妊娠妇女TORCH酶联免疫法筛查及产前诊断
【摘要】 目的 了解本地区孕期妇女感染TORCH现状、宫内传播情况及探讨产前诊断方法。方法 应用酶联免疫法检测44019例孕5～34周孕妇血清风疹、巨细胞、单纯疱疹Ⅱ、B19病毒与弓形虫IgM，确诊阳性者于孕23周后行腹脐静脉穿刺术采胎血对应TORCH IgM+荧光定量PCR产前诊断;产前诊断结果阳性者，建议终止妊娠，引产胎儿病检;阴性者继续妊娠，产后复查相应TORCH IgM及随访新生儿生长发育。结果 风疹病毒孕母感染率1.7%(748/44019)，产前诊断阳性率5.13%(14/273);巨细胞病毒孕母感染率1.8%(792/44019)，186例产前诊断无一例阳性;弓形虫孕母感染率0.85%(374/44019)，产前诊断阳性率0.95%(2/210);单纯疱疹病毒Ⅱ孕母感染率2.6%(230/8868)47例接受产前诊断胎儿无一例阳性;B19病毒孕母感染率3.0%(271/9032)，33例接受产前诊断者2例阳性，产前诊断阳性率6.1%;全体TORCH产前诊断阴性胎儿产后复查均阴性，除失访者，新生儿均健康成长。结论 孕期母体TORCH病原体感染可导致胎儿宫内感染，是新生儿先天缺陷的重要原因，但可通过腹脐静脉穿刺术获得正确的产前诊断结果，从而避免盲目终止妊娠。
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关键词 妊娠期 TORCH(风疹、巨细胞、单纯疱疹Ⅱ、B19病毒、弓形虫)感染 产前诊断
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2003)11-1687-02
孕期TORCH感染可引起胎儿流产、死胎，但如其胎儿存活、产前B超又没有阳性指征，其胎儿先天感染———TORCH综合征发生率是多少?本研究正是针对这一问题展开。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 仪器应用伯乐公司550型酶标仪、1575型微孔洗板仪行TORCH-IgM、IgG检测;伯乐公司高效液相血红蛋白分析仪行胎血鉴定;应用5700荧光定量PCR仪行TORCH病原体定量RNA-PCR检测。
试剂选用美国CLAPK原装进口风疹IgM和IgG，巨细胞IgM和IgG，单纯疱疹IgM和IgG，B19病毒IgM和IgG，弓形虫IgM和IgG;以及中国达安公司提供TORCH病原体定量RNA-PCR检测。
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1.2 病例资料与方法 收集1990年6月～2003年6月在我院就诊44019例孕5～34周孕妇静脉血，分离血清于-20℃保存，1周内检测。阳性或可疑者于1周后～2周复查相应TORCH IgM与IgG，仍为阳性则确诊。约孕23周左右行腹脐静脉穿刺术采胎血并经鉴定为纯胎血后，检测对应TORCH IgM+PCR产前诊断，其中弓形虫IgG和IgM行TORCH酶联免疫法检测，其中胎血检测时稀释度较成人浓缩10倍。产前诊断结果阳性者，建议胎儿引产并送病检。阴性者彩色B超排除胎儿结构异常及产后留脐血复查相应TORCH-IgM及出生后随访6～24个月。
2 结果
2.1 风疹病毒 44019例孕5～34周孕妇血清中检出748例阳性，占受检人数1.7%，其中273例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后查风疹IgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，14例阳性，占受检人数5.13%，这14例产前诊断结果阳性者12例引产，6例同意尸解，尸检2例心脏分别为房间隔及室间隔缺损，2例双眼白内障伴肾动脉硬化，1例轻度脑积水，1例脑炎、脑膜炎;另6例没有解剖者外观未见畸形;而未终止妊娠2例孕妇，1例孕36周早产并出现抽搐等神经系统症状，另1例足月顺产，随访发现婴儿右耳听力障碍，两者产后脐血复查风疹IgM均为阳性;其余259例产前诊断阴性者，均为足月顺产，新生儿未见异常，产后复查风疹IgM均为阴性。193例随访婴儿生长发育良好，66例失访。
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2.2 巨细胞病毒 44019例孕5～34周孕妇血清中检出792例阳性，占受检人数1.8%，其中190例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后查巨细胞病毒IgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，无一例阳性，产后复查脐血巨细胞病毒IgM均为阴性，均为足月顺产，新生儿未见异常，147例随访婴儿生长发育良好，43例失访。
2.3 单纯疱疹病毒Ⅱ 8868例孕5～34周孕妇血清中检出230例阳性，占受检人数2.6%，其中50例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后单纯疱疹病毒ⅡIgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，无一例阳性，产后复查脐血单纯疱疹病毒ⅡIgM均为阴性，均为足月顺产，新生儿未见异常，44例随访婴儿生长发育良好，6例失访。
2.4 B19病毒 9032例孕5～34周孕妇血清中检出271例阳性，占受检人数3.0%，其中33例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后查B19病毒IgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，2例阳性，占受检人数6.1%，这2例产前诊断结果阳性者彩色B超和引产尸解均见胎儿心、肝、脾肿大。其余31例产前诊断阴性者，均为足月顺产，新生儿未见异常，产后复查B19病毒IgM均阴性，27例随访婴儿生长发育良好，4例失访。
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2.5 弓形虫 44019例孕5～34周孕妇血清中检出374例阳性，占受检人数0.85%，其中210例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后查弓形虫IgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，2例阳性，占受检人数0.95%，这2例产前诊断结果阳性者同意引产和尸解，1例见室间隔缺损畸形、脑炎，另1例尿道下裂伴脑轻度积水，两者引产后脐血复查弓形虫IgM均为阳性;其余208例产前诊断阴性者，均为足月顺产，新生儿未见异常，产后复查弓形虫IgM均阴性，176例随访婴儿生长发育良好，32例失访。
3 讨论
3.1 关于TORCH宫内感染检测 早在1977年意大利 Scalise等就提出应用新生儿脐血检测TORCH-IgM诊断新生儿先天TORCH宫内感染 [1] ，脐血IgM>20mg/dl可作为TORCH宫内感染初筛指标，进一步再做特异TORCH-IgM检测;之后1990年Boulot等应用腹脐静脉穿刺术取胎儿脐血行TORCH宫内感染产前诊断 [2] ，但只测TORCH-IgM会漏诊，而只测TORCH-RNA-PCR也存在假阳性或漏诊 [3] ，所以本研究设计为取胎血同时检测TORCH-IgM与RNA-PCR及在术后B超检查、产后复查与出生后随访。当然，若条件许可所取胎血行TORCH病原体培养，其产前诊断结果将更准确 [3] 。
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3.2 巨细胞、单纯疱疹Ⅱ病毒宫内感染情况 本研究中巨细胞、单纯疱疹Ⅱ病毒孕期感染孕妇其胎儿无一例宫内感染，估计与孕妇为继发感染有关。Raynor [4] 等报道孕期巨细胞病毒为继发感染者，其胎儿受感染可能只有0.2%～1%，而一般只有1.47%孕妇为原发感染 [3] 。单纯疱疹如为母体无症状多为继发感染，主要是通过产道感染新生儿 [5] 。但要明确是否继发感染，须了解病史及孕前检查TORCH-IgG。
3.3 B19病毒宫内感染检测 也有学者提出应用B超检测胎儿大脑中动脉血流，作为B19病毒宫内感染及贫血严重和胎儿宫内输血疗效指标 [6] ，本报告中2例B19病毒宫内感染者产前B超也提示胎儿有水肿综合征表现。
本研究结果提示，孕期TORCH感染孕妇其垂直感染率均少于6.5%，可于孕23周左右行产前诊断排除胎儿宫内感染，无须盲目终止妊娠;而孕前TORCH-IgG检查和孕后TORCH-IgM筛查是必要的。
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参考文献
1 Scalise G，Mura MS，Asara G，et al.Concentration of the IgM and antiˉbodies for the TORCH complex in the umbilical blood.Ann Sclavo，1977，19(5):943-950.
2 Boulot P，Deschamps F，Lefort G，et al.Pure fetal blood samples obˉtained by cordocentesis:technical aspects of322case.Prenat Diagn，1990，10(2):93-100.
3 Ruellan-Eugene G，Barjot P，Compet M，et al.Evaluation of virological procedures to detect fetal human cytomegalovirus infection:avidity of IgG antibody，virus detection in amniotic fluid and maternal serum.J Med Virol，1996，50(1):9-15.
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4 Raynor BD.Cytomegalovirus infection in pregnancy.Semin Perinatol，1993，17(6):394-402.
5 Morand P.Natural history of HSV1and HSV2infection.Asymptomatic viral excretion.Mother-infant transmission.Indirect transmission.Ann Dermatol Venereol，2002，129(4Pt2):577-585.
6 Cosmi E，Mari G，Delle Chiae L，et al.Noninvasive diagnosis by Doppler ultrasonography of fetal anemia resulting from parvovirus infection.Am J ObstetGyn
ecol，2002，187(5):1290-1293.
作者单位:510180广东省广州市妇婴医院研究所
(编辑 李阳), 百拇医药(钟燕芳)
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关键词 妊娠期 TORCH(风疹、巨细胞、单纯疱疹Ⅱ、B19病毒、弓形虫)感染 产前诊断
【文献标识码】 B 【文章编号】 1606-8106(2003)11-1687-02
孕期TORCH感染可引起胎儿流产、死胎，但如其胎儿存活、产前B超又没有阳性指征，其胎儿先天感染———TORCH综合征发生率是多少?本研究正是针对这一问题展开。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 仪器应用伯乐公司550型酶标仪、1575型微孔洗板仪行TORCH-IgM、IgG检测;伯乐公司高效液相血红蛋白分析仪行胎血鉴定;应用5700荧光定量PCR仪行TORCH病原体定量RNA-PCR检测。
试剂选用美国CLAPK原装进口风疹IgM和IgG，巨细胞IgM和IgG，单纯疱疹IgM和IgG，B19病毒IgM和IgG，弓形虫IgM和IgG;以及中国达安公司提供TORCH病原体定量RNA-PCR检测。
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1.2 病例资料与方法 收集1990年6月～2003年6月在我院就诊44019例孕5～34周孕妇静脉血，分离血清于-20℃保存，1周内检测。阳性或可疑者于1周后～2周复查相应TORCH IgM与IgG，仍为阳性则确诊。约孕23周左右行腹脐静脉穿刺术采胎血并经鉴定为纯胎血后，检测对应TORCH IgM+PCR产前诊断，其中弓形虫IgG和IgM行TORCH酶联免疫法检测，其中胎血检测时稀释度较成人浓缩10倍。产前诊断结果阳性者，建议胎儿引产并送病检。阴性者彩色B超排除胎儿结构异常及产后留脐血复查相应TORCH-IgM及出生后随访6～24个月。
2 结果
2.1 风疹病毒 44019例孕5～34周孕妇血清中检出748例阳性，占受检人数1.7%，其中273例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后查风疹IgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，14例阳性，占受检人数5.13%，这14例产前诊断结果阳性者12例引产，6例同意尸解，尸检2例心脏分别为房间隔及室间隔缺损，2例双眼白内障伴肾动脉硬化，1例轻度脑积水，1例脑炎、脑膜炎;另6例没有解剖者外观未见畸形;而未终止妊娠2例孕妇，1例孕36周早产并出现抽搐等神经系统症状，另1例足月顺产，随访发现婴儿右耳听力障碍，两者产后脐血复查风疹IgM均为阳性;其余259例产前诊断阴性者，均为足月顺产，新生儿未见异常，产后复查风疹IgM均为阴性。193例随访婴儿生长发育良好，66例失访。
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2.2 巨细胞病毒 44019例孕5～34周孕妇血清中检出792例阳性，占受检人数1.8%，其中190例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后查巨细胞病毒IgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，无一例阳性，产后复查脐血巨细胞病毒IgM均为阴性，均为足月顺产，新生儿未见异常，147例随访婴儿生长发育良好，43例失访。
2.3 单纯疱疹病毒Ⅱ 8868例孕5～34周孕妇血清中检出230例阳性，占受检人数2.6%，其中50例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后单纯疱疹病毒ⅡIgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，无一例阳性，产后复查脐血单纯疱疹病毒ⅡIgM均为阴性，均为足月顺产，新生儿未见异常，44例随访婴儿生长发育良好，6例失访。
2.4 B19病毒 9032例孕5～34周孕妇血清中检出271例阳性，占受检人数3.0%，其中33例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后查B19病毒IgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，2例阳性，占受检人数6.1%，这2例产前诊断结果阳性者彩色B超和引产尸解均见胎儿心、肝、脾肿大。其余31例产前诊断阴性者，均为足月顺产，新生儿未见异常，产后复查B19病毒IgM均阴性，27例随访婴儿生长发育良好，4例失访。
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2.5 弓形虫 44019例孕5～34周孕妇血清中检出374例阳性，占受检人数0.85%，其中210例接受腹脐静脉穿刺术采胎血，经胎血鉴定后查弓形虫IgM与定量FQ-RNA-PCR产前诊断，2例阳性，占受检人数0.95%，这2例产前诊断结果阳性者同意引产和尸解，1例见室间隔缺损畸形、脑炎，另1例尿道下裂伴脑轻度积水，两者引产后脐血复查弓形虫IgM均为阳性;其余208例产前诊断阴性者，均为足月顺产，新生儿未见异常，产后复查弓形虫IgM均阴性，176例随访婴儿生长发育良好，32例失访。
3 讨论
3.1 关于TORCH宫内感染检测 早在1977年意大利 Scalise等就提出应用新生儿脐血检测TORCH-IgM诊断新生儿先天TORCH宫内感染 [1] ，脐血IgM>20mg/dl可作为TORCH宫内感染初筛指标，进一步再做特异TORCH-IgM检测;之后1990年Boulot等应用腹脐静脉穿刺术取胎儿脐血行TORCH宫内感染产前诊断 [2] ，但只测TORCH-IgM会漏诊，而只测TORCH-RNA-PCR也存在假阳性或漏诊 [3] ，所以本研究设计为取胎血同时检测TORCH-IgM与RNA-PCR及在术后B超检查、产后复查与出生后随访。当然，若条件许可所取胎血行TORCH病原体培养，其产前诊断结果将更准确 [3] 。
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3.2 巨细胞、单纯疱疹Ⅱ病毒宫内感染情况 本研究中巨细胞、单纯疱疹Ⅱ病毒孕期感染孕妇其胎儿无一例宫内感染，估计与孕妇为继发感染有关。Raynor [4] 等报道孕期巨细胞病毒为继发感染者，其胎儿受感染可能只有0.2%～1%，而一般只有1.47%孕妇为原发感染 [3] 。单纯疱疹如为母体无症状多为继发感染，主要是通过产道感染新生儿 [5] 。但要明确是否继发感染，须了解病史及孕前检查TORCH-IgG。
3.3 B19病毒宫内感染检测 也有学者提出应用B超检测胎儿大脑中动脉血流，作为B19病毒宫内感染及贫血严重和胎儿宫内输血疗效指标 [6] ，本报告中2例B19病毒宫内感染者产前B超也提示胎儿有水肿综合征表现。
本研究结果提示，孕期TORCH感染孕妇其垂直感染率均少于6.5%，可于孕23周左右行产前诊断排除胎儿宫内感染，无须盲目终止妊娠;而孕前TORCH-IgG检查和孕后TORCH-IgM筛查是必要的。
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参考文献
1 Scalise G，Mura MS，Asara G，et al.Concentration of the IgM and antiˉbodies for the TORCH complex in the umbilical blood.Ann Sclavo，1977，19(5):943-950.
2 Boulot P，Deschamps F，Lefort G，et al.Pure fetal blood samples obˉtained by cordocentesis:technical aspects of322case.Prenat Diagn，1990，10(2):93-100.
3 Ruellan-Eugene G，Barjot P，Compet M，et al.Evaluation of virological procedures to detect fetal human cytomegalovirus infection:avidity of IgG antibody，virus detection in amniotic fluid and maternal serum.J Med Virol，1996，50(1):9-15.
, 百拇医药
4 Raynor BD.Cytomegalovirus infection in pregnancy.Semin Perinatol，1993，17(6):394-402.
5 Morand P.Natural history of HSV1and HSV2infection.Asymptomatic viral excretion.Mother-infant transmission.Indirect transmission.Ann Dermatol Venereol，2002，129(4Pt2):577-585.
6 Cosmi E，Mari G，Delle Chiae L，et al.Noninvasive diagnosis by Doppler ultrasonography of fetal anemia resulting from parvovirus infection.Am J ObstetGyn
ecol，2002，187(5):1290-1293.
作者单位:510180广东省广州市妇婴医院研究所
(编辑 李阳), 百拇医药(钟燕芳)