人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定

http://www.100md.com 2004年6月24日 王鸿鹤；朱孝峰；谢冰芬；冯公侃；沈竞康；刘宗潮

    参见附件(907kb)。

     王鸿鹤；朱孝峰；谢冰芬；冯公侃；沈竞康；刘宗潮 中国科学院上海药物研究所 上海200031；中山大学肿瘤防治中心实验研究部 广东广州510060 中山大学学报 2003 5

    关键词：细胞周期蛋白D1；CDK4

    【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】...

    http://www.100md.com/html/Dir/2004/06/24/21/988.htm

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