蚯蚓溶栓酶基因的克隆及非融合性表达
双胸蚓属|蚯蚓纤溶酶|基因克隆|重组表达,关键词：
参见附件(55kb)。
陈飞；李莉；孟宪志；梁国栋；刘艳玲；吴红艳 中国预防医学科学院病毒研究所 北京100052；辽宁省微生物科学研究院 辽宁朝阳122000 中国药学杂志 2003 12
关键词：双胸蚓属；蚯蚓纤溶酶；基因克隆；重组表达
目的 克隆和表达我国特有的双胸蚓属蚯蚓(Lumbricusbimastus)体内一种具有纤溶活性的蛋白质。方法 通过蛋白质N 末端测序、引物设计及合成、RT PCR得其对应的cDNA ,随后构建了pBV2 2 0 P3 0 重组质粒,在大肠杆菌DH5α中进行非融合性表达,再经亲和色谱柱纯化复性,得到重组蚯蚓溶栓酶蛋白。结果 克隆cDNA全长888bp ,编码含2 4 2个氨基酸的成熟肽,SDS PAGE电泳显示分子量在30×10 3 左右,因此将其命名为P3 0 ,经活性测定,具有纤溶活性。结论 P3 0 为首次发现的新基因,在国际基因库的输入号为GenebankAF 10 96 4 8,并获得国家专利,专利号为9810 2 2 5...
关键词：双胸蚓属；蚯蚓纤溶酶；基因克隆；重组表达
目的 克隆和表达我国特有的双胸蚓属蚯蚓(Lumbricusbimastus)体内一种具有纤溶活性的蛋白质。方法 通过蛋白质N 末端测序、引物设计及合成、RT PCR得其对应的cDNA ,随后构建了pBV2 2 0 P3 0 重组质粒,在大肠杆菌DH5α中进行非融合性表达,再经亲和色谱柱纯化复性,得到重组蚯蚓溶栓酶蛋白。结果 克隆cDNA全长888bp ,编码含2 4 2个氨基酸的成熟肽,SDS PAGE电泳显示分子量在30×10 3 左右,因此将其命名为P3 0 ,经活性测定,具有纤溶活性。结论 P3 0 为首次发现的新基因,在国际基因库的输入号为GenebankAF 10 96 4 8,并获得国家专利,专利号为9810 2 2 5...
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