芩柏颗粒剂干预溃疡性结肠炎大鼠可溶性白介素-2受体和IgG的实验研究
【摘要】 目的 研究芩柏颗粒剂治疗溃疡性结肠炎的作用机理。方法 用硫酸葡聚糖造成大鼠溃疡性结肠炎模型后，灌服芩柏颗粒剂和柳氮磺胺吡啶，检测血清中可溶性白介素-2受体(soluble interleukin-2receptor，sIL-2R)和免疫球蛋白G(IgG)的含量。结果 芩柏颗粒剂能够减少溃疡性结肠炎大鼠血清SIL-2R的表达和降低IgG含量，优于柳氮磺胺吡啶组(P<0.01)。分析 其作用机理可能与改善免疫反应密切相关。
关键词 芩柏颗粒剂 溃疡性结肠炎 可溶性白介素-2受体 免疫球蛋白G
【文献标识码】B 【文章编号】 1726-7587(2003)11-1026-02
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis。UC)近几年在我国的发病逐渐增高 [1] ，其病因病机尚不完全清楚。UC病人存在着免疫异常，在免疫反应中前炎症因子和抗炎因子失衡也起着非常重要的作用 [2，3] 。芩柏颗粒剂治疗溃疡性结肠炎疗效显著 [4] ，本文观察芩柏颗粒剂治疗UC鼠后血清中sIL-2R表达和IgG含量的变化，探讨芩柏颗粒剂治疗UC的作用机理。
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1 材料与方法
1.1 材料 SD大鼠(由中南大学湘雅医学院动物学部提供)40只，雄性，体重200g左右。硫酸葡聚糖(dextran sulfate sodium，DSS)为Sigma公司产品。sIL-2R试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司，芩柏颗粒剂由湖南中医学院附二医院制备。
1.2 大鼠UC模型的建立 根据Okayaus方法造模 [5] 用3%DSS溶液给大鼠自由饮水，连续1周，其间肉眼观察腹泻与血便情况。
1.3 动物分组与处理 40只SD大鼠随机分成四组，每组 10只。正常组:以生理盐水2ml灌服，不食用DSS;模型组:饮用DSS溶液1周后，以生理盐水2ml灌服;芩柏颗粒剂治疗组:饮用DSS溶液1周后，按1.65g/kg剂量灌服(按体表面积折算)芩柏颗粒剂1次/日，每次2ml;柳氮磺胺吡啶(SASP)治疗组:饮用DSS溶液1周后，按0.27g/kg剂量灌服(按体表面积折算)SASP溶液，1次/日，每次2ml。4周后制取标本。
, 百拇医药
1.4 标本制备 大鼠麻醉后，剪开胸腔，暴露心脏采血，低速离心，1500r/min，5min取血清，-75℃保存。
1.5 血清sIL-2R、IgG含量测定方法 用双抗体夹心ABC-ELISA法检测sIL-2R，IgG测定用美国Array360system全自动免疫分析仪进行。
1.6 统计学处理 sIL-2R、IgG含量的数据用均数±标准差表示，多组间比较用方差分析。
2 结果
造模后，各组sIL-2R、IgG较正常组显著上升(P<0.01)，用药治疗后，芩柏颗粒剂和SASP治疗组的sIL-2R表达和IgG含量较模型组显著减少(P<0.01)。芩柏颗粒剂治疗组与SASP治疗组比较，血清中sIL-2R表达和IgG含量差异有非常显著性(P<0.01)。见表1。
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表1 各组大鼠血清中sIL-2R、IgG的比较 (略)
3 分析
UC病人存在着免疫异常，在免疫反应中前炎症因子和抗炎因子失衡也起着非常重要的作用 [2，3] ，目前认为，本病的发生机理与T细胞免疫功能及免疫系统障碍因素有密切的关系。sIL-2R是活化的T细胞和其它的单核细胞分泌的IL-2受体的一种，可与IL-2结合参加IL-2的调节活动。当免疫反应发生时活化的T细胞增加，IL-2和IL-2受体也增加 [6，7] ，而抑制IL-2和IL-2受体的表达也可抑制T细胞增值[8] 。更多研究报道在慢性炎症性肠病的实验中发现sIL-2R的表达增加。本实验用DSS造模，UC大鼠血清中sIL-2R、IgG含量异常升高，说明UC的发病机制可可能存在由IL-2介导的T细胞免疫和IgG参与的体液免疫。
芩柏颗粒剂由黄芩、黄柏等药组成，具有“清热利湿、活血化瘀”之功效，治疗UC模型大鼠后能显著降低血清中sIL-2R的表达及IgG含量，疗效比单用SASP疗效更佳，揭示了芩柏颗粒剂治疗溃疡性结肠炎可能是通过抑制免疫异常反应而起作用。
, 百拇医药
参考文献
1 郑芝田.胃肠病学.北京:人民卫生出版社，1992，646-656.
2 McCabe RP，Dean P，Elson CO.Immunology of inflammatory bowel disˉease.Curr Opin Gastroenterol，1996，12(4):340-344.
3 Sartor RB.pathogenesis and immune mechanism of chronic inflammatory bowel disease.Am J Gastroenterol.
4 何永恒.复方芩柏颗粒剂治疗慢性结肠炎50例.辽宁中医杂志，1995，22(12):12.
5 Okayasu I，Hatakeyama S，Yamada M，et al.A novel method in the inˉduction
, 百拇医药
of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice.Gastroent
erology，1990，98(3):694-702.
6 Rubin LA，Kurman CC，Fritz ME，et al.Soluble interleukin2receptors are released from activated humen lymphoid cells in vitrol，1985，135(5):3172-3177.
7 Rubin LA，Jay G，Neison DL.The release interleukin2receptor binds interleu
kin2efficiently.Immunol，1986，137(12):3841-3844.
, http://www.100md.com
8 Stevens C，Lipman M，Fabry S，et al.5-ASA abrogates T-cell prolifˉeration
by blocking interleukin2production in peripheral blood mononuˉclear cells.J Pharmacol Exp Ther，1995，272:399-406.
基金项目:湖南省自然科学基金资助课题(编号:01-JJY2075)
作者单位:410005长沙湖南中医学院附属二医院
(收稿日期:2003-10-31)
(编辑 小川), http://www.100md.com(王真权)
关键词 芩柏颗粒剂 溃疡性结肠炎 可溶性白介素-2受体 免疫球蛋白G
【文献标识码】B 【文章编号】 1726-7587(2003)11-1026-02
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis。UC)近几年在我国的发病逐渐增高 [1] ，其病因病机尚不完全清楚。UC病人存在着免疫异常，在免疫反应中前炎症因子和抗炎因子失衡也起着非常重要的作用 [2，3] 。芩柏颗粒剂治疗溃疡性结肠炎疗效显著 [4] ，本文观察芩柏颗粒剂治疗UC鼠后血清中sIL-2R表达和IgG含量的变化，探讨芩柏颗粒剂治疗UC的作用机理。
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1 材料与方法
1.1 材料 SD大鼠(由中南大学湘雅医学院动物学部提供)40只，雄性，体重200g左右。硫酸葡聚糖(dextran sulfate sodium，DSS)为Sigma公司产品。sIL-2R试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司，芩柏颗粒剂由湖南中医学院附二医院制备。
1.2 大鼠UC模型的建立 根据Okayaus方法造模 [5] 用3%DSS溶液给大鼠自由饮水，连续1周，其间肉眼观察腹泻与血便情况。
1.3 动物分组与处理 40只SD大鼠随机分成四组，每组 10只。正常组:以生理盐水2ml灌服，不食用DSS;模型组:饮用DSS溶液1周后，以生理盐水2ml灌服;芩柏颗粒剂治疗组:饮用DSS溶液1周后，按1.65g/kg剂量灌服(按体表面积折算)芩柏颗粒剂1次/日，每次2ml;柳氮磺胺吡啶(SASP)治疗组:饮用DSS溶液1周后，按0.27g/kg剂量灌服(按体表面积折算)SASP溶液，1次/日，每次2ml。4周后制取标本。
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1.4 标本制备 大鼠麻醉后，剪开胸腔，暴露心脏采血，低速离心，1500r/min，5min取血清，-75℃保存。
1.5 血清sIL-2R、IgG含量测定方法 用双抗体夹心ABC-ELISA法检测sIL-2R，IgG测定用美国Array360system全自动免疫分析仪进行。
1.6 统计学处理 sIL-2R、IgG含量的数据用均数±标准差表示，多组间比较用方差分析。
2 结果
造模后，各组sIL-2R、IgG较正常组显著上升(P<0.01)，用药治疗后，芩柏颗粒剂和SASP治疗组的sIL-2R表达和IgG含量较模型组显著减少(P<0.01)。芩柏颗粒剂治疗组与SASP治疗组比较，血清中sIL-2R表达和IgG含量差异有非常显著性(P<0.01)。见表1。
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表1 各组大鼠血清中sIL-2R、IgG的比较 (略)
3 分析
UC病人存在着免疫异常，在免疫反应中前炎症因子和抗炎因子失衡也起着非常重要的作用 [2，3] ，目前认为，本病的发生机理与T细胞免疫功能及免疫系统障碍因素有密切的关系。sIL-2R是活化的T细胞和其它的单核细胞分泌的IL-2受体的一种，可与IL-2结合参加IL-2的调节活动。当免疫反应发生时活化的T细胞增加，IL-2和IL-2受体也增加 [6，7] ，而抑制IL-2和IL-2受体的表达也可抑制T细胞增值[8] 。更多研究报道在慢性炎症性肠病的实验中发现sIL-2R的表达增加。本实验用DSS造模，UC大鼠血清中sIL-2R、IgG含量异常升高，说明UC的发病机制可可能存在由IL-2介导的T细胞免疫和IgG参与的体液免疫。
芩柏颗粒剂由黄芩、黄柏等药组成，具有“清热利湿、活血化瘀”之功效，治疗UC模型大鼠后能显著降低血清中sIL-2R的表达及IgG含量，疗效比单用SASP疗效更佳，揭示了芩柏颗粒剂治疗溃疡性结肠炎可能是通过抑制免疫异常反应而起作用。
, 百拇医药
参考文献
1 郑芝田.胃肠病学.北京:人民卫生出版社，1992，646-656.
2 McCabe RP，Dean P，Elson CO.Immunology of inflammatory bowel disˉease.Curr Opin Gastroenterol，1996，12(4):340-344.
3 Sartor RB.pathogenesis and immune mechanism of chronic inflammatory bowel disease.Am J Gastroenterol.
4 何永恒.复方芩柏颗粒剂治疗慢性结肠炎50例.辽宁中医杂志，1995，22(12):12.
5 Okayasu I，Hatakeyama S，Yamada M，et al.A novel method in the inˉduction
, 百拇医药
of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice.Gastroent
erology，1990，98(3):694-702.
6 Rubin LA，Kurman CC，Fritz ME，et al.Soluble interleukin2receptors are released from activated humen lymphoid cells in vitrol，1985，135(5):3172-3177.
7 Rubin LA，Jay G，Neison DL.The release interleukin2receptor binds interleu
kin2efficiently.Immunol，1986，137(12):3841-3844.
, http://www.100md.com
8 Stevens C，Lipman M，Fabry S，et al.5-ASA abrogates T-cell prolifˉeration
by blocking interleukin2production in peripheral blood mononuˉclear cells.J Pharmacol Exp Ther，1995，272:399-406.
基金项目:湖南省自然科学基金资助课题(编号:01-JJY2075)
作者单位:410005长沙湖南中医学院附属二医院
(收稿日期:2003-10-31)
(编辑 小川), http://www.100md.com(王真权)