弓形虫GRA8基因真核表达重组质粒的构建、鉴定及测序
弓形虫属|原虫蛋白质类|克隆|分子|质粒|序列分析|基因表达|重组|遗传,弓形虫GRa8基因真核表达重组质粒的构建、鉴定及测序,关键词：
参见附件(35kb)。
杨慧龄；肖建华；刘彦；杨秋林；张愉快；刘传爱 南华大学病原学研究中心 421001湖南省衡阳 中华传染病杂志 2003 5
关键词：弓形虫属；原虫蛋白质类；克隆；分子；质粒；序列分析；基因表达；重组；遗传
目的 构建弓形虫RH株pcDNA3 .1( + ) GRA8真核表达重组质粒,为进一步DNA免疫做准备。方法 用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码致密颗粒蛋白(GRA8)的基因片段,纯化后重组入pUC 19克隆载体,再经含IPTG ,XGal氨苄培养基蓝白筛选,挑选白色克隆酶切,低溶点琼脂糖纯化,回收目的基因亚克隆入pcDNA3 .1( + ) ,经氨苄培养基过夜培养挑选6个克隆提纯酶切,PCR鉴定和测序。结果 从RH株基因组DNA中扩增出特异的GRA 8基因片段,克隆成功pcDNA3 .1( + ) GRA 8重组质粒。测序表明GRA8这部分基因与GENEBANK相应基因序列完全一致。结论 本结果为...
关键词：弓形虫属；原虫蛋白质类；克隆；分子；质粒；序列分析；基因表达；重组；遗传
目的 构建弓形虫RH株pcDNA3 .1( + ) GRA8真核表达重组质粒,为进一步DNA免疫做准备。方法 用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码致密颗粒蛋白(GRA8)的基因片段,纯化后重组入pUC 19克隆载体,再经含IPTG ,XGal氨苄培养基蓝白筛选,挑选白色克隆酶切,低溶点琼脂糖纯化,回收目的基因亚克隆入pcDNA3 .1( + ) ,经氨苄培养基过夜培养挑选6个克隆提纯酶切,PCR鉴定和测序。结果 从RH株基因组DNA中扩增出特异的GRA 8基因片段,克隆成功pcDNA3 .1( + ) GRA 8重组质粒。测序表明GRA8这部分基因与GENEBANK相应基因序列完全一致。结论 本结果为...
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