T细胞核仁形成区嗜银蛋白测定在乳腺癌监测中的作用
【摘要】 目的 研究T细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)在诊断乳腺癌复发转移及疗效判定中的作用。方法 采用KL型免疫图像分析系统定量测定Ag-NORs，采用酶联免疫法测定癌抗原(CA15-3)，采用放免法测定癌胚抗原(CEA);对复发转移的乳腺癌患者系统治疗后再复检。结果 176例乳腺癌术后病人，经检测Ag-NORs低于6%者40例，经动态观察3～9个月有28例出现复发转移，CA15-3>30U/ml者16例，CEA>30ng/ml者15例，经查已全部出现复发和(或)转移，治疗后有效者Ag-NORs升高至正常，无效者无升高。结论 检测Ag-NORs能更早发现复发转移倾向，能动态观察治疗疗效，Ag-NORs可做为乳腺癌病人的一项可靠的监测指标。
关键词 Ag-NORs 乳腺癌 复发转移 疗效
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)07-0609-02
The role of detecting Ag-NORs in
, 百拇医药
T cell nucleolus formation area in breast cancer
Li Xiaoli，Liu Jie，Li Yulian
The Third Hospital of Harbin Medical University，Harbin，Heilongjiang150040.
【Abstract】 Objective To study the effect of Ag-NORs of T cell nucleolus formation area in diagnoses of reˉcurrence and metastasis as well as estimating therapeutic effect in breast cancer.Methods Quantification of Ag-NORs with the KLimmune image analytic system，detecting CA15-3and CEA by ELISA and radioimmunoassay reˉspectively.The patients with recurrence and metastasis were detected again after systemic therapy.Results In176postoperative mammectomy patients，40cases with Ag-NORs low expression(<6%)were observed dynamically for3-9months and then28cases of that had recurrence and metastasis;16cases with high CA15-3(>30U/ml)and12cases with high CEA(>30ng/ml)all had recurrence and/or metastasis.After therapy the Ag-NORs in effective patients increased to normalitywhile there was no changes in noneffective cases.Conclusion Detection the expression of Ag-NORs help to find the trend of recurrence and metastasis earlier and help to observe the therapeutic effect dyˉnamically.It was suggested that Ag-NORs could be adependable monitoring mark for the breast cancer patients.
, 百拇医药
Key words Ag-NORs breast cancer recurrence and metastasis therapeutic effect
乳腺癌是威胁妇女生命健康的第一杀手，其发病率逐年增高，乳腺癌主要死于术后的复发和转移。因此术后动态监测其病情变化显得尤为重要。我们将T细胞核仁形成区嗜银蛋白测定(Ag-NORs)和肿瘤标志物癌抗原(CA15-3)、癌胚抗原(CEA)用于监测乳腺癌术后病人的病情变化，能更早帮助我们判断有无复发转移可能及监测治疗效果，现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 临床资料 我院自1999年8月～2002年1月共检测了乳腺癌术后病人176例，男4例，女172例，年龄32～71岁，中位年龄50.6岁;全部经病理证实，单纯癌98例，浸润性导管癌34例，髓样癌31例，导管内癌10例，小叶癌2例，分泌型乳癌1例，术后病期:Ⅰ期42例，Ⅱ期103例，Ⅲ期31例。
, 百拇医药
1.2 实验方法 采用KL型免疫图像分析系统定量测定Ag-NORs，设备为北京健尔康医疗设备公司产品，采集晨起空腹静脉血0.1ml，采用RPMI-1640培养液培养，然后进行银染、固定。采用图像分析系统，每例随机检测20个T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核银染面积比值 [1，2] 。采用酶联免疫法测定CA15-3，采用放免法测定CEA，具体方法按照试剂盒操作。
1.3 实验结果判定 Ag-NORs正常范围6%～10%，如Ag-NORs<6%为异常，CA15-3正常范围<30U/ml。如CA15-3>30U/ml为异常，CEA正常范围为<5ng/ml，如CEA>5ng/ml为异常。
1.4 疗效判定 按WHO实体瘤疗效判定标准，完全缓解(CR):所有可测量病灶完全消失，至少1个月以上;部分缓解(PR):所有可测量病灶缩小>50%，保持1个月;稳定(SD):所有可测量病灶缩小<50%或>25%;进展(PD):所有可测量病灶增大>25%或出现新病灶。
, http://www.100md.com
1.5 统计学方法 采用t检验。
2 结果
2.1 Ag-NORs用于复发转移的监测 176例乳腺癌术后病人经动态监测Ag-NORs及CA15-3、CEA变化，出现异常的比例分别为22.7%、9.1%、6.8%，Ag-NORs异常比例明显高于CEA、CA15-3，且经过3～9个月后，Ag-NORs异常者有70%(28/40)的病人出现复发转移，而CA15-3、CEA升高者经查全部已有复发和(或)转移，说明检测Ag-NORs能更早预测乳腺癌病人有复发转移可能。出现异常的比例见表1。
2.2 Ag-NORs用于治疗效果的监测 我们对复发转移的47 例病人进行系统的放、化疗后复检Ag-NORs、CA15-3、CEA，发现CR者，三项指标均可恢复正常，PR者三项均有所恢复，而SD及PD者三项不恢复或继续异常，说明治疗无效，提示我们调整治疗方法，说明Ag-NORs同CA15-3、CEA一样也可做为监测疗效的指标，见表2。
, 百拇医药
表1 Ag-NORs、CA15-3、CEA 表达异常比例(略)
表2 Ag-NORs、CA15-3、CEA与疗效关系 (略)
3 讨论
近年来，肿瘤免疫学研究表明，癌症的发生和发展与机体免疫监视和免疫清除功能障碍有密切关系。T淋巴细胞是机体参与肿瘤免疫应答的主要免疫活性细胞，核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)为RNA聚合酶的亚单位，其含量可反映T淋巴细胞RNA转录活性的高低。20世纪70年代以来，国内外不少学者将Ag-NORs用于肿瘤研究，发现肿瘤进展时，T淋巴细胞Ag-NORs含量下降;反之，肿瘤得到控制时，T淋巴细胞Ag-NORs含量上升。因此，外周血T淋巴细胞核仁区嗜银蛋白的含量是机体细胞免疫水平的重要标志 [2，3] 。CA15-3是由乳腺、肺、卵巢和胰腺等器官的恶性和正常上皮细胞的膜糖蛋白，正常血清中含量极低。目前主要用于乳腺癌的诊断和监测。CEA也是一种糖蛋白，主要在消化道肿瘤患者中高表达，在肺癌等恶性肿瘤患者血清中CEA水平也可增高 [4，5] 。
, 百拇医药
本研究动态监测Ag-NORs、CA15-3、CEA在乳腺癌术后病人的表达，证实176例患者中Ag-NORs表达异常40例，经3～9个月后有28例出现复发转移，而CA15-3、CEA异常者经查已全部出现复发和(或)转移，说明Ag-NORs在判断乳腺癌复发和转移上明显早于CA15-3和CEA。而且对全部有复发转移患者进行系统治疗后，有效的病人尤 其是CR者治疗后Ag-NORs、CA15-3、CEA恢复正常，治疗前后差异有显著性(P<0.05)，而无效的病人各项指标无恢复，进一步说明Ag-NORs能动态观察治疗的疗效。
通过本实验进一步验证了T淋巴细胞Ag-NORs检测具有比其他肿瘤标志物更高的诊断和监测效率，利用其实验操作简便、快捷、灵敏及其广谱和肿瘤诊断的高效率，结合肿瘤特异的肿瘤标志物检测，可明显提高肿瘤诊断和治疗过程中病情的监测，为临床提供有效的技术支持，使之达到更好的治疗效果。
参考文献
, 百拇医药
1 Och RL，Busch H.Further evidence that phosphoprotein C23is the nuˉcleolar silver staining protein.Exp Cell Res，1984，152:260.
2 王瑞年，胡丹毅.Ag-NORs—肿瘤研究的一项新指标(综述).国外医学·肿瘤学分册，1995，15(5):22-26.
3 刘广贤，张婧，江泽飞，等.肿瘤患者T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达分析.世界医学杂志，1999，3(7):68-71.
4 刘广贤，张婧，胡小电，等.T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达分析在肿瘤诊断和监测中的意义.世界医学杂志，2000，4(1):78-80.
5 熊霞，黄延庭，万远廉.核仁组成区相关蛋白对乳腺癌诊断和预后意义.中华外科杂志，1995，33(10):409-601.
作者单位:150040哈尔滨医科大学第三临床医学院内科
(收稿日期:2002-10-29)
(编辑 于少伟), 百拇医药(李晓莉 刘杰 李玉莲)
关键词 Ag-NORs 乳腺癌 复发转移 疗效
【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-6115(2003)07-0609-02
The role of detecting Ag-NORs in
, 百拇医药
T cell nucleolus formation area in breast cancer
Li Xiaoli，Liu Jie，Li Yulian
The Third Hospital of Harbin Medical University，Harbin，Heilongjiang150040.
【Abstract】 Objective To study the effect of Ag-NORs of T cell nucleolus formation area in diagnoses of reˉcurrence and metastasis as well as estimating therapeutic effect in breast cancer.Methods Quantification of Ag-NORs with the KLimmune image analytic system，detecting CA15-3and CEA by ELISA and radioimmunoassay reˉspectively.The patients with recurrence and metastasis were detected again after systemic therapy.Results In176postoperative mammectomy patients，40cases with Ag-NORs low expression(<6%)were observed dynamically for3-9months and then28cases of that had recurrence and metastasis;16cases with high CA15-3(>30U/ml)and12cases with high CEA(>30ng/ml)all had recurrence and/or metastasis.After therapy the Ag-NORs in effective patients increased to normalitywhile there was no changes in noneffective cases.Conclusion Detection the expression of Ag-NORs help to find the trend of recurrence and metastasis earlier and help to observe the therapeutic effect dyˉnamically.It was suggested that Ag-NORs could be adependable monitoring mark for the breast cancer patients.
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Key words Ag-NORs breast cancer recurrence and metastasis therapeutic effect
乳腺癌是威胁妇女生命健康的第一杀手，其发病率逐年增高，乳腺癌主要死于术后的复发和转移。因此术后动态监测其病情变化显得尤为重要。我们将T细胞核仁形成区嗜银蛋白测定(Ag-NORs)和肿瘤标志物癌抗原(CA15-3)、癌胚抗原(CEA)用于监测乳腺癌术后病人的病情变化，能更早帮助我们判断有无复发转移可能及监测治疗效果，现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 临床资料 我院自1999年8月～2002年1月共检测了乳腺癌术后病人176例，男4例，女172例，年龄32～71岁，中位年龄50.6岁;全部经病理证实，单纯癌98例，浸润性导管癌34例，髓样癌31例，导管内癌10例，小叶癌2例，分泌型乳癌1例，术后病期:Ⅰ期42例，Ⅱ期103例，Ⅲ期31例。
, 百拇医药
1.2 实验方法 采用KL型免疫图像分析系统定量测定Ag-NORs，设备为北京健尔康医疗设备公司产品，采集晨起空腹静脉血0.1ml，采用RPMI-1640培养液培养，然后进行银染、固定。采用图像分析系统，每例随机检测20个T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核银染面积比值 [1，2] 。采用酶联免疫法测定CA15-3，采用放免法测定CEA，具体方法按照试剂盒操作。
1.3 实验结果判定 Ag-NORs正常范围6%～10%，如Ag-NORs<6%为异常，CA15-3正常范围<30U/ml。如CA15-3>30U/ml为异常，CEA正常范围为<5ng/ml，如CEA>5ng/ml为异常。
1.4 疗效判定 按WHO实体瘤疗效判定标准，完全缓解(CR):所有可测量病灶完全消失，至少1个月以上;部分缓解(PR):所有可测量病灶缩小>50%，保持1个月;稳定(SD):所有可测量病灶缩小<50%或>25%;进展(PD):所有可测量病灶增大>25%或出现新病灶。
, http://www.100md.com
1.5 统计学方法 采用t检验。
2 结果
2.1 Ag-NORs用于复发转移的监测 176例乳腺癌术后病人经动态监测Ag-NORs及CA15-3、CEA变化，出现异常的比例分别为22.7%、9.1%、6.8%，Ag-NORs异常比例明显高于CEA、CA15-3，且经过3～9个月后，Ag-NORs异常者有70%(28/40)的病人出现复发转移，而CA15-3、CEA升高者经查全部已有复发和(或)转移，说明检测Ag-NORs能更早预测乳腺癌病人有复发转移可能。出现异常的比例见表1。
2.2 Ag-NORs用于治疗效果的监测 我们对复发转移的47 例病人进行系统的放、化疗后复检Ag-NORs、CA15-3、CEA，发现CR者，三项指标均可恢复正常，PR者三项均有所恢复，而SD及PD者三项不恢复或继续异常，说明治疗无效，提示我们调整治疗方法，说明Ag-NORs同CA15-3、CEA一样也可做为监测疗效的指标，见表2。
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表1 Ag-NORs、CA15-3、CEA 表达异常比例(略)
表2 Ag-NORs、CA15-3、CEA与疗效关系 (略)
3 讨论
近年来，肿瘤免疫学研究表明，癌症的发生和发展与机体免疫监视和免疫清除功能障碍有密切关系。T淋巴细胞是机体参与肿瘤免疫应答的主要免疫活性细胞，核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)为RNA聚合酶的亚单位，其含量可反映T淋巴细胞RNA转录活性的高低。20世纪70年代以来，国内外不少学者将Ag-NORs用于肿瘤研究，发现肿瘤进展时，T淋巴细胞Ag-NORs含量下降;反之，肿瘤得到控制时，T淋巴细胞Ag-NORs含量上升。因此，外周血T淋巴细胞核仁区嗜银蛋白的含量是机体细胞免疫水平的重要标志 [2，3] 。CA15-3是由乳腺、肺、卵巢和胰腺等器官的恶性和正常上皮细胞的膜糖蛋白，正常血清中含量极低。目前主要用于乳腺癌的诊断和监测。CEA也是一种糖蛋白，主要在消化道肿瘤患者中高表达，在肺癌等恶性肿瘤患者血清中CEA水平也可增高 [4，5] 。
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本研究动态监测Ag-NORs、CA15-3、CEA在乳腺癌术后病人的表达，证实176例患者中Ag-NORs表达异常40例，经3～9个月后有28例出现复发转移，而CA15-3、CEA异常者经查已全部出现复发和(或)转移，说明Ag-NORs在判断乳腺癌复发和转移上明显早于CA15-3和CEA。而且对全部有复发转移患者进行系统治疗后，有效的病人尤 其是CR者治疗后Ag-NORs、CA15-3、CEA恢复正常，治疗前后差异有显著性(P<0.05)，而无效的病人各项指标无恢复，进一步说明Ag-NORs能动态观察治疗的疗效。
通过本实验进一步验证了T淋巴细胞Ag-NORs检测具有比其他肿瘤标志物更高的诊断和监测效率，利用其实验操作简便、快捷、灵敏及其广谱和肿瘤诊断的高效率，结合肿瘤特异的肿瘤标志物检测，可明显提高肿瘤诊断和治疗过程中病情的监测，为临床提供有效的技术支持，使之达到更好的治疗效果。
参考文献
, 百拇医药
1 Och RL，Busch H.Further evidence that phosphoprotein C23is the nuˉcleolar silver staining protein.Exp Cell Res，1984，152:260.
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3 刘广贤，张婧，江泽飞，等.肿瘤患者T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达分析.世界医学杂志，1999，3(7):68-71.
4 刘广贤，张婧，胡小电，等.T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达分析在肿瘤诊断和监测中的意义.世界医学杂志，2000，4(1):78-80.
5 熊霞，黄延庭，万远廉.核仁组成区相关蛋白对乳腺癌诊断和预后意义.中华外科杂志，1995，33(10):409-601.
作者单位:150040哈尔滨医科大学第三临床医学院内科
(收稿日期:2002-10-29)
(编辑 于少伟), 百拇医药(李晓莉 刘杰 李玉莲)