酸美托洛尔缓释片样品测定结果 略
3 讨论
3.1 本法准确度高,重复性好,专属性强,是测定富马酸美托洛尔含量的较为理想的方法。
3.2 在试验过程中,曾选甲醇-磷酸盐缓冲溶液(70:30)为流动相,拖尾,与有关物质分离度差。
作者单位: 250013 山东省济南市中心医院
(收稿日期:2003-10-17)
(编 辑 晓勇), 百拇医药(俞淑文)
富马酸美托洛尔(metoprolol fumarate)为新型β 1 -受体阻滞剂,根据其结构特点,本文选用HPLC法测定富马酸美托洛尔的含量,该方法快速、准确、重现性好,现介绍如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药 Waters515高压泵,Waters2487紫外检测器,Waters717自动进样器。富马酸美托洛尔对照品及富马酸美托洛尔缓释片由山东临淄制药厂提供,乙腈为色谱纯,醋酸铵、三乙胺、磷酸与冰醋酸均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 色谱条件 phenomenex-C 18 250×4.60mm色谱柱。流动相为醋酸铵溶液(取醋酸铵3.9g,加水810ml使溶解,加三乙胺2ml,磷酸3ml与冰醋酸10ml)-乙腈(81∶19)。流速1.0ml/min。检测波长274nm。
1.2.2 对照品贮备溶液制备 精密称取富马酸美托洛尔对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含5mg的溶液,作为对照品贮备溶液。
2 结果
2.1 工作曲线 精密量取对照品贮备溶液0.4、1、1.6、2、2.4、3、4ml,分别置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取20μl,照上述色谱条件,分别进样测定,得色谱图(见图1)。以对照品峰面积(Y)对浓度(X)进行线性回归,求得回归方程:Y=4899.64X-8687.48,r=0.9999,线性范围18.92~189.2μg/ml。
2.2 回收率 精密称取富马酸美托洛尔对照品约76、95、114mg与1片处方量的辅料,分别置100ml量瓶中,加水适量,振摇使富马酸美托洛尔溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过;精密量取续滤液5ml,置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀;按照含量测定下的方法,计算回收率。测得相对平均回收率为99.8%,RSD为0.97%(n=5)。
图1 富马酸美托洛尔高效液相色谱图 略
2.3 溶液稳定性考察 取上述线性关系考察项下的对照品溶液(浓度为189.2μg/ml),在室温条件下分别于0、1、2、4、6、8h,照上述色谱条件分别进行测定,结果表明,在8h内峰面积几乎无变化。
2.4 重复性试验 精密称取富马酸美托洛尔缓释片的细粉适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含富马酸美托洛尔0.1mg的溶液,照含量测定项下的方法,测定含量,RSD为0.62%(n=5)。
2.5 样品测定 取富马酸美托洛尔缓释片20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于富马酸美托洛尔95mg),置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,滤过;精密量取续滤液5ml,置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取20μl,照上述色谱条件,分别进样测定,根据回归方程计算样品含量,结果见表1。
表1 富马酸美托洛尔缓释片样品测定结果 略
3 讨论
3.1 本法准确度高,重复性好,专属性强,是测定富马酸美托洛尔含量的较为理想的方法。
3.2 在试验过程中,曾选甲醇-磷酸盐缓冲溶液(70:30)为流动相,拖尾,与有关物质分离度差。
作者单位: 250013 山东省济南市中心医院
(收稿日期:2003-10-17)
(编 辑 晓勇), 百拇医药(俞淑文)