一阶导数紫外分光光度法测定御苁蓉口服液中苯乙醇苷类成分的含量
【摘要】 目的 采用一阶导数紫外分光光度法测定御苁蓉口服液中苯乙醇苷类成分的含量。方法 用AB-8大孔吸附树脂分离口服液中的苯乙醇总苷，然后用一阶导数紫外分光光度法测定。结果 测定平均回收率为99.2%，RSD=1.02%(n=4)。结论 本法简便，可以用于御苁蓉口服液的质量标准。
关键词 御苁蓉口服液 肉苁蓉 苯乙醇总苷 紫外分光光度法
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)15-2281-02
Determination of phenylethanoid glycosides in yu congrong
oral liquid by first derviative spectrophotometry
Tuerhong·Aximu，Wang Yongqiang，Zhang Xuan，et al.
, http://www.100md.com
College of Pharmacy，Xinjiang Medical University，Xinjiang830000.
【Abstract】 Objective To determine contents of yu congrong oral liquid by spectrophotometry.Methods Phenylthanoid glycosides were isolated from oral liquidby AB-8macro void resin，then，were determined by first derivative spectroscopy.Results The average recovery of assay was99.2%，with RSD=1.02%(n=4).Conclusion The method were simple，accurate，and could be used in the quality standard ofyu congrong oral liquid.
, 百拇医药
Key words yu congrong oral liquid cistanchis herba phenylethanoid glycosides spectrophotometric
御苁蓉口服液是由肉苁蓉、甘草、黄芪、菟丝子、锁阳等中药组成的制剂，其中肉苁蓉为主要成分，本制剂由北京第四制药厂生产，具有补肾、滋阴、扶正固本的功效，是集调、补、治为一体的天然保健品。本文首次建立了制剂主要成分肉苁蓉中所含苯乙醇苷类成分的定量方法，该法能消除空白液的干扰，测定值稳定。文献指出，苯乙醇苷类成分具有增强大脑记忆功能和助阳等多方面作用，所以对本品中苯乙醇苷类的量化研究，基本上能反映该口服液品质的优劣和真伪问题。
1 仪器与实验材料
紫外分光光度计，岛津UV-2501PC型。大孔吸附树脂，AB-8型，天津南开大学化工产品。御苁蓉口服液及空白对照液由北京第四制药厂提供，批号:971201、971202、971203、971204、971205。松果菊苷为本院天然药化教研室自制，光谱数据符合文献值 [1] 。其余试剂均为分析纯。
, http://www.100md.com
2 方法与结果
2.1 一阶导数光谱的绘制
2.1.1 口服液测定液的制备 精密吸取御苁蓉口服液10.0ml，用水饱和的乙酸乙酯萃取3次(10ml×3)，水层再用水饱和的正丁醇萃取3次(10ml×3)，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇，稠膏以数毫升蒸馏水溶解，并定量转移至装有15ml大孔树脂柱的顶端(树脂预先用丙酮回流处理，用水洗净杂质后湿法装柱)依次用50ml水、50ml甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部分，并定容至50ml，摇匀，制得备用液。再吸取0.5ml备用液，甲醇定容至25ml，摇匀，制得测定液 [2] 。
2.1.2 御苁蓉口服液中缺肉苁蓉空白测定液的制备 方法同上。
2.1.3 对照品溶液的制备 精密称取松果菊苷3.8mg，置于25ml容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，摇匀。再吸取0.5ml，用甲醇定容至25ml，摇匀，备用。
, 百拇医药
2.1.4 一阶导数光谱的绘制 分别对上述各溶液进行紫外扫描，结果发现空白液有少量的吸收，但空白液的谱线近似为线性，可通过求导将线性项转化为常数项;或者空白液的一阶导数与基线相交，且交点处样品有较大振幅时，使可应用导数光谱来消除干扰，直接测定。分别取一定浓度的样品液、空白液、对照品液，在260～400nm波长范围内(波长间隔Δλ=4、狭缝宽度1.0nm)，快速扫描，绘制一阶导数光谱图，结果见图1。
图1 御苁蓉口服液一阶导数光谱图1)两种浓度的样品液;2)松果菊苷对照液;3)空白对照液从图1可知，在波长352.20nm处，空白对照液的曲线与基线相交，且此处口服液的曲线也有较大振幅(近峰谷处)，故可选择352.20nm处作为测定波长。以谷-零之间振幅值，测定苯乙醇苷类成分的含量。
2.2 标准曲线制备 精密称取松果菊苷对照品20mg置于50ml容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，摇匀，备用。分别吸取备用液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0ml，置于25ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。以甲醇为空白溶液，在352.20nm处，分别测定不同浓度松果菊苷的一阶导数光谱，读出谷-零之间的振幅值，结果见表1。
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表1 浓度与振幅值关系表 注:D =|dA/dλ|×10 3
表1经回归处理，得回归方程C(μg/ml)=1.084D+0.1404(r=0.9994)，松果菊苷甲醇液浓度在3.2～32.0μg/ml范围内，与振幅值呈良好的线性关系。
2.3 精密度与稳定性考察 精密吸取御苁蓉口服液(批号为971205)五份，10ml，按口服液制备项下操作，制得的测定液在352.20nm处测定一阶导数的振幅值，结果分别为9.715，9.682，9.531，9.575，9.645，RSD=0.78%。
2.4 回收率测定 精密吸取口服液(批号为971205)5.0ml，置于50ml容量瓶中加蒸馏水至刻度，摇匀，备用。吸取备用液5.0ml(共四份)，分别加入松果菊苷1.5mg，用水饱和的乙酸乙酯2ml脱脂1次，再用水饱和的正丁醇萃取3次(5ml×3)，合并正丁醇萃取液，减压回收至稠膏状，用少量水溶解，并定量转移至装有15ml大孔树脂柱的顶端，用10～15ml蒸馏水洗涤，然后用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，并定容至50ml，摇匀。再从中吸取2ml置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。以甲醇为空白，在352.20nm处，测定一阶导数振幅值，代入标准曲线求得浓度，再乘以稀释倍数，求出回收率，结果4次测定的平均回收率为99.2%，RSD=1.02%(n=4)。
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2.5 不同批号样品测定 分别吸取五个批号的样品各10.0ml，按口服液测定制备项下操作，在352.20nm处测定振幅值，结果见表2。
表2 不同批号样品的含量测定 (ˉx±s，n=5)
3 讨论
御苁蓉口服液中肉苁蓉的配方比占80%，目前测定肉苁蓉中有效成分的方法通常应用HPLC法，但HPLC法只适宜测定某一成分的含量，不宜测定某一大类成分的含量。肉苁蓉中苯乙醇苷类成分结构相似，具有共同的最大吸收波长，故可用紫外分光光度法测定总苷。
从表2可看出，不同批号的御苁蓉口服液，苯乙醇苷的含量有所不同，其主要原因是由于肉苁蓉中苯乙醇苷类的含量与品种、产地有较大的关系。一般来说，管花肉苁蓉比荒漠肉苁蓉和盐生肉苁蓉的含量高，同一品种中，内蒙和新疆产的比其它地方产的药材含量高。
, 百拇医药
参考文献
1 H.Kobayashi，et al.Studies on the Constituents of Cistanchis HerbⅢ，Chem.Phram.Bull，1984，32:3009.
2 堵年生，刘俊岭.大孔吸附树脂—紫外分光光度法测定肉苁蓉中苯乙醇甙类的含量.天然产物研究与开发，1993，5(3):30.
作者单位:1830000新疆维吾尔医医院药剂科
2新疆医科大学药学院
(编辑小 川), http://www.100md.com(吐尔洪·阿西木)
关键词 御苁蓉口服液 肉苁蓉 苯乙醇总苷 紫外分光光度法
【文献标识码】 A 【文章编号】 1606-8106(2003)15-2281-02
Determination of phenylethanoid glycosides in yu congrong
oral liquid by first derviative spectrophotometry
Tuerhong·Aximu，Wang Yongqiang，Zhang Xuan，et al.
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College of Pharmacy，Xinjiang Medical University，Xinjiang830000.
【Abstract】 Objective To determine contents of yu congrong oral liquid by spectrophotometry.Methods Phenylthanoid glycosides were isolated from oral liquidby AB-8macro void resin，then，were determined by first derivative spectroscopy.Results The average recovery of assay was99.2%，with RSD=1.02%(n=4).Conclusion The method were simple，accurate，and could be used in the quality standard ofyu congrong oral liquid.
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Key words yu congrong oral liquid cistanchis herba phenylethanoid glycosides spectrophotometric
御苁蓉口服液是由肉苁蓉、甘草、黄芪、菟丝子、锁阳等中药组成的制剂，其中肉苁蓉为主要成分，本制剂由北京第四制药厂生产，具有补肾、滋阴、扶正固本的功效，是集调、补、治为一体的天然保健品。本文首次建立了制剂主要成分肉苁蓉中所含苯乙醇苷类成分的定量方法，该法能消除空白液的干扰，测定值稳定。文献指出，苯乙醇苷类成分具有增强大脑记忆功能和助阳等多方面作用，所以对本品中苯乙醇苷类的量化研究，基本上能反映该口服液品质的优劣和真伪问题。
1 仪器与实验材料
紫外分光光度计，岛津UV-2501PC型。大孔吸附树脂，AB-8型，天津南开大学化工产品。御苁蓉口服液及空白对照液由北京第四制药厂提供，批号:971201、971202、971203、971204、971205。松果菊苷为本院天然药化教研室自制，光谱数据符合文献值 [1] 。其余试剂均为分析纯。
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2 方法与结果
2.1 一阶导数光谱的绘制
2.1.1 口服液测定液的制备 精密吸取御苁蓉口服液10.0ml，用水饱和的乙酸乙酯萃取3次(10ml×3)，水层再用水饱和的正丁醇萃取3次(10ml×3)，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇，稠膏以数毫升蒸馏水溶解，并定量转移至装有15ml大孔树脂柱的顶端(树脂预先用丙酮回流处理，用水洗净杂质后湿法装柱)依次用50ml水、50ml甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部分，并定容至50ml，摇匀，制得备用液。再吸取0.5ml备用液，甲醇定容至25ml，摇匀，制得测定液 [2] 。
2.1.2 御苁蓉口服液中缺肉苁蓉空白测定液的制备 方法同上。
2.1.3 对照品溶液的制备 精密称取松果菊苷3.8mg，置于25ml容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，摇匀。再吸取0.5ml，用甲醇定容至25ml，摇匀，备用。
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2.1.4 一阶导数光谱的绘制 分别对上述各溶液进行紫外扫描，结果发现空白液有少量的吸收，但空白液的谱线近似为线性，可通过求导将线性项转化为常数项;或者空白液的一阶导数与基线相交，且交点处样品有较大振幅时，使可应用导数光谱来消除干扰，直接测定。分别取一定浓度的样品液、空白液、对照品液，在260～400nm波长范围内(波长间隔Δλ=4、狭缝宽度1.0nm)，快速扫描，绘制一阶导数光谱图，结果见图1。
图1 御苁蓉口服液一阶导数光谱图1)两种浓度的样品液;2)松果菊苷对照液;3)空白对照液从图1可知，在波长352.20nm处，空白对照液的曲线与基线相交，且此处口服液的曲线也有较大振幅(近峰谷处)，故可选择352.20nm处作为测定波长。以谷-零之间振幅值，测定苯乙醇苷类成分的含量。
2.2 标准曲线制备 精密称取松果菊苷对照品20mg置于50ml容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，摇匀，备用。分别吸取备用液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0ml，置于25ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。以甲醇为空白溶液，在352.20nm处，分别测定不同浓度松果菊苷的一阶导数光谱，读出谷-零之间的振幅值，结果见表1。
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表1 浓度与振幅值关系表 注:D =|dA/dλ|×10 3
表1经回归处理，得回归方程C(μg/ml)=1.084D+0.1404(r=0.9994)，松果菊苷甲醇液浓度在3.2～32.0μg/ml范围内，与振幅值呈良好的线性关系。
2.3 精密度与稳定性考察 精密吸取御苁蓉口服液(批号为971205)五份，10ml，按口服液制备项下操作，制得的测定液在352.20nm处测定一阶导数的振幅值，结果分别为9.715，9.682，9.531，9.575，9.645，RSD=0.78%。
2.4 回收率测定 精密吸取口服液(批号为971205)5.0ml，置于50ml容量瓶中加蒸馏水至刻度，摇匀，备用。吸取备用液5.0ml(共四份)，分别加入松果菊苷1.5mg，用水饱和的乙酸乙酯2ml脱脂1次，再用水饱和的正丁醇萃取3次(5ml×3)，合并正丁醇萃取液，减压回收至稠膏状，用少量水溶解，并定量转移至装有15ml大孔树脂柱的顶端，用10～15ml蒸馏水洗涤，然后用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，并定容至50ml，摇匀。再从中吸取2ml置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。以甲醇为空白，在352.20nm处，测定一阶导数振幅值，代入标准曲线求得浓度，再乘以稀释倍数，求出回收率，结果4次测定的平均回收率为99.2%，RSD=1.02%(n=4)。
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2.5 不同批号样品测定 分别吸取五个批号的样品各10.0ml，按口服液测定制备项下操作，在352.20nm处测定振幅值，结果见表2。
表2 不同批号样品的含量测定 (ˉx±s，n=5)
3 讨论
御苁蓉口服液中肉苁蓉的配方比占80%，目前测定肉苁蓉中有效成分的方法通常应用HPLC法，但HPLC法只适宜测定某一成分的含量，不宜测定某一大类成分的含量。肉苁蓉中苯乙醇苷类成分结构相似，具有共同的最大吸收波长，故可用紫外分光光度法测定总苷。
从表2可看出，不同批号的御苁蓉口服液，苯乙醇苷的含量有所不同，其主要原因是由于肉苁蓉中苯乙醇苷类的含量与品种、产地有较大的关系。一般来说，管花肉苁蓉比荒漠肉苁蓉和盐生肉苁蓉的含量高，同一品种中，内蒙和新疆产的比其它地方产的药材含量高。
, 百拇医药
参考文献
1 H.Kobayashi，et al.Studies on the Constituents of Cistanchis HerbⅢ，Chem.Phram.Bull，1984，32:3009.
2 堵年生，刘俊岭.大孔吸附树脂—紫外分光光度法测定肉苁蓉中苯乙醇甙类的含量.天然产物研究与开发，1993，5(3):30.
作者单位:1830000新疆维吾尔医医院药剂科
2新疆医科大学药学院
(编辑小 川), http://www.100md.com(吐尔洪·阿西木)