测乙肝两对半两种方法比较
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-6424(2003)12-1129-02
各种检测乙肝两对半的方法，各有优缺点，此文介绍本室两种测定乙肝两对半的方法，同时寻求一种国家认证并质量可靠的测定乙肝两对半的方法。
1 材料和方法
1.1 血清/血浆乳胶层析法 产品编号:IHB-355(AˉCON)，ACONL ABORTOES，Inc，sanDlego，CA92/21、USA，编号RO15995-02，储存于室湿4～30℃(40～86°F)
1.2 立可读R○酶联免疫法 体外用诊断试剂，上海实业科毕生物技术有限公司，(沪卫G-96)卫药生证。(此法需有37℃干恒温箱、洗板机、读板机、电脑、打印机设备)字第04号(91)卫药准字(沪实S-02号)
, http://www.100md.com
1.3 检测对象 2003年大学新生6000人;离、退休人员1070人，共有7070人。
1.4 检测方法 (1)乳胶层析法:抽被检人静脉血3ml入试管放入37℃恒温水箱内30min后取出分离血清(先将板块备好)，用板块内塑料小吸管吸取血清，分别将血清滴入板块上的5个孔内(需4～5滴)，让其血清渗透延至层析反应条上呈现一条红色条带为阴性;析出两条红色条带为阳性。而HBeAb、HBcAb析出两条红色带为阴性，仅析出一条红色条带为阳性。
(2)酶联免疫法:分离血清步骤同前。先将反应板上分别标明5种，如HBsAg等，以96人份为例，横式排序，共12排，最前两个孔为空白对照、3～4孔为阴性对照，5～6孔为空白对照。分别在5个板块上加入标本(第7孔开始按序号，每人一个滴头，不能通用)一直加到96孔(每人标本加入50ml)，直加到96孔(实际可做90人，成本4元)加完血清后加酶底物，每孔加一滴(空白不加)，然后在微振荡机上混匀1～2min后，将封条纸封好板块放入37℃干恒温箱内30min后取出，打开封条纸放入洗板机内洗涤5次(洗涤液试剂盒内按比例配制)，取出分别加入A、B显色剂各一滴，又放入37℃干恒温箱内20min，取出后加入终止液一滴，此时凡是阳性者均变成黄色，在5～15min之内将反应板放入读板机内读板(但事先必须在电脑上建立工作单，如姓名、性别、年龄、序号、空白、阴性阳性对照，设置好后保存)，在读板时再打开工作单方能读板，最后打印，如需修正时先在电脑上修正，才能打印;打印可以单项打印也可以综合报告打印。
, 百拇医药
2 结果
2003年新生和离、退休人员7070人员中，(学生18～22岁;离、退休人员55～94岁)，检出乙肝两对半一项和三项阳性的人员共有3311人，占46.83%;现将两种方法测定乙肝两对半的结果列表如下。表1 酶联免疫法测定结果
3 讨论
酶联免疫法是国家认证的并且国内多数大医院所采用的乙肝两对半测定的特种方法。但必须必备试剂盒的质量保证，此法有阴性、阳性对照试剂，有电脑配套，可单项测定报告也可以5项同时测定打成综合报告，而且成本低，唯一不足(本室经验)的是即时肉眼观看反应板上仅显极微极微的黄色，而电脑上打成阳性结果，所以要认真细看，在电脑上要加以修正方能打印，以求质量的准确性;而乳胶层析法，操作简便，也不会出现可凝或弱阳性类似情况，阴就是阴、阳就是阳，此法在高等院校新生体检中是十分适用的(就云南省高等院校医院仅云南大学医院才有酶联免疫法测定乙肝两对半的设备)。
(收稿日期:2003-11-03)
作者单位:650091云南大学校医院
(编辑一 坤), 百拇医药(罗兴福)
各种检测乙肝两对半的方法，各有优缺点，此文介绍本室两种测定乙肝两对半的方法，同时寻求一种国家认证并质量可靠的测定乙肝两对半的方法。
1 材料和方法
1.1 血清/血浆乳胶层析法 产品编号:IHB-355(AˉCON)，ACONL ABORTOES，Inc，sanDlego，CA92/21、USA，编号RO15995-02，储存于室湿4～30℃(40～86°F)
1.2 立可读R○酶联免疫法 体外用诊断试剂，上海实业科毕生物技术有限公司，(沪卫G-96)卫药生证。(此法需有37℃干恒温箱、洗板机、读板机、电脑、打印机设备)字第04号(91)卫药准字(沪实S-02号)
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1.3 检测对象 2003年大学新生6000人;离、退休人员1070人，共有7070人。
1.4 检测方法 (1)乳胶层析法:抽被检人静脉血3ml入试管放入37℃恒温水箱内30min后取出分离血清(先将板块备好)，用板块内塑料小吸管吸取血清，分别将血清滴入板块上的5个孔内(需4～5滴)，让其血清渗透延至层析反应条上呈现一条红色条带为阴性;析出两条红色条带为阳性。而HBeAb、HBcAb析出两条红色带为阴性，仅析出一条红色条带为阳性。
(2)酶联免疫法:分离血清步骤同前。先将反应板上分别标明5种，如HBsAg等，以96人份为例，横式排序，共12排，最前两个孔为空白对照、3～4孔为阴性对照，5～6孔为空白对照。分别在5个板块上加入标本(第7孔开始按序号，每人一个滴头，不能通用)一直加到96孔(每人标本加入50ml)，直加到96孔(实际可做90人，成本4元)加完血清后加酶底物，每孔加一滴(空白不加)，然后在微振荡机上混匀1～2min后，将封条纸封好板块放入37℃干恒温箱内30min后取出，打开封条纸放入洗板机内洗涤5次(洗涤液试剂盒内按比例配制)，取出分别加入A、B显色剂各一滴，又放入37℃干恒温箱内20min，取出后加入终止液一滴，此时凡是阳性者均变成黄色，在5～15min之内将反应板放入读板机内读板(但事先必须在电脑上建立工作单，如姓名、性别、年龄、序号、空白、阴性阳性对照，设置好后保存)，在读板时再打开工作单方能读板，最后打印，如需修正时先在电脑上修正，才能打印;打印可以单项打印也可以综合报告打印。
, 百拇医药
2 结果
2003年新生和离、退休人员7070人员中，(学生18～22岁;离、退休人员55～94岁)，检出乙肝两对半一项和三项阳性的人员共有3311人，占46.83%;现将两种方法测定乙肝两对半的结果列表如下。表1 酶联免疫法测定结果
3 讨论
酶联免疫法是国家认证的并且国内多数大医院所采用的乙肝两对半测定的特种方法。但必须必备试剂盒的质量保证，此法有阴性、阳性对照试剂，有电脑配套，可单项测定报告也可以5项同时测定打成综合报告，而且成本低，唯一不足(本室经验)的是即时肉眼观看反应板上仅显极微极微的黄色，而电脑上打成阳性结果，所以要认真细看，在电脑上要加以修正方能打印，以求质量的准确性;而乳胶层析法，操作简便，也不会出现可凝或弱阳性类似情况，阴就是阴、阳就是阳，此法在高等院校新生体检中是十分适用的(就云南省高等院校医院仅云南大学医院才有酶联免疫法测定乙肝两对半的设备)。
(收稿日期:2003-11-03)
作者单位:650091云南大学校医院
(编辑一 坤), 百拇医药(罗兴福)