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编号:10402303
羊水中解脲支原体和沙眼衣原体感染及对母婴的影响
http://www.100md.com 中华医学研究杂志 2003年4月 第3卷 第4期
     【摘要】 目的 探讨羊水中解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)的感染情况及对母婴造成的影响。方法 应用聚合酶链式反应技术(PCR)检测126例剖宫产分娩产妇羊水中UU、CT感染。结果 126例剖宫产产妇羊水中检测出UU阳性7例,占5.56%,CT阳性4例,占3.17%。UU宫内感染与胎膜早破有关,且宫内UU、CT感染产妇其新生儿黄疸、眼结膜炎、肺炎的发病率均明显高于非感染组。结论 羊水中可检测出UU、CT感染,其感染率为8.73%,宫内UU、CT感染与胎膜早破、新生儿黄疸、眼结膜炎和新生儿肺炎有关。

    关键词 解脲支原体 沙眼衣原体 聚合酶链式反应 宫内感染

    【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)04-0313-03

    The intraamniotic infections of ureaplasma urealyticum and chlamydia
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    trachomatis and their influence on mothers and neonates

    Yuan Hui,Yuan benxu,Liuxiaoxian

    The Medicine and Life Science College of the Jianghan University,Wuhan,Hubei430015.

    【Abstract】 Objective To investigate the intrauterine infection of ureaplasma urealyticum(UU)and chlamyˉdia trachomatis(CT),and their influences onmothers and neonates.Methods 126parturients of cesarean section and their neonates were investigated.The polymerase chain reaction(PCR)technique was used to detect UU and CT DNA in samples from amniotic fluid.Results In the126cases of cesarean section,there are7cases UU positive and4casˉes CT positive in their amniotic fluid,the positive rates are5.56%and3.17%respectively.The UU intrauterine inˉfection is associated with premature rupture of membranes.In the group of intrauterine UU or CT infection,the inciˉdence of neonatal complications in the jaundice,conjunctivitis and pneumonitis is especially high than those of the non-infection group.Conclusion The UU and CT infections can be detected in the amniotic fluid and its infectious rate is8.73%.The intrauterine UU or CT infections are associated with premature rupture of membranes,neonatal jaunˉdice,conjunctivitis and pneumonitis.
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    Key words ureaplasma urealyticum chlamydia trachomatis polymerase chain reaction intrauterine infection

    近年来,医学界对UU、CT感染引起的泌尿生殖系统疾病已引起广泛重视。许多研究表明,UU和CT不仅可引起非淋菌性尿道炎,而且可引起女性内生殖系统感染。通过母婴垂直传播可造成新生儿疾病。本研究应用聚合酶链式反应技术(PCR)检测126例剖宫产分娩产妇羊水中UU、CT感染情况,探讨孕期宫内UU、CT感染对母儿造成的影响。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 研究对象为2000年7月1日~12月31日在武汉市第六医院住院剖宫产分娩产妇126例。孕妇年龄在22~38岁,平均年龄28.2岁。其中37例有不同程度的妇科炎症史,均经阴道分泌物检测排除淋球菌、霉菌及滴虫感染。孕妇调查内容有姓名、年龄、职业、孕产次、孕周、妊娠并发症、既往妇科炎症史等,于剖宫产当日和前1日调查。新生儿调查内容有羊水性状、窒息情况、体重、黄疸、眼结膜炎、肺炎等,于出生第1日、3日、5日、7日分别进行调查。
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    1.2 实验方法和步骤

    1.2.1 标本采集及DNA提取 在剖宫产术中用无菌注射器抽取羊水1ml于无菌试管,保存于-20℃冰箱待检。将羊水以15000rpm离心15min,弃上清液;以无菌生理盐水水洗2次,在沉淀中加入50μl DNA提取液和蛋白酶K4μl,吹打均匀后56℃水浴1h以充分提取DNA,然后于95℃,10min灭活蛋白酶K,后以15000rpm离心10min。

    1.2.2 扩增反应 分别取UU和CT反应管及阳性、阴性对照管,先在各管中加入14μl PCR反应液,然后每管加入石蜡油18μl。先将阴性对照3.5μl加入一反应管随即盖上盖,再将各标本离心上清液3.5μl加入各自反应管,盖上盖。最后取出阳性对照,取3.5μl加入反应管中作为阳性对照,配好后离心2s即扩增。先按94℃保温3min,再按93℃45s→55℃45s→72℃60s,循环35次,最后72℃延伸5min。

, 百拇医药     1.2.3 产物检测 取15μl下层蓝色液体,经含EB染色剂的2%的琼脂糖凝胶电泳15~20min(5V/cm)至蓝色指示剂离点样孔1.5cm时结束电泳。将胶置于紫外检测分析仪上观察,若在429bp处出现橙黄色条带(与阳性对照处于同一位置)则为UU感染阳性;若在225bp处出现橙黄色条带(与阳性对照处于同一位置)则为CT感染阳性,见图1。

    1.3 实验仪器及试剂 本实验主要仪器有美国PE公司生产的PE-480型PCR扩增仪、浙江永嘉上塘教学仪器厂制造的WP-93-1型紫外透射检测分析仪等。所选试剂由上海复星实业有限公司提供的UU、CT-DNA PCR试剂盒(单人装)和蛋白酶K。

    1.4 统计学处理 检测率的比较和相关分析采用Fisher’s精确概率法。

    2 结果与分析

    2.1 UU及CT检测阳性率 126例剖宫产产妇羊水中UU感染7例,阳性率为5.56%,CT感染4例,阳性率为3.17%,其中1例UU和CT均为阳性。见图1。A 1 为CT标准分子量,B 1 为UU标准分子量A 5 为CT感染阳性,B 4 和B 6 为UU感染阳性图1 CT、UU感染患者PCR DNA电泳图
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    2.2 职业与UU、CT阳性检出率的比较 由表1可见,无业和个体经营者51例,UU阳性4例,检出率为7.84%,CT阳性2例,检出率为3.92%;有正式职业者75例,UU阳性3例,检出率为4%,CT阳性2例,检出率为2.67%。

    表1 职业与UU、CT阳性检出率的比较 例(略)

    注:P=0.1999,P=0.3535

    无业人员和个体经营者UU、CT检出率虽高于有职业组,但经统计分析,两者差异无显著性(P>0.05)。

    2.3 有妇科炎症病史组与无妇科炎症病史组UU、CT阳性检出率的比较 126例剖宫产产妇中有37例以前或此次妊娠时有妇科炎症史,此次均经阴道分泌物检测排除淋球菌、霉菌及滴虫感染。其UU、CT阳性检出率分别为13.51%(5/37)、5.41%(2/37);89例无妇科炎症史者,UU、CT阳性检出率分别为2.25%(2/89)、2.25%(2/89)。经统计分析,有妇科炎症病史组UU检出率高于无妇科炎症病史组,且两组差异有显著性(P<0.05),两组CT感染率差异无显著性(P>0.05)。见表2。
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    2.4 胎膜早破组和非胎膜早破组UU、CT阳性率的比较 研究对象中46例有胎膜早破,其中UU检出6例,检出率为13.04%,CT检出3例,占6.52%;80例无胎膜早破者,其UU检出1例,占1.25%,CT检出1例,占1.25%。胎膜早破组UU感染率高于非胎膜早破组,经统计学处理,差异有显著性(P<0.05);CT感染率虽高于非胎膜早破组,但两者差异无显著性(P>0.05)。见表3。

    表2 妇科炎症者UU、CT阳性率比较 例(略)

    表3 胎膜早破组和非胎膜早破组UU及CT阳性率的比较

    注:P=0.0089,P=0.1213

    2.5 UU和CT阳性组与UU和CT阴性组新生儿并发症发生率的比较 由表4可见,126例剖宫产产妇羊水中UU和CT阳性者共10例。其中发生新生儿黄疸4例,占40%,新生儿眼结膜炎2例,占20%,新生儿肺炎2例,占20%;阴性组116例,发生新生儿黄疸、眼结膜炎、肺炎分别为8.62%(10/116)、1.72(2/116)、2.59%(3/116)。经统计分析,阳性组发生新生儿黄疸、眼结膜炎、肺炎的发生率均较阴性组差异有显著性,P均<0.05。
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    3 讨论

    3.1 UU、CT下生殖道感染可导致宫内感染 据文献报道 [1] ,大约有20%~40%的CT和20%~50%的UU下生殖道感染可引起上生殖道的感染。本研究表明,有妇科炎症病史的产妇,如外阴炎、阴道炎、宫颈炎等,其宫内UU感染率较无妇科炎症组高,差异有显著性。说明下生殖道UU感染可导致上行宫内感染。本研究中有妇科炎症病史的产妇及宫内CT感染率高于对照组,虽经统计学分析差异无显著性,可能与样本例数不够大,阳性率不高有关。由于很多研究已证实孕期宫颈UU、CT感染率较高,虽然宫颈有一定的屏障作用,但仍可上行引起宫内感染。因此对于有妇科炎症病史的孕妇进行UU、CT检查是有必要的。

    表4 UU或CT阳性组与UU、CT阴性组新生儿并发症发生率的比较 例(略)

    注:P=0.0124,P=0.0300,P=0.0467
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    3.2 UU、CT感染与胎膜早破的关系 近年来,很多研究表明 [2] ,胎膜早破与孕妇UU、CT感染有关。由于UU、CT感染无典型的临床症状,故无法采取相应的防治措施。随着PCR技术的应用,该病原体可得以快速诊断。孕妇宫颈CT、UU感染可直接影响胎膜,引起胎膜组织水肿,韧性降低,易导致胎膜早破。UU、CT还能产生大量磷酯酶A 2 分解胎膜中的花生四烯酸,产生前列腺素(PG5),PG5的释放使子宫收缩从而促使胎膜早破的发生。McDonald等[3] 报道,孕妇阴道分泌物UU阳性者,胎膜早破的危险性比UU阴性者高3倍。本研究中,有胎膜早破和无胎膜早破剖宫产羊水中均有检出UU、CT感染。胎膜早破组UU阳性率为13.04%,高于无胎膜早破组,差异有显著性意义。尽管UU、CT感染不一定是胎膜早破的唯一病原体,但至少说明胎膜早破与UU感染有关。这与文献报道的结果一致。

    3.3 孕期UU、CT宫内感染对母体和新生儿的影响 陈翠华等 [4] 报道419例孕妇宫颈CT阳性检出率为28.2%,且CT感染组胎膜早破、产褥感染、新生儿肺炎及新生儿黄疸的发生率显著高于阴性组。另外关于UU感染造成胎儿宫内发育迟缓和低出生体重,国内外均有报道 [5,6] 。孕期支原体和衣原体宫内感染可引起绒毛膜羊膜炎、流产、早产、胎膜早破、死胎、死产等。
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    本研究10例UU和CT宫内感染产妇中,新生儿肺炎、眼结膜炎发病率均为20%,116例无UU和CT感染产妇中新生儿肺炎、眼结膜炎的发病率分别为1.72%、2.59%,差异均有显著性意义,亦说明UU、CT宫内感染易导致新生儿眼结膜炎、新生儿肺炎,这与文献报道的一致。有关文献 [7] 报道UU感染与新生儿黄疸发生关系密切。新生儿尤其是早产儿和低体重儿的肝脏酶系统发育不完善,宫内感染加速红细胞破坏,并使肝细胞受损,引起胆红素代谢异常。在子宫内缺氧时,糖代谢障碍,肝血流量减少,肝酶活性降低,体内胆红素水平升高,并致新生儿黄疸。本研究结果显示,10例UU和CT阳性者新生儿黄疸发生率为40%,116例UU和CT阴性者新生儿黄疸发生率为8.62%,差异有显著性(P<0.05),说明UU和CT感染与新生儿黄疸的发生相关,这与陈翠华 [4] 、郭晓玲等 [7] 报道的结论一致。

    综上所述,羊水中可检测出UU、CT感染,其感染率为8.73%,宫内UU、CT感染与胎膜早破的发生有关,并可导致新生儿黄疸、眼结膜炎和新生儿肺炎的发病率增高。所以在孕早期或孕前进行衣原体和支原体检测并给予相应的治疗是很有必要的。
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    参考文献

    1 何森.妇产科感染性疾病.北京:中国人口出版社,1991,153-160.

    2 张晨芳,杨睛,李红霞.胎膜早破与支原体宫内感染.中国实用妇科与产科杂志,1996,12:23-24.

    3 Mcdonald HM,O’loughlin JA,Jolley P,et al.Prenatal microbiological riskfactors associated with preterm birth.Br J Obstet Gynecol,1992,99(3):190.

    4 陈翠华,陈士岭.孕期宫颈沙眼衣原体感染对母婴的影响.第一军医大学学报,1999,10,25,19(5):470-471.

    5 徐晨,王一飞.人脐带血溶脲脲原体培养及其与新生儿体重关系.生殖与避孕,1998,18(4):237-238.

    6 周怀君,李明发,程云英,等.解脲支原体与胎儿宫内发育迟缓关系的探讨.中华妇产科杂志,1999,5,18,34(5):284-286.

    7 郭晓玲,郑玉华,卢海英,等.解脲支原体感染与胎膜早破.现代妇产科进展,1997,12:154-157.

    作者单位:430015江汉大学医学与生命科学学院

    华中科技大学同济医学院

    (收稿日期:2002-11-18)

    (编辑张 璇), 百拇医药(袁)