反向斑点杂交法检测流感嗜血杆菌核酸
流感嗜血杆菌|DNa探针|杂交,关键词：
参见附件(39kb)。
樊慧珍；黄文杰；梁昆；方怡；马立人；刘耀清 广州军区广州总医院呼吸科 广州510010；军事医学科学院放射医学研究所 北京100850 临床检验杂志 2004 2
关键词：流感嗜血杆菌；DNA探针；杂交
目的 探讨早期、快速检测流感嗜血杆菌的方法。方法 应用流感嗜血杆菌编码外膜蛋白特异的P6基因设计引物,通过聚合酶链反应合成特异探针,采用反向斑点杂交法检测生物素标记DNA ,并应用于痰标本的检测。结果 只有流感嗜血杆菌扩增出35 1bp的DNA片段,该探针能检测出10ng的细菌DNA ,与其他细菌、病毒、真菌无交叉反应。该方法和培养法分别检测5 0份痰标本,两者的阳性率分别为30 %和2 2 %。结论 该方法快速、特异,对流感嗜血杆菌感染有早期诊断价值.
关键词：流感嗜血杆菌；DNA探针；杂交
目的 探讨早期、快速检测流感嗜血杆菌的方法。方法 应用流感嗜血杆菌编码外膜蛋白特异的P6基因设计引物,通过聚合酶链反应合成特异探针,采用反向斑点杂交法检测生物素标记DNA ,并应用于痰标本的检测。结果 只有流感嗜血杆菌扩增出35 1bp的DNA片段,该探针能检测出10ng的细菌DNA ,与其他细菌、病毒、真菌无交叉反应。该方法和培养法分别检测5 0份痰标本,两者的阳性率分别为30 %和2 2 %。结论 该方法快速、特异,对流感嗜血杆菌感染有早期诊断价值.
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